检验科生化抗链球菌溶血素ASO测定的标准操作规程

检验科生化链球菌溶血素“O”测定的标准操作规程【目的】
体外检测血清抗链球菌溶血素“O”(AS0)含量。

【职责】
1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

【标本类型及实验前准备】
1.受检者的准备
病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。

对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.静脉采血
除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

【仪器设备】
东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机
一、检测原理
抗链球菌溶血素“O”试剂是大小均一的聚苯乙烯乳胶颗粒悬液，颗粒表面包被有链球菌溶血素“O”，当含有ASO的样品与之混合时，发生明显的凝聚反应，通过测定600nm处吸光度值的变化，即可计算出样本中抗链球菌溶血素“O”的浓度。

二、试剂
1.试剂
本科使用上海复星长征医学科学有限公司ASO试剂盒，为液体双试剂，其各组分如下：
试剂1（R1）
叠氮化钠 0.1%
磷酸盐缓冲液 13mmol/L
试剂2（R2）
抗链球菌溶血素“O ”致敏胶乳颗粒抗原
2.校准要求
2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准。

2.2校准间隔
2.2.1试剂批号变更时，使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。

2.2.2 室内质量控制出现问题时使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准并确认问题得到解决后方可对临床病人样本进行测定。

三、操作
按生化分析仪操作要求结合长征试剂说明书输入测定参数，并按校准、质量控制、样本测定的顺序进行常规测定。

四、计算
(IU/mL (IU/mL)校准液浓度（校准液）
（样本）浓度⨯∆∆=A A ASO ） 五、质控程序
1.建议采用朗道水平2(正常范围质控）和 水平3（病理范围质控）两个水平的血清进行室内质控。

2.可接受性判断 质控物的检测值应在给定质控范围，或可以通过参加卫生部室间质评对实验室的运作情况进行系统评估。

3.质控操作 每日进行样本检测之前首先应进行质控操作，以考察系统的在控情况。

如果检测结果符合质控要求则进行样本操作；如果不符合质控要求，则应重复质控操作，以排除可能发生的偶然误差；如果仍不符合质控要求，则应考虑质控品的重新准备、试剂的重新校准或更新、仪器的维护等。

建议在样本的检测过程中和/或结束后再次进行质控操作，以考察样本的检测全过程的在控情况。

六、参考范围
0—200IU/ml
七、危急值或警示
对超出可报告范围的结果的处理：取0.1ml样品加0.4ml蒸馏水，再测定，结果乘以5。

无危急值。

八、临床意义
链球菌溶血素O（SLO）是链球菌的一种胞外产物，它能溶解细胞膜从而导致溶血。

抗链球菌溶血素（ASO）是SLO 的抗体。

ASO测试能为早期的链球菌所导致的感染
提供证据，主要应用于急性风湿热、链球菌感染后的血管球性肾炎、患有咽炎的
个人以及其它急性感染。

通常，与抗原对应的抗体在急性链球菌感染后三周左右达到峰值，并保持在峰值
水平3 - 4个月，然后逐渐降低到正常水平。

九、试剂性能概要
1.外观
试剂1为无色澄清液体；试剂2为白色混悬液。

2.准确度
用相对偏差（RE%）表示测定结果的准确度，相对偏差（RE%）≤±10%。

3.线性范围（或可报告范围）
采用复星长征规定的参数进行测定，线性范围（或可报告范围）为50－600
IU/mL。

4.精密度
批内精密度：变异系数（CV%）≤5%；批间精密度：相对极差（%）≤10%。

十、超出线性范围（或可报告范围）的处理
如样本中抗链球菌溶血素“O”浓度高于600IU/mL，需对样本进行稀释后再测定，
结果乘以稀释倍数。

十一、其他必须说明的内容
1.试剂盒仅供体外诊断使用。

2. 未开瓶试剂避光储存于2～8℃，可稳定至试剂盒标识的有效期。

3.开瓶后上机试剂，在仪器贮存条件下可稳定30天。