沈阳市2013年副溶血弧菌临床分离株的血清分型研究
副溶血性弧菌耐药基因的研究进展

副溶血性弧菌耐药基因的研究进展郑林;祝令伟;郭学军;陈萍【摘要】副溶血性弧菌为水产品主要致病菌之一,水产业和农业中抗生素的过量使用导致副溶血性弧菌对所推荐使用的抗生素产生了抗性,并且在副溶血性弧菌中已经发现了质粒和整合子等基因移动元件,更增加了与其他细菌发生耐药基因相互交换和重组的几率.对副溶血性弧菌的耐药研究现状、耐药机制和耐药基因的水平转移进行综述.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2019(053)006【总页数】6页(P80-85)【关键词】副溶血性弧菌;耐药基因;水平转移【作者】郑林;祝令伟;郭学军;陈萍【作者单位】吉林农业大学食品与工程学院,长春130118;军事医学研究院军事兽医研究所/吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室,长春130122;军事医学研究院军事兽医研究所/吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室,长春130122;军事医学研究院军事兽医研究所/吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室,长春130122;吉林农业大学食品与工程学院,长春130118【正文语种】中文【中图分类】S852.61自从1921年发现青霉素具有抗菌活性后[1],从医药、农牧业到水产业,人们对于抗生素的使用日渐增加。
抗生素的大量使用挽救了无数生命,也促进了农牧业产品的生产,但同时也造成了细菌耐药性的广泛流行。
细菌获得耐药基因之后,还可通过转化、转导和接合等方式将耐药基因传递到其他细菌中,甚至可以在不同种属的细菌中传播,使受体细菌获得更多的耐药性,从而增加了治疗的难度。
水环境是发生耐药基因水平传递的最佳场所,副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是水环境中的主要病原菌,于1950年在日本首次被发现[2]。
该菌的O3K6 血清型曾引起1994年印度加尔各答和1998年美国两次大规模食物中毒事件,最后通过使用抗生素控制了疫情[3-4]。
据美国疾病控制和预防中心(CDC)报道,自2001年以来副溶血性弧菌感染的发生率又开始显著提升[5]。
副溶血弧菌简介

预防控制措施
加强食品卫生管理
对海产品等副溶血弧菌易污染的食品进行严格检验,确保食品新鲜 、无污染。
改善环境卫生
加强海水养殖区、沿海旅游景区的环境卫生管理,减少副溶血弧菌 的传播途径。
个人防护
避免生食海产品,煮熟的食物是预防副溶血弧菌感染的最佳选择。同 时,注意个人卫生,勤洗手,避免与感染者密切接触。
生物学特性
形态与染色
生理生化特性
副溶血弧菌呈杆状或弧状,革兰氏染 色阴性。
副溶血弧菌具有趋化性,能够产生多 种酶和毒素。
培养特性
副溶血弧菌需在特定培养基上进行培 养,如TTC培养基。
分布与栖息环境
分布
副溶血弧菌广泛分布于海洋环境中, 尤其是沿海地区。
栖息环境
副溶血弧菌主要栖息在海洋动物体内 ,如贝类、鱼类等。同时,在海洋植 物表面、海底沉积物以及海水中也能 检测到副溶血弧菌的存在。
疫苗与药物研究
针对副溶血弧菌的致病机制,开展了疫苗和药物的研究,取得了 一定的成果。
未来研究方向预测
跨种属感染研究
副溶血弧菌不仅感染人类,还可感染其他动物,未来需要深入研究 其跨种属感染的机制。
耐药性研究
随着抗生素的广泛使用,副溶血弧菌的耐药性逐渐增强,需要加强 耐药性的研究,为临床治疗提供指导。
现代分子生物学技术应用
基因组学研究
通过对副溶血弧菌基因组的研究,发现了一些可用于检测的基因 片段。
实时荧光定量PCR
利用荧光定量PCR技术,针对副溶血弧菌的特异性基因片段进行检 测,可实现快速、准确的检测。
生物传感器技术
通过将副溶血弧菌的特异性抗体或基因片段固定在传感器上,实现 对副溶血弧菌的快速检测。
人群特点
副溶血弧菌基因分型和检测的研究进展

