南医大药物分析第03章-药物的杂质检查-(1)模板PPT课件

第三章 药物的杂质检查
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基本要求：
1.认识药物杂质来源，纯度要求 ; 2.认识药物分析中杂质检查的意义;
3.掌握药物中一般杂质检查的主要项目及 检查方法 ;
4.掌握药物中杂质限量的计算方法 ;
5.了解药物特殊杂质的概念及其检查方法。
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第一节 药物的杂质及其来源
一、药物的纯度（purities of drugs)
（2）供试品溶液自身稀释对照法：适用 于杂质结构不确定，或者没有杂质对照 品；限于杂质斑点颜色与主分斑点颜色 相同或相近情况。
例： 1：吡罗昔康有关物质的检查 2：盐酸马普替林中有关物质的检查
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（3）杂质对照品与供试品溶液自身稀释 对照并用法：药物存在多种杂质，若已 知杂质有对照品，则采用杂质对照品法； 共存的未知杂质或没有对照品的杂质， 则同时采用供试品溶液自身稀释对照法。
指药物纯净程度，反映了药物质量的优劣， 含有杂质是影响药物纯度的主要因素。
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杂质（forin、impurities）是指：
1. 有毒副作用的物质; 2. 本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和 疗效的物质; 3. 本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性 和疗效，但影响药物的科学管理的物质。
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二、药物中杂质的来源与种类 （一）杂质来源
（2）对照品与供试品的同步操作
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2.正确的取样及供试品的称量范围 1g不超过±2%，＞1g不超过±1%
3.正确的比色、比浊方法 4. 检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供 试管和对照管各复查二份
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一、氯化物检查法
（一）原理 -对照法
药物 C l： Ag3N H O N 3 O Ag 白 C色 l 对照：NaCl（c,V） AgNO3 HNO3 AgCl白色浑浊
2. 反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50 ml 供试溶液中含稀硝酸10 ml为宜。
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（1）加速AgCl浑浊的形成； （2）产生较好的乳浊； （3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧 化银沉淀的形成。
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3. 试剂：硝酸银 4. 供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液， 使生成白色浑浊而不是白色沉淀
该法适用于单一杂质含量较少，无法得到杂质对 照品、杂质结构与主成分相 似，即杂质与主成分 的响应因子基本相同的情况下使用。
（四）面积归一化法：适用于供试品中 结构相似、相对含量较高且限度范围较 宽的杂质含量粗略考查。
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3.气相色谱法 4.毛细管电泳法
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（三）光谱方法
依据药物和药物中杂质对光选择吸收性质 差异进行的。
适用于已知杂质的控制；以主成分为对照，用杂质
对照品测定杂质的校正因子。
方法：将杂质对照品和药物对照品配制成一定浓 度的测定杂质校正因子的溶液，进行色谱分离、 分析后，按内标法求出杂质相对于主成分的校正 因子（f）
例： 1：红霉素中红霉素B、C杂质的检查 2：甲基多巴中有关物质的检测
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f=（AS/CS）/(AR/CR)
（血压过低或抗过敏性休克）
（效力降低 至原来1/27）
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（二）杂质的分类
药物中的杂质按来源分为
1. 一般杂质：在多种药物的生产和贮藏过程中容 易引入的杂质
如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、 碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质
其检查方法收载在中国药典的附录中。
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2. 特殊杂质：
杂质限 标 量准溶 供液 试 标 体 品 准 积 量 溶液浓
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L(%） LVc10% 0 S
LppmVSc106
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P101
示例一、茶苯海明中氯化物的检查：
S：0.30g
H2O 50ml+NH3 3ml +NH4NO3 6ml +AgNO3 25ml
定容至200ml
加热、过滤
取滤液25ml
3）阿片提取吗啡，有可能引入罂粟碱及其他生物碱； 4）从植物中提取盐酸小檗碱，可能含有药根碱、巴马 汀等其他生物碱。
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在药物生产过程中引入杂质的途径为
A. 原料不纯或部分未反应完全的原料造成 B. 合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成 C. 需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等 造成 D. 所用金属器皿及装置等引入杂质 E. 由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入 的杂质
