单核苷酸位点C19007T多态性与宫颈癌易感性的相关性分析
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比值 比达 到 ３ ． ７ ８ （ Ｐ％ ０ ． ０ ５ ） 。结 论 宫 颈 癌 的发 生 与 Ｅ ＲＣ Ｃ １基 因 Ｃ １ ９ 。 ０ ７ Ｔ位 点 多 态 性 存 在 一 定 相 关 性 ， ｃ １ ９ ０ ０ ７ Ｔ 位 基 因型 Ｔ Ｔ 和等 位 基 因 Ｔ 可 增加 宫 颈 癌 的 易感 性 ， 该 位 点 可 作 为 宫 颈 癌 风 险预 测 的 指 标 。 【 关键 词】 宫 颈癌 ； 单 核 苷 酸 多 态性 ； 核 苷 酸 切 除 修 复 交叉 互 补 基 因 １ ； Ｃ １ ９ ｏ ｏ ７ Ｔ Ｄ Ｏ Ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ２ － ９ ４ ５ ５ ． ２ ０ １ ４ ． ０ ４ ． ０ ２ ７ 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ： １ ６ ７ ２ — ９ ４ ５ ５ （ ２ ０ １ ４ ） ０ ４ — ０ ４ ９ ５ － ０ ２
司合 成 。采 用 Ｐ Ｃ Ｒ 一 限制性片段 长度多态性 （ Ｐ Ｃ Ｒ — Ｒ Ｆ Ｉ Ｐ ） 基 因
分 型方 法 埘 Ｃ １ ９ ０ ０ ７ Ｔ位点 多态性 进行 分型 ， 扩 增 目标 片 段 长 度为 ５ ４ ５ ｂ ｐ 。Ｐ Ｃ Ｒ扩 增 体 系 为 ２ ５ １ ， 包括 ２ ０ ｎ ｇ Ｄ ＮＡ 模 板 、 ０ ． ２ ５ ｐ ｔ ｍｏ ｌ ／ Ｉ 引物、 １ Ｕ Ｔａ ｇ ＤＮＡ 聚 合 酶 、 ０ ． ４ ｍｍｏ ｌ ／ Ｉ ｄ ＮＴ Ｐ 和２ ｍｍｏ ｌ ／ Ｉ Ｍｇ Ｃ Ｉ ２ 。Ｐ Ｃ Ｒ扩增条件为 ９ ４℃ ２ ｍｉ ｎ ， ９ ４。 Ｃ ３ ０
反应一 限 制性 片段 长 度 多 态性 （ Ｐ Ｃ Ｒ — Ｒ Ｆ Ｉ Ｐ ） 技术分析 Ｃ １ ９ ０ ０ ７ Ｔ 位 点 多 态性 ， 运用 Ｌ ｏ ｇ ｉ ｓ ｔ ｉ ｃ回 归模 型 分析 ｃ １ ９ ０ ０ Ｔ Ｆ位
点 多 态性 与 宫 颈癌 易 感 性 的 相 关 性 。结 果 Ｃ １ ９ ０ ０ ７ Ｔ位 点 扩 增 片段 酶 切 后 可 产 生 Ｃ Ｃ 、 Ｃ Ｔ和 ＴＴ 三 种基 因 型 ； 宫颈
检验 医 学 与 Ｊ 塍床 ２ ０ １ ４年 ２月 第 １ ｌ卷 第 ４期 Ｉ ａ ｂ Ｍｅ ｄ Ｃ ｌ ｉ ｎ ， Ｆ ｅ ｂ ｒ ｕ ａ ｒ ｙ ２ ０ １ ４ ， Ｖｏ １ ． １ １ ， Ｎｏ ． ４
・
・
４ ９５ ・
临床研究 ・
单核苷酸位点 Ｃ １ ９ ０ ０ ７ Ｔ 多态 性 与 宫颈 癌 易 感性 的 相 关 性 分 析
的 发 生 与 ＤＮ Ａ 损 伤 修 复 能 力 异 常 相 关 。 核 苷 酸 切 除 修 复 交 叉互补基 因 １ （ Ｅ Ｒ Ｃ Ｃ １ ） 是 一 种 重 要 的 ＤＮ Ａ 损 伤 修 复 基 因 。 已 有研究发现 ， Ｅ ＲＣ Ｃ １基 因单 核 苷 酸 多 态 性 （ Ｓ ＮＰ ） 位 点 突 变 可 导致 Ｅ Ｒ Ｃ Ｃ １ 表达水平 的异常 ， 从而 影响肿 瘤易感性 ＿ ３ ］ 。 本 研 究探讨 了 Ｅ Ｒ Ｃ Ｃ １基 因 Ｃ １ ９ ｏ ０ ７ Ｔ位点与宫颈癌易感性 的关系 ，
吴世木 ， 陈 俊， 杨 瑞宾 ， 韦入 翠 ， 陆 红 ， 陈瑞连 （ 贵 州省 兴义 市人 民 医院检 验 科 ５ ６ ２ ４ ０ ０ ）
