非发酵菌群的分类鉴定ppt课件

肠杆菌科 杆状
周毛或无 — F
弧菌科 弧形或逗点状
端毛 + F
非发酵菌 球杆状 周毛、端毛或无
+/— O/—
巴斯德氏菌科 球杆状 无鞭毛 + F
第三节、 非发酵菌群的属间鉴别
菌属
假单胞菌属 寡氧单胞菌属 产碱杆菌属 黄杆菌属 鲍特氏菌属 金氏杆菌属 不动杆菌属 无色杆菌属 莫拉氏菌属 艾肯氏菌属 土壤杆菌属
铜绿假单胞菌鉴别要点：
（1）、铜绿假单胞菌在普通琼脂培养基上能 产生水溶性绿色素，使整个培养基变为绿色。
（2）、在血平板上经35—37℃，18—24h培养 可表现为：菌落灰绿色、半透明、大而扁平、 表面湿润、边缘不齐；有金属光泽；有生姜样 芳香气味；菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血 环。
（3）、该菌为专性需氧菌，氧化酶和触酶均 阳性；O/F试验“O型”；无芽孢、无荚膜，菌 体一端有单鞭毛，运动活泼。
三、黄杆菌属
黄杆菌属细菌为无芽孢、无鞭毛的革兰 氏阴性杆菌。其主要特性有两个：
1、 在其生长过程中产生黄色素； 2、 以微弱发酵的方式利用葡萄糖，但因
其产酸量少而慢，需培养一周以上才能 观察到，故常被作为非发酵菌来对待。
芳香黄杆菌在血平板上的菌落特征（37℃，18h）
脑膜炎败血黄杆菌在血琼脂平板和营养琼脂平板上的菌落特征（37℃，18—24h）
二、产碱杆菌属
主要特性：
1、 产碱杆菌属为一群革兰氏阴性专性需氧菌， 具有周身鞭毛，多数无荚膜。
2、 营养要求不高，在普通培养基上生长良好； 在液体培养基上可形成菌膜；在含蛋白胨的肉 汤中产碱，使培养基pH上升到8.6以上，故名 产碱杆菌。
3、 除木糖氧化产碱杆菌木糖氧化亚种可氧化 分解木糖外，不分解任何糖类；氧化酶、触酶 均 阳 性 ； 在 O/F 培 养 基 中 产 生 碱 性 反 应 ； IMViC试验为：—、—、—、+。
rRNA同源群Ⅰ—包括铜绿假单胞菌等12个种； rRNA同源群Ⅱ—包括伯克霍尔德菌属等7个种； rRNA同源群Ⅲ—包括食酸丛毛单胞菌等7个种； rRNA同源群Ⅳ—微小假单胞菌等8个种； rRNA同源群Ⅴ—寡氧单胞菌等64个种。
此外，还有4个种属于rRNA同源群未知的假单胞 菌。
上述分类中，不管采用哪种分类，临床 上常见的只有两个种，即假单胞菌属的 铜绿假单胞菌和寡氧单胞菌属的嗜麦芽 寡氧单胞菌。
支气管腐败 鲍特氏菌
+ — + +
+ +
鲍特氏菌属
鞭毛染色
有鞭毛
无鞭毛
支气管腐败鲍特氏菌
百日咳鲍特氏菌、副百日咳鲍特氏菌
尿素酶
氧化酶
1、假单胞菌属
该菌属的代表种为铜绿假单胞菌。该菌 早在1872年由施罗顿（Schroeten）首先 命名，因其在代谢过程中能产生水溶性 兰绿色色素，在感染部位能形成兰绿色 脓液，故称绿脓杆菌。该菌除分布在水 源、土壤、空气中外，亦存在于正常人 的皮肤、呼吸道、肠道中，是非发酵菌 群中最常见的条件致病菌。
分类及鉴定；产碱杆菌属目前分为3个种、 两个亚种和一个型，即：
粪产碱杆菌、皮乔特产碱杆菌、木糖氧 化产碱杆菌。
木糖氧化产碱杆菌去硝化（脱硝）亚种； 木糖氧化产碱杆菌木糖氧化亚种。
