第二代杂交捕获法诊断宫颈高度病变的临床评价

第二代杂交捕获法诊断宫颈高度病变的临
床评价
检验医学2009年6月第24卷第6期LaboratorvMedici,Ju!,!丝:
文章编号:1673-8640(2009)06-0409-04中图分类号:R446.5文献标识码:A
第二代杂交捕获法诊断宫颈高度病变的临床评价
肖克林,吴丽娟,郑有为.,钱靖琳,梅平,王丁,周克元.
(1.深圳市宝安区妇幼保健院检验科,广东深圳518133;2.广东省人民医院病理医学部,
广东广州510080;3.广东医学院生物化学与分子生物学教研室,广东湛江524023) 409?
摘要:目的评价第2代杂交捕获法(HC2)检测l3种高危型人乳头瘤病毒(HPV)用于诊断宫颈高度病变
的效能.方法利用HC2检测292位妇女宫颈上皮细胞l3种高危型HPV感染状况,以组织病理学检测结果为
金标准评价HC2诊断宫颈高度病变[≥宫颈上皮内瘤变2级(CIN2)]的效能.结果≥CIN2组妇女l3种高危
型HPV感染率为95.56%(43/45),<CIN2组为66.40%(164/247),两组问差异有统计学意义(X2:15.68,P<
0.001).HC2诊断宫颈高度病变的敏感性为95.56%,特异性为33.60%,阳性预测值为20.77%,阴性预测值为
97.65%,阳性似然比为1.44,阴性似然比为0.13.受试者工作特征(ROC)曲线分析发现,HC2诊断宫颈高度病
变时曲线下面积为0.64,最佳诊断值为3.46pg/mL,此时方法的敏感性为93.30%,特异性为42.10%.结论
宫颈高度病变与l3种高危型HPV感染有关.HC2具有较高的敏感性和阴性预测值,但特异性和阳性预测值较
低,临床上若用于宫颈高度病变的确诊,应与其他特异性较高的方法结合以提高其
准确性.
关键词:第2代杂交捕获法;敏感性;特异性;受试者工作特征曲线;人乳头瘤病毒;宫颈高度病变
EvaluationofthediagnosticaccuracyofHC2indetectinghigh-gradecervicalintraepithelial neoplasia
XIAOKelin,WULijuan,ZHENGY ouwei,QIANJinglin,ME1P,WANGDing,ZHOUKeyu an.
(1.DepartmentofClinicalLaboratory,BaofinMaternityandChildHealthHospital,Guangd ongShenzhen518133,
China;2.DepartmentofPatholog)Medicine,GuangdongProvincialPeoplesHospital,Guan gdongGuangzhou510080,
China;3.DepartmentofBiochemistry,GuangdongMedicalCollege,GuangdongZhanfian g524023,China)
Abstract:ObjectiveToevaluatethediagnosticaccuracyofhybridcapture2(HC2)indetectin ghigh—grade
cervicalintraepithelialneoplasia(CIN).Methods292womenwereenrolledandtheircervica lsquamouscellspecimens
werecollectedfordetecting13high—riskHumanpapillomavirus(HPV)genotypesbyHC2,andthediagnosticaccuracyof
HC2indetectinghigh—gradeCIN(≥CIN2)wasanalyzedusinghistopathologyresultasstandard.Results66.40%
(164/247)womenofhist0path0locallvconfirmed<CIN2and95.56%(43/45)womenofhi stopath0logicallyconfirmed
≥
CIN2wereinfectedby13highriskHPV,therewassignificantdifferencebetweenthem(=15.6 8,P<0.001).
