实验一 血型鉴定与交叉配血-修改后

下周二（9月27日）第1-2节课进行本实验内容！！！
实验一ABO血型鉴定
【目的】
掌握ABO血型签定的原理和方法。

【原理】
血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。

在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。

A抗原加抗A抗体或B 抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。

血型鉴定是将受试者的红细胞加入抗A抗体与抗B抗体中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。

在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。

【实验对象】
人
【实验器材和药品】
采血针，玻片，牙签，抗A、B标准血清，生理盐水，75%酒精，棉球，碘酒，消毒注射器，小试管，记号笔。

【实验步骤与观察项目】
玻片法
(1) 取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用蜡笔标明A及B，
并分别各滴入抗A、B抗体一滴。

(2) 细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴（1滴约50ul），加入含1ml生理盐
水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。

采血时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。

（挤压→消毒→干棉球→穿刺→取血→制备悬液→消毒）(3) 用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管
与血清相接触（抗体：悬液=1:1）,竹签两头分别混合，搅匀。

(4) 10~30min后观察结果如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮
起。

先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。

(5) 判断血型根据被试者红细胞是否被抗A，B标准血清所凝集，判断其血型2、试管法
首先，用与玻片法相同的方法采血，滴1~2滴血于盛有1 ml生理盐水的小试管中混匀，制成红细胞悬液(体积分数约5%)。

然后取小试管2支，分别标上A、B字样，各加入标准血清与受试者的红细胞悬液l~2滴，混匀后离心1
min(1000r/min)，取出试管后轻弹管底，使沉淀物被弹起，在良好的光线下观察结果，轻弹管底时，若沉淀物成团漂起，表示发生凝集现象；若沉淀物的边缘呈烟雾状逐渐上升，最后试管内液体恢复红细胞悬液状态，则表示无凝集现象。

【注意事项】
1、所用双凹玻片的试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象。

2、红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面，竹签一端去混匀一侧就不能去接触另一侧。

3、试管法较玻片法结果准确，如结果判断有困难时，可借助显微镜观察是否出现凝集。

【思考题】
ABO血型有何临床意义？。