分离后精子输精对超排奶牛卵子受精和胚胎质量的影响
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控 制奶牛 出生性 别 的途径 一是 通过受 精后 胚胎性 别
的鉴 定而获得 所需 性别 的后代 ；二是受 精前 通过体 外 分离精 子 而预先 决 定后 代 的性别 。２ 纪 ６ ０世 ０年 代流 式细胞 分离仪 问世…。流式 细胞 仪精子 分离法 ，
是 根据 ｘ、 Ｙ两类 精子 在 Ｄ Ａ含 量 上 的差 异来 分 离 Ｎ
冻、 分离前 后 的保 存 、 分离过 程 中激光 照射 及机械 损
年 ４月 ，在 大庆 田丰 生物工 程有 限公 司和济 南 佳宝 １２ 供 体 牛 的选 择 和饲 养 管 理 供 体 牛 为奶 牛 场 ．
饲 养 的 、 口的体 质健 康 、 周期 正 常 、 生殖 疾 患 进 性 无
的荷斯 坦高 产成年母 牛或青 年母 牛 。青年母 牛 年龄
关 键 词 ： 子 分 离 ； 式 细 胞 仪 ； 数排 卵 ； 控 胚 胎 精 流 超 性
中图分 类号 ：￥ ２ ． ８ ３３
文 献标识码 ： Ｂ
文章 编号 ：２ ８ ７ ３ ｆ ０ ８）３ ０ １— ３ ０ ５ — ０ ３ ０ ０ — ０ ０ ０ ２
就奶 牛生产 而言 ，如能将 产母犊 率提 高 １ ％ ～ ０
伤等 ，都可 能会对精 子产 生不利 影 响。利用 该技 术
分 离牛有 活性 的 ｘ和 Ｙ精 子 ， 已经成 功地 应 用 于人 工授 精 （ Ｉ 、 Ａ ） 体外受 精 （Ｖ ） 胞 质 内单 精 子显微 注 Ｉ Ｆ及
ｌ 月 以上 ， 重 达 ３０ｋ ； 年母 牛 １ ４个 体 ３ ｇ 成 ～２产 ， 泌 乳 月 ２～４个 月 ，膘 情 中上 等 。供 体 牛和其 他 牛 一 样， 同群 同栏 ， 饲养 条件 相 同 。粗 料 以干草 （ 东北 羊 草） 为主 、 配合 使 用青 贮 玉米 ， 料 每头 每 天维 持需 精
种母 牛进行超 排 生产性控 胚胎 ，是充分 挖掘 良种母
收稿 日期 ：０ ７ ０ — ３ 修 回 日期 ：０ ７ ｌ一 ５ ２０ — ６ １ ； ２０ 一 ｌ０ 作者简介 ： 岳奎忠 （９ ５ ） 男 ， １６ 一 ， 硕士 ， 研究员
Байду номын сангаас
控 精 液 组 相 比差 异 不 显 著 （ ＞００ ）但 可 用胚 胎 比例 高 于性 控 精 液 组 （ ０１％对 ８ ． ％，６０％对 ６ ．７ 。 成 Ｐ ．５ ， ９． ７ ９ ３ ６． ７ ３ ３５％） 育
牛群组受精 卵比例 高于成母牛群组 （２７ ％对 ８ ． ％） ９． ４ ４９ ３ 差异不显著 （ ＞００ ）但 可用胚胎 比例显著 高于成母 牛群 Ｐ ． ； ５ 组（ ８ ７ ６ ． ％对 ５ ． ％）ｐ ． ） ７ ５２ （ ＜００ 。１次输 ２支性控精液组 中， ８ ５ 育成牛群组受精 卵数 、 可用胚 胎比例 都显著 高于成母 牛群组 （０８ ％ ７ ． ％，７８ ％对 ５ ． ％） Ｐ＜００ ） ９ ． 对 ９６ ６ ． ３ ９ ９ ３１ （ ３ ． 。２次人 工授 精 ， ５ 每次输 １支性控精 液组 中， 育成牛群 组受 精 卵及可用胚胎 比例都显著 高于成母牛群组（ ３７ ％ ８ ． ％，９２ ％对 ５ ． ％） Ｐ ．５ 。 ９ ． 对 ７ １ ６． ５ ４ ３ ６３ （ ＜００ ） ０
要量 ２５ｋ ， ． ｇ 在此 基础 上 ， 每产 ２５ｋ 奶加 喂 ｌ ｇ ． ｇ 精 ｋ
料 。白天舍饲 ， 晚上 放运 动场 自由活 动 。
射 （ Ｓ） 研究 ， Ｉ Ｉ等 Ｃ 产下后代ｐ 。现在超数 排 卵利用 性
控精 液生产 性控胚 胎是性 控胚胎 移植 的主要 胚胎来
２山 东农业 大 学动 物科技 学院 ， ． 山东泰 安
２ １１ ； ３ 东北农业 大 学奶 牛研 究所 ， ７ ０８ 黑龙江哈 尔滨 １０ ３ ； ５０ ０
４大庆 田丰生物 工程有 限公 司， 黑龙 江大庆 １３ １ ） ６ ７ １
摘 要 ： 究应用性控精 液对超排 育成 牛和成母牛输精 ， 研 生产性控 胚胎 。结果表 明 ： 非性控 精液组 受精 卵数 同性
牛 的遗 传潜力 和 向社 会提供 大量 优质性 控胚 胎 的重 要 手段 。本研 究 的 目的是 检测 和验证 流式 细胞 分离 仪分 离精子 的过程 或染料 对奶 牛超数 排卵 后卵母 细 胞 受精及 胚胎 质量 的影 响。
１ 材 料 与 方 法
１ ％， 对迅 速发展我 国乳 牛业能起 很大 作用 。目前 ５ 则
维普资讯
糖 釜 理 ・ ｅ ｒｄ ｃｉｎａ ｄＰ ｙ ｉｌｇ Ｒ ｐｏ ｕ ｔ ｎ ｈ ｓ ｏ ｙ ｏ ｏ