鞭 毛的基 因位点 R I 分析 (ll u R L 分 析 )肠杆菌科 FP F cs F P ao ,
基 因 间重 复 序列 为 引 物 的 聚合 酶 链 式 反 应 ( neoat a E t bc f l r e i
断方 法以其敏感性高 、 特异性 强 、 型率和分辨率 佳的优点 , 分
逐渐取代传统 的表型分型技术 ,在微生物 的分型与诊断 中发 挥 巨大 的作用 。本文就近年来 国内外在副溶血弧菌的基因分 型与检测方法上的研究作一综述。
D A分析(ad ma l e o m rh N R P , N rn o mpi dp l op i D A, A D)运用 随 i f y e
7 9 , 4 ,5 l ,1 %和 2 .5% ,3 C 、 lB 、 2和 . % 9 % 4. % 6 7 7 . 7 8 . 1 7 C 、 5 E 、 1D
1 基因分 型的研 究进 展
基因分型有利于追踪副溶血弧菌病流行的病原 ,以及进
一
步 了解水域 中微生物生态状况 ,特别是 由于传统的血清分 型、 表型分型技术在流行病学调 查中的局限性 越来 越明显, 基
A 2亚型是主要 的图谱型 。
1 限制性片断长度 多态性分析 ( . P R L . 3 RF ) F P是 D A分 L N 子水平上 的多态性检测技 术 ,其通过特定 的探针杂交检测 不 同品种 ( 个体 ) 因组 的限制性 内切 酶的酶切位 点碱基 突变 , 基
或 酶切位点之 问由于发生 了碱 基的插人 、缺失而导致酶 切片
副溶血性弧菌的快速检测技术

3、多重PCR
结果显示,所有的V.p都扩增出tl基因,tl 基因是V.p特异的;54%的V.p扩增出tdh基因; 只有38.73%的V.p扩增出trh基因;该法灵敏度 38.73 V.p trh ; 高,能把10g牡蛎培养肉汤里10~100个V.p 检测出来。与其他常规生化方法相比,多重 PCR更快速,仅8h就能完成检测,结果更为准 确、可靠,而且还可改进成定量竞争PCR,对 标本中靶序列进行定量。
3、多重PCR
由于不是全部副溶血性弧菌都含有tdh基因 或trh基因,所以只针对tdh或trh的单一PCR, 有时会漏检。多重PCR(multiplex-PCR)能全 PCR(multiplex-PCR) 方位高效率地检测V.p。 Bej白等针对tl、tdh、trh设计不同的引物 对,在同一PCR反应体系内同时扩增tl、tdh、 trh。
总结
与传统方法相比较,PCR法更加快速、 灵敏,基本满足了快速检测的要求,但是其 技术含量较高,试剂费用都比较高,而且一 般检测时间也还是要6-8小时左右,离即时 检测的要求还有一定距离,随着分子生物学 和科技水平的不断提高,更加准确、可靠、 方便、快速、经济、安全的检测方法将是食 品安全检测的发展方向。
参考文献
• [1] 张凡非. 副溶血性弧菌及其引起的食物中毒研究进展. 中国 卫生监督杂志, 2003, 10 (1) : 8 -10. • [2] 中华人民共和国卫生部, 中国国家标准化管理委员会. GB/T4789.7—2008. 食品卫生微生物学检验副溶血性弧菌检验. 北京: 中国标准出版社, 2008. • [3] 刘秀梅, 陈艳, 王晓英, 等. 1992-2001年食源性疾病爆发资料 分析-国家食源性疾病监测网. 卫生研究, 2004, 33 ( 6) : 725 727. • [4] 朱雪兰,陈艳. 副溶血性弧菌溶血素基因及其检测的研究进 展. 国外医学卫生学分册, 2007, 34 (4) :233-237. • [5] 程苏云,张俊彦,王赞信, 等. 海水产品副溶血性弧菌污染定 量检测分析. 中国卫生检验杂志, 2007, 17 (2) :336-338.
副溶血性弧菌致病性和检测方法研究

