核酸纯化

Code No. 27104 D6943-01 U0588A DP103-02 9760
Price/Kit (RMB) 964 224 676 152 350
Price/rxn (RMB) 19.28 2.24 13.52 3.04 7
RNaseA 冻干粉/室温 液态/室温 冻干粉/室温 液态/室温 液态/-20℃
Y Y Y Y N
Recovery 70~80% 50~80% 70~90% 70~85% 70-90%
Price/reac (RMB)
18.88 4.48 9.6 4.32 7
Fragment Size
70bp~10k 50bp~40k 50bp~20k 100bp~10k 50bp~50k
TaKaRa MiniBEST Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver.4.0 (50)
收率
Conclusion：
1.DNA回收率优于或与其它公司相当。
2.与其它公司相比较，价格合理。
DNA片段长度
11
9762市场竞争情况
Product QIAquick Gel Exteaction Kit (50) Gel Extraction Kit(50) NucleoSpin® Gel and PCR clean up TIANgel Mini Purification Kit(50) Company Qiagen Omega MN Tiangen Takara
8
片段回收纯化-9761、9762
片段直接纯化 切胶回收纯化 回收率计算： 9761 9762 TaKaRa MiniBEST DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0 TaKaRa MiniBEST Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver.4.0
3
核酸提取方法
Qiagen、Promega、 Roche、Eppendorf推 出相关产品。
自动化抽提系统
材料有限，可从组织或者细胞中 同时制备DNA、RNA及蛋白质。
多效生物分子抽提法
四步骤： 细胞裂解、核酸吸附柱上、 漂洗、洗脱。
固相抽提法
异硫氰酸胍-酚-氯仿抽提、 碱裂解、CTAB、 EtBr-CsCl等。
菠菜叶片油菜叶片小麦幼苗叶片玉米幼苗叶片绿豆幼苗叶片萝卜幼苗叶片高粱幼苗叶片向日葵幼苗叶片小叶黄杨叶片芹菜叶片白菜叶片拟南芥叶片烟草叶片苹果果肉马铃薯块茎西红柿果实香蕉果肉柏树叶片松针茶叶冻存棉籽棉桃壳葡萄茎尖秋橄榄果实银杏叶片紫薯块茎龙骨叶片花卉芦荟叶片花卉花生种子香蕉苗叶片红掌叶片花卉红景天叶片花卉平菇子实体吊兰叶片花卉香菇菌丝落地生根叶片花卉玉米种子桔皮水稻种子梨肉请参考真菌材料可以采用protocoliii方法提取
9
片段回收纯化-9761 or 9762？
电泳检测条带不单一，针对靶序列进行回收。
9762
9761
电泳检测条带单一，无其它污染片段。
10
9761市场竞争情况
Product QI Aquick PCR Purification Kit (50) Cycle-pure Kit Universal DNA Purification Kit NucleoSpin® Gel and PCR clean up TaKaRa MiniBEST DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0
2013/7~2013/10 Top产品
制品用途
片段直接纯化 切胶回收纯化 质粒DNA提取 一般材料DNA提取 一般材料RNA提取
Code No.
9761 9762 9760 9765 9767
制品名称
TaKaRa MiniBEST DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0 TaKaRa MiniBEST Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver.4.0 TaKaRa MiniBEST Plasmid Purification Kit Ver.4.0 TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0 TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit
回收后粗产物总量 回收前产物总量
× 100%
回收前粗产物总量： 通过电泳检测大概定量。 例如，5 μl电泳，与DNA Marker比较大概定量100 ng， 粗产物共50 μl，那么回收前粗产物量为100/5 × （50-5）μl=900 ng。
回收后产物总量： 通过电泳检测大概定量。 例如，5 μl电泳，与DNA Marker比较大概定量100 ng， 粗产物共30 μl，那么回收后产物量为100/5 × （30-5） μl=500 ng。 回收率：500/900 × 100%=55.6%
DNA片段收率 140.00 120.00 100.00 80.00 60.00 40.00 20.00 0.00
Code No. 28704 D2500-01 246-050 DP209-02 9762
Price/Kit (RMB)
944 224 480 216 350
Heating to melted gel
质粒DNA拷贝数 质粒的拷贝数和大小直接影响质粒提取量。 推荐高拷贝质粒菌液2 ml，提取量10 μg左右；
低拷贝粒4 ml，提取量2-3 μg左右。
宿主菌种类 推荐使用endA基因发生突变的（endA1）大肠杆菌寄主菌株， 如JM109，DH5a等。
14
9760市场竞争情况
Product QIAprep Spin Miniprep Kit (50) Plasmid Mini Kit I(100) NucleoSpin® Plasmid TIANprep Mini Plasmid Kit(50) TaKaRa MiniBEST Plasmid Purification Kit Ver.4.0(50)
16
A260/A280 比值为 1.8， A260/A230 大于 2.0。
Nucleic Acid Purification
宝生物工程（大连）有限公司 中国营销部
主要内容
1
2 3 4
核酸纯化方法 TaKaRa核酸纯化及产品分析
竞争产品对比
竞争公司情况
2
核酸提取
核酸是遗传信息的载体，是最重 要的生物信息分子，是分子生物 学研究的主要对象，因此核酸提 取是分子生物学实验技术的最重 要、最基本的操作。 核酸在细胞中总是与各种蛋白质 结合在一起的，核酸提取主要是 指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪 等生物大分子物质分开，高质量 的靶核酸是没有蛋白、糖、脂类 和其它核酸污染。
Price/reac (RMB) 18.88 4.48 4.32
Fragment Size 100 bp~10k 50bp~40k 100bp~8k
MN
Takara
U0609B
9761
480
350
70~85%
70-90%
9.6
7
50bp~20k
50bp~50k
TaKaRa A B C D 100 bp 500 bp 2kb 10 kb 18 kb
5
固相抽提法
原理 依赖缓冲液的pH值和盐浓度来吸附核酸。
6
TaKaRa核酸纯化经典产品回顾
制品用途
片段直接纯化 切胶回收纯化 质粒DNA提取 细菌DNA提取 病毒DNA/RNA提取 一般材料DNA提取 多糖多酚材料DNA提取 血液DNA提取 一般材料RNA提取 多糖多酚材料RNA提取 血液RNA提取 Small RNA提取
7
Code No.