Thesensitivity,specificity,positivepredictivevalue,negativepredictivevalue,positivelikel ihookratioandnegative
likelihookratioofHC2were95.56%,33.60%,20.77%,97.65%,1.44and0.13,respectively. Areaunderreceiver
operatorcharacteristic(ROC)curvewas0.64,theoptimaldiagnosticvaluewas3.46pg/mL,t hesensitivityand
specificitywere93.30%and42.10%inthepoint,respectively.ConclusionsThereissignifica ntcorrelationbetween
HPVinfectionandhigh—gradeCIN.HC2hasgoodsensitivityandnegativepredictivevalueinscreeninghigh—gradeCIN,
butthespecificityandpositivepredictivevalueareweak.Itmustbecombinedwithothermeth odstoimproveits
aecuraeyin≥CIN2diagnosis.
Keywords:Hybridcapture2;Sensitivity;Specificity;Receiveroperatorcharacteristiccurve :Human
papillomavirus;Cervicalintraepithelialneoplasia
第2代杂交捕获法(hybridcapture2,HC2)
是目前美国食品药品监督管理局(FDA)惟一批
准可在临床应用的人乳头瘤病毒(HPV)DNA检
测方法,是一种液相杂交法,其利用特异的RNA
作者简介:肖克林,男,1980年生,硕士,主管技师,主要从事分子诊断研究:
通讯作者:王丁,联系电话************.
探针与变性后的HPVDNA单链杂交,同时结合
酶联免疫化学发光原理使基因信号放大,从而达
到检测靶基因的目的.该法操作简便,由于利
用的是信号放大原理,无需体外扩增目的基因,不
验医壹Q09年6月第24卷第6期Laborato~Medicine,June2009,V0124.N06
易污染,所以对实验室设置无特殊要求,是目前临
床中用于筛查妇女宫颈细胞HPV感染的常用方
法之一.HC2引入我国临床应用已有数年时间,
在我国的一些医疗机构也得到较广泛的应用,但
该法用于宫颈病变的诊断性能情况,国内外学者的报道尚存在不同之处.本研究就该法诊断宫颈高度病变的效能进行评价.
材料和方法
一
,研究对象
随机选取2004年1O月至2005年12月广东
省人民医院妇科门诊和体检中心女性患者292 例,年龄(36±18)岁.
二,研究方法
1.高危型HPV检测利用Digene公司HC2
高危型HPV检测试剂检测受检妇女高危型HPV 感染状况,该试剂能够检测出HPV16,18,31,33, 35,39,45,51,52,56,58,59和68共13种高危型HPV类型.HC2为一种半定量方法,其将3个含
有1ng/LHPV16DNA的阳性标准检测到的发光
值的均值作为阈值(cut—off,CO)E23,然后将标本的发光值(relativelightunit,RLU)与CO相除,即
可半量检测标本中的HPV核酸含量.(1)标本
采集:Digene公司专用锥形采集刷自受检者宫颈口鳞,柱状上皮交界处采集标本后立即放于Digene公司专用标本保存管内;(2)实验步骤:按
试剂说明书操作;(3)结果判断:标本检测结果以RLU/CO定量数值报告,以试剂厂商提供的参考值为判断标准,即RLU/CO<1时,高危型HPV阴性,反之则为阳性,RLU/CO数值越高,表示标本
所含病毒载量越高.
2.组织病理学检查用电子阴道镜指引取
材,宫颈病变者在病变部位多点采样送检,未见病
变者按常规在宫颈移行带3,6,9和12点4个位点取样送检.阴道镜检查指征如下:(1)有性交
出血或血性白带;(2)细胞学检查为≥意义不明
的非典型鳞状上皮细胞(ASCUS);(3)细胞学检
查阴性,但临床可疑癌;(4)有癌症家族史,患者
要求排除宫颈病变者;(5)慢性宫颈炎长期治疗
效果不佳者.本研究将组织病理学诊断结果为宫颈上皮内瘤变2级(CIN2),宫颈上皮内瘤变3级(CIN3)及宫颈癌患者归为宫颈高度病变组
(≥CIN2),其余归为对照组(<CIN2).
