大肠菌群检测(MPN法)
mpn法检测大肠菌群的原理
mpn法检测大肠菌群的原理1. 什么是MPN法？大家好，今天咱们聊聊MPN法，也就是最可能数法，这可是检测水中大肠菌群的“神器”呢！MPN法的英文全名是“Most Probable Number”，翻译过来就是“最可能数”。
听起来是不是很神秘？其实它就是一种通过统计学的方法来估算水里大肠菌群的数量，通俗点说，就是看水中藏着多少小“坏蛋”。
首先，MPN法听起来有点复杂，其实它的工作原理还挺简单的。
咱们可以把它理解成一种通过“打样”的方法来找出水中的大肠菌群到底有多少。
这就好比我们去商场逛街，看到一件漂亮的衣服，试穿了几件差不多款式的，最终决定了买哪一件。
MPN法也是这样，它通过一系列的实验，来估算大肠菌群的数量。
要知道，大肠菌群这家伙可是影响水质的重要因素，所以咱们得好好了解一下它们的情况。
2. MPN法的基本步骤2.1 采样和稀释说到MPN法，首先要做的就是采样。
就像咱们去商场挑衣服一样，第一步是挑选你想要的样品。
这里咱们的样品是水，特别是那些咱们平时喝的水，或者用来洗菜、做饭的水。
这些水可得小心处理，不然大肠菌群的数量会被弄得不准确。
采样之后，我们需要把水样进行稀释。
稀释的目的是为了减少水中大肠菌群的浓度，使得后续的实验更容易操作。
这个过程就像是调配饮料时，加水稀释一样。
稀释得越多，水样中的细菌浓度就越低。
这样做是为了确保在实验时，能准确地找出大肠菌群的数量。
2.2 培养和观察接下来，我们把稀释后的水样放到培养基里去培养。
培养基是一种特殊的营养液，可以让细菌在里面繁殖。
就像给植物提供土壤一样，培养基给细菌提供了生长的环境。
这个过程需要一点时间，一般来说，细菌在培养基里待24到48小时，就可以看到结果了。
观察结果的时候，我们需要注意培养基的变化。
如果水样中有大肠菌群，它们会在培养基中产生一些气体或者改变颜色，这就像是植物长出了新芽一样。
通过观察这些变化，我们可以判断水样中是否有大肠菌群存在。
如果培养基的颜色发生了变化，那就意味着水中有大肠菌群，咱们可以进一步计算它们的数量。
MPN大肠菌群大肠杆菌原理
MPN大肠菌群大肠杆菌原理MPN的全称是Most Probable Number，即最有可能数目。
MPN是一种用于测定微生物数量的方法。
在微生物学中，常常需要知道一个环境样品中微生物的数量，这对于病原微生物的检测、食品与饮用水质量的检验等具有重要意义。
MPN方法的原理基于一种统计学的原则，即当样品中存在微生物时，根据样本连续稀释后的阳性结果的比率可以估算样品中微生物的数量。
首先，将样品连续稀释，然后分别将稀释液接种到不同的培养基中，根据不同培养基的阳性结果来估算微生物数量。
大肠菌群是人类消化系统中的一类细菌。
它们主要分布在人体肠道的大肠中，经常与人体共生共存。
通常情况下，大肠细菌对人体有很多益处，如帮助消化食物、合成维生素等。
然而，有些大肠细菌可能是致病菌，会导致人体感染。
因此，对大肠菌群的检测对于维护人体健康具有重要意义。
大肠杆菌（Escherichia coli）是大肠菌群中的一种细菌，是最常见的肠道细菌之一、大肠杆菌是革兰氏阴性杆菌，通常呈杆状且单株分离。
它们在肠道中发挥着重要的生理功能，如参与食物消化、产生维生素和促进免疫系统的功能。
此外，大肠杆菌在医学和微生物学中也经常被用作实验模型。
大肠杆菌的检测原理一般采用培养方法。
首先，将样品中的细菌进行传代培养，为了区分大肠杆菌和其他微生物，通常会在培养基中加入选择性抑制剂。
在培养基中生长的细菌经过一段时间后会形成典型的大肠杆菌形态，如菌落大小、形状和颜色等。
此外，还可用生化试剂进行进一步检测，如糖发酵试验和气体产生试验等，以确定细菌是否为大肠杆菌。
总结起来，MPN是一种用于估算样品中微生物数量的方法，大肠菌群是人体肠道中的一类细菌，而大肠杆菌则是大肠菌群中的一种最常见细菌。
大肠杆菌的检测一般采用培养方法，通过培养基中细菌的生长和形态特征以及生化试剂的反应来确定是否为大肠杆菌。
