血细胞分析仪检验

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• 细胞具有相对非导电的性质,悬浮在电解 质溶液中的血细胞颗粒通过计数小孔时可 引起电阻及电压的变化,出现脉冲信号。 脉冲信号的数量代表细胞的数量,脉冲的 大小代表细胞的大小,从而对血细胞进行 计数和体积测定------(库尔特原理)
利用此原理可进行:白细胞检测 红细胞和血小板检测。
白细胞检测(按大小)
第二部分 临床意义
血红蛋白测定的临床意义
• 血红蛋白浓度、红细胞比容和红细胞 计数是贫血、红细胞增多和真性红细 胞增多症的诊断和分类的重要指标。 血红蛋白次定的临床意义和红细胞相 同。血红蛋白低于参考值下线可判定 为贫血。
(一)红细胞参数
红细胞(RBC) 生理变化: 红细胞受多种生理因素影响。除年龄性别 差异外还受到不同生活环境和习惯等影响。 其中:高原生活、长期吸烟、重体力劳动 者红细胞和血红蛋白偏高。6个月~2岁婴儿、 老年人、孕妇的红细胞通常低于参考值下 线。静脉血测定结果较毛细血管低10%15%。在同一天内上午七点结果最高。
• 坚持做校准和质控 (二)分析中质控
• 每天开机检查:电压、气压是否在规定范 围内。试剂是否充足。
• 试剂:良好的试剂及每天的日常维护对获 得准确的结果至关重要。
• 标本要求:标本无溶血、凝血做之前充分 混匀。
• 严格执行操作规程 • 做好每天质控 • 注意仪器的报警 • 病理性因素对分析仪的影响:可通过显微
前鞘流
检测窗
后鞘流
容量、电导、光散射检测技术
每个细胞接受三维分析 定义到三维散点图的相应位置
电阻抗
电导性 光散射
• 体积(volume,V) 电阻抗原理测定细胞体 积和数量
• 电导性(conductivity,C) 高频电磁探针, 测量细胞内部结构,细胞内核浆比例
• 光散射(scatter,S)细胞内粗颗粒的光散射 强度要比细颗粒更强。
RBC病理性增多
(1)原发性增多:真性红细胞增多症等。 (2)继发性增多:缺氧导致肾上腺素大量分
泌继发性的引起红细胞增多。 (3)相对性增多:由于呕吐等因素造成的暂 时性血液浓缩。
红细胞病理性减少
• 引起红细胞病理性减少的发生 机制为红细胞生成障碍、造血 原料缺乏和利用障碍、红细胞 破坏过多和失血等。
网织红细胞检测原理
• 网织红细胞中嗜碱性物质RNA,在活体状 态下与特殊的荧光染料结合
• 荧光强度与RNA含量成正比 • 用流式细胞术检测 • 网织红细胞大小和 • RNA含量及血红蛋 • 白的含量
红细胞指数
• 红细胞指数(MCV、 MCH和MCHC)通过 RBC计数(RBC)、 Hb浓度(HGB)和红 细胞压积(HCT)的
红细胞和血小板的检测
红细胞和血小
CPU对血小板和红细
板共用一个小孔管, 胞分布图进行判断
正常人红细胞体积
和血小板体积间有
一个明显界限,血
小板计数准确容易
红细胞和血小板检测
联合检测型原理
• 主要体现在白细胞分类,实质是选用较特 异的方法将血中含量较少的嗜酸、嗜碱性 粒细胞检出,发现异常细胞。共有特点是: 均使用了鞘流技术。
一、血细胞分析仪概• 50年代, Coulter Model A型用于临床 • 60年代, 测定参数达7项 • 70年代, 全血细胞计数(CBC) • 80年代, 双通道、白细胞2~3分群、五分群 • 90年代以来,多功能、多参数、流水线
一、红细胞计数原理
减少:
中性粒细胞:见于伤寒、副伤寒、疟疾、 流感、化学药物中毒、X线和镭照射、 抗癌药物化疗、极度严重感染、再生障 碍性贫血、粒细胞缺乏症等。 嗜酸性粒细胞:伤寒、副伤寒、应用肾 上腺皮质激素后。 淋巴细胞:多见于传染病急性期、放射 病、细胞免疫缺陷等。
血细胞分析仪检验图形及临床应用
• 直方图观察的内容: 1.峰的位置:反映主细胞群位置有无异常。 2.峰的高度:主细胞群数量的多少。 3.峰底宽度:反映细胞群体大小的不均一性或离散
镜镜检而排除。 (三)分析后质量控制 • 保留标本备查 • 重视室内质控
• 加强质控小组责任 • 加强与临床联系 • 积极参与室间质量控制
