尿NMP22检测在膀胱癌诊断中的应用

尿NMP22检测在膀胱癌诊断中的应用
朱小军;袁亚光
【摘要】目的:探讨测定尿中NMP 22的含量在膀胱癌诊断中的应用价值.方法:应用ELISA法检测29例膀胱癌术前患者(实验组)、15例膀胱癌术后复测患者(对照组),20例泌尿系良性疾病患者(对照组),15例健康志愿者(对照组),尿样中NMP22的含量.同时行尿脱落细胞学检查并进行对比.结果:实验组29例术前尿NMP22含量中位数为27.63 u/ml;15例术后尿NMP22含量中位数为7.62 u/ml;20例泌尿系良性疾病中位数为7.25 u/ml;15例健康志愿者的中位数为2.17 u/ml.膀胱癌患者尿NMP22的平均水平均显著高于其他3组的NMP22的平均水平,实验组与其他3组之间的差异具有统计学意义(P＜0.01).以10 u/ml为诊断参考值时,NMP22诊断膀胱癌的敏感度为82.76%,特异度为65%.而尿脱落细胞学检查的敏感度仅为34.48%,特异度为100%.15例术后复测患者的NMP22平均水平显著低于术前(P ＜0.01).且实验组NMP22水平与肿瘤分级密切相关、与临床分期无关.结论:尿NMP22含量的测定可作为膀胱癌诊断和监测的一个辅助指标,且具有简单、无创伤、敏感度高、可定量分析等优点.
【期刊名称】《内蒙古医学杂志》
【年(卷),期】2010(042)001
【总页数】4页(P9-12)
【关键词】尿;NMP22;膀胱肿瘤;移行细胞癌
【作者】朱小军;袁亚光
【作者单位】内蒙古医学院附属医院泌尿外科,内蒙古,呼和浩特,010050;内蒙古医
学院附属医院泌尿外科,内蒙古,呼和浩特,010050
【正文语种】中文
【中图分类】R345.9;R737.14
膀胱癌是泌尿系最常见的恶性肿瘤,近年来其发病率有上升趋势[1]。

如何早期诊断、监测复发是膀胱癌面临的主要问题。

传统的膀胱镜检查、尿脱落细胞学检查虽然是诊断膀胱癌的金标准,但或存在侵入性、或缺乏敏感性。

因此,寻找新的诊断方法已
成为一个研究热点。

目前尿液中许多大分子物质被作为膀胱癌标记物。

尿NMP22是国外新研究的一种可经尿液检测的膀胱肿瘤标记物[2,3],已被美国食品和药品管
理局(FDA)批准在临床应用。

为了评价NMP22在膀胱癌诊断和监测复发中的应用价值,我们应用ELISA法对29例膀胱癌患者尿液中的NMP22含量进行测定。

现
将结果报道如下。

1 资料与方法
1.1 一般资料
收集我院2003年6月～12月住院的膀胱癌患者29例(实验组),男 20例,女 9例;
年龄 30～84岁,平均年龄61岁;术后均经病理学证实,其中移行细胞癌28例,鳞状
细胞癌1例。