这些检测方法对于保障人体健康和食品安全具有重要作用。
MPN法测定食品中大肠杆菌群数
知识点：MPN法测定大肠杆菌群数情境：微生物检测技术任务：MPN法测定大肠杆菌群数课程：食品微生物技术MPN 法测定大肠菌群原理一、大肠菌群什么叫大肠菌群大肠菌群是一群以大肠埃希氏菌为主的需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，在37℃生长时，能在48h内发酵乳糖并产酸产气。
二、MPNMPN❞食品中大肠菌群数是以每100 mL（g）检样内大肠菌群最近似数（The most probable number，简称MPN）表示。
❞据此含义，所有食品卫生标准中所规定的大肠菌群均应以每mL（g）食品内允许含有大肠菌群的实际数值为报告标准。
三、MPN法测定原理MPN法是统计学和微生物学结合的一种定量检测法。
待测样品经系列稀释并培养后，根据其未生长的最低稀释度与生长的最高稀释度，应用统计学概率论推算出待测样品中大肠菌群的最大可能数。
大肠菌群测定步骤1.液体样品稀释以无菌吸管吸取25 mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）或其他无菌容器中充分振摇或置于机械振荡器中振摇，充分混匀，制成1:10 的样品匀液。
2.梯度稀释❞用1 mL无菌吸管或微量移液器吸取（1:10）样品匀液1 mL，沿管壁缓缓注入9 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管混匀或换用1支1 mL无菌吸管反复吹打，使其混合均匀，作成1:100的样品匀液。
❞根据对样品污染状况的估计，按上述操作，依次制成十倍递增系列稀释样品匀液。
每递增稀释1次，换用1支1 mL灭菌吸管或吸头。
从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min。
五、初发酵试验每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管接种1mL（如接种量超过1mL，则用双料LST肉汤），36℃±1℃培养24h±2h，观察倒管内是否有气泡产生，24h±2h产气者进行复发酵试验（证实试验），如未产气则继续培养至48h±2h，产气者进行复发酵试验。
大肠菌群测定—食品中大肠菌群的测定方法
培养特性： 大肠杆菌合成代谢能力强，在含无机盐、铵盐、葡萄 糖的普通培养基上生长良好。最适生长温度为37℃， 在42-44 ℃条件下仍能生长，生长温度范围15-46 ℃。
➢ 在普通营养琼脂上有3中菌落形 态：
➢ 1）光滑型：菌落边缘整齐， 表面有光泽、湿润、
➢ 光滑、呈灰色，在生理盐水 中易分散；
计，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳 糖胆盐发酵管。
•
接种量在1ml以上者，用双料乳糖胆盐发酵管，1ml及1ml
以下者，用单料乳糖胆盐发酵管，同时用大肠埃希氏菌和产气肠
杆菌混合菌种混合接种于1支作单料乳糖胆盐发酵管对照。
• 置36±1℃温箱培养24±2小时，如所有发酵管 都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产 气者，则与对照的混合菌种一起按下列程序进 行。
4、 大肠菌群最可能数（MPN ）的报告
➢ 根据大肠菌群阳性管数，检索MPN 表（见附录
B ) ，报告每克（或毫升）样品中大肠菌群的 MPN 值。 ✓注意：当检样的量与表中的量有增加或减少时，
表内的数也应相应减少或增加。
大肠杆菌 0157显色 培养基上 的菌落
在伊红美兰乳糖琼脂（EMB）上
大肠菌群在去氧胆酸钠琼脂上的典型特征
设备和材料
食品中大肠菌群测定
参考 GB4789．3-2010
➢主要由肠杆菌科中埃希氏菌属、肠杆菌 属、克雷伯氏菌属的一部分及沙门氏属 的Ⅲ亚属细菌组成。
3、大肠杆菌的生物学特性
基本形态