粪产碱杆菌Ⅱ型、
生化反应
42℃生长 硝酸盐还原 丙二酸盐 木糖氧化
粪产碱 杆菌
— — + —
皮乔特 产碱杆菌
— + + —
鲍特氏菌属包括7个种：百日咳鲍特氏菌、 副百日咳鲍特氏菌、支气管腐败鲍特氏 菌、鸟鲍特氏菌、欣氏鲍特氏菌、霍氏 鲍特氏菌和创口鲍特氏菌。其中前三种 可引起人类疾病，具有较大的临床价值。
主要特性：
1、该属细菌为GN无芽孢球杆菌。百日咳 鲍特氏菌的光滑型菌株有荚膜；副百日 咳鲍特氏菌和支气管腐败鲍特氏菌无荚 膜。百日咳鲍特氏菌和副百日咳鲍特氏 菌无鞭毛、不运动；支气管腐败鲍特氏 菌具有周身鞭毛，在18—24℃有动力而 在37℃不能运动。
氧化酶阴性菌群
不动杆菌属，寡氧单胞菌属，付百日咳鲍特氏菌
动力
+
—
寡氧单胞菌属 （嗜麦芽寡氧单胞菌）
+ —
不动杆菌属，付百日咳鲍特氏菌 在鲍—金二氏培养基上产 棕色素 麦康凯上生长 —
+
付百日咳鲍特氏菌
不动杆菌属
（二）、氧化酶阳性菌群的 属间鉴别
氧化酶阳性菌群
假单胞菌属，产碱杆菌属，黄杆菌属，
支气管败血鲍特氏菌，金氏杆菌属，无色杆菌属，
但在临床上用一般方法不能够 分离出来的细菌有：
鲍特氏菌属（百日咳鲍特氏菌）：初次 分离对营养要求较高，在血琼脂平板和 巧克力琼脂平板上均不能生长，必须在 含有血液、甘油、马铃薯以及活性炭的 包-金（Bordet-Gengou,B-G）二氏培养基 上才能生长。故用一般的培养基不可能 将其分离出来。
假单胞菌科由假单胞菌属及其亲缘关系 密切的菌属（以前大部分属于假单胞菌 属）组成。用于假单胞菌科分类的方案 有两个：
其一：根据细菌的表型特征分为七个主 要的组，即：产荧光组、斯氏族、产碱 组、食酸组、类鼻疽组、敏捷—德氏组、 缺陷组。
其二：根据rRNA—DNA同源性将假单胞菌科分 为5个rRNA同源群，即：
麦康凯培 养基上生 长 生长 生长 生长 不易或— — 不定 生长 生长 抑制或— — 生长
非发酵菌群 氧化酶
+
假单胞菌属，产碱杆菌属，黄杆菌属， 支气管败血鲍特氏菌，金氏杆菌属， 无色杆菌属，莫拉氏菌属，艾肯氏菌属， 土壤杆菌属。
—
不动杆菌属 寡氧单胞菌属 付百日咳鲍特氏菌
（一）、氧化酶阴性菌群的 属间鉴别
军团菌属营养要求苛刻，普通培养基、血平板 和巧克力平板均不生长；生长过程中需要多种 微量元素如：铁、钙、镁、锰、锌、钼等作为 酶的协同因子；同时需要甲硫氨酸、半胱氨酸 等特殊氨基酸才能生长。目前公认的最适宜培 养基是缓冲活性炭酵母浸出液，加上铁、L-半 胱氨酸和α-酮戊二酸组成的BCYEa（buffered charcoal – yeast e其它生 物学性状与铜绿假单胞菌极为相似，所 不同的是氧化酶阴性，这是与假单胞菌 属相区别的重要特性；此外，该菌一端 具有3根以上丛鞭毛，运动活泼，可与氧 化酶阴性的不动杆菌属和副百日咳鲍特 氏菌相鉴别。
3、鼻疽（类鼻疽）伯克霍尔德菌