实验组中15例膀胱癌术后1个月复查的患者,男11例,女4例;年龄30～73岁,平
均年龄58岁。

20例良性泌尿系疾病患者,男15例,女5例;年龄14～74岁,平均年龄43岁。

包括良性前列腺增生、肾结核、肾积水、鞘膜积液、尿石症等。

健康志愿者15例,男12例,女 3例;年龄28～34岁,平均年龄32岁。

29例膀胱癌病例均反复核实临床及病理资料,按WHO和UICC标准进行分级、分期:G1级6例,G2级15例,G3级8例;T1期13例,T2期7例,T3期9例。

1.2 试剂和方法
NMP22试剂盒(美国Martritech公司生产),由普生(天津)科技有限公司提供,序列号为G053107。

用ELISA法检测所有受试组尿液,同时行尿脱落细胞学检查。

1.3 统计学处理
对资料先进行正态分布性检验,多组样本之间的差异采用R×C表χ2检验,两组间差异采用wilcxon秩和检验。

资料为正态分布则采用χ2检验分析。

2 结果
29例膀胱癌患者的尿NMP22中位数为27.63(4.13～138.98)u/ml,以≥10 u/ml 为参考值,阳性率为82.76%。

同时行尿脱落细胞学检查,阳性率为34.48%。

15例术后复查的尿NMP22中位数为7.62(1.44～47.53)u/ml,阳性率为 26.67%。

20
例良性泌尿系统疾病的尿NMP22中位数为7.35(0.83～121.54)u/ml,阳性率为35.00%。

15例健康志愿者尿NMP22中位数为2.17(0.03～6.29)u/ml,阳性率为0。

见表1,表2。

表1 实验组与各对照组尿NMP22测定结果平均年龄(范围)岁 n 阳性率(%) NMP22测得值中位数(范围)u/ml膀胱癌术前 61(30～84) 29 82.76
27.63(4.13～138.98)膀胱癌术后 58(30～73) 15 26.67 7.62(1.44～47.53)良性泌尿系疾病 43(14～74) 20 35.00 7.35(0.83～121.54)健康对照组 32(28～34) 15 0.00 2.17(0.03～6.29)
表2 实验组与各对照组NMP22测定结果分析膀胱癌术前 24 5 29 82.76膀胱癌术后 4 11 15 26.67良性泌尿系疾病 7 13 20 35.00健康对照组 0 15 15 0.00合计 35 44 79 44.30
对上组资料进行R×C表χ2检验,χ2=31.92,P＜0.005。

可认为4个组的NMP22
阳性率不相等,差异有统计学意义。

见表2。

29例膀胱癌术后病理回报G1级6例,阳性率为66.67%;G2级15例,阳性率为78.57%;G3级8例,阳性率为 100%。

临床分期 T1期 13例,阳性率84.64%;T2期
7例,阳性率 57.14%;T3期 9例,阳性率100%。

见表3,表4。

采用Wilcoxon两样本比较法进行检验,算得 u=3.9258,因相同秩次过多,进行校正
算得C=0.8328,Uc=4.3019,P＜0.005。

说明NMP22的阳性率与膀胱癌的分级有关,且级别越高阳性率越高。

见表3。

表3 实验组NMP22阳性率与病理分级的关系NMP22检测结果秩和(t值)病理分级合计秩次范围平均秩次阳性阴性阳性阴性G1级 4 2 6 1～6 3.5 14
7 G2级 11 4 15 7～21 14 154 56 G3级 8 0 8 22～28 25 200 0合计23 6 29 —— 368 63
采用Wilcoxon两样本比较法进行检验,u=0.5485,C=0.9311,Uc=0.5890,P＞0.05。

说明NMP22的阳性率与膀胱癌的临床分期无关。

详见表4。

表4 实验组NMP22阳性率与临床分期的关系NMP22检测结果平均秩和(t值)临床分期合计秩次范围平均秩次阳性阴性阳性阴性T1期 11 2 13 1～ 13
7 77 14 T2期 4 3 7 14～ 20 17 68 51 T3期 9 0 9 21～ 29 25 225 0合计 24 5 29 —— 370 65
已测尿NMP22的29例膀胱癌患者中有15例术后1月复查尿NMP22值,与术前相比较。

术前尿NMP22阳性 13例,阴性 2例,阳性率86.67%。

术后尿 NMP22
阳性 4例,阴性 11例,阳性率26.67%。

进行四格表χ2检验,χ2=11.00,P＜0.005。

说明手术前后尿NMP22阳性率差异有统计学意义。

可作为判断膀胱癌预后及进
行监测的一个指标。

见表5。

表5 15例膀胱癌手术前后尿NMP22结果比较阳性阴性合计阳性率(%)术前
13 2 15 86.67术后 4 11 15 26.67合计 17 13 30 56.67
对29例膀胱癌患者在行NMP22检测的同时行尿脱落细胞检查。