此菌为两端钝圆的短小杆菌，一般约0.50.8μm*1.0-3.0 μm，多单独存在或成双，但 不呈长链排列。约50%的菌株有周生鞭毛， 但多数只有1-4根，一般不超过10根，故菌体 动力弱。多数菌株有菌毛，有的有荚膜或微 荚膜，不形成芽孢，对普通碱性染料着色良 好，革兰氏染色阴性。
生活饮用水中总大肠菌群三种不同检测方法比较
生活饮用水中总大肠菌群三种不同检测方法比较在生活饮用水中，大肠菌群是一种重要的指标，用来评价水源的卫生状况。
常见的三种大肠菌群检测方法包括MPN法（Most Probable Number）、膜过滤法和PCR法（聚合酶链式反应法）。
本文将对这三种方法进行比较，分析其特点和适用场景。
首先，MPN法是一种常用的大肠菌群检测方法。
该方法通过对一系列稀释液进行培养，根据培养液中菌落的种类和数量来评估大肠菌群的含量。
这种方法的优点是操作简单、成本较低，可适用于大批量的水样检测。
但是，MPN法的缺点是需要较长时间的培养过程，通常需要3-5天的时间才能得到结果。
此外，该方法对生活饮用水中的非培养大肠菌群无法进行检测。
其次，膜过滤法是一种较为常用的大肠菌群检测方法。
该方法通过将水样通过特殊大小的膜过滤器，使大肠菌群滞留在膜上，然后将膜转移到培养基上进行培养。
该方法的优点是操作相对简单，需要的时间较短，通常在24小时内可以得到结果。
此外，该方法可以对生活饮用水中的非培养大肠菌群进行检测。
但是，膜过滤法的缺点是需要较多的培养器材和耗材，成本较高。
最后，PCR法是一种较为先进的大肠菌群检测方法。
该方法通过扩增水样中大肠菌群的DNA片段，然后利用荧光技术进行检测。
PCR法的优点是快速、灵敏，可以在短时间内得到准确的结果。
此外，该方法可以对生活饮用水中的非培养大肠菌群进行检测，并可以进行定量分析。
但是，PCR法的缺点是需要较复杂的实验设置和专业的设备，操作要求较高，成本较高。
综上所述，生活饮用水中总大肠菌群的检测方法包括MPN法、膜过滤法和PCR法。
这三种方法各有特点，在不同的场景中适用。
MPN法适用于大批量的水样检测，操作简单、成本较低，但需要较长时间。
膜过滤法适用于一般的大肠菌群检测，操作相对简单、时间较短，但成本较高。
PCR 法适用于准确和快速的大肠菌群检测，可以进行定量分析，但需要较复杂的实验设置和专业设备。
在实际应用中，可以根据需求和实际条件选择合适的检测方法来评估生活饮用水的卫生状况。
肉制品中大肠菌群的检验—第一法大肠菌群MPN计数法
菌海砂或玻璃砂研磨，磨碎后加入灭菌水225mL，混匀后即为1:10稀释
液。或用均质器以8000~10000r/min，均质1min，做成1:10稀释液。
一、样品的采集和处理
大
肠
4.2 鲜、冻家禽检样的处理
菌
群
先将检样进行表面消毒，再用无菌剪子取检样深层肌肉25g（一般可从
MPN
胸部或腿部剪取）。其他处理同生肉。带毛野禽去毛后，同家禽检样处理。
MPN
1.2 采样过程遵循无菌操作程序，防止一切可能的外来污染。
计 数
2. 采样方案
法
2.1 根据检验目的、食品特点、批量、检验方法、微生物的危害
程度等确定采样方案。
2.2 采样方案分为二级和三级采样方案。二级采样方案设有n、
c和m 值,三级采样方案设有n、c、m 和M 值。
一、样品的采集和处理
大
第一法：大肠菌群MPN计数法
目录页
样品的采集和处理 设备和材料 培养基和试剂
大肠菌群MPN计数检样程序 大肠菌群MPN计数检样操作步骤
样品的采集和处理
一
1. 采样原则和采样方案 2. 采样用品 3. 样品的采取和送检 4. 检样的处理
一、样品的采集和处理
大 肠
1. 采样原则
菌 群
1.1 样品的采集应遵循随机性、代表性的原则。
群
样品,
MPN
若5个样品的检验结果均小于或等于m 值(≤100CFU/g),则这种情况是允许的;
计 数
若≤2个样品的结果(X)位于m 值和M 值之间(100CFU/g<X≤1000CFU/g)，
法
则这种情况也是允许的;
若有3个及以上样品的检验结果位于m 值和M 值之间,则这种情况是不允许的；
mpn 法