doi :10.3969/j.issn.1002-7386.2022.22.034·综述与讲座·副溶血性弧菌致病性和检测方法研究进展陈媛媛 王亚男 刘士朋项目来源:河北省医学研究重点课题(编号:20211149)作者单位:100029 北京市,中日友好医院(陈媛媛);河北省宁晋县医院(王亚男);河北医科大学公共卫生学院环境与人群健康重点实验室(刘士朋)通讯作者:刘士朋 E⁃mail:17100880@ 【摘要】 本文对副溶血性弧菌的生物学性状、致病性特点、污染食品规律、食物中毒事件、检测标准等进行综述,重点介绍了溶血毒素和检测方法,提出预防副溶血性弧菌食物中毒5要点和关键措施,以期更好地预防副溶血性弧菌食物中毒的发生。
【关键词】 副溶血性弧菌;食物中毒;耐热性溶血毒素;耐热性溶血毒素相关溶血毒素;检测标准【中图分类号】 R 378.3 【文献标识码】 A 【文章编号】 1002-7386(2022)22-3491-05Study on pathogenicity and detection method of Vibrio parahaemolyticus CHEN Yuanyuan ∗,WANG Yanan ,LIU Shipeng.∗China⁃Japan Friendship Hospital ,Beijing 100029,China【Abstract 】 This article systematically reviews related aspects in Vibrio parahaemolyticus (VP ),including biological characteristics ,pathogenic characteristics ,contaminated food conditions ,food Posisoning incidents detection standard ,etc.,focusing on hemolytic toxins and detection methods.Five key points for preventing VP⁃related food poisoning and treatment measures are proposed aiming to to better prevent the occurrence.【Key words 】 vibrio parahaemolyticus ;food poisoning ;thermostable direct hemolysin ;thermostable related hemolysin ;testing standards 副溶血性弧菌(vibrio parahaemolyticus)是一种常见的病原菌,主要栖息在海水中,存在于近海海水、海产品及盐渍食品中。
不同副溶血弧菌的分子鉴别与生长动力学模型比较

文章编号:1002-2694(2008)03-0210-06不同副溶血弧菌的分子鉴别与生长动力学模型比较3杨振泉,焦新安摘 要:目的 探讨不同分子亚型副溶血弧菌(V ibr io pa r ahaemolytic u s ,V p)的生长动力学特征,为建立海产品中V p 预测模型提供数据。
方法 应用PCR 和RAPD 方法对5株不同来源的V p 分离株进行了分子鉴别,并对不同菌株在适宜温度(37℃)和低温(15℃)下生长变化进行了测定,采用修正的G omper tz 方程拟合细菌的生长曲线,求出不同菌株的生长动力学参数并建立预测模型。
结果 4株食物中毒样品来源的V p 菌株基因型均为tl +tdh +tr h 2toxR +,1株海产品分离株为tl +t dh 2tr h 2toxR +,筛选的随机引物P21可以将5株不同来源的V p 菌株分成5个不同的分子亚型,不同菌株37℃的世代时间在0.210~0.238h 之间,延滞时间在1.705~1.849h 之间,生长曲线没有显著差异(R 2>0.995),应用预测模型求得各菌株的预测值与实测值均方根偏差在0.110~0.452之间;而在15℃条件下测得不同V p 菌株世代时间在0.727~1.062h 之间,延滞时间在10467~12552h 之间,生长曲线具有较大的变异性(R 2>0.938),其中菌株V P06003和VP06127的预测值与实测值之间均方根偏差分别为1.425和1.318。
结论 不同分子亚型的V p 菌株具有不同的低温适应能力,在15℃下的生长动力学参数存在差异性,对预测模型的可信度具有一定的影响。
关键词:副溶血弧菌;分子鉴别;生长动力学模型;预测模型 中图分类号:R378.3 文献标识码:A Molecular chara cter iza tion and micr obi a l gr ow th kinetics modelof Vi br io p a ra haemol yticus isola tes fr om dif fer ent sour cesY AN G Zhen 2quan ,J IAO Xin 2an(J ia ngsu Key L ab of Zoono sis ,Yangz hou University ,Ya ngzhou 225009,China )ABSTRACT:To c haracte rize growth kinetic s model of diffe rent subtypes of Vibri o pa ra haemol yticus and to provide usef ul data fo r developing risk asse ssment of V.pa ra haemol yticus in seafood ,PCR and RAPD techniques were applied to molecular characterization of 5strains of V.pa ra haemol yticus isola ted f rom differ ent s o urce s and the growt h of bacte rial a t 37℃and 15℃we re analyzed.G rowth curve s were f itte d using modified G ompertz equation a nd kinetic para mete rs of diff ere nt st rains and predictive model we re develope d with nonlinear estimation equations.The results showed that 4strains of V.pa r ahaemolytic u s f rom foo d poisonous accident sample s ha d genotype of tl +tdh +tr h 2tox R +,however ,one isola te f rom sea products was tl +t dh 2tr h 2toxR +.An efficient random primer na med P21wa s selecte d to divide the se strains into f ive subtypes.G rowth curves at 37℃had no significa nt diff ere nce a mong the five subtypes of strains ,but when grown at 15℃,generation time and lag time of 5st rains ranged from 0.727h to 1.062h a nd 10.467h to 12.552h ,respectively ,suggesting t hat diff erent V.pa r ahaemolytic u s st rains ha d diff erent cold a daptive ability.Pre dicitive model based on growt h kinetic para mete rs of VP05166wa s developed and t he predicted val ue could agr ee with obse rved value well at 37℃(RM SE <0.5),but dif fere nce betwee n p redicte d value and ob 2serve d value of VP06003a nd V P06127a t 15℃were significant (RMSE >1).These r esults implicated t hat information on growt h character s varia tio n of V.pa ra hae mol yticus st rains were needed to improve reliability of ri sk a ssessme nt of V.pa r ah 2aemolyticus in sea product s. KE Y W O RDS :V ibrio pa r ahaemolyticus ;molecular c haracte rization ;growth kinetic s model ;predictive model 3国家杰出青年科学基金资助项目(353) 通讯作者焦新安,j @yz 作者单位江苏省人兽共患病学重点实验室,扬州大学,扬州 5 副溶血弧菌(V ib rio p a ra haemol yt icus ,V p )是一种革兰氏阴性嗜盐细菌,主要分布于沿岸海水、海河交界处以及鱼类和贝类等海产品中。
副溶血性弧菌分子检测与分型研究进展

