不同方法提取的柚子花的挥发性成分分析
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新鲜柚子(Citrus maxima)花样品采自云南西双版纳，干柚子花样品为本实验室晾干处理的样品。
HA221-50-06型超临界CO2流体萃取装置，GC-MS气质联用仪(气相色谱仪，Agilent公司；7890A质谱仪，Waters公司)其他试剂及实验条件参考文献[12，15]。
(1)同时蒸馏萃取法(SDE)：准确称取干2在50℃下连续萃取3h。反应完毕，用10ml二氯甲烷冲洗装置，收集二氯甲烷层，静置24h，浓缩获得黄色透明液体，供GC-MS分析用。
【相关文献】
[1] 杨荣华.柚子果皮油挥发性成分的气相色谱质谱分析[J].分析化学,2001,29(3):313-316.
[2] 冯宝民,裴月湖.柚皮中的化学成分[J].沈阳药科大学学报,2000，17(5):332-333.
[3] 郑占虎.中药现代研究与应用[M].北京:学苑出版社,1998.
[4] 林正奎,华映芳.中国特有沙田柚果皮精油化学成分研究[J].植物学报,1989,31(1):73-76.
分别用1μl提取物按上述进样条件进行GC/MS分析，获得上述三种柚子花精油的挥发性成分总离子流色谱图(如图1、图2和图3所示)，各化学成分及其相对含量，详见表1。
由总离子流色谱图可以看出，两种提取方法所得到的3种提取物的挥发性成分存在明显差异。从新鲜柚子花同时蒸馏萃取物中分离鉴定出57种化合物(图1)，相对含量较大的组分为香叶基香叶醇(24.24%)、橙花叔醇(19.09%)、左旋芳樟醇(13.03%)、柠檬烯(5.57%)、3,7-二甲基-1,3,6-辛三烯(4.87%)、吲嗪(3.66%)等；从干柚子花同时蒸馏萃取物中分离鉴定出60种化合物(图2)，其中含量较大的组分分别为柠檬烯(16.06%)、β-罗勒烯(13.55%)、香叶基香叶醇(11.42%)、左旋芳樟醇(11.25%)、橙花叔醇(9.63%)、氨茴酸甲酯(4.48%)、橙花醇(3.26%)等；从干柚子花超临界CO2萃取物中分离鉴定出56种化合物(图3)，其中含量较大的组分分别为E-3,7,11-三甲基-2,6,10-十二三烯-1-醇(13.18%)、2,6-二甲基-2,7-辛二烯-1,6-二醇(12.98%)、咖啡因(12.00%)、E-3,7,11-三甲基-1,6,10-十二三烯-3-醇(7.57%)、Z-7-十四碳烯醛(5.12%)等。
由表1可知，从同时蒸馏萃取法提取的新鲜柚子花中鉴定出的化学成分占化合物检出总含量的93.11%，对鉴定出的化学成分进行归类分析，发现其中包括醇类占68.74%，烯类占17.71%，酯类占5.77%，醛类占1.47%，其他占1.17%；从同时蒸馏萃取法提取的干柚子花中鉴定出的化学成分占化合物检出总含量的91.91%，其中包括醇类占52.36%，烯类占35.66%，酯类占5.99%，萜类占2.05%，其他占0.63%；从超临界CO2萃取法提取的干柚子花中鉴定出的化学成分占化合物检出总含量的78.02%，其中包括醇类占45.96%，咖啡因占12%，酯类占7.47%，饱和烃化合物占2.52%，酮类占1.73%，烯类占1.52%，其他占1.81%；柚子花的特殊香味，可能与其含有大量的醇、烯、酯类物质相关。
本研究首次对柚子花的不同提取方法和不同提取状态(干花和鲜花)的提取物的主要成分进行分析对比，为进一步研究开发柚子花提供了一定的理论参考依据。
传统的水蒸气蒸馏法虽然工艺简单，但是对有效的色香味物质提取不完善[13，14]，本研究对同时水蒸气蒸馏与超临界CO2萃取两种方法所得的挥发性成分进行分析比较。提取物经过GC-MS分析得出，超临界CO2提取方法优于水蒸气蒸馏法。
不同方法提取的柚子花的挥发性成分分析
王晓霞;魏杰;阴耕云;芦燕玲;刘劲芸;徐世涛