MPN法是Most Probable Number的缩写，指最大或然数计数，又称稀释培养计数，适用于测定在一个混杂的微生物群落中虽不占优势，但却具有特殊生理功能的类群。
MPN法的特点是通过待测微生物的特殊生理功能的选择性来摆脱其他微生物类群的干扰，并通过该生理功能的表现来判断该类群微生物的存在和丰度。
该方法特别适合于测定土壤微生物中的特定生理群（如氨化、硝化、纤维素分解、固氮、硫化和反硫化细菌等）的数量和检测污水、牛奶及其他食品中特殊微生物类群（如大肠菌群）的数量。
MPN法的实施过程包括确定稀释系列、接种培养基、观察结果和记录结果等步骤。
该方法具备一定的定量性，并且可以在相对较短的时间内得出结果，因此在微生物分析领域具有广泛应用，成为许多微生物检测实验室和食品、环境等行业常用的分析方法之一。
以上信息仅供参考，建议查阅专业书籍获取更准确的信息。
mpn法检测大肠菌群的原理
mpn法检测大肠菌群的原理1. 什么是MPN法？大家都知道，大肠菌群对我们的健康可有着举足轻重的影响。
咱们今天要聊的是一种检测它们的好方法——MPN法。
MPN法，全名叫做“最可能数法”（Most Probable Number），听起来是不是挺高大上的？其实，这就是一种用来估算水或食品中大肠菌群数量的方法，简单说就是“猜个数”法，当然这不是随便猜的哦，背后可是有科学依据的。
2. MPN法的基本原理2.1 检测过程的初步了解首先，这个MPN法就像玩“猜谜游戏”。
你要先把你的样本，譬如水或食物，分成几份，放到不同的培养基里。
培养基就是一种特别的“营养液”，它可以帮助大肠菌群生长。
接着，你要观察这些培养基里的变化。
特别注意的是，如果有大肠菌群存在，它们会产生气体，气体会让液体变成泡泡状。
2.2 数据分析和结果估算然后，你会看到这些泡泡的数量，根据这些泡泡的多寡，你就可以用统计学的方法，估算样本中大肠菌群的数量。
是不是有点像把一篮水果分成几堆，然后根据每堆的水果数量来估算整篮水果的数目？这就是MPN法的“智慧”所在，通过这种方法，我们可以粗略估算出大肠菌群的数量，尽管这种估算是“最可能数”，但却很有帮助。
3. 为什么选择MPN法？3.1 MPN法的优势说到为什么用MPN法，其实这有点像在菜市场挑选水果，MPN法就像是用比较简单的工具来确定水果的新鲜程度。
它不仅简单易用，而且对于某些检测条件下，MPN法比其他方法要方便得多。
尤其是当你面对大量的样本时，它就显得特别得心应手。
你只需要简单的试剂和培养基，就能完成检测，省时省力。
3.2 MPN法的局限性不过，任何方法都有它的“短板”，MPN法也不例外。
虽然它方便，但它的结果只是一个“估计值”，而不是一个精准值。
就像你估算一桌子菜的分量，不可能每次都做到百分百准确，对吧？MPN法同样如此，它给出的结果只能算是一个“最可能”的数值，实际情况可能会有所不同。
4. 实际应用中的MPN法4.1 在水质检测中的应用在实际应用中，MPN法广泛用于水质检测。
大肠菌群检测的实验报告
大肠菌群检测的实验报告大肠菌群检测实验报告一、实验目的本实验旨在通过检测样品中的大肠菌群数量，评估其卫生质量，为食品安全和人类健康提供重要依据。
二、实验原理大肠菌群是指一群革兰氏阴性、无芽孢、兼性厌氧的细菌，主要包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠球菌属等。
这些细菌可在25-37℃的环境下生长，且在伊红美蓝培养基上形成典型的大肠菌群菌落。
本实验采用MPN（最大可能数）方法进行大肠菌群的检测。
通过在不同浓度的样品中接种不同体积的培养基，并按照MPN表进行统计分析，以获得样品中大肠菌群的数量。
三、实验步骤1.样品处理：将样品按照10倍递增的方式进行稀释，以适应不同浓度的大肠菌群检测。
2.接种培养：分别取0.1mL、0.01mL、0.001mL的样品稀释液，接种于伊红美蓝培养基中，每个稀释度接种三管。
轻轻摇匀，倒置培养。
3.培养观察：将培养基放入37℃的培养箱中，培养24小时。