副溶血性弧菌分子检测与分型研究进展摘要副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性嗜盐菌,常通过食用被该菌污染的食品导致食物中毒。
该文综述了副溶血性弧菌的分子检测技术如PCR、环介导等温扩增、免疫捕获等,及分型技术如RAPD-PCR、ERIC-PCR、PFGE、核糖体分型、RFLP等,这些方法将为副溶血性弧菌食物中毒提供重要的检测与分型手段,对预防与控制副溶血性弧菌食物中毒具有重要意义。
关键词副溶血性弧菌;检测;分型方法副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)是重要的食源性嗜盐致病菌,可因食用被其污染的食品而引起中毒。
多见于日本、东南亚、美国及中国台北地区。
近年来,在我国浙江、上海、广东、福建等沿海地区各种食源性病原菌中副溶血性弧菌所占比重不断上升,已成为细菌性食源性致病菌的首位。
副溶血弧菌的检测与分型技术对预防和控制该菌食物中毒具有重要意义,该文综述近年来副溶血弧菌的分子检测与分型应用进展,以供参考。
1 副溶血弧菌的分子检测技术1.1 基于特异性毒力基因检测翁仕强等[1]采用自行设计的改良初筛方案结合tlh、toxR 2种特异性基因的2次筛选开发了一种副溶血性弧菌的快速分离鉴定方法,并通过16S rRNA 基因测序进行特异性验证。
Venkateswaran et al[2]克隆gyrB基因并测序,在分析序列的基础上建立了基于gyrB检测副溶血性弧菌的分子检测技术。
周燕等[3]利用tlh基因建立海产品中副溶血性弧菌的分子检测技术。
该方法特异性强,灵敏度高,实验样品摇床增菌3 h,结合PCR检测,8 h可以获得样品的检测结果。
张红芝等[4]建立了添加内标(IC)的PCR副溶血性弧菌分子检测技术,该方法对DNA灵敏度的检测极限是0.5 pg/μL,此时IC的最佳添加浓度是0.5 fg/μL。
对多份水产品的检测结果也证实该方法能起到很好的指示假阴性作用。
俞春松[5]选取副溶血性弧菌不耐热溶血毒素基因作为检测的靶片段设计引物及探针,通过体系优化建立检测副溶血性弧菌的荧光定量PCR检测方法,该方法具有较好的特异性、灵敏度、重复性,并对临床收集的样本进行检测。
副溶血性弧菌的特征、分布及其致病风险评估研究概述