【摘 要】以新鲜柚子花和干柚子花为原料,采用同时蒸馏萃取法或超临界CO2萃取法对于柚子花和新鲜柚子花的挥发油进行提取,利用气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行分离鉴定,并测定各化学成分的相对含量.结果表明:相同方法提取的新鲜柚子花和干柚子花的挥发油的组成成分基本一致,但各化合物的相对含量不同,不同方法提取的干柚子花挥发油的组成成分与相对含量都存在较大差异.%Using fresh and dryCitrus maxima flowers as raw materials,simultaneous distillation extraction method and supercritical CO2 extraction method combined with GC-MS were set up to analyze volatile oil in Citrus maxima flowers.Furthermore,the volatile compounds and their contents in Citrus maxima were analyzed and the differences between two different raw materials were discussed.The results showed that the compositions of fresh Citrus maxima flowers oil and dry flowers oil obtained by same method were similar,but the contents were different.However,the compositions and contents of dry Citrus maxima flowers oil obtained by different method were different.
[5] YUSA,TAKEHIKO.Structures and physiological activity of coumarins in hassaku(Citrus natsudaidai)peels[J].Yukagaku:1992,41(3):249-251.
[6] 杨荣华.柚子果皮油挥发性成分的气相色谱质谱分析[J].分析化学,2001,29(3):313-316.
[11]张文成,潘见,胡学桥.超临界柚子鲜花芳香性成分的研究[J].中国野生植物资源，2004，23(4)：43-45.
[12]王晓霞,魏杰,刘劲芸,阴耕云,徐世涛.云南食用玫瑰精油化学成分的GC/MS分析及其应用研究[J].云南大学学报:自然科学版,2011,S2.
[13]唐松方.香料生产技术与应用[M].广州:广东科技出版社,2000.
[14]黄相中，张润芝，关小丽，等.云南楚雄杜仲叶挥发油的化学成分分析[J].云南民族大学学报：自然科学版，2011，20(5)：356-360.
[15]马和木提，米丽班·霍加，拜合提努尔.GC-MS法测定芜菁子中油脂组成研究[J].新疆师范大学学报：自然科学版，2012，31(2)：49-51.
Abstract:Using fresh and dry Citrus maxima flowers as raw materials,simultaneous distillation extraction method and supercritical CO2 extraction method combined with GC-MS were set up to analyze volatile oil in Citrus maxima flowers.Furthermore,the volatile compounds and their contents in Citrus maxima were analyzed and the differences between two different raw materials were discussed. The results showed that the compositions of fresh Citrus maxima flowers oil and dry flowers oil obtained by same method were similar,but the contents were different.However,the compositions and contents of dry Citrus maxima flowers oil obtained by different method were different.
[7] SAWAMURA M,KURIGAWA T.Quantitive determination of volatile constituents in the pummelo(CITRUS GRANDISO sbeck forma Tosabutan)[J].J Agric Food Chem,1988,86:567-569.