【 摘要】 目 的 探 讨 核 苷 酸 切 除 修 复 交 叉互 补 基 因 ｌ （ Ｅ ＲＣ Ｃ１ ） 单 核 苷 酸 多 态性 （ Ｓ Ｎ Ｐ ） 位 点 Ｃ１ ９ ０ ０ ７ Ｔ 与 宫 颈癌 易感 性 的相 关 性 。 方 法 选 择 ４ ８例 宫 颈癌 患 者 （ 宫颈癌组 ） 和４ ８例 无 宫 颈 病 变 的健 康 者 （ 对照组 ） ， 采 用 聚 合 酶 链
癌组 Ｃ Ｃ、 Ｃ Ｔ和 Ｔ Ｔ 基 因 型频 率 分 别 为 ５ ２ ． Ｏ ８ 、 ３ ３ ． ３ ３ 、 １ ４ ． ５ ８ ， 对照组分 别为 ６ ４ ． ５ ８ 、 ３ １ ． ２ ５ 、 ４ ． １ ７ ， 基因
型 频 率 组 间 比较 差 异具 有 统 计 学 意 义 （ Ｐ ＜０ ． ０ ５ ） ； 宫 颈 癌 组 ｃ、 Ｔ基 因频 率 分 别 为 ６ ８ ． ７ ５ 、 ３ １ ． ２ ５ ， 对照组分 别为 ８ ０ ． ２ １ 、 １ ９ ． ７ ９ ， 组 间 比较 差 异 有 统 计 学 意 义 （ Ｐ ＜Ｏ ． ０ ５ ） ； 加 性 遗 传模 型 下 ， Ｃ １ ９ ０ ０ ７ Ｔ 位 点 多 态 性 预 测 宫 颈 癌 的
Ｓ 、 ５ ５℃ ３ ０ ｓ 、 ７ ２ ｕ Ｃ ４ ０ ｓ 循环 ３ ５次 ， ７ ２℃ ６ ｍｉ ｎ 。取 ４ ｔ ｔ Ｉ Ｐ Ｃ Ｒ
扩增 产物 ， 在 １ 琼 脂 糖 凝胶 中 电泳 ， 采 用 紫 外 分 析 仪 检 测 Ｐ Ｃ Ｒ产 物 电 泳 结 果 。利 用 １ Ｕ Ｂ ｓ ｒ Ｄ Ｉ限 制 性 内 切 酶 对 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增 产物 进 行 酶 切 ， ３ ７℃水 浴 过 夜 后 ，采用 １ ． ５ 琼 脂 糖 凝 胶
电泳 检 测 酶 切 结 果 。
宫 颈 癌 是 最 常 见 的 妇 科 恶 性 肿 瘤 之 一 。 虽 然 近 年 来 宫 颈
ＡＡ Ｇ Ａ ＴＡ Ｃ Ｔ Ｃ 一 ５ ， 引物 由 生 工 生 物 工 程 （ 上海 ） 股 份 有 限 公
癌的病死率有所下降 ， 但 其 发 病 率 却 呈 上 升 趋 势 ］ 。加 强 宫 颈 癌早期风险预测 ， 对 于降低其发病率具有重要意义＿ ２ ］ 。宫 颈 癌
司合 成 。采 用 Ｐ Ｃ Ｒ 一 限制性片段 长度多态性 （ Ｐ Ｃ Ｒ — Ｒ Ｆ Ｉ Ｐ ） 基 因
分 型方 法 埘 Ｃ １ ９ ０ ０ ７ Ｔ位点 多态性 进行 分型 ， 扩 增 目标 片 段 长 度为 ５ ４ ５ ｂ ｐ 。Ｐ Ｃ Ｒ扩 增 体 系 为 ２ ５ １ ， 包括 ２ ０ ｎ ｇ Ｄ ＮＡ 模 板 、 ０ ． ２ ５ ｐ ｔ ｍｏ ｌ ／ Ｉ 引物、 １ Ｕ Ｔａ ｇ ＤＮＡ 聚 合 酶 、 ０ ． ４ ｍｍｏ ｌ ／ Ｉ ｄ ＮＴ Ｐ 和２ ｍｍｏ ｌ ／ Ｉ Ｍｇ Ｃ Ｉ ２ 。Ｐ Ｃ Ｒ扩增条件为 ９ ４℃ ２ ｍｉ ｎ ， ９ ４。 Ｃ ３ ０
反应一 限 制性 片段 长 度 多 态性 （ Ｐ Ｃ Ｒ — Ｒ Ｆ Ｉ Ｐ ） 技术分析 Ｃ １ ９ ０ ０ ７ Ｔ 位 点 多 态性 ， 运用 Ｌ ｏ ｇ ｉ ｓ ｔ ｉ ｃ回 归模 型 分析 ｃ １ ９ ０ ０ Ｔ Ｆ位
点 多 态性 与 宫 颈癌 易 感 性 的 相 关 性 。结 果 Ｃ １ ９ ０ ０ ７ Ｔ位 点 扩 增 片段 酶 切 后 可 产 生 Ｃ Ｃ 、 Ｃ Ｔ和 ＴＴ 三 种基 因 型 ； 宫颈
