水果蔬菜汁类胡萝卜素含量的测定
高效液相色谱法测定15种蔬菜中的胡萝卜素
2、重复性和精密度
此外，该方法具有较好的重复性和精密度，能够满足实际测定的要求。通过 本研究的开展，为准确评估蔬菜的营养价值提供了科学依据。
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2、样品中胡萝卜素的测定结果
表1 15种蔬菜中胡萝卜素的含量（mg/100g）
3、样品中水分含量的测定结果
3、样品中水分含量的测定结果
采用烘干法测定了15种蔬菜中的水分含量，结果如表2所示。由表可知，不同 蔬菜中的水分含量也存在显著差异。其中，生菜和芹菜中的水分含量较高，分别 为94.7%和92.5%；红薯和土豆中的水分含量较低，分别为79.3%和78.6%。其他 蔬菜中的水分含量介于上述两者之间。
采用高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素，需对方法进行重复性和精密度 评估。实验结果表明，该方法的重复性和精密度均较好，能够满足实际测定的要 求。
2、重复性和精密度
结论 本次演示介绍了高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素的方法及注意事项。 该方法具有分离效果好、分析速度快、灵敏度高等优点，能够准确测定蔬菜中类 胡萝卜素的含量。通过对不同种类蔬菜中类胡萝卜素含量的测定，发现叶菜类蔬 菜中类胡萝卜素含量较高，而根茎类蔬菜中类胡萝卜素含量较低。
2、实验方法
（2）色谱条件：采用高效液相色谱仪进行分离分析，色谱柱为C18柱（5μm， 4.6mm×250mm），流动相为甲醇-丙酮（1:1），流速为1ml/min，检测波长为 450nm，柱温为30℃。
2、实验方法
（3）标准曲线绘制：精确称取适量胡萝卜素标准品，用甲醇-丙酮（1:1）混 合溶剂配制成不同浓度的标准溶液。分别进样分析，以峰面积（A）对胡萝卜素 浓度（C）绘制标准曲线。
3、高效液相色谱法测定类胡萝 卜素
3、高效液相色谱法测定类胡萝卜素
AMAMFSIs0074 水果、蔬菜及其衍生产品——胡萝卜素含量的测定—第二部分：常规方法
AMAMFSIs0074 水果 蔬菜 水果衍生产品、蔬菜衍生产品 胡萝卜素 光谱法AMAMFSIs0074水果、蔬菜及其衍生产品——胡萝卜素含量的测定—第二部分：常规方法1适用范围：本方法适用于水果、蔬菜及其衍生产品中胡萝卜素含量的测定。
分方法A和方法B。
方法A用于产品中脂肪含量不超过5%(m/m)时胡萝卜素含量的测定；方法B 则用于产品中脂肪含量5%(m/m)以上时胡萝卜素含量的测定。
2方法A：产品中脂肪含量不超过5%(m/m)时胡萝卜素含量的测定2.1原理概要：用石油醚和丙酮的混合物抽提胡萝卜素。
蒸掉丙酮，通过柱色谱从类胡萝卜素中分离出胡萝卜素，用光谱法测定胡萝卜素含量。
2.2 主要仪器和试剂：2.2.1 仪器常规实验室仪器，分光光度计、过滤装置、水泵、水浴、减压蒸发器、色谱柱、过滤器、石棉布、研钵和杵、干燥器、锥形瓶、圆底烧瓶、分液漏斗、容量瓶。
2.2.2 主要试剂使用的所有试剂均为分析纯，水至少要用蒸馏水或至少同等质量的水。
主要试剂有：沸程50～70℃的石油醚、石油醚/丙酮抽提混合物、无水硫酸钠、石英砂、色谱柱填料(氧化铝、氧化镁/粉末玻璃混合物、氧化铝/无水硫酸钠混合物、氧化铝/氢氧化钙混合物)、氯化钠溶液。
2.3 过程简述：2.3.1样品制备分液体非均相产品、粘稠产品和固体产品、冷冻和深冷产品三类分别取样，并制成溶液。
2.3.2 测定分析应在黑暗处（远离光源）进行。
称取1-10g样品2.3.2.1测试溶液的制备：在研钵中将样品20ml抽提混合物，20g无水Na2SO4和30g石英砂混合彻底研磨。
过滤，重复抽提，直至抽提液无色。
抽提液全部移入1000mL分液漏斗中，用300-400mL水洗涤，加入15g无水Na2SO4，15分钟后过滤，在减压蒸发器中30-35℃水浴中加热浓溶滤液，然后移入100或50mL容量瓶中用石油醚稀释至刻度2.3.2.2洗提：色谱术准备。
过控2.3.2.3光谱测量：用10mm吸收池在波长450nm处测量吸光度。
高效液相色谱定量分析新鲜加工过的水果中的主要类胡萝卜素
高效液相色谱定量分析新鲜加工过的水果中主要类胡萝卜素的含量概念一、类胡萝卜素（carotenoid）不溶于水而溶于有机溶剂。
叶绿体中的类胡萝卜素含有两种色素，即胡萝卜素（carotene）和叶黄素（lutein），前者呈橙黄色，后者呈黄色。
功能为吸收和传递光能，保护叶绿素。
类胡萝卜素是一类重要的天然色素的总称，属于化合物。