结果分析表明，两种方法提取的三种柚子花精油的挥发性成分中均有紫丁香醇、吲嗪、芳樟醇氧化物、石竹烯、香叶基香叶醇等5类成分；而用同时蒸馏萃取的干柚子花和新鲜柚子花都含有香芹醇、柠檬醛、δ-3-蒈烯、苯甲醛、2-β-松萜、左旋水芹烯、左旋芳樟醇、莳萝乙醚、4-松油醇、左旋-α-松油醇、香叶醇、乙酸薰衣草酯、α-蛇麻烯、橙花叔醇、金合欢醇同分异构物、依兰油醇、顺-α-没药烯、反式芳樟醇氧化物等18种成分；同时蒸馏萃取的干柚子花和超临界CO2萃取的干柚子花的挥发性成分中均有6-甲基-5-庚烯-2-酮、β-月桂烯、柠檬烯、5-甲基-2-异丙基环己醇、抗坏血酸-2，6-二棕榈酯、异蒲勒醇、肉豆蔻醛、氨茴酸甲酯、顺-7,10-十六二烯醛等9种成分；但是同时蒸馏萃取的新鲜柚子花和超临界CO2萃取的挥发性成分中只有苯乙醇和叶绿醇同分异构物两种物质是共有的。在三种提取物均有的成分中，“香叶基香叶醇”在同时蒸馏萃取的新鲜柚子花中的含量是最高的(24.24%)，同种方法提取的干柚子花含量次之(11.24%)，而超临界CO2萃取的干柚子花中含量却很低(0.52%)，这说明不同的萃取方法和萃取物的不同状态(干花和鲜花)对挥发性成分的组成和相对含量都存在影响。
【期刊名称】《云南师范大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2013(033)004
【总页数】8页(P52-59)
【关键词】柚子花;挥发油;同时蒸馏萃取;超临界;气质联用
【作 者】王晓霞;魏杰;阴耕云;芦燕玲;刘劲芸;徐世涛
【作者单位】云南烟草科学研究院,云南昆明650106;云南烟草科学研究院,云南昆明650106;云南烟草科学研究院,云南昆明650106;云南烟草科学研究院,云南昆明650106;云南烟草科学研究院,云南昆明650106;云南烟草科学研究院,云南昆明650106
【正文语种】中 文
【中图分类】Q946.82
柚子(Citrus maxima)，是一种芸香科柑橘亚科柑橘属常绿乔木果树，花白色，果实大，果味酸甜，广泛栽种于我国广东、广西、福建、台湾等地区。其花、叶、果皮可提取芳香油，果皮可药用。柚子皮富含挥发油等化学成分[1，2]，目前国内外学者，如林正奎[3]，Yusa[4]，杨荣华[5]等对柚子果皮中挥发油/精油已有研究[6-8]。然而对柚子花的研究较为单一，目前仅见于超临界CO2萃取法的工艺和提取物分析[9-11]，未见有不同提取方法及柚子花的不同状态(如干花和鲜花)对成分组成及含量的影响研究。
柚子花在每年三月下旬至四月间开放，新鲜柚子花香气清爽、甜美、馥郁，使人感到清新醒脑，花期20天左右，利用其芳香成分可以开发新型高级香精、高档化妆品和药品等。柚子花在晒干后香味变淡，但这是否说明其挥发性成分受到影响，本研究将从成分的分析上进行进一步的对比论证，从而也为开发高附加值的柚子花香精香料提供科学依据。
另外，在柚子花中检测出芳樟醇、苯甲醛、苯甲醇、苯乙醛和糠醛等，这些是人们普遍认可的烟草特有的致香成分，其中芳樟醇常用于合成香精及香料行业(FEMA 2635)，能够改善烟气的沉闷、不透发；苯甲醛用以调和皂用香精、食用香精等；苯乙醇是构成柚子花花香的基本成分，可用于医药和香料工业。由此来看，柚子花有着良好的开发与应用前景。
(2)超临界CO2萃取法(SFE)：将干燥的柚子花120.00g用超临界CO2流体萃取装置进行萃取。固定萃取压力为20MPa，提取温度为45℃，CO2流量为7kg/h，萃取时间为90min，分离釜I的压力为8.0MPa(分离温度为30℃)，分离釜II的压力为5.0MPa(分离温度25℃)，夹带剂为10%乙醇。萃取完毕后，分别从分离釜 I 和分离釜 II 底部收集到黄绿色半透明油状萃取物。过滤后用无水硫酸钠干燥24h，再过滤得黄绿色澄清透明液体，供GC-MS分析用。
[8] 冯宝民,苑艳光,裴月湖.柚的化学与药理研究进展[J].沈阳药科大学报,2001,18(3):228-232.
[9] 张杨,谢慧明,孙益民,等.超临界CO2萃取柚子花挥发成分的工艺研究[J].安徽化工,2002，(3)：22-25.