副溶血性弧菌的特征、分布及其致病风险评估研究概述作者:宫春波张良华陶文靖来源:《食品安全导刊》2019年第08期本文对副溶血性弧菌的个体形态、群体形态、生物学特征、食品中的分布情况及其快速检测方法进行了阐述。
同时,介绍了食品中副溶血性弧菌的致病因子,并阐述了致病风险的评估步骤,以期推进食品中副溶血性弧菌致病风险的预测,并对风险预警、风险交流以及防控措施的制定有所帮助。
副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,简称“VP”)是细菌性食源性疾病的主要致病菌之一,其为嗜盐性细菌,主要侵染海产品和盐含量较高的食品。
有研究表明,近年来淡水产品中VP的检出率呈现上升趋势,并表现出多物种、多环节以及季节性的高污染特征。
目前,VP已成为沿海国家和地区急性胃肠炎的重要病原菌之一。
在我国,副溶血性弧菌引起的食物中毒已高居微生物性食物中毒的第二位。
从食品类别来看,动物性水产品中VP的检出率一直维持在较高水平,并呈上升趋势——已连续多年成为我国主要的食源性水产品致病菌。
与此同时,引起副溶血性弧菌食物中毒的食物载体也由传统的海产品转向诸如咸菜、咸鸭蛋等多类别食品。
食用被VP污染的全生或半生以及未充分煮熟的食品是导致该菌食源性疾病暴发的主要因素。
VP的潜伏期为8~40h,最高可达96h,典型的临床症状是腹泻(水样便或血样便)、上腹部痉挛、恶心呕吐、发热等。
1 VP的生物学特征副溶血性弧菌个体形态多样,呈现棒状、弧状、卵圆状,G-,无芽孢,兼性厌氧,嗜盐、不耐热,50℃加热20min、65℃加热5min或80℃加热1min即可杀死该菌。
VP的生长温区为10~44℃,最适生长温度为30~35℃;生长pH值范围为4.8~11.0,最适生长pH值为7.6~8.6。
该菌能够在1%~8%的NaCl环境中存活,在低NaCl或无NaCl环境中停止生长或死亡。
但研究表明,淡水产品中VP污染率呈逐年上升趋势,为4.7%~41.4%。
副溶血弧菌海产品相关分离株tdh基因分布及其在应激条件下的表达的开题报告

副溶血弧菌海产品相关分离株tdh基因分布及其在应激条
件下的表达的开题报告
这个开题报告的主题是关于副溶血弧菌在海产品中的分离以及其相关基因在应激条件下的表达的研究。
以下是该报告的具体内容:
1. 研究背景和意义
副溶血弧菌是一种常见的海产品病原菌,可以引起人类和动物的疾病。
其主要致病因子为TDH和TRH两种毒素。
因此,对副溶血弧菌的分离和毒素基因在应激条件下的表达进行研究,可以更好地了解其致病机制和控制方法,对保障海产品安全具有重要意义。
2. 研究目的
本研究旨在对海产品中的副溶血弧菌进行分离,并确定其tdh基因的分布情况。
同时,通过模拟不同的应激条件,研究tdh基因在不同应激条件下的表达情况,探讨其致病机制。
3. 研究方法
(1)样品采集和处理:采集不同类型的海产品样品,如虾、蟹、贝等,进行分离纯化副溶血弧菌。
(2)分子生物学方法:通过PCR扩增和测序技术,检测含有tdh基因的副溶血弧菌,并确定其基因型和分布情况。
(3)表达分析:利用qRT-PCR技术,研究tdh基因在不同温度、pH值、盐度等应激条件下的表达情况。
4. 预期结果
本研究预计能够分离大量的副溶血弧菌并确定其tdh基因的分布情况。
同时,通过应激条件下的表达分析,可以更好地了解tdh基因的功能及其在副溶血弧菌致病机制中的作用。
5. 研究意义
本研究的结果不仅可以为副溶血弧菌的预防和控制提供科学依据,还可以为保障海产品安全,维护公共卫生做出贡献。
不同基因型变异链球菌临床分离株的分离和鉴定