鼻疽伯克霍尔德菌（Burkholderia mallei） 和类鼻疽伯克霍尔德菌（ Burkholderia pseudomallei）是鼻疽与类鼻疽的病原菌， 属假单胞菌属rRNA同源群的第二群； 2000年被NCCLS/CLSI（National Committee for Clinical Laboratory Standards / Clinical and Laboratory Standards Institute）列为可能成为生物恐 怖的细菌。
莫拉氏菌属，艾肯氏菌属，土壤杆菌属。
触酶
+
—
假单胞菌属，产碱杆菌属，黄杆菌属，
金氏杆菌属，
支气管败血鲍特氏菌，无色杆菌属，
艾肯氏菌属
莫拉氏菌属，土壤杆菌属
O/F
动力
弱F
—
37℃
18—24 ℃
金氏杆菌属
艾肯氏菌属
—
+
—
+
+
—
支气管败血 假单胞菌属
黄杆菌属
鲍特氏菌
产碱杆菌属
莫拉氏菌属
无色杆菌属
土壤杆菌属
假单胞菌属产碱杆菌属黄杆菌属金氏杆菌属支气管败血鲍特氏菌无色杆菌属371824支气管败血假单胞菌属黄杆菌属无色杆菌属土壤杆菌属黄色素13ppt学习交流假单胞菌属产碱杆菌属无色杆菌属土壤杆菌属鞭毛染色假单胞菌属产碱杆菌属无色杆菌属土壤杆菌属无色杆菌属土壤杆菌属产碱杆菌属还原硝酸盐后产气土壤杆菌属无色杆菌属14ppt学习交流15ppt学习交流需氧的革兰氏阴性杆菌具有一端鞭毛无荚膜无芽孢
脂、巧克力色血琼脂及兔血琼脂上均不能生长。
副百日咳鲍特氏菌和支气管腐败鲍特氏菌营养 要求不高，在上述培养基上均能生长。
3、该菌属细菌不分解糖类。其它生化反应见 下表。
鉴别要点
鞭毛 动力 37℃
18—24℃ 尿素酶 硝酸盐还原 氧化酶
百日咳 鲍特氏菌
— — — — —
+
副百日咳 鲍特氏菌
—
— — + — —
这两种细菌均对马、驴、骡、猫、狗等动 物感染。人类感染是经伤口或粘膜、呼吸 道而进入体内。急性患者可有高热、衰竭 等全身症状；皮肤、皮下、鼻粘膜出现结 节和溃疡；肺鼻疽病有胸痛、咳嗽、咳血 等症状。细菌进入血流，可形成菌血症及 内脏脓肿，最后常因脓毒血症而死亡。慢 性患者全身症状不定，可有皮肤、皮下溃 疡，其潜伏期可达数年。从患者的血液、 尿液、痰液、脓液、创口分泌物中均可分 离出上述两菌。
生化反应 I
脑膜炎败血 黄杆菌
+
芳香黄杆菌 —
DNA 酶
+
+
七叶苷水解
+
—
短小黄杆菌
+ + —
黄杆菌 Ⅱb 群
+ — +/—
黄杆菌属
I
+
—
脑膜炎败血黄杆菌
短小黄杆菌 黄杆菌Ⅱb 群
DNA 酶
+
—
芳香黄杆菌
脑膜炎败血黄杆菌 短小黄杆菌 七叶苷水解
+
黄杆菌Ⅱb 群 —
脑膜炎败血黄杆菌
短小黄杆菌
（四）、鲍特氏菌属
因此在临床上真正能分离出来 且有临床意义的非发酵菌群有：
假单胞菌属、寡氧单胞菌属、产碱杆菌 属、黄杆菌属、鲍特氏菌属（百日咳鲍 特氏菌除外）、金氏杆菌属、不动杆菌 属、无色杆菌属、莫拉氏菌属、艾肯氏 菌属、土壤杆菌属。
第二节 非发酵菌群的初步识别
特性 形态染色 鞭毛及位置 氧化酶 O/F 试验
2、该菌属为专性需氧菌，百日咳鲍特氏菌初次 分离时营养要求较高，需要有谷氨酸、L—脯氨 酸、半胱氨酸及菸酸等营养物质，但不需要X和 V因子。在生长过程中形成过多的脂肪酸、重金 属盐和H2O2等物质能抑制其生长，因此在培养 基中需加入血液、活性炭和离子交换树脂等物 质来吸附多余的有害物质，故该菌只能在鲍— 金二氏培养基上生长，在普通琼脂、麦康凯琼