[10]谢慧明,张文成,潘见.柚子花芳香油超临界C02萃取研究[J].农业工程学报，2005，21(2)：140-143.
HA221-50-06型超临界CO2流体萃取装置，GC-MS气质联用仪(气相色谱仪，Agilent公司；7890A质谱仪，Waters公司)其他试剂及实验条件参考文献[12，15]。
(1)同时蒸馏萃取法(SDE)：准确称取干2在50℃下连续萃取3h。反应完毕，用10ml二氯甲烷冲洗装置，收集二氯甲烷层，静置24h，浓缩获得黄色透明液体，供GC-MS分析用。
【相关文献】
[1] 杨荣华.柚子果皮油挥发性成分的气相色谱质谱分析[J].分析化学,2001,29(3):313-316.
[2] 冯宝民,裴月湖.柚皮中的化学成分[J].沈阳药科大学学报,2000，17(5):332-333.
[3] 郑占虎.中药现代研究与应用[M].北京:学苑出版社,1998.
[4] 林正奎,华映芳.中国特有沙田柚果皮精油化学成分研究[J].植物学报,1989,31(1):73-76.
分别用1μl提取物按上述进样条件进行GC/MS分析，获得上述三种柚子花精油的挥发性成分总离子流色谱图(如图1、图2和图3所示)，各化学成分及其相对含量，详见表1。
由总离子流色谱图可以看出，两种提取方法所得到的3种提取物的挥发性成分存在明显差异。从新鲜柚子花同时蒸馏萃取物中分离鉴定出57种化合物(图1)，相对含量较大的组分为香叶基香叶醇(24.24%)、橙花叔醇(19.09%)、左旋芳樟醇(13.03%)、柠檬烯(5.57%)、3,7-二甲基-1,3,6-辛三烯(4.87%)、吲嗪(3.66%)等；从干柚子花同时蒸馏萃取物中分离鉴定出60种化合物(图2)，其中含量较大的组分分别为柠檬烯(16.06%)、β-罗勒烯(13.55%)、香叶基香叶醇(11.42%)、左旋芳樟醇(11.25%)、橙花叔醇(9.63%)、氨茴酸甲酯(4.48%)、橙花醇(3.26%)等；从干柚子花超临界CO2萃取物中分离鉴定出56种化合物(图3)，其中含量较大的组分分别为E-3,7,11-三甲基-2,6,10-十二三烯-1-醇(13.18%)、2,6-二甲基-2,7-辛二烯-1,6-二醇(12.98%)、咖啡因(12.00%)、E-3,7,11-三甲基-1,6,10-十二三烯-3-醇(7.57%)、Z-7-十四碳烯醛(5.12%)等。
由表1可知，从同时蒸馏萃取法提取的新鲜柚子花中鉴定出的化学成分占化合物检出总含量的93.11%，对鉴定出的化学成分进行归类分析，发现其中包括醇类占68.74%，烯类占17.71%，酯类占5.77%，醛类占1.47%，其他占1.17%；从同时蒸馏萃取法提取的干柚子花中鉴定出的化学成分占化合物检出总含量的91.91%，其中包括醇类占52.36%，烯类占35.66%，酯类占5.99%，萜类占2.05%，其他占0.63%；从超临界CO2萃取法提取的干柚子花中鉴定出的化学成分占化合物检出总含量的78.02%，其中包括醇类占45.96%，咖啡因占12%，酯类占7.47%，饱和烃化合物占2.52%，酮类占1.73%，烯类占1.52%，其他占1.81%；柚子花的特殊香味，可能与其含有大量的醇、烯、酯类物质相关。
本研究首次对柚子花的不同提取方法和不同提取状态(干花和鲜花)的提取物的主要成分进行分析对比，为进一步研究开发柚子花提供了一定的理论参考依据。
传统的水蒸气蒸馏法虽然工艺简单，但是对有效的色香味物质提取不完善[13，14]，本研究对同时水蒸气蒸馏与超临界CO2萃取两种方法所得的挥发性成分进行分析比较。提取物经过GC-MS分析得出，超临界CO2提取方法优于水蒸气蒸馏法。
不同方法提取的柚子花的挥发性成分分析
王晓霞;魏杰;阴耕云;芦燕玲;刘劲芸;徐世涛
【摘 要】以新鲜柚子花和干柚子花为原料,采用同时蒸馏萃取法或超临界CO2萃取法对于柚子花和新鲜柚子花的挥发油进行提取,利用气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行分离鉴定,并测定各化学成分的相对含量.结果表明:相同方法提取的新鲜柚子花和干柚子花的挥发油的组成成分基本一致,但各化合物的相对含量不同,不同方法提取的干柚子花挥发油的组成成分与相对含量都存在较大差异.%Using fresh and dryCitrus maxima flowers as raw materials,simultaneous distillation extraction method and supercritical CO2 extraction method combined with GC-MS were set up to analyze volatile oil in Citrus maxima flowers.Furthermore,the volatile compounds and their contents in Citrus maxima were analyzed and the differences between two different raw materials were discussed.The results showed that the compositions of fresh Citrus maxima flowers oil and dry flowers oil obtained by same method were similar,but the contents were different.However,the compositions and contents of dry Citrus maxima flowers oil obtained by different method were different.
