血细胞分析仪的应用及形态学复检

城乡对口支援临床检验技术标准制定及培训
Program of Urban and Rural Counterpart Support on Clinical Laboratory Technology Standard Development and Training
血细胞分析仪的应用及形态学复检
安徽医科大学第一附属医院 司 力


内容
v 血细胞分析仪
§ 原理 § 常见误差因素 § 性能验证
v 形态学复检
§ 复检规则 § 结合病例分析外周血细 胞形态学改变


1、库尔特原理—电阻抗法
§ 三分群血细胞分析仪的主要检测原理 § 五分类血细胞分析仪的基础检测原理
华莱士.库尔特 约瑟夫.库尔特
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库尔特原理—电阻抗法
v 电阻抗法 即库尔 特原理（图1）。

电 阻抗法是三分群血 液分析仪的核心技 术，可准确测出细 胞（或类似颗粒） 的大小和数量。

v 电阻抗法还与其他 检测原理组合应用 于五分类血液分析 仪中。

图1 电阻抗法细胞计数原理


库尔特原理—电阻抗法
电阻抗法红细胞计 数和血小板计数是在相 应通道内进行计数，并 根 据二者体积不同，采 用浮动界标法进行区分 （图2）。

图2 电阻抗法正常红细胞直方图
为提高计数准确性，部分 仪器还采用3次计数、扫流和 拟合曲线等技术进行血小板计 数（图3）。

电阻抗法还可用 于白细胞计数及白细胞三分群 分析。

图3 电阻抗法正常血小板 计数和拟合曲线直方图


白细胞计数和分群的注意事项
淋巴细胞群 粒细胞群 单个核细胞群
§ 稀释液和溶血剂成分与细胞体积的变化直接相关 § 测定的白细胞体积与自然体积无关 • 与细胞核的大小和胞浆颗粒的多少有关
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红细胞计数的注意事项
MCV
§ 含有白细胞因素，但可以忽略
• 红细胞:白细胞约为750:1
§ 病理情况下易产生误差
• 白细胞增加明显 • 贫血严重
７ ７


血小板检测
v 血小板和红细胞在同一个系统中检测 v 血小板通常在2~30fl（与仪器有关） v 大于右侧阈值者考虑为红细胞


血红蛋白测定的原理—分光光度比色
v 检测物质为血红蛋白衍生物 § 氰化血红蛋白 • 含有氰化物 § 月桂酰硫酸钠（SLS）血红蛋白 • 不含氰化物 • 波长555nm
v 校正仪器时以氰化高铁法为准 § 最大吸收波长为540nm § 国际血液标准委员会（ICSH）推荐方法
８ ８


中性粒细胞增多
WBC 23.8 x 109/L LYM% 8.1% MXD% 7.9% NEUT% 84.0% Stab Seg Lym Mono Eo Baso 8%
77%
7% 7% 1% 0%
(x 400)
中性粒细胞峰高、面宽


淋巴细胞增多
WBC LYM% MXD% NEUT% 7.9 x 109/L + 64.7% 15.8% – 19.5% Stab Seg Lymph Mono Eo Baso Aty-Lym 4% 20 % 64 % 4% 5% 0% 3%
(x 1000)


单核细胞增多
WBC 7.7 x 109/L LYM% F1 * 13.2% MXD% F2 * 37.7% NEUT% 49.1%
Stab Seg Lymph Mono Eo Baso Aty-Lym 8% 37 % 17 % 36 % 1% 0% 1%
(x 1000)
中部突起


嗜酸性粒细胞增多
WBC 4.3 x 109/L LYM% 18.3% MXD% + 62.2% NEUT% – 19.5%
Stab Seg Lymph Mono Eo Baso My Aty-Lym 1% 19 % 20 % 9% 48 % 1% 1% 1%
(x 1000)
中部突起


红细胞大小不均性贫血
曲线跨度大，RDW明显增高
出现大血小板和分布宽度增加相关的报警提示（存在小红细胞干扰）


均一性大细胞性贫血
单个核细胞和中性粒细胞波谷消失 （有核红细胞增多所致）
红细胞直方图右移提示大细胞


慢性淋巴细胞性白血病
n 酷似正常淋巴细胞增多 n 在60fL处出现明显尖峰，单个核和中性波谷消失 n 骨髓免疫分型确诊为B淋巴细胞白血病


慢性粒细胞性白血病
n 白细胞三分群消失 ，出现单一曲线，主峰位于175fL， 提示出现大量中性和中性幼稚细胞，分类没有结果


常见报警信息
AL AM AG
R1
R2
R3
R4
报警提示 直方图异常区域 R0或R1 R2 R3 R4 RM 淋巴细胞左侧区域
原因
血小板聚集/巨大血小板/疟原虫/有核 红细胞/不溶解红细胞/异常淋巴细胞 性粒细胞/嗜碱性粒细胞
淋巴和单个核细胞之间 异常淋巴细胞/原幼细胞/浆细胞/嗜酸 单个核和粒细胞间 粒细胞右侧区域 多区异常
未成熟粒细胞/嗜酸性粒细胞/异常细胞 粒细胞增多症 以上多种原因引起


报警信息的功能
v 提高血细胞分类结果的准确性
§ 用于筛选血常规的异常白细胞分类结果
v 对于疑似血液病患者，无论仪器是否有报警信 号，均应作涂片复检


2、激光散射流式细胞术检测原理
将稀释、染色（化学染色或核酸荧光染色）、 球形化的细胞悬液注入鞘液流中央，单个细胞沿着 悬液和鞘液流两股液流整齐排列，以恒定流速定向 通 过石英毛 细 管 ，即 流 体 动力 学 聚 焦 技术（图 4） 。

主要用于五分类血 液分析仪 白 细胞 计 数和 分类计数。

图4 双 鞘流技术

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