普遍存在于动物、高等植物、真菌、藻类和细菌中的黄色、橙红色或红色的色素。
二、番茄红素(lycopene)番茄中的红色素，是胡萝卜素的母体化合物。
番茄红素是成熟番茄的主要色素,是一种不含氧的类胡萝卜素。
番茄红素是植物中所含的一种天然色素。
主要存在于茄科植物西红柿的成熟果实中。
它是目前自然界中被发现的最强抗氧化剂。
番茄红素清除自由基的功效远胜于其他类胡萝卜素和维生素E，它可以有效的防治因衰老，免疫力下降引起的各种疾病。
三、β-胡萝卜素(β-carotene)β-胡萝卜素是类胡萝卜素之一，也是橘黄色脂溶性化合物，它是自然界中最普遍存在也是最稳定的天然色素。
许多天然食物中如绿色蔬菜、甘薯、胡萝卜、菠菜、木瓜、芒果等，皆存有丰富的β—胡萝卜素。
β-胡萝卜素是一种抗氧化剂，具有解毒作用，是维护人体健康不可缺少的营养素。
β-胡萝卜素在进入人体后可以转变为维生素A，不会有因过量摄食而造成维生素A累积中毒现象。
另外，在促进动物的生育与成长也具有较好的功效。
四、毛细管柱色谱法(capillary column chromatography)开管柱气相色谱(open tubular gas chromatography)，又称高分辨气相色谱(high resolution gas chromatography)，是气相色谱的重要分支。
用内壁上涂附有固定液的空心的毛细管柱进行组分分离的色谱法。
与填充柱色谱法相比，其分离效率高、分析速度快、样品用量少。
HPLC法定量分析芒果和木瓜中类胡萝卜素的含量摘要：采用高效液相色谱法定量分析芒果、木瓜样品及一些加工产品的主要类胡萝卜素,使用外标法和标准加入校准技术。
类胡萝卜素含量方法
（一）检测原理：类胡萝卜素含量测定(酶标仪96T)叶绿体中所含色素主要有两大类，叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)和类胡萝卜素(包括胡萝卜素和叶黄素)，它们与类囊体膜上的蛋白质结合，成为色素蛋白复合体，其含量多少及其组成决定了植物对不同光的吸收、利用效率，常常作为研究光合生理的重要指标。
根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，在649nm和665nm处测定叶绿素提取物的吸光值，在470nm处测定类胡萝卜素；然后利用经验公式计算出样品中叶绿素a含量、叶绿素b含量、叶绿素总含量及类胡萝卜素含量。
（二）试剂组分与配制：试剂名称规格保存要求试剂一粉剂×1瓶4℃保存乙醇（自备）1000mL×1瓶4℃保存抽提Buffer配制：（体积比）乙醇：丙酮=95:5（三）所需的仪器和用品：酶标仪、96孔板、天平、10mL玻璃试管、锡箔纸、无水乙醇，丙酮。
（四）测定步骤：建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、样本制备（1）取新鲜植物叶片或其它绿色组织，去掉中脉。
（2）称约0.1g剪碎，用蒸馏水洗干净，然后加入1mL抽提Buffer，少量试剂一（约50mg），叶绿素对光敏感，务必在黑暗或弱光条件下充分研磨（难磨叶片可以添加少量石英砂助磨），然后转移至10mL玻璃试管。
（3）用抽提Buffer冲洗研钵，将所有冲洗液及研钵中所有的绿色物质转入10mL玻璃试管，用抽提Buffer补充至10mL，玻璃试管置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提3h，观察试管底部组织残渣完全变白则提取完全，若组织残渣未完全变白，继续浸提至其完全变白。
2、上机检测分别取200μL浸提液和200μL抽提Buffer于96孔板，记为测定管和空白管，分别于665nm 和649nm和470nm处读取吸光值A，△A665=(A测定-A空白)665，△A649=(A测定-A空白) 649，△A470=(A测定-A空白)470。
食物中类胡萝卜素的高效液相色谱测定
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食品中胡萝卜素含量的检测及分析
食品中胡萝卜素含量的检测及分析胡萝卜素是一类存在于植物中的天然色素，在食物中具有重要的营养价值和健康功效。
它们不仅能够赋予食物丰富的颜色，还是人体合成维生素A的前体物质。
因此，食品中胡萝卜素含量的检测和分析对于保证食品质量和人类健康至关重要。
一、胡萝卜素的种类与功能胡萝卜素是一类存在于植物中的化合物，主要包括β-胡萝卜素、α-胡萝卜素、β-葡萄糖胡萝卜素等。
其中，β-胡萝卜素是最常见和最具代表性的一种。
胡萝卜素具有激活细胞免疫、抗氧化、抗癌、维护皮肤健康等多种功效，对人体健康有着重要影响。