观察每个稀释度的培养管中是否有典型的大肠菌群菌落形成。
4.结果统计：根据MPN表，统计每个稀释度下形成菌落的管数，并计算大肠菌群的数量。
5.结果报告：根据实验数据，得出样品中大肠菌群的数量，并评估其卫生质量。
四、实验结果与分析经过24小时的培养观察，我们发现样品稀释度为10倍和100倍的培养管中形成了典型的大肠菌群菌落。
根据MPN表进行统计分析，得出样品中大肠菌群的数量为9.0×10²CFU/mL。
根据国家相关标准，该样品的大肠菌群数量超过了安全阈值（<10³CFU/mL），因此该样品的卫生质量不达标。
五、结论与建议通过本实验的检测和分析，我们得出样品中大肠菌群的数量超出了安全阈值，说明该样品的卫生质量不符合要求。
这可能是由于生产过程中的污染、储存条件不当或运输环节不卫生等原因导致的。
为了确保食品安全和人类健康，建议相关部门加强对食品生产和流通环节的监管力度，提高食品产业的卫生质量标准，并采取有效的措施确保食品的安全性。
自来水供应水质检测方法标准
自来水供应水质检测方法标准为了确保自来水供应的水质安全和可靠，水质检测方法标准起着至关重要的作用。
本文将介绍一些常用的自来水供应水质检测方法标准，以及其在保障公众健康和环境保护方面的重要性。
一、总大肠菌群检测方法标准自来水供应中存在着各种微生物，其中的总大肠菌群是一类重要的指标微生物，其检测方法标准对于判断自来水是否受到污染具有重要意义。
目前，常用的总大肠菌群检测方法标准包括MPN法和膜过滤法。
MPN法（Most Probable Number Method）是一种常用的水质检测方法，通过数倍稀释法和培养基培养法，可以根据落菌管的阳性和阴性结果来计算出总大肠菌群的数量，从而评估水样中是否存在细菌污染。
膜过滤法则是将水样通过特定孔径的膜过滤器，过滤后将膜置于选择性培养基上进行培养，通过检测培养基上的菌落形成情况，判断样品中总大肠菌群的存在与否。
二、水中重金属检测方法标准水中重金属是自来水供应中的另一个重要指标，其含量的超标可能对人体健康产生不良影响，因此需要进行检测。
针对水中重金属的检测，一般采用原子吸收光谱法（AAS）或者电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）等。
原子吸收光谱法是利用金属原子吸收特定波长的光线来测定水样中特定重金属元素的含量。
通过将水样进行特定前处理，如化学处理或进一步浓缩，使得被检测的重金属元素在检测时可以被准确快速地测定。
电感耦合等离子体质谱法是一种高效、高灵敏度和准确性的检测方法。
通过将溶液离子化、加速、分离和检测，可以测定各种重金属元素的含量。
这种方法可以同时测定多种重金属元素，并且可以检测到更低浓度的元素含量。
三、水中有机物检测方法标准自来水供应中的有机物是指水中溶解的含有碳原子的化合物，其来源多样，包括废水排放、农药使用等。
合理检测和控制水中有机物的含量对保障自来水供应水质安全至关重要。
目前，常用的水中有机物检测方法标准包括气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）和液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）。
大肠菌群MPN法的设计原理
大肠菌群MPN法的设计原理
大肠菌群MPN法是一种用于检测环境水样和食品样品中大肠菌群数量的方法。
它的设计原理基于以下几个方面：
1. 大肠菌群指标：大肠菌群是一类广泛存在于环境中的微生物，其中包括了多种大肠杆菌和其他肠道细菌。
大肠菌群可以作为一种指标，用来评估水质和食品中的细菌污染程度。
2. MPN法：MPN（Most Probable Number，最可能数）法是一种常用的微生物计数方法。
它通过对不同稀释度的样品进行对比培养，观察细菌生长情况，从而推测出细菌的数量。
3. MPN法的流程：大肠菌群MPN法的流程一般包括以下几个步骤：首先，将样品进行预处理，如加入适当的培养基和抑制剂，以排除其他非目标菌的影响；然后，将样品分成若干个不同稀释度的试管；接下来，将试管中的样品逐渐转移到培养基中进行培养；最后，观察培养基中的生长情况，根据特定的生长特征，确定大肠菌群的MPN值。
