高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量

实验三 高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩
苷的含量
【实验目的】
（1）初步掌握福立FL-2200高效液相色谱仪原理及其使用方法；
（五号宋体） （2）掌握高效液相色谱对流动相、样品处理的要求及注意事项；
（3）能根据测定数据计算双黄连口服液中黄芩苷的含量；
（4）了解中药制剂质量检测的方法。

【实验原理】
双黄连口服液由金银花、黄芩及连翘经提取精制而成，具有辛凉解表、 清热解毒功效，对于上呼吸道感染、扁桃体炎、咽炎、病毒性肺炎等细菌 和病毒感染性疾病有一定疗效。

其中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩素 是其主要活性成分。

本试验根据《2010版中国药典》方法对双黄连口服液中黄芩苷含量进行测 定，以便控制制剂质量。

【仪器和试剂】
1. 高效液相色谱仪（福立FL-2200）：
2. 黄芩苷对照品（中食品药品检定所）
【实验步骤】
1.按操作说明书使用仪器，其色谱条件如下：
色谱柱：C18 反相色谱柱
流动相：甲醇-水-冰醋酸（50:50:1）
检测波长：274nm。

柱温：30℃
流速：1.0ml/min
理论板数：按黄芩苷峰计算应不低于 1500。

2.【含量测定】 黄芩照高效液相色谱法（附录ⅥD）测定。

对照品溶液的制备
精密称取黄芩苷对照品 10mg，置 100ml 量瓶中，加 50%甲醇适量， 置水浴中振摇使溶解，放置至室温，稀释至刻度，摇匀，即得（每 1ml 中含黄芩苷 0.1mg）。

供试品溶液的制备
精密量取装量项下的本品 1ml，置 50ml 量瓶中,加 50%甲醇适量,
超声处理 20 分钟，放置至室温，加 50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即 得。

测定法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 5μl，注入液相色谱仪， 测定，即得。

本品每支含黄芩按黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于 80mg。

【数据处理】
采用外标法进行含量计算。

【思考题】
1. 高效液相色谱仪在样品检测过程中设置的主要仪器参数有哪些？
2. 高效液相色谱仪在使用过程中应注意些什么？
3. 高效液相色谱仪在样品检测中与紫外-可见分光光度计相比，具有
哪些不同和优势？。