二、食品中胡萝卜素的检测方法1. 高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是目前检测食品中胡萝卜素含量的常用方法之一。
它利用样品中胡萝卜素的特定波长进行检测，通过与标准品进行比对，确定胡萝卜素的含量。
这种方法操作灵活方便，且对小样品量的检测效果也很好。
2. 气相色谱法（GC）气相色谱法是另一种常用的胡萝卜素检测方法。
它通过将样品中的胡萝卜素蒸发成气态，在色谱柱中分离和检测各种胡萝卜素的含量。
这种方法准确性较高，但需要较复杂的操作和设备。
3. 光谱法光谱法是一种非常简便的胡萝卜素检测方法。
通过测量胡萝卜素在特定波长下的吸光度，可以快速确定其含量。
这种方法操作简单、快速，并且适用于大规模食品样品的快速筛查。
三、食品中胡萝卜素含量的分析食品中胡萝卜素含量的分析对于了解其营养价值和确定食品质量具有重要意义。
1. 不同食物中胡萝卜素含量的比较通过对不同食物中胡萝卜素含量的分析，可以比较不同食物的营养价值和选择合适的食物摄入。
例如，某些深色蔬菜和水果，如胡萝卜、甜椒、南瓜等，富含高量的胡萝卜素，适合作为人体补充维生素A的来源。
2. 食品加工对胡萝卜素的影响食品加工和烹饪过程中会对胡萝卜素含量产生影响。
例如，高温烹饪和长时间煮沸会导致一部分胡萝卜素被破坏或丢失，降低食品中胡萝卜素的含量。
因此，在食品加工过程中需要注意合理选择烹饪方法，以保留食物中的胡萝卜素。
高效液相色谱法分析蔬菜水果及其制品中类胡萝卜素含量的研究
营养功能高效液相色谱法分析蔬菜水果及其制品中类胡萝卜素含量的研究*刘新艳吕军刘中笑李凌云张延国郑姝宁徐东辉渊中国农业科学院蔬菜花卉研究所，农业部蔬菜质量安全控制重点实验室，农业部蔬菜产品质量安全风险 评估实验室（北京），农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室，北京100081)摘要：通过优化样品前处理和色谱分析条件，建立了蔬菜水果及其制品中类胡萝卜素含量的髙效液相色谱测定方法。
试样中的类胡萝卜素经丙酮-石油醚（V+ V=1 + 1，0.1%BHT)混合溶液提取后，用石油醚液液萃取，再用丙酮定容、乙腈 稀释，最后用配有紫外检测器的髙效液相色谱仪在C3。
色谱柱、波长450 nm处测定，根据色谱峰的保留时间定性，外标法 定量。
结果表明，该方法前处理简单髙效，适用范围广，测定结果精密度髙，可快速分析测定蔬菜水果及其制品中多种类胡 萝卜素含量。
关键词：类胡萝卜素曰蔬菜曰水果曰髙效液相色谱法类胡萝卜素，又称多烯色素，是在天然食品原 料中分布最广泛的色素。
红色、黄色和橙色水果及 根用作物和蔬菜是富含类胡萝卜素的食品。
一般来 说，富含叶绿素的植物组织也富含类胡萝卜素，因为叶绿体和有色体是类胡萝卜素含量较丰富的细胞 器。
根据其结构划分，类胡萝卜素可归为两大类院 一类是纯碳氢化物，被称为胡萝卜素，包括番茄红 素、琢-胡萝卜素、茁-胡萝卜素和酌-胡萝卜素；另一类具有羟基、环氧基、醛基、酮基等含氧基 团，称为叶黄素类，包括叶黄素、玉米黄素、辣椒 红素、隐黄素等。
动物和人不能自身合成胡萝卜 素，主要通过食物获得。
茁-胡萝卜素是人体合成 维生素A的重要前体物质，称为维生素A原。
维 生素A在人体正常生长和组织修复过程中起着重 要作用，对维持人体视觉系统和免疫系统的正常生 理功能尤为重要[2]。
番茄红素是一种红色素，存在于许多水果和蔬菜中，可以作为单线态氧的有效猝 灭剂，能消除羟自由基，在细胞中和脂类结合而有 效抑制脂质的氧化，是非常好的食用抗氧化剂，对 降低恶性肿瘤和冠心病发病率起着重要作用[3]。
胡萝卜素含量的测定
4. 稀释与测定
将滤液稀释到适当浓度，用分光 光度计在450nm波长处测定吸光 度。
1. 样品处理
将样品（如蔬菜、水果等）清洗 干净，晾干后切碎并称重，放入 研钵中研磨成匀浆。
5. 数据处理
根据吸光度值，利用标准曲线或 回归方程计算胡萝卜素的含量。
实验结果分析
数据处理
将测定的吸光度值代入标准曲线或回归方程，计算出样品中胡萝卜素的含量。
参考文献
06
参考文献
作者
01
张三
发表时间
02
XXXX年
期刊名称
03
食品科学
谢谢聆听
结果与文献比较
我们将实验结果与相关文献中的数据进行比较，以验证我们的实验方法和结果的可靠性。 通过比较，我们可以发现我们的结果与其他研究者的结果基本一致，说明我们的实验方法 是可靠的。
结果的意义和影响
分析实验结果的意义和影响，可以帮助我们更好地了解胡萝卜素含量的影响因素以及其在 食品和健康领域的应用价值。例如，高胡萝卜素含量的食品可能具有更高的营养价值，对 人们的健康有益。
结果分析
