反相色谱名词解释

反相色谱名词解释
反相色谱是根据多次取样、算法复杂的原理，应用分离技术把物质分离成若干种不同的组分，然后对每个组分再分别进行分析测定的方法。

第一级。

反相。

将未知物分别与试样和内标物混合，借助内标物来分离出未知物。

（１）作用：使试样中各组分与内标物具有不同的量，可以使色谱分离成两个组分，并分别进行分析测定。

（２）操作步骤：先在紫外灯下对混合物照射10-15min；再将混合物过滤或压滤；取1-2g滤液放入试管中，向试管中加入1-2μl内标物；最后将各试管在180 ℃温度下烘至恒重。

第二级。

鉴定。

将各试管中的混合物转移到具塞比色管中，加入对照品溶液，混匀后置于荧光灯下，如出现颜色则说明该组分为已知物；否则不是。

第三级。

解离。

用10倍以上的稀释度，在荧光灯下进行定性、定量测定。

常用的方法有柱层析、纸色谱等。

柱层析（１）原理：利用固定相和流动相间能形成氢键、范德华力、静电引力等吸附力，在柱中按一定顺序逐层展开，由于固定相的孔径和厚度的不同，使得各组分在不同时间内先后到达色谱柱中，并在一定的顺序离开固定相，从而实现混合物与样品之间的分离。

（２）适用条件：反相柱：较窄的固定相颗粒尺寸（＜0.5μm），较低的固定相比表面积（ 8-10m2/g），分配平衡时的柱温，较高的柱压（＞0.25MPa）。

（３）基本方法：色谱分离、色谱分离和制备色谱联用等。

纸色谱（１）原理：是一种以薄层的形式铺展在支撑物上的固体吸附剂。

在支持物的表面上通常涂有一种选择性吸附
性强的固定液，它既能有效地吸附各种分子（包括气体），又能有效
地吸附少量的小分子。

（２）适用条件：适用于吸附选择性高、可耐酸碱、干燥程度低、质地疏松的吸附剂。

（１）空心阴树脂柱的构造。

空心阴树脂柱一般采用半径为
0.8-1.2mm的大孔树脂，是树脂分子在空心阴树脂微孔中的运动及被载物分子在树脂中扩散运动所产生的机械作用和热作用下形成的分
子运动达到最佳状态。

（２）特点：由于空心阴树脂柱具有独特的结构和材料，在处理强极性或弱极性有机化合物时，能保持一定的选择性，因此，空心阴树脂柱对化学键合型有机化合物分离尤其适宜。

（３）缺点：导致孔容易堵塞。