阳性率分别为82.76%和34.48%。

用配对四格表资料的χ2检验,算得χ2=13.07,P＜0.005。

证
明NMP22检测的阳性率显著高于尿脱落细胞检查的阳性率。

见表6。

表6 尿NMP22检测及脱落细胞学检查结果比较尿脱落细胞学检查尿NMP22检
测合计阳性阴性阳性 9 15 24阴性 0 5 5合计 9 20 29
3 讨论
膀胱肿瘤传统的检查方法为尿细胞学、膀胱镜检查等。

尿细胞学检测阳性率不高,
且差异较大。

但尿细胞学可以检测出膀胱镜检查未能看见的肿瘤细胞,能在膀胱镜
检查出肿瘤前几个月发现癌细胞。

膀胱镜检查则可直接观察肿瘤并取活检,但其是
一种有创伤性的检查,给患者造成很大的痛苦[4]。

选择一种简单、无创伤、高敏感、高特异性的检查方法对膀胱癌的诊断具有很大的意义。

核基质蛋白(Nuclear matrix protein,NMP)最早于1974年由Berezney[5]等报道,它是构成细胞核网状结构的一个组成部分,是细胞核的非染色质网状框架,决定细胞
核的形态并将DNA组成三维结构,同时还在DNA的复制和转录、RNA的加工、
基因表达调控等过程中起重要作用[6]。

NMP22属于NMP的一种,是细胞核有丝
分裂器(Nuclear mitotic appa-ratus,NuMA)的组成成分,它与细胞分裂时染色质
在子代细胞中的分配有关[1,7～12]。

NMP22在细胞死亡后被释放出来,以可溶性
的复合物或片段的形式存在于人的尿液中[13]。

NMP22是NuMA的组分之
一,NuMA在尿路上皮的含量较其他组织高25倍。

因此,NMP22适宜做尿路上皮
肿瘤的特异标志物[14]。

利用特异性NMP22单克隆抗体免疫测定的方法,可以迅速、定量的检测尿中NMP22含量,用于早期膀胱癌的诊断和术后监测[15]。

NMP22实验正是基于这个原理来进行的。

本实验中,29例膀胱癌患者术前尿NMP22检测阳性率为82.76%,明显高于术后尿NMP22检测阳性率(26.67%),良性泌尿系疾病尿NMP22检测阳性率为35.00%
和健康志愿者尿NMP22检测阳性率为0,差异均有统计学意义,而后三者之间差异
无统计学意义。

表明NMP22能作为膀胱移行细胞癌的肿瘤标记物。

以10 u/rnl
为诊断参考值时,诊断膀胱癌的敏感度为82.76%,特异度为65%,与Landman等[16]报道的敏感度为81%结果相似;尿脱落细胞学检查的敏感度为34.48%,特异度
为100%,与Rhee等报道的20%～40%相吻合。

从表6可以得出尿NMP22检测法比尿脱落细胞学更敏感,具有更高的阳性检出率,值得临床推广,这与大多数学者的观点一致。

从表3可以得出NMP22的敏感度与病理分级密切相关,随着病理分级
的增高,敏感度也增高,这与部分文献报道不一致[17]。

而尿NMP22的敏感度与临
床分期无关。

手术前后尿NMP22含量差异有统计学意义,提示NMP22可用于手
术效果的评价。

而术后尿NMP22含量仍高于正常的患者应给予高度重视,密切监
测其预后。

在20例泌尿系良性疾病患者中存在7例假阳性,分析原始资料都为结石和泌尿系感染患者。

说明NMP22的特异性在很大程度上受结石和感染的影响。

4 结论
本研究结果表明,尿NMP22可以作为一种新的膀胱癌标志物应用,具有快速、简单、无创伤、敏感度高、可定量分析等优点,还可以评价手术效果。

2007年被欧洲泌尿外科协会推荐为膀胱癌早期诊断的参考指标[18]。

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