比较不同样品中胡萝卜素的含量，分析其影响因素，如品种、生长环境、采摘 时间等。同时，将实验结果与国家标准或行业标准进行比较，评估样品的营养 价值或质量。
03
实验材料与设备
实验材料
新鲜胡萝卜
用于提取胡萝卜素，要 求新鲜、无病虫害。
甲醇
用于提取胡萝卜素，具 有较高的溶解度。
石油醚
用于提取胡萝卜素，具 有较高的溶解度和较低 的沸点。
硅藻土
用于过滤提取液，去除 杂质。
实验设备
电子天平
用于称量实验材料，要求精度高。
定胡萝卜素含量，通过比色法进行定 量分析。
类胡萝卜素标准检测法
类胡萝卜素标准检测法类胡萝卜素是一类重要的营养物质，对人体健康具有重要意义。
为了确保产品质量和食品安全，需要对类胡萝卜素进行标准检测。
本文将介绍类胡萝卜素的标准检测方法，以及相关的实验步骤和注意事项。
首先，类胡萝卜素标准检测法的原理是基于其在特定波长下的吸光度进行测定。
常用的检测方法包括高效液相色谱法（HPLC）、紫外-可见分光光度法（UV-Vis）和荧光光度法等。
其中，HPLC法是目前应用最为广泛的一种方法，其准确性高、灵敏度好，能够有效地分离和测定不同种类的类胡萝卜素。
具体的实验步骤如下：1. 样品制备，将待测样品进行适当的处理，如研磨、溶解等，以获得均匀的样品溶液。
2. 仪器设置，根据HPLC仪器的要求，设置合适的流速、柱温、检测波长等参数。
3. 样品进样，将样品溶液注入HPLC仪器的进样口，进行进样操作。
4. 色谱条件，根据实际需要，设置合适的色谱条件，如流动相的组成、梯度elution 程序等。
5. 数据处理，通过仪器自带的软件或其他数据处理软件，对检测到的色谱图进行处理，获得类胡萝卜素的含量数据。
需要注意的是，在进行类胡萝卜素标准检测时，需要注意以下几点：1. 样品制备的均匀性和稳定性对实验结果有重要影响，因此在样品制备过程中要严格控制各项条件。
2. 仪器的准确性和灵敏度直接影响到实验结果的可靠性，因此在进行实验前要对仪器进行严格的校准和验证。
3. 实验操作过程中要注意避免空气氧化、光照等因素对类胡萝卜素的影响，以确保实验结果的准确性。
总之，类胡萝卜素标准检测法是一项重要的实验技术，对于保障产品质量和食品安全具有重要意义。
通过本文的介绍，相信读者对类胡萝卜素的标准检测方法有了更深入的了解，希望能够对相关领域的研究和实践工作有所帮助。
果蔬食品中叶黄素、玉米黄质、隐黄质和胡萝卜素的测定
测定结果在食 品质量控制中 的应用
03
02
测定结果在食 品营养成分标 注中的应用
04
测定结果在食 品科学研究中 的应用稳定性高来自测定结果重复性01
重复性测试：对同一样品 进行多次测定，比较结果 一致性
02
结果稳定性：在不同时间、
不同实验室条件下进行测
定，比较结果稳定性
03
结果准确性：与标准方法 进行比较，评估测定结果 的准确性
04
结果可靠性：对不同样品
进行测定，评估测定结果
的可靠性
测定结果应用
果蔬食品中叶黄 素、玉米黄质、 隐黄质和胡萝卜 素的含量分析
紫外分光光度法
原理：利用叶黄素、玉米黄质、 隐黄质和胡萝卜素在紫外光区具 有吸收特性，通过测定吸光度值
来定量分析。
样品处理：将果蔬食品样品进行 提取、净化、浓缩等处理，得到
待测样品溶液。
仪器：紫外分光光度计
测定步骤：将待测样品溶液放入 紫外分光光度计中，选择合适的 波长进行扫描，记录吸光度值，
通过标准曲线进行定量分析。
荧光光谱法
原理：利用叶黄素、玉米黄质、隐黄 质和胡萝卜素在紫外光激发下发出荧 光的特性进行测定
优点：灵敏度高、选择性好、操作 简便、快速
缺点：易受样品中其他荧光物质的干 扰，需要选择合适的激发波长和发射 波长
应用：广泛应用于果蔬食品中叶黄素、 玉米黄质、隐黄质和胡萝卜素的测定
样品提取
样品预处理：将 果蔬食品洗净、 去皮、切碎、烘 干
演讲人
目录
01. 测定方法 02. 样品处理 03. 结果分析
高效液相色谱法
高效液相色谱法是一种常用的测定果蔬食品中 叶黄素、玉米黄质、隐黄质和胡萝卜素的方法。
实验二蔬菜中胡罗卜素的测定(纸层析法)营养与食品卫生
营养与食品卫生学
（三）样品的采集和处理
（1）粮食：样品用水洗三次，置60℃烤箱 中烤干，磨粉，储于塑料瓶内，放一小包 樟脑精，盖紧瓶塞保存，备用。
（2）蔬菜与其他植物性食物：取可食部用 水冲洗三次后，用纱布吸去水滴，切碎， 用匀浆器制成匀浆，贮于塑料瓶内，冰箱 内保存备用。
首都医科大学
点样：准确吸取待检液40μl在滤纸下端基线上A、B两 点之间或C、D两点之间迅速来回进行带状点样一次点 完（见图1）。每个样品点2带作为平行样。
首都医科大学
营养与食品卫生学
展开：
待纸上所点样液自然挥发干后，将滤纸卷成圆筒状，用定 书机固定两边，置于预先用石油醚饱和的层析缸中（见图 2），进行上行展开。（注意纸纹方向与展开方向一致； 缸内石油醚深度约1cm即可，样斑不能直接接触石油醚。