２０ 年 第４ 卷 第 ３ ０８ ４ 期
分离后精子输精对超排奶 牛卵子受精和 胚 胎 质 量 的 影 响
岳奎 忠 ， 罗明久 ， 武浩楠 ， 凡伟 ， 孟 王耀峰 （． １东北农 业大 学生命科技 学学 院 ， 黑龙 江哈 尔滨 １０ ３ ； ５ ００
１１ 试 验 时间 和地 点 ． 乳 业有 限公 司进行 。
试 验 于 ２０ 年 ５月一２ ０ ０３ ０５
精子 。Ｍ Ｎ ｔ等『 ｃｕ ｔ ２ Ｊ 在兔上 的实验 表 明 ， 分离 精子体 外 受精 时具有 正常 的受精 能力 ，分 离过程 不会 影 响受 精 ，但 可能会 影 响早 期胚 胎和胎 儿 的发育 。造成 这 些 问题 的原 因是 多 方 面 的 ，如荧 光 染 色 、稀释 、 冷
源 。性控胚 胎的生 产移植 作为一 项 高新技 术 ，在 我
国奶 牛 良种 化进程 中正 发挥 着 日趋 重要 的作用 ， 这
一
１３ 超数 排卵 方 法 ．
供体 牛 自然 发情 ｆ 以静立 接 受
先进 的繁育 技术 正 向着 产业化 方 向迈 进 。对优 良
爬 跨 为准）的 当天记 为 ０天，在发情 周期 的 ９～１ ２ｄ 的任何 １ｄ开始 ， 用 递减 法 连续 ４ｄ每天 ２次 （ 采 ， 间
的鉴 定而获得 所需 性别 的后代 ；二是受 精前 通过体 外 分离精 子 而预先 决 定后 代 的性别 。２ 纪 ６ ０世 ０年 代流 式细胞 分离仪 问世…。流式 细胞 仪精子 分离法 ，
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冻、 分离前 后 的保 存 、 分离过 程 中激光 照射 及机械 损
年 ４月 ，在 大庆 田丰 生物工 程有 限公 司和济 南 佳宝 １２ 供 体 牛 的选 择 和饲 养 管 理 供 体 牛 为奶 牛 场 ．
饲 养 的 、 口的体 质健 康 、 周期 正 常 、 生殖 疾 患 进 性 无
的荷斯 坦高 产成年母 牛或青 年母 牛 。青年母 牛 年龄
关 键 词 ： 子 分 离 ； 式 细 胞 仪 ； 数排 卵 ； 控 胚 胎 精 流 超 性
中图分 类号 ：￥ ２ ． ８ ３３
文 献标识码 ： Ｂ
文章 编号 ：２ ８ ７ ３ ｆ ０ ８）３ ０ １— ３ ０ ５ — ０ ３ ０ ０ — ０ ０ ０ ２
就奶 牛生产 而言 ，如能将 产母犊 率提 高 １ ％ ～ ０
伤等 ，都可 能会对精 子产 生不利 影 响。利用 该技 术
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控 精 液 组 相 比差 异 不 显 著 （ ＞００ ）但 可 用胚 胎 比例 高 于性 控 精 液 组 （ ０１％对 ８ ． ％，６０％对 ６ ．７ 。 成 Ｐ ．５ ， ９． ７ ９ ３ ６． ７ ３ ３５％） 育
牛群组受精 卵比例 高于成母牛群组 （２７ ％对 ８ ． ％） ９． ４ ４９ ３ 差异不显著 （ ＞００ ）但 可用胚胎 比例显著 高于成母 牛群 Ｐ ． ； ５ 组（ ８ ７ ６ ． ％对 ５ ． ％）ｐ ． ） ７ ５２ （ ＜００ 。１次输 ２支性控精液组 中， ８ ５ 育成牛群组受精 卵数 、 可用胚 胎比例 都显著 高于成母 牛群组 （０８ ％ ７ ． ％，７８ ％对 ５ ． ％） Ｐ＜００ ） ９ ． 对 ９６ ６ ． ３ ９ ９ ３１ （ ３ ． 。２次人 工授 精 ， ５ 每次输 １支性控精 液组 中， 育成牛群 组受 精 卵及可用胚胎 比例都显著 高于成母牛群组（ ３７ ％ ８ ． ％，９２ ％对 ５ ． ％） Ｐ ．５ 。 ９ ． 对 ７ １ ６． ５ ４ ３ ６３ （ ＜００ ） ０
要量 ２５ｋ ， ． ｇ 在此 基础 上 ， 每产 ２５ｋ 奶加 喂 ｌ ｇ ． ｇ 精 ｋ
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２０ 年 第４ 卷 第 ３ ０８ ４ 期
分离后精子输精对超排奶 牛卵子受精和 胚 胎 质 量 的 影 响
岳奎 忠 ， 罗明久 ， 武浩楠 ， 凡伟 ， 孟 王耀峰 （． １东北农 业大 学生命科技 学学 院 ， 黑龙 江哈 尔滨 １０ ３ ； ５ ００
１１ 试 验 时间 和地 点 ． 乳 业有 限公 司进行 。
试 验 于 ２０ 年 ５月一２ ０ ０３ ０５
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１３ 超数 排卵 方 法 ．
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