~~~~完~~~~ 谢谢
1.精密度 分为批间重复性试验和批内重复性试验 2.携带污染 不同浓度样品间连续测定的相互影响 3.仪器的最佳线性范围 4.可比性 5.准确性 6.总重复性
血细胞分析仪全面质量控制
• 一、分析前质量控制 • 对技术人员要求:上岗前应经过严格的岗
前培训。 • 仪器安装条件:安装在远离电磁干扰、防
潮、防尘、通风条件好等 • 仪器验收:必须对仪器的技术性能进行测
程度的大小。 4.有无异常峰出现:多提示血液中有异常细胞群或
干扰因素存在。 5.峰的起始有无异常:若有提示有干扰因素存在 6.波谷位置高低:多提示细胞比例变化或有异常细胞
群。
红细胞直方图:
白细胞直方图:
血小板直方图
散点图
第三部分
血细胞分析仪的性能评价与 全面质量控制
一、血细胞分析仪的性能评价
RDW的意义:
用于缺铁性贫血(IDA)的诊断与疗效 观察。 用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断 (IDA与地中海贫血)。 用于贫血的分类(Bessman分类法)。
白细胞增多:
中性粒细胞:见于急性化脓感染、粒细胞白血病、急性出血、 溶血、手术后、尿毒症、酸中毒、急性汞中毒、急性铅中毒 等。 嗜酸性粒细胞:见于变态反应、寄生虫病、某些皮肤病、手 术后、烧伤等。 嗜碱性粒细胞:慢性粒细胞白血病、何杰金病、癌转移、铅 及铋中毒等。 淋巴细胞:见于百日咳、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴 细胞白血病、麻疹、腮腺炎、结核、传染性肝炎等。 单核细胞:见于结核、伤寒、亚急性感染性心内膜炎、疟疾、 黑热病、单核细胞白血病、急性传染病恢复期等。
试、校准和评价。 • 仪器的校准
• 标本的采集和运送:真空采血管(紫色盖头)采 集EDTA-K2抗凝的静脉血。采血后立即与抗凝剂 混匀,在试管外壁贴上单据号等病人信息或检验
联号后,放置室温立即送检。穿刺时须防止穿刺
针刺扎采血员,以避免血液中传染性病原如肝炎
病毒、人类免疫缺陷病毒等以及血液中未知的可 致病成分污染采血员。标本在室温下最多保留4小 时。不能在4小时内检测的标本,放置于冷藏冰箱 (2℃~8℃)中保存,8小时内有效,使用前从冰 箱中取出回复室温后检测。
第一部分
全自动血细胞计数仪的原 理及构造
血细胞分析仪(Blood cell analyzer,BCA) 是指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动 分析的临床检验常规仪器。又称血细胞自动计
数仪(ABCC)、血液学自动分析仪(AHA)。
一、血细胞分析仪概述
•发展史 • 手工计数 • 仪器简单计数 • 两分群 • 三分群 • 五分群 • 五分群+网织红
值计算出。计算公式 如下:
MCV(fl)=
HCT×1015 RBC/L
MCH (pg)=
HGB(g/L)×1012 RBC/L
HGB(g/L) MCHC(g/L)=
HCT
SLS-血红蛋白测定法
• 在稀释的血液中加入溶血素,红细胞中的 血红蛋白被释放出来。血红蛋白在月桂洗 硫酸钠的作用下,二价铁转变成三价铁, 并与月桂洗硫酸钠结合形成SLS-Hb,SLSHb进入血红蛋白检测系统。测定SLS-Hb在 555nm波长下的吸光度值,并通过与加入 样品前稀释液的吸光度进行对比进行计算。
电阻抗、射频与细胞化学联合
• 这类仪器是利用电阻抗、 射频这一成熟细胞计数技 术结合细胞化学技术,通 过4个不同的检测系统对 白细胞、幼稚细胞进行分 类和计数。
• 嗜酸性粒细胞检测系统 • 嗜碱性粒细胞检测系统 • 淋巴、单核和粒细胞检测
系统 • 幼稚细胞检测系统
白细胞分类散射图
联合使用多项技术(流式、激光、射频、 电导、电阻抗、细胞化学染色)同时分析一 个细胞,综合分析实验数据,从而得出较 为准确的白细胞“五分群”结果。
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