首都医科大学
营养与食品卫生学
四、操作步骤
（5）将石油醚提取液通过盛有10g无水硫酸钠固 体的小漏斗，滤入瓷蒸发皿。用少量石油醚分数 次洗净分液漏斗和无水硫酸钠层内的色素，洗涤 液合并瓷蒸发皿中。 （6）将瓷蒸发皿置于低温电热板上蒸发至约1ml 时，取下，待其自然挥干。冷却后置于冰裕上， 立即用石油醚2ml沿蒸发皿壁将色素洗下，混匀立 即点样。 （7）层析
首都医科大学
营养与食品卫生学
五、计算
式中：X2——样品中胡萝卜素的含量，以β －胡萝卜素计，mg/100g； c——在标准曲线上所查得的胡萝卜素 的含量，μg； V1——点样体积，ml； V2——加入瓷蒸发皿内的样品石油醚 提取液浓缩后的定容体积，ml； m——样品质量，g。
首都医科大学
营养与食品卫生学
首都医科大学
营养与食品卫生学
果蔬汁实验报告数据
一、实验目的1. 掌握果蔬汁的提取方法。
2. 了解不同果蔬汁的营养成分。
3. 探究不同提取方法对果蔬汁营养成分的影响。
二、实验原理果蔬汁是富含多种营养成分的饮料，包括维生素、矿物质、膳食纤维等。
本实验通过提取不同果蔬汁，分析其营养成分，比较不同提取方法对营养成分的影响。
三、实验材料1. 果蔬：苹果、香蕉、胡萝卜、黄瓜。
2. 仪器：榨汁机、电子天平、烧杯、试管、滴定管、pH计等。
3. 试剂：无水乙醇、蒸馏水、氢氧化钠、盐酸等。
四、实验方法1. 果蔬汁提取（1）将新鲜果蔬洗净，去皮去核，切成小块。
（2）将果蔬块放入榨汁机中，加入适量蒸馏水，搅拌均匀，提取果蔬汁。
2. 果蔬汁营养成分测定（1）维生素测定：采用紫外分光光度法测定果蔬汁中维生素C的含量。
（2）矿物质测定：采用原子吸收光谱法测定果蔬汁中钙、镁、钾等矿物质含量。
（3）pH值测定：采用pH计测定果蔬汁的pH值。
3. 不同提取方法比较（1）直接提取：将果蔬汁与无水乙醇按一定比例混合，离心分离，收集上清液。
（2）加热提取：将果蔬汁加热至沸腾，保持一定时间，冷却后过滤。
五、实验数据1. 苹果汁营养成分测定结果（1）维生素C含量：50mg/100ml （2）钙含量：20mg/100ml（3）镁含量：15mg/100ml（4）钾含量：80mg/100ml（5）pH值：3.52. 香蕉汁营养成分测定结果（1）维生素C含量：30mg/100ml （2）钙含量：10mg/100ml（3）镁含量：10mg/100ml（4）钾含量：100mg/100ml （5）pH值：4.23. 胡萝卜汁营养成分测定结果（1）维生素C含量：40mg/100ml （2）钙含量：10mg/100ml（3）镁含量：5mg/100ml（4）钾含量：50mg/100ml（5）pH值：5.04. 黄瓜汁营养成分测定结果（1）维生素C含量：20mg/100ml （2）钙含量：5mg/100ml（3）镁含量：5mg/100ml（4）钾含量：30mg/100ml（5）pH值：6.05. 不同提取方法比较结果（1）直接提取：苹果汁、香蕉汁、胡萝卜汁、黄瓜汁的维生素C含量分别为45mg/100ml、25mg/100ml、35mg/100ml、15mg/100ml，钙、镁、钾含量分别降低20%、15%、10%、5%。
食品中胡萝卜素的检测与分析技术研究
食品中胡萝卜素的检测与分析技术研究胡萝卜素是一类重要的营养物质，具有较高的生物活性和抗氧化作用。
它广泛存在于蔬菜、水果和其他植物中，是人们日常饮食中必不可少的成分之一。
然而，胡萝卜素的含量和种类在不同食品中存在较大的差异，如何准确检测和分析食品中的胡萝卜素成为了食品科学研究的热点之一。
传统的胡萝卜素检测方法主要依赖于色谱、质谱和高效液相色谱等仪器设备，这些技术能够准确测定食品中不同种类胡萝卜素的含量，并具有较高的灵敏度和准确性。
然而，这些检测方法有着昂贵的设备费用、复杂的操作步骤和较长的分析时间等问题，不适用于大规模的胡萝卜素检测需求。
近年来，一些新的检测技术和方法开始被应用于胡萝卜素的检测和分析。
例如，近红外光谱技术（NIRS）是一种非破坏性的检测方法，能够通过红外光的吸收谱图来分析样品的组分。
研究人员通过建立胡萝卜素的模型和校正样品库，将NIRS技术应用于食品中胡萝卜素的快速检测。
这种方法不仅可以实现在线实时检测，而且还具有分析速度快、样品消耗少的优点。
另一种新兴的胡萝卜素检测技术是荧光光谱分析法。
胡萝卜素分子在特定波长的光照射下会发生荧光现象，研究人员通过测定样品的荧光强度来判断其中胡萝卜素的含量。
这种方法具有简便快速、灵敏度高的特点，适用于食品加工过程中的快速检测。
除了传统的检测方法和新兴的技术手段，分子生物学方法也被广泛应用于食品中胡萝卜素的检测。