三,统计学方法
利用SPSS12.0软件包受试者工作特征(ROC)曲线分析HC2诊断宫颈高度病变的曲线下面积(AUC),并计算出其最佳诊断CO.AUC
>0.5为具有诊断价值.利用检验比较宫颈高
度病变组和对照组的高危型HPV感染率,P<
0.05为差异具有统计学意义.HC2的敏感性,特
异性,阳性预测值,阴性预测值,阳性似然比和阴
性似然比采用直接计算法.
结果
一
,组织病理学及高危型HPV检测结果
292位妇女组织病理学检测结果显示,诊断
为CIN2及以上者45例,CIN2级以下者247例. 宫颈病变≥CIN2组妇女高危型HPV阳性者43 例,阴性2例;<CIN2组妇女高危型HPV阳性者164例,阴性83例.≥CIN2组高危型HPV感染
率(95.56%,43/45)高于<CIN2组(66.40%,
164/247),两组比较差异有统计学意义(=
15.68,P<0.001),见表1.
二,HC2诊断宫颈高度病变的敏感性及特异性
以组织病理学结果为评判标准,HC2诊断宫
颈高度病变的敏感性为95.56%(95%可信区间
为89.54%～10o.00%),特异性为33.60%
(95%可信区间为27.71%～39.49%),阳性预测
表1受检妇女组织病理学及13种高危型HPV检测结果阳性
阴性
合计
47
24
7l
99
40
l39
l2
6
18
l7
2
l9
l5
l5
11
l1
207
85
292
注:CIN1为宫颈上皮内瘤变1级
检验医学2009年6月第24卷第6期Laborato~Medicine,Jne!!丝: 值为20.77%(95%可信区间为15.25%～
26.29%),阴性预测值为97.65%(95%可信区
间为94.4l%～100.00%),阳性似然比为1.44,
阴性似然比为0.13.
三,HC2诊断宫颈高度病变ROC曲线
HC2诊断宫颈高度病变时AUC为0.64
(95%可信区间为0.57～0.71).当诊断RLU/CO
为3.46pg/mL时,HC2的敏感性和特异性达到最
佳平衡,此时敏感性为93.30%,特异性为42.10%,
见图1
注:AUC=0.64,P=0.003
图1HC2检测宫颈高度病变ROC曲线
讨论
本研究利用HC2检测292位妇女的13种高
危型HPV感染情况,发现≥CIN2组妇女13种高
危型HPV的感染率明显高于<CIN2组(=
l5.68,P<0.001),此结果表明宫颈病变与l3种
高危型HPV感染存在相关性,且随着病变程度的
加深,高危型HPV的感染率不断上升,尤其是宫
颈癌患者,其感染率更是高达100%.
国内外一些学者的研究表明,HC2用于检测
宫颈高度病变具有较高的敏感性,但特异性则报
道各异J.本研究发现,HC2用于检测宫颈高
度病变具有较高的敏感性和阴性预测值,分别达
到95.56%和97.65%,但特异性和阳性预测值相
对较差,分别为33.60%和20.77%.此结果中的
敏感性与以前的大部分报道相似,而特异性则介于他们之间.研究结果之间存在差异的原因可能与病例的收集,受检人群的来源及生活方式不同有关,同时也表明不同地区和不同人群中HPV的感染率存在一定的差异.本研究结果还显示,
HC2诊断宫颈高度病变的阳性似然比为1.44,阴性似然比为0.13,这些结果均表明HC2用于确诊宫颈高度病变的效能不强,但排除高度病变的能力相对较好.
HC2高危型HPV检测试剂生产厂商提供的
诊断RLU/CO为1pg/mL,然而有学者研究发现, 此值并非HC2的最佳诊断标准』.本研究发现
当诊断RLU/CO为3.46pg/mL时,HC2的检验
效能达到最佳.此结果与Guyot等的报道相
似,但与Kulmala等的报道存在差异.研究结
果存在差异的原因可能与采用的评判标准不同有关,本实验所采用的评判标准为组织病理学检查结果,而Kulmala等则是采用宫颈细胞学作为评价标准;同时,研究时病例收集方式不同亦可造成差异.本研究还发现,HC2用于诊断宫颈高度病
变的AUC为0.64,相对较小,但较Castle等报
道的略高.本结果表明,HC2用于诊断宫颈高度
病变具有一定的价值,但效能并不高.