4. 数据分析：根据大肠菌群MPN法的设计原理，可以使用统计学的方法对实验结果进行分析和计算，得出大肠菌群的数量。
通过与相关标准进行比较，可以评估环境水样或食品样品是否符合卫生标准。
总而言之，大肠菌群MPN法通过稀释样品、对比培养和数据分析等步骤，可以量化环境水样和食品样品中大肠菌群的数量，从而评估细菌污染程度。
大肠杆菌的检测(MPN计数法)
食品微生物检验技术课程综述大肠杆菌的检测（MPN计数法）院系：食品科学与药学学院班级：食科114姓名: 张花学号: 114031431组长: 张军玲成员：张花赵晶郁朱娟娟大肠杆菌Petrifilm测试片计数法摘要食品检测是反映食品加工、贮藏、运输、等环节的卫生与安全状况的重要手段,而大肠菌群检测则是食品检测的重要指标均之一.根据定义大肠菌群是在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和碱性厌氧的革兰氏阴性芽胞杆菌.其主要检测意义在于反映食品卫生状况并推测其在肠道致病菌的可能性。
Petrifilm大肠菌群测试片是由美国3M生产的一种预先制备好的VRB平板培养基系统，并添加了TTC作为菌落指示剂便于菌落判读，而上层薄膜可以起到对大肠菌群发酵产生的气体截留的作用。
该方法目前已被多数权威机构认可，并在国内很多实验室开展运用。
关键词大肠杆菌Petrifilm测试法1设备和材料1。
1恒温培养箱:36±1℃。
1.2冰箱2～5℃。
1.3恒温水浴箱 :44。
5±0。
2℃。
1.4天平:感量0。
1g.1.5均质器1.6振荡器。
1.7无菌吸管：lmL（具0.01 mL刻度）、10mL（具0。
1mL刻度）或微量移液器及吸头。
1.8无菌锥形瓶：容量500mL。
1。
9 玻璃珠:直径约5mm。
1.10pH计或pH比色管或精密pH试纸1。
11试管架.2. 培养基和试剂2.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨（ LST ）肉汤。
2.2EC肉汤.2。
3蛋白胨水.2。
4缓冲葡萄糖蛋白胨水（MP—VP实验用）。
2。
5磷酸盐缓冲液。
2。
6无菌生理盐水：称取8.5g氯化钠溶于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15min。
2。
71mol/L氢氧化钠（NaOH ）：称取40g 氢氧化钠溶于1000ml蒸馏水中。
2.81mol/L 盐酸（HCI ）：移取浓盐酸90ml,用蒸馏水稀释至1000ml。
3检验程序4.样品稀释4。
1固体和半固体样品：以无菌操作将检样25mL样品，置盛有225mL磷酸盐缓冲液的无菌均质杯内或其他稀释液的灭菌锥形瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。
大肠菌群测定实训报告总结
一、实训背景大肠菌群是指一群能在37℃下48小时内发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
大肠菌群是食品卫生学中重要的微生物指标之一，其存在与否直接关系到食品的卫生质量。
为了提高我们对大肠菌群检测方法的理解和实际操作能力，我们进行了大肠菌群测定实训。
二、实训目的1. 掌握大肠菌群检测的基本原理和操作方法。
2. 熟悉实验室常规操作，提高实验技能。
3. 培养团队协作精神和严谨的科学态度。
三、实训内容1. 大肠菌群检测原理大肠菌群检测主要依据MPN（最可能数）法，通过观察样品在培养过程中是否产生酸、产气来判断大肠菌群的存在，并计算出其数量。
2. 实验步骤（1）样品采集：按照GB/T 4789.3-2003《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群测定》进行样品采集。