通过提取食品样品中的DNA，使用PCR技术扩增目标基因片段，再通过凝胶电泳或其他分析手段来检测胡萝卜素的含量。
这种方法不仅可以定量分析胡萝卜素的含量，还可以鉴定不同种类和品种的胡萝卜素。
综上所述，食品中胡萝卜素的检测与分析技术研究是一个具有重要意义的课题。
传统的色谱、质谱和高效液相色谱等技术仍然是胡萝卜素检测的"金标准"，但其高成本和复杂操作限制了其在实际应用中的推广。
新兴的检测技术如近红外光谱和荧光光谱分析法以及分子生物学方法为胡萝卜素的检测提供了更多的选择。
拉曼光谱法检测果蔬中的类胡萝卜素
拉曼光谱法检测果蔬中的类胡萝卜素一、实验目的1.熟练掌握拉曼光谱分析法的原理及应用。
2.利用拉曼光谱法和RP-HPLC法检测果蔬中的类胡萝卜素。
二、设计思想与实验原理类胡萝卜素是自然界广泛存在的一类天然色素的总称，包括胡萝卜素和叶黄素两大类。
类胡萝卜素具有多种生物活性，它们广泛存在于微生物、植物、动物及人体内，是生物体必不可少的组成成分。
常见的有虾青素、β-胡萝卜素、番茄红素、角黄素、玉米黄素等[1]。
已明确结构的类胡萝卜素有600余种，其中由8个类异戊二烯组成，碳原子数为40的四萜占多数。
类胡萝卜素具有活泼共轭双键体系，有特征的紫外可见光吸收和拉曼响应。
类胡萝卜素具有重要的生物学功能，作为强抗氧化剂，能高效猝灭单线态氧；参与执行光能传递和物质转化、抗光敏化作用，是光合生物必不可少的组分；此外，它们对人类有重要的保健防病功能，如清除自由基、免疫调节、防治眼病、抑制肿瘤或抗癌等。
但是直到现在，人们对类胡萝卜素的生物学功能和机理并未完全了解。
为了能在类胡萝卜素研究中获得可靠和有价值的结论，测定类胡萝卜素组成，获得可靠的资料变得非常必要[1,2]。
通过文献调研，我们了解到目前检测类胡萝卜素的方法主要有反相液相色谱法(RP-HPLC法)和拉曼光谱法两种。
本实验将采用两种方法来检测胡萝卜中的类胡萝卜素。
（一）RP-HPLC法反相液相色谱法是检测类胡萝卜素的常用方法，包括提取、皂化和分离检测三个部分，该法能够实现对类胡萝卜素各组分的分离和准确定量。
自然条件下，类胡萝卜素通常与糖、蛋白质等呈结合态的形式，所以首先需要对其进行提取。
文献报道的提取方法有有机溶剂提取法[3]、酶反应法[4]、微波辅助提取法[2]、超声波辅助提取法[3]、超临界流体萃取法[4]等，本实验选用条件较为简单的有机溶剂提取法。
根据文献数据[3，5]，实验选取正己烷、乙醇（体积比2：1）作萃取剂。
由于类胡萝卜素主要以脂肪酸酯的形式存在，需要在碱性条件下，对上述提取液进行皂化，待脂肪酸释放，再用有机溶剂萃取。
类胡萝卜素的测定方法
类胡萝卜素的测定方法（高效液相色谱法）本方法适用于各类食品中以羟基类胡萝卜素为主的多种类胡萝卜素的测定。
本方法最低检出量为：α-胡萝卜素为5ng/mL，β-胡萝卜素为 4.3ng/mL，γ-胡萝卜素为3.5ng/mL，番茄红素为2.7ng/mL，斑蝥黄素为1.0ng/mL。
1. 方法提要样品以丙酮-石油醚（1+1体积比）混合溶剂反复萃取使类胡萝卜素与其他成分分离，在450nm 波长条件下进行HPLC分析检测，通过外标法计算各种类胡萝卜素的含量。
2. 仪器（1）高效液相色谱仪。
（2）冷凝回流皂化装置。
（3）旋转蒸发仪。
（4）离心机（5000r/min）。
3. 试剂本方法所使用试剂除特殊注明外，均为分析纯；所用水为重蒸馏水。
（1）丙酮-石油醚（1+1体积比）混合溶剂：取相同体积的丙酮、石油醚混匀。
（2）50% KOH甲醇-水溶液：称取250g氢氧化钾，用50mL适量水溶解后，用甲醇定容至500mL容量瓶，备用。
（3）无水硫酸钠（Na-2SO4）。
（4）二丁基羟基甲苯（BHT）。
（5）无水乙醇（C2H5OH）。
（6）流动相使用液：按乙腈+二氯甲烷+甲醇（85+10+5）比例准确量取各溶剂，并充分混匀，经.45μm微孔膜过滤后使用。
（7）类胡萝卜素标样：α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、γ-胡萝卜素、番茄红素、斑蝥黄素。
（8）标准溶液：准确称取α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、γ-胡萝卜素、番茄红素、斑蝥黄素一定量，先分别用少量的乙酸乙酯溶解，再用甲醇配制成60~80ng/L的标准储备液（于-30℃冻箱保存），使用时再配成3.5~16.5mg/L的标准使用液。
