CTAB法大量提取水稻DNA

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10)将离心管放到超净工作台风干,保存备用
实验步骤
1)将3g黄化苗材料在液氮中磨碎
2)加入18ml预热的CTAB,65℃水浴,1h,每5min摇匀一次
3)10000rpm/min离心7min,回收上清液16ml,弃去沉淀
4)加入25:24:1 16ml,上下颠倒几次,静置10min(可用24:1替代)
5)12000rpm/min离心10min,小心吸取上清14ml
6)加入24:1 14ml,上下颠倒几次,静置10min
7)12000rpm/min离心10min,小心吸取上清13ml
8)加入1/10上清体积的3Mol/LNaAC,1-2倍上清体积的-20℃无水乙醇,-20℃静置1h
9)轻轻振荡晃动管子,使DNA缠绕在一起,用干净的针头将絮状DNA挑入1.5ml EP管,加入70%乙醇洗涤几次至DNA白色
CTAB法大量提取水稻DNA
药品配制
1.CTAB配制
药品名
终浓度
CTAB
2%(V)
NaCl
1.4Mol/L
EDTA
0.02Mol/L
TrisBasic
0.1Mol/L
pH=8.0
2.NaAC3Mol/LpH5.2
3.氯仿:异戊醇=24:1
4.Tris饱和酚:氯仿:异戊醇=25:24:1
5.70%乙醇
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