铜绿假单胞菌镜下形态和在血平板上的菌落特征
铜绿假单胞菌在普通琼脂培养基上的菌落特征
2、寡氧单胞菌属
该菌属原属于假单胞菌属，在1961年根 据其鞭毛特征被命名为嗜麦芽假单胞菌； 1983年根据核酸同源性和细胞脂肪酸组 成等归入黄单胞菌属，命名为嗜麦芽黄 单胞菌；但由于其无黄单胞菌素、无植 物病原性，能在37℃生长等与其它黄单 胞菌不同，故在1993年又被命名为嗜麦 芽寡氧单胞菌。
氧化酶
+ — + + +/— + — + + + +
触酶
+ + + + + — + + + — +
动 力 O/F 试验 色 素
+（端毛） O 型/—
+（端毛） O 型/—
+（周毛） —
—
O 型/弱 F
—/+（周毛 —
—
弱/F
—
O 型/—
+（周毛） O 型
—
—
—
—
+（周毛） O 型
绿棕红无 部分黄色 — 黄 —/棕 — — — — — —
黄色素
+
—
黄杆菌属
莫拉氏菌属
假单胞菌属 产碱杆菌属
无色杆菌属 土壤杆菌属
鞭毛染色
端毛菌
周毛菌
假单胞菌属
产碱杆菌属，无色杆菌属，土壤杆菌属
O型
O/F —
无色杆菌属，土壤杆菌属
还原硝酸盐后产气
+
—
产碱杆菌属
土壤杆菌属
无色杆菌属
第四节、非发酵菌群的属内鉴别
一、假单胞菌属和 寡氧单胞菌属
假单胞菌属属假单胞菌科，该属为严格 的专性需氧的革兰氏阴性杆菌，具有一 端鞭毛，无荚膜、无芽孢。该菌属在自 然界中分布广泛，营养要求不高，氧化 酶试验均为阳性，是假单胞菌科的代表 菌属。
粪产碱 杆菌Ⅱ型
— — — —
木糖氧化产碱杆菌
去硝化（脱 木 糖 氧 化
硝）亚种 亚 种
+
+
+
+
+
+
—
+
产碱杆菌属
42℃生长
+
—
木糖氧化产碱杆菌
木糖氧化
+
—
粪产碱杆菌 粪产碱杆菌Ⅱ型
皮乔特产碱杆菌
木糖氧化亚种
去硝化亚种
硝酸盐还原
+ 皮乔特产碱杆菌
—
粪产碱杆菌，粪产碱杆菌Ⅱ型
丙二酸盐
+
—
粪产碱杆菌
粪产碱杆菌Ⅱ型
非发酵菌大多是条件致病菌，可引起各种感染， 尤其是医源性感染，近年来各国发病率逐年上升， 已成为当前医院管理中的一个重要问题。
非发酵菌的种类很多，包括十几个菌属、 几十个种，有些还有生物型、亚型等。 但与医学关系密切的、具有临床意义的 有：假单胞菌属、寡氧单胞菌属、产碱 杆菌属、黄杆菌属、鲍特氏菌属、金氏 杆菌属、不动杆菌属、无色杆菌属、莫 拉氏菌属、艾肯氏菌属、土壤杆菌属、 军团菌属。
非发酵菌群的分类鉴定
第一节 非发酵菌概述
非发酵菌（Nonfermenters）是指一大类不能以 发酵方式（或不能以明显发酵方式）分解葡萄糖 的革兰氏阴性无芽孢的需氧或兼性厌氧杆菌。它 们在分类学上分别隶属于不同的科、属，但生理 生化特性又很相似，故在临床微生物学检验中， 常把它们当作同一类菌群来对待。
黄杆菌属目前共分为8个种和4个未命名的 生物群。它们分别是：
脑膜炎败血黄杆菌、芳香黄杆菌、短小黄 杆菌、水田黄杆菌、嗜醇黄杆菌、嗜糖黄 杆菌、嗜温黄杆菌、薮内黄杆菌及黄杆菌 Ⅱb、Ⅱe、Ⅱh、Ⅱi群。其中脑膜炎败血 黄杆菌、芳香黄杆菌、短小黄杆菌和黄杆 菌Ⅱb群可引起人类疾病。
四种黄杆菌的主要鉴别点