检验 医 学 与 Ｊ 塍床 ２ ０ １ ４年 ２月 第 １ ｌ卷 第 ４期 Ｉ ａ ｂ Ｍｅ ｄ Ｃ ｌ ｉ ｎ ， Ｆ ｅ ｂ ｒ ｕ ａ ｒ ｙ ２ ０ １ ４ ， Ｖｏ １ ． １ １ ， Ｎｏ ． ４
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４ ９５ ・
临床研究 ・
单核苷酸位点 Ｃ １ ９ ０ ０ ７ Ｔ 多态 性 与 宫颈 癌 易 感性 的 相 关 性 分 析
的 发 生 与 ＤＮ Ａ 损 伤 修 复 能 力 异 常 相 关 。 核 苷 酸 切 除 修 复 交 叉互补基 因 １ （ Ｅ Ｒ Ｃ Ｃ １ ） 是 一 种 重 要 的 ＤＮ Ａ 损 伤 修 复 基 因 。 已 有研究发现 ， Ｅ ＲＣ Ｃ １基 因单 核 苷 酸 多 态 性 （ Ｓ ＮＰ ） 位 点 突 变 可 导致 Ｅ Ｒ Ｃ Ｃ １ 表达水平 的异常 ， 从而 影响肿 瘤易感性 ＿ ３ ］ 。 本 研 究探讨 了 Ｅ Ｒ Ｃ Ｃ １基 因 Ｃ １ ９ ｏ ０ ７ Ｔ位点与宫颈癌易感性 的关系 ，
吴世木 ， 陈 俊， 杨 瑞宾 ， 韦入 翠 ， 陆 红 ， 陈瑞连 （ 贵 州省 兴义 市人 民 医院检 验 科 ５ ６ ２ ４ ０ ０ ）
【 摘要】 目 的 探 讨 核 苷 酸 切 除 修 复 交 叉互 补 基 因 ｌ （ Ｅ ＲＣ Ｃ１ ） 单 核 苷 酸 多 态性 （ Ｓ Ｎ Ｐ ） 位 点 Ｃ１ ９ ０ ０ ７ Ｔ 与 宫 颈癌 易感 性 的相 关 性 。 方 法 选 择 ４ ８例 宫 颈癌 患 者 （ 宫颈癌组 ） 和４ ８例 无 宫 颈 病 变 的健 康 者 （ 对照组 ） ， 采 用 聚 合 酶 链
癌组 Ｃ Ｃ、 Ｃ Ｔ和 Ｔ Ｔ 基 因 型频 率 分 别 为 ５ ２ ． Ｏ ８ 、 ３ ３ ． ３ ３ 、 １ ４ ． ５ ８ ， 对照组分 别为 ６ ４ ． ５ ８ 、 ３ １ ． ２ ５ 、 ４ ． １ ７ ， 基因
型 频 率 组 间 比较 差 异具 有 统 计 学 意 义 （ Ｐ ＜０ ． ０ ５ ） ； 宫 颈 癌 组 ｃ、 Ｔ基 因频 率 分 别 为 ６ ８ ． ７ ５ 、 ３ １ ． ２ ５ ， 对照组分 别为 ８ ０ ． ２ １ 、 １ ９ ． ７ ９ ， 组 间 比较 差 异 有 统 计 学 意 义 （ Ｐ ＜Ｏ ． ０ ５ ） ； 加 性 遗 传模 型 下 ， Ｃ １ ９ ０ ０ ７ Ｔ 位 点 多 态 性 预 测 宫 颈 癌 的
Ｓ 、 ５ ５℃ ３ ０ ｓ 、 ７ ２ ｕ Ｃ ４ ０ ｓ 循环 ３ ５次 ， ７ ２℃ ６ ｍｉ ｎ 。取 ４ ｔ ｔ Ｉ Ｐ Ｃ Ｒ
扩增 产物 ， 在 １ 琼 脂 糖 凝胶 中 电泳 ， 采 用 紫 外 分 析 仪 检 测 Ｐ Ｃ Ｒ产 物 电 泳 结 果 。利 用 １ Ｕ Ｂ ｓ ｒ Ｄ Ｉ限 制 性 内 切 酶 对 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增 产物 进 行 酶 切 ， ３ ７℃水 浴 过 夜 后 ，采用 １ ． ５ 琼 脂 糖 凝 胶
电泳 检 测 酶 切 结 果 。
宫 颈 癌 是 最 常 见 的 妇 科 恶 性 肿 瘤 之 一 。 虽 然 近 年 来 宫 颈
ＡＡ Ｇ Ａ ＴＡ Ｃ Ｔ Ｃ 一 ５ ， 引物 由 生 工 生 物 工 程 （ 上海 ） 股 份 有 限 公
癌的病死率有所下降 ， 但 其 发 病 率 却 呈 上 升 趋 势 ］ 。加 强 宫 颈 癌早期风险预测 ， 对 于降低其发病率具有重要意义＿ ２ ］ 。宫 颈 癌