4. 测定步骤（1）样品处理：a. 皂化提取法（如牛奶等脂肪含量较高的样品）：取250L鲜牛奶于2℃、5000r/min冷冻离心30min，取上层油脂于250mL皂化瓶中，加入50mL乙醇、40mL 50% KOH甲醇溶液、0.1g BHT，65~75℃回流皂化30min，用石油醚反复提取皂化液，多次水洗至中性后用无水硫酸钠脱水，定容至25mL容量瓶中，备用。
八、蔬菜中胡萝卜素的测定（纸层析法）
食品检验实验：蔬菜中胡萝卜素的测定(纸层析法)(一)原理蔬菜的植物色素包括叶绿素、叶黄素及胡萝卜素等，它们能被丙酮石油醚溶液提取出来。
将样品提取液进行纸上层析，由于胡萝卜素极性最小，故被石油醚洗走的速度最快，从而可将胡萝卜素与其他色素分开，然后将胡萝卜素层析带洗脱进行比色定量。
(二)器材1．小乳钵。
2．10ml容量瓶。
3．层析缸。
4．层析纸。
5．分液漏斗50ml或100ml6．光电比色计。
(三)试剂1．石油醚(沸程60～90℃分析纯)。
2．丙酮(分析纯)。
3．丙酮-石油醚液(3：7) 以三份丙酮和七份石油醚振摇混合。
4．经过处理的河沙取河沙置于烧杯中，加10％HCl至高出沙面约1cm煮沸(煮时不断搅动)，然后弃去HCl，用蒸馏水洗至无酸为止。
5．无水硫酸钠(分析纯)。
6．β-胡萝卜素标准溶液精确称取纯β-胡萝卜素40mg于几毫升氯仿里，然后以石油醚稀释至100ml容量瓶中定容。
取该溶液5ml用石油醚稀释至50ml容量瓶中定容，即得40μg／ml的胡萝卜素标准应用液，置冷暗处保存。
(四)操作步骤1．在分液漏斗内先放30ml水。
2．称取绿叶蔬菜的均匀样品2g放入乳钵中(备25ml 3：7的丙酮-石油醚溶液)。
加少许河沙和数毫升丙酮-石油醚溶液于乳钵内，将样品研磨成糊状，用滴管吸取提取液至分液漏斗内。
这样，25ml丙酮-石油醚分十数次提取，直至提取液基本无色为止。
3．振摇分液漏斗，使丙酮溶于水中，待分层后，放去水层，加水洗涤3～4次以除尽丙酮。
过滤前，用吸水纸条吸干分液漏斗管口的水分。
4．将提取液通过盛有无水硫酸钠的漏斗，滤入10ml容量瓶内，再加少许石油醚洗涤漏斗及滤纸上附着的色素，并注入容量瓶内，加石油醚至10ml刻度，混匀。
5．层析(1)点样：于滤纸底端距边约3cm处，用铅笔画一基线，以1ml注射器准确吸取石油醚提取液0．5ml，徐徐点在基线的一条(或一点)上。
(2)展开：将点好样的滤纸卷成圆筒状(或呈长条状)，两边用线系牢，但不使两边重叠，放人事先以石油醚饱和的层析缸内，层析纸要放正，不接触缸边，层析纸基线下1／3浸入液面以内，进行上行展开。
高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素组分
高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素组分赵显峰;潘丽莉;孟晶;王茵;江月仙;荫士安【期刊名称】《卫生研究》【年(卷),期】2008(37)2【摘要】目的测定食物中叶黄素（Lut）、隐黄素（Cryp）、α-胡萝卜素（a-C）、β-胡萝卜素（β-C）和番茄红素（Lyco）的水平。
方法采用高效液相色谱法（HPLC）。
HPLC色谱柱：Develosil C30柱；流动相：A（甲醇：叔丁基甲基醚：水=83：15：2），B（甲醇：叔丁基甲基醚：水：8：90：2），梯度洗脱；检测器：紫外-可见光检测器；检测波长：450nm。
结果Lut在0、013～0．508,ug／ml范围内与峰面积的线性相关，R。
=0、999，加标回收率为105．9％，RSD=4、62％；Cryp在0．015～0、605μg／m1范围内与峰面积的线性相关，R^2=1．000，加标回收率为94．7％，RSD=3．50％；n—C在0．011～0．432μg／ml范围内与峰面积的线性相关，R^2=1．000，加标回收率为95．8％，RSD：3．83％；、β-C在0、013～0、518μg/ml范围内与峰面积的线性相关，R^2=1．000，加标回收率为108．1％，RSD=2、97％；Lyco在0．012～0．498μg／ml范围内与峰面积的线性相关，R^2：1、000，加标回收率为104．5％，RSD：4．24％。
结论该方法同时测定了蔬菜中的Lut、Cryp、α—C、β-C和Lyco5种类胡萝卜素组分，方法简便、快速、准确。
【总页数】3页(P228-230)【关键词】高效液相色谱法;类胡萝卜素;食物【作者】赵显峰;潘丽莉;孟晶;王茵;江月仙;荫士安【作者单位】中国疾病预防控制中心营养与食品安全所,北京100050;浙江省医学科学院保健食品研究所【正文语种】中文【中图分类】R151.3【相关文献】1.高效液相色谱法测定蔬菜中的类胡萝卜素 [J], 宋曙辉;薛颖2.高效液相色谱法分析蔬菜水果及其制品中类胡萝卜素含量的研究 [J], 刘新艳;吕军;刘中笑;李凌云;张延国;郑姝宁;徐东辉3.超声萃取-超高效液相色谱法快速测定烤烟中的类胡萝卜素 [J], 李小玉; 肖丽凤; 杨懋勋4.高效液相色谱法同时测定红心鸭蛋中5种类胡萝卜素含量 [J], 蔡翔宇; 秦富; 司露露; 欧玉玲5.高效液相色谱法测定鸡蛋、鸡肉中五种类胡萝卜素物质 [J], 兰韬;闫娜;裴栋;刘佳雯;于聪聪;初侨;李笃信因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
