实训项目十五内标对比法测定对乙酰氨基酚的含量

实训项目十五内标对比法测定对乙酰氨基酚的含量
一、实验目的
．掌握内标对比法的测定步骤和结果计算方法。

．掌握样品、流动相的处理方法，掌握液相色谱仪维护基本知识。

二、实验原理
内标对比法是内标法的一种，是高效液相色谱法中最常用的定量分析方法之一。

分别配制含有等量内标物的对照品溶液和试样溶液，经分析后，测得上述两溶液中待测组分（）和内标物（）的峰面积，按下式计算试样溶液中待测组分的浓度
试样对照X
对乙酰氨基酚（扑热息痛，）为苯胺类解热镇痛药，是治疗发热、镇痛的首选药物之一。

对乙酰氨基酚稀碱溶液在波长附近有最大吸收，可以用于定量测定。

在其生产过程中，有可能引入对氨基酚等中间体，这些杂质在上述波长处也有紫外吸收，若采用紫外分光光度法测定含量，方法影响因素较多。

为避免杂质干扰，本实验采用内标对比法测定对乙酰氨基酚含量。

三、主要仪器和试剂
. 仪器
高效液相色谱仪；色谱柱（X, m；电子天平；容量瓶；移液管。

．试剂
对乙酰氨基酚对照品：非那西丁对照品；对乙酰氨基酚原料药；甲醇（色谱纯）；重蒸馏水；针头滤器（仏有机系）。

四、操作步骤
．色谱条件
色谱柱：色谱柱（X, m ；流动相：甲醇水（：）；流速：；检测波长：；柱温：室温；进样量：m。

．内标溶液的配制
精密称取非那西丁对照品约, 用适量甲醇溶解后加入容量瓶中,并稀释至刻度,摇匀即得内标溶液。

•对照品溶液的配制
精密称取对乙酰氨基酚对照品约，用适量甲醇溶解后加入容量瓶中，再精密加入内标溶液，用甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取，置容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀即得。

•试样溶液的配制
精密称取对乙酰氨基酚样品约，用适量甲醇溶解后加入容量瓶中，再精密加入内标溶液，用甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取，置容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀即得。

•进样分析
对乙酰氨基酚对照品溶液经卩滤膜滤过。

用微量注射器吸取滤液，过进样W 记录色谱图，重复次。

以同样方法分析试样溶液。

五、数据记录与处理
按下表记录峰面积，按下式计算对乙酰氨基酚的百分含量。

(% ) X
式中对照是对照溶液中组分的量
六、注意事项
•流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水，酸碱液及缓冲液经过滤后使
用，过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围；水相流动相需经常更换(一般不超过天)，防止滋生细菌变质。

.实验中可通过选择适当长度的色谱柱，调整流动相中甲醇和水的比例或流速，使对乙酰氨基酚与内标物的分离度达到定量分析的要求。

.内标对比法是内标校正曲线法的应用。

若已知校正曲线通过原点，并在一定线性范围内，则可用内标对比法测定。

该法只需配制一种与待测组分浓度接近。