不同基因型变异链球菌临床分离株的分离和鉴定[摘要] 目的分离鉴定变异链球菌临床分离株。
方法收集高龋患者和无龋健康人口腔中牙菌斑标本进行厌氧培养,通过细菌形态学观察、生物化学鉴定、自动微生物分析系统分析、聚合酶链反应(pcr)扩增变异链球菌基因的特异性片段表面蛋白抗原ⅰ/ⅱ(spap)、葡糖基转移酶b(gtfb)和葡聚糖酶(dexa)以及基因分型等方法对获得的变异链球菌临床分离株进行鉴定。
结果从32例临床受试者口腔中分离获得46株变异链球菌临床分离株,经生物化学,自动微生物分析系统,变异链球菌的特异性基因spap、gtfb 和dexa的pcr扩增均鉴定为变异链球菌,基因分型发现其中5株临床分离株的基因型与其他菌株相同。
结论获得41株不同基因型变异链球菌临床分离株。
[关键词] 变异链球菌;基因型;分离;鉴定[中图分类号] r 780.2 [文献标志码] a [doi]10.7518/hxkq.2013.01.020 变异链球菌(streptococcus mutans)是人类口腔中最主要的致龋菌[1]。
变异链球菌群中各菌种的分离与鉴定是进行龋病研究的基础。
细菌菌种的鉴定方式经历了由传统的表型、血清型方法到以分子生物学为基础的基因型方法的转变。
本文采用形态学、生物化学、自动微生物分析系统、扩增变异链球菌基因的特异性片段区域以及基因分型等方法对获得的变异链球菌临床分离株进行鉴定,为龋病临床和基础研究提供材料。
1 材料和方法1.1 实验菌株变异链球菌国际参考株ingbritt(首都医科大学附属北京口腔医院口腔医学研究所提供),金黄色葡萄球菌临床分离株188号(军事医学科学院基础医学研究所生物化学与分子生物学研究室提供)。
1.2 病例选择纳入标准:高龋患者,龋失补牙(decayed-mis-sing-filled-tooth,dmft)指数≥6;无龋健康人,dmft指数=0。
排除标准:饮食结构异常,有嗜甜食(饮)及睡前进餐等不良饮食习惯者;接受放疗和化疗的患者;舍格伦综合征患者;严重全身系统性疾病者;近3个月内服用抗生素者;接受正畸治疗者;口腔卫生状况不良者;牙齿结构异常者;涉及取样的牙体有牙髓病变、根面暴露或根面龋、未控制的牙周病变、冠或固定桥等修复体者。
副溶血性弧菌的耐药状况及耐药机制研究进展

存在 的一 种人 畜共 患病原 菌 , 既能 引起 水生动 物疾 病 的发 生 , 给水产 养殖 业 带来 巨大 损 失 l 】 J , 同时 也 是 人 类食 源性 疾 病 最 重 要 的病 原 之 一 , 能引起急 性肠 胃
有些甚至达到 1 0 0 %耐药率, 对较早使用的抗生素如
副溶血性弧茵 的耐药状况
副溶血性弧菌在水产品中的检出率很高 , 尤其在
收 稿 日期 : 2 0 1 3— 0 8— 0 7 ; 接收 日期 : 2 0 1 3—1 0—1 0
第1 代和第 2 代 头孢类也 高度耐受 J 。这些药物
原, 因此 , 对其 耐 药 状 况 的分 析 报 道 也较 多 。本 文综 合分 析 了 国内外关 于副 溶 血性 弧菌 耐 药 性 的 研 究报 道, 部分 菌株 的耐 药概 况见 表 1 。从 已有 的耐 药 性分 析 结果来 看 , 副 溶 血 性 弧 菌对 一内 酰胺 类 、 氨 基糖 苷类 、 磺 胺类 、 喹诺 酮类 、 四环素 类和 氯霉 素类 等抗 生 素 具有 不 同程度 的 耐 受作 用 , 耐 药 谱 与分 离 地 区 、 分 离 品种 、 养殖 环境 和养 殖模 式 等相关 。每个 国家或 地 区 的养 殖模 式一 般不 同 , 病 害 发生频 率及 用药 品种 和 用 药程 度都 会不 同 , 导致 不 同 国家 或地 区分 离 的菌株 耐药性 会有 差 异 。D e v i 等 对从 养 殖 对 虾及 其 养 殖
在水产养殖过程 中极少使用 , 说 明这些抗生素的耐药
基 因在 环境 中已经普 遍存 在 。值得 注意 的是 , 虽然 氯
江艳 华, 姚琳 , 李风铃 , 翟毓 秀 , 王联 珠
一起不同血清型食物中毒副溶血性弧菌毒力基因检测