[5] YUSA,TAKEHIKO.Structures and physiological activity of coumarins in hassaku(Citrus natsudaidai)peels[J].Yukagaku:1992,41(3):249-251.
[6] 杨荣华.柚子果皮油挥发性成分的气相色谱质谱分析[J].分析化学,2001,29(3):313-316.
[11]张文成,潘见,胡学桥.超临界柚子鲜花芳香性成分的研究[J].中国野生植物资源，2004，23(4)：43-45.
[12]王晓霞,魏杰,刘劲芸,阴耕云,徐世涛.云南食用玫瑰精油化学成分的GC/MS分析及其应用研究[J].云南大学学报:自然科学版,2011,S2.
[13]唐松方.香料生产技术与应用[M].广州:广东科技出版社,2000.
[14]黄相中，张润芝，关小丽，等.云南楚雄杜仲叶挥发油的化学成分分析[J].云南民族大学学报：自然科学版，2011，20(5)：356-360.
[15]马和木提，米丽班·霍加，拜合提努尔.GC-MS法测定芜菁子中油脂组成研究[J].新疆师范大学学报：自然科学版，2012，31(2)：49-51.
Abstract:Using fresh and dry Citrus maxima flowers as raw materials,simultaneous distillation extraction method and supercritical CO2 extraction method combined with GC-MS were set up to analyze volatile oil in Citrus maxima flowers.Furthermore,the volatile compounds and their contents in Citrus maxima were analyzed and the differences between two different raw materials were discussed. The results showed that the compositions of fresh Citrus maxima flowers oil and dry flowers oil obtained by same method were similar,but the contents were different.However,the compositions and contents of dry Citrus maxima flowers oil obtained by different method were different.
[7] SAWAMURA M,KURIGAWA T.Quantitive determination of volatile constituents in the pummelo(CITRUS GRANDISO sbeck forma Tosabutan)[J].J Agric Food Chem,1988,86:567-569.