总之,本研究表明HC2可作为宫颈高度病变
的一种筛查方法,用于宫颈高度病变的初筛具有较高的价值,但不能单独用于宫颈高度病变的确诊,临床应用时,应与其他特异性较高的方法(如
宫颈液基细胞学检查)结合以提高其准确性,这
也是目前国际上及我国妇产科学相关协会和组织
推荐的方法.
参考文献
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(收稿日期:2008-06—11)
(本文编辑:姜敏)
文章编号:1673-8640(2009)06-0412-02中图分类号:R446.62文献标识码:B 胃癌患者血浆组织因子,组织因子途径抑制物
的检测及其临床意义
宋娟芳,张敏华,施黎华,吴月红
(湖州市第三人民医院检验科,浙江湖州313000)
关键词:组织因子;组织因子途径抑制物;胃癌
近年来研究发现,组织因子(TF)和组织因子途径抑
制物(TFPI)与恶性肿瘤的发生,发展有重要关系,TF在
体内许多细胞均能表达,多种癌细胞亦能表达和分泌,与
肿瘤的血管生长和转移有关….我们报道胃癌患者血浆
中TF和TFPI的水平变化,并对其临床意义进行探讨.
一
,材料和方法
1.患者组65例,其中男38例,女27例,年龄4l～
71岁,平均50.3岁,全部病例经计算机断层扫描(CT)
和/或磁共振,病理或细胞学确诊.按有,无转移分为转
移组25例和未转移组40例,胃癌手术切除后半年肿瘤复
发转移者为术后复发组8例,同时对比了21例患者手术
前,后指标的变化.
2.正常对照组30名,其中男l9名,女11名,年龄
45～73岁,平均50.6岁,均为无器质性病变的健康体检
者,且近期均无明显的炎症感染.
3.方法所有患者在采集标本前均未接受化疗或放
疗,采集晨间空腹静脉血1.8mL,放入含0.109mol/L枸
橼酸钠抗凝剂0.2mL的试管中,轻摇,分离血浆并保存
于一80℃低温冰箱待测,21例胃癌患者术后恢复2周时
再次采集血标本.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测
血浆TF,TFPI水平,操作严格按规定进行,试剂为美国
ADI公司产品,购自上海太阳生物技术有限公司,检测仪
器为美国Dynex公司的OpSys?MR酶标仪.
4.统计学方法实验数据用孟±s表示,采用SPSS
10.0统计软件包进行t检验,P<0.05为差异具有统计学
意义.
二,结果
1.胃癌转移组,未转移组血浆TF和TFPI水平25
例胃癌转移组患者血浆中TF水平显着高于未转移组
(P<0.05),血浆中TFPI水平显着高于未转移组(P<
0.05),未转移组TFPl水平高于对照组(P<0.05),见表1.
表1胃癌转移组,未转移组血浆TF和TFPI水平比较
(x±s)
组别例数TF(ng/L)TFPI(g/L)
注:与正常对照组比较,P<0.05,P<0.叭;与胃癌转
移组比较,#P<0.05
2.胃癌患者手术前后血浆TF和TFPI水平21例
患者手术前血浆TF和TFPI水平均明显高于对照组(P<
0.05),术后2周血浆TF和TFPI水平均明显回落,明显低
于术前(P<0.05);8例术后复发患者TF和TFPI水平又
明显回升,明显高于对照组(P<0.05),见表2.
(下转第417页)
作者简介:宋娟芳,女,1975年生,学士,主管技师,主要从事生物化学检验工作.。