1 方 法 _ 3
1 . 镜 检 ,生 化试 验 ,副溶 血性 弧 菌 实 时荧 光 .1 3 P R检 测 从 营 养 平 板 挑 取 单 菌 落 进 行 革 兰 氏染 C 色 ,镜 检 ,并按 产 品说 明书用 A I 0 所有 分离 P E对 2 株 进 行 生 化 试 验 。 实 时荧 光 P R检 测 副 溶 血 性 弧 C
全 清 楚 。研 究 表 明 V P的毒 力 基 因 是耐 热 直 接 溶血 素 基 因 ( em s bedrc hm ls th和 耐 热 直 t r ot l i t e oyi d) h a e n,
11 菌 株 来 源 .
某 起 食 物 中毒 副 溶 血 性 弧 菌 分 离
株共 6 ,其 中腹 泻病人肛拭分离株 3 ,剩余食 株 株 品 3 ,分别分离 自鸭肉、卤鸡翅 、莲藕。 株 1 主要试剂 和设备 . 2 各类培养基购 自北京 陆桥
是 一 种 存 在 于 海 产 品 中 的 革 兰 氏 阴 性 嗜 盐 性 细 菌 ,人 类 被 感 染 后 会 引 起 胃肠 炎 、伤 口感 染 和 败 血 症 等 病 症 。据 报 道 在 我 国沿 海 地 区 近年 来 引 起 细菌 性 食 物 中毒 的致病 菌 主要 为 副溶 血 性 弧菌 n ,
D e e ton of viul nce tci r e ge a s r ypi ne nd e ot ng o i i pa a e ol tc i o a e f V br o r ha m y i us s l t d f om one ood r f
poioni s ng UANG h,T H Ya ANG he z ,WANG n ,e 1 Z n- hu Ho g ta .Gu n x a g iZhu n Au o o u gin Ce e o a g tn mo s Re o ntrf r Die s r e i n a nto , Cn n s a eP ev nt nd Co r l ?a nig53 0 , hi a o 0 28 C n
副溶血性弧菌分离鉴定

副溶血性弧菌分离鉴定杨松【摘要】The isolation and identification of Vibrio parahaemolyticus from seafood was studied by several methods,including bacterial morphological observation,halophilic test,cytochrome oxidase test.indole test,lysine decarboxylase test,arginine digydrolase hydrolysis, Voge-Proskauer test and sucrose fermentation. Result showed that bacterium from seafood was identified as Vibrio parahaemolyticus.%利用TCBS琼脂培养基和科玛嘉弧菌显色培养基对细菌进行分离,采用糖分解试验、氧化酶试验、IMVi试验等生化试验鉴定海产品中副溶血性弧菌,为防治疾病提供依据.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2011(038)008【总页数】3页(P233-235)【关键词】副溶血性弧菌;分离;鉴定【作者】杨松【作者单位】辽宁医学院,辽宁锦州 121001【正文语种】中文【中图分类】S852.61副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)属于弧菌科,弧菌属,是具有嗜盐性的细菌。
1950年从日本一次暴发性食物中毒中分离发现(周正任,2006),该菌常存在于近海岸的海水、海底沉积物、海产品及盐渍食品中,主要引起食物中毒和急性腹泻,尤以日本、东南亚、美国及中国台北地区多见,也是中国大陆沿海地区食物中毒中最常见的致病菌。
夏季海产品的平均带菌率高达94.8%(宁喜斌等,2008)。
此外,被本菌污染的腌菜也能引起食物中毒。
一株副溶血性弧菌鉴定结果分析

一株副溶血性弧菌鉴定结果分析为提高检验工作质量,提高检验人员素质,促进实验室规范管理,我所近几年连续四次参加了铁道部铁科院环控劳卫所全路疾控所实验室安全质量控制考核。
今年共进行了五株盲样的考核,其中一株我们鉴定为副溶血性弧菌,现将此菌的鉴定结果报告如下:1材料与方法1.1材料由铁道部铁科院环控劳卫所下发考核菌株。
1.2检测依据GB/T4789——2003《食品微生物学检验》中华人民共和国国家标准[2003——08——11发布]。
1.3试剂由宁波天润购于宁波天润生物药业有限公司及北京陆桥医学生物技术中心生产,有效期内使用。
1.4检验方法1.4.1增菌无菌操作打开菌种管,向其内用无菌注射器加入0.2ml的营养肉汤,混匀,吸取0.1ml细菌混匀液加入10ml营养肉汤管内混合均匀,于37℃6h培养。
1.4.2菌种分离及鉴定取上述肉汤增菌液各一环,分别接种于CIN-I琼脂平板、EMB琼脂平板、HE琼脂平板、SS平板、麦康凯平板、TCBS平板、血平板、营养琼脂平板、李斯特氏菌显1/ 3色培养基平板各两个,分别置37℃、26℃,18-24h培养;观察菌落形态特征,挑取TCBS平板上典型菌落接种于3.5%三糖铁上琼脂斜面上于37℃24h培养;取挑取TCBS平板上典型菌落涂片做革兰氏染色镜检,取3.5%三糖铁上琼脂斜面培养物做嗜盐性试验并接种副溶血性弧菌生化套装一套,取营养琼脂平板上菌落做氧化酶试验。
2结果2.1革兰氏染色镜检为革兰氏阴性,无芽孢,呈卵圆形;菌落形态:在TCBS平板上生长出圆形、半透明表面光滑的绿色菌落。
在营养琼脂上生长出圆形、光滑湿润、无色半透明的菌落;在血平板上生长出灰白色,湿润、表面光滑、无溶血的圆形菌落。
2.2嗜盐性试验结果,见下表:2.3生化试验3.5%三糖铁琼脂斜面结果:斜面(K),底层(A),产气(-),H2S;(-);氧化酶试验阳性,见下表:副溶血性弧菌生化套装结果依据细菌的染色形态,在鉴别培养基上生长特征,嗜盐性试验及生化试验结果,综合判断此菌为弧菌科、弧菌属、副溶血性弧菌。
一起食物中毒副溶血性弧菌血清及PFGE分型