类胡萝卜素检测
类胡萝卜素检测
类胡萝卜素（Carotenoids）是一类广泛存在于动物、高等植物、真菌中的天然色素的总称，种类繁多，已经发现的天然类胡萝卜素就有700多种，按其化学结构和溶解性的不同可分为胡萝卜素类（Carotenes）和叶黄素类（Xanthophylls）两大类。
其中，胡萝卜素类主要包括α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、γ-胡萝卜素和番茄红素等；叶黄素类主要包括叶黄素、α-隐黄质、β-隐黄质、玉米黄素（玉米黄质）、虾青素、辣椒红素和藏红素（栀子黄）等。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)方法，使用Agilent或者Waters高效液相色谱仪，配备DAD检测器或ELSD检测器，可检测各类样品中类胡萝卜素含量变化。
此外，我们还提供生化法检测类胡萝卜素含量以及其他色素检测服务，以满足您的不同需求。
检测项目。
检测指标。
检测方法。
类胡萝卜素。
高效液相色谱法/生化法。
胡萝卜素。
高效液相色谱法。
β-胡萝卜素。
高效液相色谱法。
番茄红素。
高效液相色谱法。
叶黄素。
高效液相色谱法。
β-隐黄质。
高效液相色谱法。
玉米黄素/玉米黄质/隐黄素。
高效液相色谱法。
虾青素。
高效液相色谱法。
其他类胡萝卜素。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
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水果、蔬菜汁类胡萝卜素含量的测定
1 主题内容与适用范围
本标准规定了水果、蔬菜汁中类胡萝卜素的分离提取方法及提取物中类胡萝卜素总量的测定方法。
本标准适用于水果、蔬菜汁中类胡萝卜素总量的测定。
2 原理
果蔬滤液通过溶剂萃取,分离提取类胡萝卜素,在特定波长下用分光光度法测其吸光度。
该吸光度与类胡萝卜素含量成线性关系,通过换算即可得知类胡萝卜素之含量。
3 试剂和溶液
本标准所用试剂除特殊规定外,均使用符合国家标准的分析纯试剂,均采用蒸馏水。
3.1 石英砂(Q/HG 22--467)；
3.2 萃取剂,2/1(v/v)氯仿(GB 682)-甲醇(GB 683)混合。
4 仪器设备
4.1 抽滤器；
4.2 无灰分滤纸；
4.3 分液漏斗：250mL；
4.4 容量瓶,100mL；
4.5 移液管,20mL；
4.6 烧杯,50mL；
4.7 分光光度计,使用的测量波长为440±10nm。
5 分析步骤
注：由于类胡萝卜素本身性状的不稳定性,即见光易氧化分解,建议所有操作应避光进行。
5.1 试样的制备
5.1.1 液体样品：混合均匀后取样。
5.1.2 固体样品：捣碎机捣碎后,纱布挤汁。
5.2 用移液管吸取20mL样液置50mL烧杯中。
5.3 过滤：在烧杯(5.2)中加入3g石英砂,摇动后用布氏漏斗过滤(布氏漏斗预先铺有无灰滤纸,纸上铺有2g石英砂),然后再用5mL水冲洗滤渣3次。
5.4 萃取：在250mL的分液漏斗中倒入滤液(5.3),再加入20mL萃取剂(3.2),振摇后静置,收集下部分有机相,再用20mL萃取剂提取两次,将三次萃取所得有机相合并,用萃取剂定容为100mL。
注：对果胶含量大的果蔬,萃取时,将三次合并的有机相重新倒回原分液漏斗,继续用20mL萃取洗涤一次,然后用萃取剂定容至100mL。
5.5 测定：在440±10nm波长下测定提取液的最大吸光度A。
6 结果的计算和表示
类胡萝卜素总量用mg/L表示,按下式计算：
类胡萝卜素(mg/L)＝A×20
式中：A——测定的最大吸光度；
20——换算系数。
此计算公式是以公认的胡萝卜素分子平均吸收系数250为依据的。
7 允许差
同一分析者连续进行两次测定,其结果相对偏差不得超过5％。
附加说明：
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由中国农业科学院分析测试中心负责起草。
本标准主要起草人李伟格、陈必芳、李兰。
本标准等效采用法国国家标准NFV 76--110 1980《水果、蔬菜汁中类胡萝卜素全量的测定》。