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于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试 液1.0m1，用水稀释使成50m1，摇匀，在暗处 放置5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向 下观察，比较，即得。
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（三）测定条件
1. 标准NaCl溶液 10 gCl/ml，50 ml溶液中 含50～80 g的Cl所显浑浊梯度明显，相当于标 准NaCl溶液5～8 ml。
指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入 的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中 的游离肼、甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检 查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。
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四、药物的纯度与化学试剂的纯度
药物的纯度考虑杂质的生理作用，药品只有两 个等级：合格或不合格。
化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯 （GR）、分析纯（AR）、化学纯（CP）、色谱纯、 光谱纯。
对照品：c:10 g/ml,V:1.5ml
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L (% )= C V 100 S
1 0 1 0 6 1 .5 1 0 0
0 .3 0 2 5
200
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0 .0 4
• 检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml （1g/ml的As）制备标准砷斑，砷盐限 量为0.0001％，应取供试品的量为
A. 0.20g B. 2.0g C．0.020g D. 1.0g E. 0.10g
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杂质量 ≤ 杂质限量 ＜ 杂质量
药品合格
药品不合格
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（一）、药物的杂质检查法
1. 对照法—限量检查法 （Limit Test） 特点：不需知道杂质的准确含量
方法：取一定量被检杂质的标准溶液与一定量 供试品溶液在相同条件下处理，如显色或产生沉 淀等，是否超过限量（比色或通过比较反应的结 果，来确定杂质含量比浊）。
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易发生氧化反应的结构： 醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键
日光、空气、水分
例：麻醉乙醚
醛+过氧化物
二巯基丙醇
氧化 二硫化物
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同分异构：同质异晶（立体异构、旋光异
构、几何异构—顺反式） （光照、温度、湿度和酸度的影响）
酸性
例：四环素
差向四环素（毒性高、活性低）
重酒石酸去甲肾上腺素（左旋 ）温度 右旋体
1、紫外-可见分光光度法 2、红外分光光度法
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（四）其他方法
1、热分析法
2、酸碱度检查法，利用杂质与药物酸碱性差异， 可用酸碱滴定法、指示液法和pH测定法
3、物理性状检查法
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第二节 一般杂质检查
＊ 一般杂质检查规则
《药品检验操作标准》规定： 1. 遵循平行操作原则
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（1）仪器的配对性 如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过 2mm，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一 致
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（1）外标法：适用于有杂质对照品，而 且进样量能够精确控制的情况。
方法：配制杂质对照品溶液和供试品溶液，分别 取一定量注入色谱仪，测定杂质对照品溶液和供 试品溶液中杂质峰的响应，按外标法计算杂质的 浓度。
优点：准确度高
不足：需要杂质对照品，这
个比较困难
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（2）加校正因子的主成分自身对照法：
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已知：c＝1 g/ml＝1×106 g/ml V＝2ml L＝0.0001%
S V c 100 % L
2 1 10 6 100 % 0.0001 %
2.0g
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检查维生素C中的重金属时，若取样量为1.0g，要求含 重金属不得过百万分之十，问应吸取标准铅溶液（每 1ml＝0.01mg的Pb）多少ml？
一份+AgNO3 （采用药典方法）
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（2）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查， 可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。
1）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。
2）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。
3）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀 乙醇或丙酮溶解后进行检查。
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4. 有机药物中有机氯杂质的检查，需破坏结 构方可检查 。
