巴洛沙星的含量测定方法研究

巴洛沙星的含量测定方法研究
赵文镜;高力虎;朱年青;霍浩刚;张虎跃
【摘要】目的对自行研制的巴洛沙星的含量测定方法进行研究.方法分别采用高效液相色谱(HPLC)法、非水溶液滴定法测定巴洛沙星的含量.结果 HPLC法测定其含量为99.42%～99.51%,非水溶液滴定法为99.43%～99.57%.结论 2种方法测定结果无明显差异,但非水溶液滴定法所耗成本较低且操作简便.
【期刊名称】《西北药学杂志》
【年(卷),期】2009(024)004
【总页数】3页(P244-246)
【关键词】巴洛沙星;HPLC;非水溶液滴定法;含量测定
【作者】赵文镜;高力虎;朱年青;霍浩刚;张虎跃
【作者单位】扬子江药业集团药物研究所,江苏,泰州,225321;扬子江药业集团药物研究所,江苏,泰州,225321;扬子江药业集团药物研究所,江苏,泰州,225321;扬子江药业集团药物研究所,江苏,泰州,225321;扬子江药业集团药物研究所,江苏,泰
州,225321
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
巴洛沙星(balofloxacin)，化学名为(±)-1-环丙基-6-氟-8-甲氧基-7-(3-甲氨基-1-哌啶基)-4-氧代-1，4-二氢喹啉-3-羧酸二水合物，是由日本中外制药株式会社研制并与韩国 Choongwae公司共同开发的第四代喹诺酮类抗菌药[1]，于2002年
12月27日在韩国首次以商品名Q-Roxin批准上市。

临床用于治疗细菌引起的呼吸、泌尿及全身感染疾病，效果优于环丙沙星与氧氟沙星。

2000年世界氟喹诺酮类药物市场规模超过90亿美元，销售额达80亿美元以上，以左氧氟沙星和环丙沙星为主导[2,3]，两者总和约占氟喹诺酮类药物全球销售额的65%。

目前国际市场上氟喹诺酮类药物占抗感染药物市场份额的20%。

未来几年仍将保持年均5%～8%的速度发展，2006年全球销售额将达到110～120亿美元，我国已成为该类药物的主要生产国之一。

笔者在此对自行研制的巴洛沙星的含量测定方法进行研究，报道如下。

1.1 仪器 Agilent 1100型高效液相色谱工作站。

1.2 试药乙腈(色谱纯)；十二烷基苯磺酸钠(分析纯)；乙二胺(分析纯)；巴洛沙星样品(自制，批号06110301，06110401，06110501)；巴洛沙星对照品(自制，批号06110601，含量为99.82%)。

2.1 色谱条件色谱柱：十八烷基键合硅胶色谱柱(250 mm×6.0 mm，5 μm)；流动相：乙腈-0.025 mol·L-1十二烷基苯磺酸钠-1%乙二胺(90∶100∶1)，用稀磷酸调节pH值为4；检测波长：295 nm；流速：1 mL·min-1；进样量：20 μL。

2.2 系统适用性试验照HPLC法2005年版《中国药典(二部)》附录系统适用性试验方法操作。

量取空白溶剂和巴洛沙星对照品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，见图1。

结果色谱柱的理论板数为1.792×104。

从有关物质检查项下结果可知，巴洛沙星与其有关物质等均达到基线分离，分离度大于1.5。

2.3 方法学考察
2.3.1 线性关系考察精密称取60 ℃减压干燥至恒重的巴洛沙星对照品(批号06110601)100.35 mg，置于100 mL量瓶中，加流动相超声使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取0.1，0.5，1.0，2.0和5.0 mL，分别置于10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试液。

分别量取各溶液20 μL注入色谱仪，记
录色谱图，量取峰面积，由溶液质量浓度(C)对峰面积(A)进行线性回归，得回归方程：A=9.344×104C+105.838，r=0.999 98(n=5)。

结果表明，巴洛沙星在上述
色谱条件下在10.035～501.75 mg·L-1范围内呈良好的线性关系。

2.3.2 精密度试验分别配制巴洛沙星溶液高、中、低质量浓度，重复进样5次，依法测定。

结果高、中、低质量浓度的溶液峰面积的RSD分别为0.09%，0.13%，和0.22%(n=5)。

2.3.3 稳定性试验取高、中、低质量浓度的巴洛沙星溶液，于配制后2，4，6，8
和12 h依法测定，结果峰面积的RSD为0.60%(n=5)，表明溶液在12 h内稳定
性良好。

2.3.4 中间精密度试验将巴洛沙星原料含量分别由不同的人员于不同时间进行测定。

结果峰面积的RSD为0.27%(n=6)。

2.3.5 重现性试验取巴洛沙星对照品适量，精密称定，共5份，按样品含量测定项下操作，计算各次的峰面积与质量浓度之比。

结果RSD为0.24%(n=5)，表明方
法的重现性良好。

2.3.6 最低检测限试验取空白基线一段，计算其噪音峰高，再将巴洛沙星对照品溶液用流动相稀释至适当质量浓度进样，使其峰高为噪音峰高的3倍。

经试验，此
时最低检出量为22.1 ng。

2.4 样品(原料药)含量测定取60 ℃减压干燥至恒重的巴洛沙星(批号06110301，06110401，06110501)适量，精密称定，分别加流动相超声使溶解，制成每1 mL约含巴洛沙星100 μg的溶液，作为供试品溶液。

精密量取20 μL，注入液相
色谱仪，记录色谱图，量取峰面积；另取巴洛沙星对照品，同法测定，按外标法以峰面积计算即得。

3.1 方法照2005年版中国药典(二部)附录Ⅶ A进行。

取60 ℃减压干燥至恒重的
巴洛沙星约0.20 g,精密称定,加冰醋酸25 mL超声使溶解,滴加结晶紫指示剂1滴,
摇匀,用高氯酸滴定液(0.1 mol·L-1)滴定至溶液变成纯蓝色，并将滴定结果用空白
试验校正。

按每1 mL高氯酸滴定液(0.1 mol·L-1)相当于38.94 mg的
C20H24FN3O4计算含量。

结果见表1。

3.2 2种含量测定方法比较分别采用HPLC法、非水溶液滴定法对样品进行了含量测定。

由表1结果可见，2种方法的测定结果无明显差异。

由于HPLC法操作较烦琐，故含量测定法暂定为非水溶液滴定法。

按2005年版《中国药典(二部)》附录有关规定，参照化学药品原料质量研究及质量标准制定指导原则(试行)有关技术要求，对巴洛沙星含量测定方法进行了系统性研究，试验结果显示，各项指标均令人满意。

【相关文献】
[1] 何建鹏，李日生，刘厚凡,等.喹诺酮类药物的发展概况[J]. 江西化工，2007，(3)：17-18．
[2] 王玉成，王秀云，郭慧元．近年我国喹诺酮类抗菌剂的研究进展[J]．中国医药工业杂志，2004，35(3)：179-185．
[3] 张薇，李生正，刘福利.喹诺酮类抗菌药物研究进展[J]．西北药学杂志，2007，22(3)：157-158．
[4] 马宁，黄海萍，胡良红,等.RP-HPLC法测定巴洛沙星胶囊的含量及有关物质[J]．药物分析杂志，2005，25(6)：673-675．。