（2）样品处理：将采集到的样品进行均质化处理，使其成为均匀的悬浮液。
（3）接种：将处理后的样品接种到乳糖胆盐发酵管中。
（4）培养：将接种好的发酵管放入37℃培养箱中培养48小时。
（5）观察：观察发酵管中是否产生气泡和浑浊现象。
（6）计算：根据发酵管中产生气泡和浑浊现象的数量，结合MPN表计算大肠菌群数量。
3. 实验结果与分析本次实训，我们共检测了10个样品，包括糕点、蜜饯、汽水等。
根据实验结果，其中6个样品检测出大肠菌群，其余4个样品未检测出大肠菌群。
分析原因如下：（1）样品采集：样品采集过程中，应注意采集部位和采集方法，避免污染。
（2）样品处理：样品处理过程中，应确保样品均匀，避免因处理不当导致检测结果不准确。
（3）接种：接种过程中，应确保接种环清洁，避免交叉污染。
（4）培养：培养过程中，应确保培养箱温度稳定，避免因温度波动导致检测结果不准确。
四、实训体会1. 实验操作过程中，要严格遵守实验室操作规程，确保实验结果的准确性。
2. 在实验过程中，要注意观察细节，如接种环的清洁、培养箱温度的稳定性等，这些细节对实验结果有很大影响。
3. 团队协作精神在实验过程中至关重要，遇到问题时，要学会与团队成员沟通、讨论，共同解决问题。
食品中大肠菌群的测定(MPN法)
五、实验步骤
检样 稀释
大肠菌群检验程图 （新国标MPN法）
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）36±１℃，24~48±2h
不产气
产气 煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB） 36±１℃，24~48±2h
不产气
产气
大肠菌群阴性
大肠菌群阳性
报告
1、样品处理：
❖ 固体和半固体食品：以无菌操作取25g样品，放入装 有225 mL生理盐水的三角瓶中，充分振荡，制成 1:10样品匀液无菌均质杯或无菌均质袋内，于8000 r/min均质1min～2min，制成1:10样品匀液。
四、实验器材
1、培养基：月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤、煌绿乳糖 胆盐（BGLB）肉汤
2、仪器或其他用具：电子天平（感量0.1g）、无菌不锈钢 勺、无菌称量纸、无菌吸管（1 mL和25 mL）、试管、 三角瓶、无菌生理盐水（9mL/管，225mL/三角瓶内含 适量玻璃珠）、无菌1 mol/L NaOH、无菌1 mol/L HCl、 75%酒精棉球、广口瓶、灭菌剪刀、灭菌镊子、酒精灯、 精密pH 试纸、恒温培养箱、高压灭菌锅、均质器、振荡 器、接种环等。
1、样品处理：
❖ 液 体 食 品 ： 以 无 菌 吸 管 吸 取 样 品 25mL 放 入 装 有 225mL生理盐水的无菌玻璃瓶（瓶内预置适当数量 的玻璃珠）中，以30cm幅度、于7s内振摇25次（或 以机械振荡器振摇）,制成1:10的样品匀液。
2、样品稀释：
1ml
1ml 1ml
生理 盐水
1:10
25g/m
1:100 1:1000 1:10000
l样品
注意：吸管尖端不要触及稀释液面，每递增稀释1
次，用1 支1mL无菌吸管。从制备样品匀液至
大肠菌群MPN法检测结果怎么报告还不明白？看过来！
大肠菌群MPN法检测结果怎么报告还不明白？看过来！食品微生物检测大肠菌群(Coliform bacteria)是指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中是否有污染肠道致病菌的可能。
大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界中广泛存在。
大肠菌群作为作为食品微生物的主要检测指标之一，食品企业最常检测的微生物项目，我们都知道目前大肠菌群检测的方法包括：GB 4789.3-2003 和GB 4789.3-2016，那在日常检测中细心的小伙伴们可能会发现，报告单位有时是MPN/g(mL)，有时又是MPN/100g(mL)，这两个单位是什么意思呢？能够简简单单的认为两者相差100倍吗？答案当然是NO。