9761 9762 9760 9763 9766 9765 9768 9781 9767/9108 9769 9112 9753
制品名称
TaKaRa MiniBEST DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0 TaKaRa MiniBEST Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver.4.0 TaKaRa MiniBEST Plasmid Purification Kit Ver.4.0 TaKaRa MiniBEST Bacteria Genomic DNA Extraction Kit Ver.3.0 TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0 TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0 TaKaRa MiniBEST Plant Genomic DNA Extraction Kit TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit / RNAiso Plus TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit RNAiso Blood RNAiso for Small RNA
pH中性，高盐浓度，质粒DNA迅速复性，可溶 状态，分布上清。 宿主菌DNA分子大，难以复性，与细胞碎片和 变性蛋白结合交联形成网状结构不溶物，离心 后形成沉淀。
吸取上清，过柱纯化。
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9760推荐
适用范围 碱裂解法，推荐大肠杆菌，小量提取。 菌液培养
菌液培养时间12-16小时，A600=2.0左右，超过3.0提取量和纯度会下降。
Buffer BL N N N Y N
收量
Conclusion： 1.质粒提取效果与其它公司质粒提取效果相当。 2.与其它公司相比较，价格合理。
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一般材料DNA提取-9765
一般材料DNA提取 9765 TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0 OD值说明 A260nm 是核酸最高吸收峰的吸收波长，最 佳测量值的范围为 0.1 至 1.0。 A280nm， A270nm 是蛋白最高吸收峰的吸收 波长，DNA 的 A260/A280 为 1.8，纯 RNA 为 2.0。如果比值低，表示受到蛋白（芳香族） 或酚类物质的污染，需要纯化样品。 A230nm 是碳水化合物最高吸收峰的吸收波 长，纯 DNA 和 RNA 的 A260/A230 大于 2.0。 若比值小于 2.0 标明样品被碳水化合物（糖 类）、盐类或有机溶剂污染，需要纯化样品。 A320nm 为检测溶液样品的浊度和其他干扰 因子，该值应该接近0。如果不是，标明溶 液中有悬浮物，需要纯化样品。纯样品的 A320 一般是 0。
传统提取法
4
核酸提取方法特点
传统提取法 多效生物分子抽提法 特点： 仅需三个简单步骤， 产量高； 无毒。
特点： 需要准备大量试剂； 操作繁琐，时间长； 毒性大。
固相抽提法 特点： 简单、方便、省时省 力、高效率； 提取结果稳定； 纯度符合下游实验。
自动化抽提系统 特点： 降低了人力成本和工 作者的隐患； 提高了结果可重复性 和质量。 避免样品交叉污染。
不同质粒收量 12.00 10.00 8.00 6.00 4.00 2.00 0.00 TaKaRa A B C D pUC19 pACYC184 p18K pNGS pNGS FOS(1 FOS(50 copy) copys) 不同类型质粒
Company Qiagen Omega MN Tiangen Takara
TaKaRa A B C D 100 bp 500 bp 2kb 10 kb DNA片段长度 18 kb
收率
Conclusion： 1.DNA回收率优于或与其它公司相当。 2.与其它公司相比较，价格合理。
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质粒DNA提取-9760
质粒DNA提取 9760 TaKaRa MiniBEST Plasmid Purification Kit Ver.4.0
DNA片段收率 140.00 120.00 100.00 80.00 60.00 40.00 20.00 0.00
Company Qiagen Omega Tiangen
Code .No. 28104 D6492-01 DP214-02
Price/Kit(RMB) 944 224 216
Recovery 70~90% 50~90% 70~90%
plasmid hostgenome
强碱（含SDS） 粒DNA）释放。 Solution II
E.Coli细胞壁破裂，内容物（宿主菌DNA和质
宿主菌染色体DNA慢慢断裂，线性化，双链解 离变性。 质粒DNA不断裂，解离变性。 蛋白质变性。 酸中和 Solution III
E.coli
洗脱质粒DNA。