1. 生产过程中引入
（1）原料、反应中间体及副产物；
（2）试剂、溶剂、催化剂类 ；
（3）生产中所用金属器皿、装置以及其他不 耐酸、碱的金属工具所带来的杂质。
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例：
1）NaCl注射液（海盐、井盐、岩盐或高温精制而得） 原料中含有溴化物、碘化物、硫酸盐、钡盐、钾盐、
镁盐、砷盐和重金属等；
2）解热镇痛药阿司匹林，是由水杨酸乙酰化制得。乙 酰化不完全或贮存过程中水解都可能产生水杨酸；
（1）加热水解法： 氯代脂烃或氯在环的侧链
例：二羥丙茶碱的氯化物
供试品+H2O+NaOH 加热30分钟 依法 检查
5. 避光、暗处放置5分钟后比浊，因氯化银见 光易分解。
6.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观 察。
7.平行操作原则
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（四）干扰及排除 1. 若供试品有色，需经处理后方可检查。
（1）内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵（黄色）中 氯化物的检查。
一份+AgNO3 1ml 10min 过滤滤液 + NaCl标准液 H2O 50ml(对照溶液)
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例. 临床所用药物的纯度与化学品及试剂纯度的主要 区别是
A. 所含杂质的生理效应不同 B. 所含有效成分的量不同 C. 所含杂质的绝对量不同 D. 化学性质及化学反应速度不同 E. 所含有效成分的生理效应不同
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三、杂质的限量
指在不影响药物的疗效和不发生毒性的前提下 ，药物中允许杂质存在的最大量通常用百分之 几（%）或百万分之几（ppm）来表示。
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2. 贮藏过程中产生
由于贮存过程，包装或保管不善，在外界条件 （如温度、湿度、日光、空气和微生物等）的影 响下，水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、 聚合、潮解和发霉等 。
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易发生水解反应的结构： 酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等； 例：
阿司匹林---水解为水杨酸和醋酸； 阿 托 品---水解为莨菪醇和消旋莨菪酸； 青 霉 素---遇碱易水解为青霉酸,受热可进一步 分 解为D-青霉胺和青霉醛而使青霉素失效。
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（二）检查方法 药典附录 除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加
水溶解使成25ml（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中 性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，应滤过；置 50ml纳氏比色管中，加水使成约40m1，摇匀，即得供 试溶液。另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液， 置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1， 摇匀，即得对照溶液。
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2. 灵敏度法
方法：系指在供试品溶液中加入试剂，在一 定反应条件下，观察有无反应出现，以不出现 反应为合格。
特点：不需对照品
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3. 比较法（含量测定法）
方法：测定杂质的绝对含量，如测定吸收度、 pH值等。 特点：准确测定杂质的量，不需对照品
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*（二）、 杂质限量的计算
杂质限量
允许杂质存在的最大量 供试品量
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1.薄层色谱法
（1）杂质对照品法：适用于已知杂质并 能制备杂质对照品的情况。
根据杂质限量，取供试品溶液和一定浓度和一定 浓度的杂质对照品溶液，分辨点样于同一薄层板， 展开、斑点定位。
例：
1：枸橼酸乙胺嗪中N-甲基哌嗪的检查
2：盐酸环丙沙星中氟喹啉酸的检查
3：盐酸阿米洛利中. 有关物质的检查
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A. 0.2ml B. 0.4ml C．2ml
D. 1ml
E. 20ml
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V L S c
10
10 10
6
10
1 .0
6
1 ml
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杂质的常用检查方法
（一）化学方法
* （二）色谱方法 药物中的有机杂质，其结构、性质和药物
相近，利用药物和杂质的色谱性质差异， 分离和检测杂质和药物。
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例： 1：盐酸黄酮哌酯易水解的有关物质检查
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（4）对照药物法：无合适的杂质对照品， 或供试品显示的杂质斑点颜色与主成分 斑点颜色有差异，难以判断限量时，可 采用与供试品相同的药物作为对照。
例： 1：马来酸麦角新碱中有关物质的检查
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2.高效液相色谱法
HPLC分离效能高、专属性强、检测灵 敏性好，可以准确地测定各组分的峰面 积，广泛应用于杂质检查。
AS为药物对照品的峰面积
AR为杂质对照品的峰面积 CS为药物对照品的浓度 CR为杂质对照品的浓度
CX=AX/(A`S/C`S)·f
AX为供试品杂质的峰面积
A`S为对照品溶液药物主成分的峰面积
CX为杂质的浓度
C`S为. 对照溶液中药物的浓度36
（3）不加校正因子的主成分自身对照法： 适用于没有已知杂质的控制。