针对这个问题，今天我们就仔细地分析探讨一下，一次性解决大肠菌群MPN法报告的问题。
一、检测方法大肠菌群检测的关键在于方法的选用，食品中大肠菌群检测有两种表示方法，其一是以100mL(g)检样内大肠菌群最大可能数(MPN)表示，检测方法需使用GB/T 4789.3-2003《食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》；其二以每g(mL)样品中大肠菌群的MPN值表示，检测方法需使用GB 4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》。
二、报告单位溯源首先看看这两个单位的来源。
2003年8月，国家卫生部和标准化管理委员会联合发布了《GB/T 4789.3-2003 食品微生物学检验大肠菌群测定》，来替代1994版国标。
这版国标的检测只有一种MPN法，但是却是大肠菌群检测的经典国标。
在2016年12月，国家卫生部发布了《GB 4789.3-2016 食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》，这次标准标准代替了GB 4789.3-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》、GB/T 4789.32-2002《食品卫生微生物学检验大肠菌群的快速检测》和SN/T 0169-2010《进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法》大肠菌群计数部分。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
大肠菌群检测(MPN法)
大肠菌群检测(MPN法)是一种常用的微生物学技术，可用于检测土壤、水源、食品等中的大肠菌群进行水质和食品安全监测。
本文将介绍大肠菌群及其检测方法-最可能数法(MPN法)。
一、大肠菌群概述
大肠菌群是以肠道菌属为主体的一类细菌，包括肠道埃希菌、沙门氏菌、志贺菌、伤寒杆菌等成员，它们可以在人类和动物的肠道中生存并繁殖。
在自然界中，大肠菌群也是广泛存在的微生物家族，如彗星菌、副肠杆菌、耶尔森氏菌等都属于大肠菌群。
1.菌落计数法
该方法主要是利用琼脂平板培养皿在水培的条件下，大肠菌群在培养基上经不同时间的生长，形成菌落来进行菌数计数。
缺点是容易受到其他微生物的干扰，只能算出概略的数值，一定误差，没有国家标准。
2. 硝酸德钠试剂法
将测样加硝酸德阳试剂进行加热，最终乳黄色的镜检测前进行比色，得出含大肠菌群的细菌群落达标后延迟显色的时间。
该方法已被最可能数(MPN)法所替代。
3. 最可能数法(MPN法)
该方法先将测量的样品分别稀释到不同浓度下，再将每一份稀释液添加到以琼脂平板固化培养基为基础的不同培养液中，观察哪一份培养液出现大肠菌群的生长，最后通过MPN表格计算每85ml或100ml的水样中最可能含有的大肠菌群数量，计算公式为：
10
^x = n / 联合效价（即dilution rate的倒数）
其中，x代表最可能数，n代表测量到大肠菌群的样品数。
在实际工作中，MPN法检测显示出了较好的结果，优点是用固定方法，可重复性好，而且可以通过相关将分析获得定量值，便于与相关的标准进行比较。
三、大肠菌群的检测范围
1. 水源：大肠菌群检测是办公室里检测饮用水可能携带的最佳方法。
一般情况下，检测过程是检测水中的微生物是否合乎标准。
2.食品：由于食品生产经常存在卫生要求，因此食品也是大肠菌群检测重要的一环。
例如，必须检测火腿或肉类制品中的大肠菌群是否合格以确保食品安全。
3. 其他领域：大肠菌群检测可以用于医学、农业、环境和建筑等领域，如医院污水浑浊度的检测和土壤中大肠菌群的检测。
总之，大肠菌群检测是一项重要的监测工作，可以帮助我们评估食品和水源中大肠菌群的数目，确保我们食品和水源安全，预防疾病的发生。