结果分析表明，两种方法提取的三种柚子花精油的挥发性成分中均有紫丁香醇、吲嗪、芳樟醇氧化物、石竹烯、香叶基香叶醇等5类成分；而用同时蒸馏萃取的干柚子花和新鲜柚子花都含有香芹醇、柠檬醛、δ-3-蒈烯、苯甲醛、2-β-松萜、左旋水芹烯、左旋芳樟醇、莳萝乙醚、4-松油醇、左旋-α-松油醇、香叶醇、乙酸薰衣草酯、α-蛇麻烯、橙花叔醇、金合欢醇同分异构物、依兰油醇、顺-α-没药烯、反式芳樟醇氧化物等18种成分；同时蒸馏萃取的干柚子花和超临界CO2萃取的干柚子花的挥发性成分中均有6-甲基-5-庚烯-2-酮、β-月桂烯、柠檬烯、5-甲基-2-异丙基环己醇、抗坏血酸-2，6-二棕榈酯、异蒲勒醇、肉豆蔻醛、氨茴酸甲酯、顺-7,10-十六二烯醛等9种成分；但是同时蒸馏萃取的新鲜柚子花和超临界CO2萃取的挥发性成分中只有苯乙醇和叶绿醇同分异构物两种物质是共有的。在三种提取物均有的成分中，“香叶基香叶醇”在同时蒸馏萃取的新鲜柚子花中的含量是最高的(24.24%)，同种方法提取的干柚子花含量次之(11.24%)，而超临界CO2萃取的干柚子花中含量却很低(0.52%)，这说明不同的萃取方法和萃取物的不同状态(干花和鲜花)对挥发性成分的组成和相对含量都存在影响。
【期刊名称】《云南师范大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2013(033)004
【总页数】8页(P52-59)
【关键词】柚子花;挥发油;同时蒸馏萃取;超临界;气质联用
【作 者】王晓霞;魏杰;阴耕云;芦燕玲;刘劲芸;徐世涛
【作者单位】云南烟草科学研究院,云南昆明650106;云南烟草科学研究院,云南昆明650106;云南烟草科学研究院,云南昆明650106;云南烟草科学研究院,云南昆明650106;云南烟草科学研究院,云南昆明650106;云南烟草科学研究院,云南昆明650106
【正文语种】中 文
【中图分类】Q946.82
柚子(Citrus maxima)，是一种芸香科柑橘亚科柑橘属常绿乔木果树，花白色，果实大，果味酸甜，广泛栽种于我国广东、广西、福建、台湾等地区。其花、叶、果皮可提取芳香油，果皮可药用。柚子皮富含挥发油等化学成分[1，2]，目前国内外学者，如林正奎[3]，Yusa[4]，杨荣华[5]等对柚子果皮中挥发油/精油已有研究[6-8]。然而对柚子花的研究较为单一，目前仅见于超临界CO2萃取法的工艺和提取物分析[9-11]，未见有不同提取方法及柚子花的不同状态(如干花和鲜花)对成分组成及含量的影响研究。
柚子花在每年三月下旬至四月间开放，新鲜柚子花香气清爽、甜美、馥郁，使人感到清新醒脑，花期20天左右，利用其芳香成分可以开发新型高级香精、高档化妆品和药品等。柚子花在晒干后香味变淡，但这是否说明其挥发性成分受到影响，本研究将从成分的分析上进行进一步的对比论证，从而也为开发高附加值的柚子花香精香料提供科学依据。
另外，在柚子花中检测出芳樟醇、苯甲醛、苯甲醇、苯乙醛和糠醛等，这些是人们普遍认可的烟草特有的致香成分，其中芳樟醇常用于合成香精及香料行业(FEMA 2635)，能够改善烟气的沉闷、不透发；苯甲醛用以调和皂用香精、食用香精等；苯乙醇是构成柚子花花香的基本成分，可用于医药和香料工业。由此来看，柚子花有着良好的开发与应用前景。
(2)超临界CO2萃取法(SFE)：将干燥的柚子花120.00g用超临界CO2流体萃取装置进行萃取。固定萃取压力为20MPa，提取温度为45℃，CO2流量为7kg/h，萃取时间为90min，分离釜I的压力为8.0MPa(分离温度为30℃)，分离釜II的压力为5.0MPa(分离温度25℃)，夹带剂为10%乙醇。萃取完毕后，分别从分离釜 I 和分离釜 II 底部收集到黄绿色半透明油状萃取物。过滤后用无水硫酸钠干燥24h，再过滤得黄绿色澄清透明液体，供GC-MS分析用。
[8] 冯宝民,苑艳光,裴月湖.柚的化学与药理研究进展[J].沈阳药科大学报,2001,18(3):228-232.
[9] 张杨,谢慧明,孙益民,等.超临界CO2萃取柚子花挥发成分的工艺研究[J].安徽化工,2002，(3)：22-25.
[10]谢慧明,张文成,潘见.柚子花芳香油超临界C02萃取研究[J].农业工程学报，2005，21(2)：140-143.