9
文章编号 :1 6 7 3—7 8 5 x ( 2 o 1 3 ) o l一0 0 0 9—0 4
中图分 类号 :R 3 7 8 . 3
文献标识码 :A
一
起食物 中毒副溶血性弧菌血清及 P F GE 分 型
Pr e v e nt i o n. Na n n i n g ̄ o o 2 8 ,Chi n a
【 Ab s t r a c t 】0b j e c t i v e T o S t u d y s e r o t y p e s , v i r u l e n c e g e n e a n d mo l e c u l a r t y p i n g o f V i b r i o p a r a h a e mo l y t i c u s
Y a n ,WA N G Ho n g , S U N G u i - j u a n , e t a 1 . G u a n g x i Z h u a n g AH t o n o Mo u 8 R e g i o n C e n t e r f o r D i s e a s e C o n t r o l a n d
黄
彦 ,王 红 ,孙贵娟 ,李薇薇 ,李秀桂 ,苏爱荣 ,诸 葛石养 。 ,吕素玲
1 广 西壮族 自治区疾病预 防控 制中心 ( 南宁 5 3 0 0 2 8 ) 2中国疾病预防控制 中心 营养与食品安全所 ( 北京 1 0 0 0 2 1 ) 【 摘 要】 目的 探 讨 广 西 一起 食 物 中 毒患 者 副溶 血 性 弧 菌 分离 株 的血 清 型 ,毒力 基 因及 脉 冲场凝 胶 电泳 复苏 保存 的 6 株 副溶血 性弧 菌,分 别用 O抗 原 和 K抗 原诊 断血清进 行分 型 ,提 取
食品中副溶血性弧菌的检验

食品中副溶血性弧菌的检验
一、概况 媒介食品 副溶广泛存在于海岸和海水中,海生动
植物常会受到污染而带菌。海鱼、虾、蟹、蛤等海 产品带菌率极高;被海水污染的食物、某些地区的 淡水产品如鲫鱼、鲤鱼等及被污染其他含盐量较高 的食物如咸菜、咸肉、咸蛋亦可带菌,也可因受到 污染而引起中毒。带用少量该菌的食物,在适宜的 温度下,经3~4小时细菌可急剧增加至中毒数量。 进食肉类或蔬菜而致病者,多因食物容器或砧板污 染所引起。
无粘性,(绿)兰色,直径2—4mm 嗜盐选择性平板:直径2.5mm,圆整或不
齐,隆起混浊,无粘性,无色,湿润。 4、选择性培养
取上述可疑菌落接种于3.5% Nacl-TSI 培养37℃ 24小时 5、镜检:取上述可疑菌落镜检,应为革兰氏 阴性,无芽胞多形态,两端浓染。
食品中副溶血性弧菌的检验
副溶血性弧菌在海博 弧菌显色培养基上典 型特征。典型 副溶
7、生化试验
• 分别接种各类生化培养基,置37 ℃恒温培 养。除V-P、靛基质、甲基红试验培养48小 时后加试剂观察外,其他均可在24小时观 察。试验结果判定参照下表。
食品中副溶血性弧菌的检验
生化特性
葡萄糖产 酸 葡萄糖产 气 蔗糖 乳糖 甘露醇 硫化氢 甲基红
7、生化试验
副溶血性弧菌的生化性状表
血性弧菌显蓝色至蓝 绿色 , 霍乱弧菌和 其它弧菌显无色。
副溶血弧菌在蔗糖琼脂(tcbs)平 板上的菌落
食品中副溶血性弧菌的检验
6、嗜盐性试验
将可疑培养物接种于不同盐浓度的盐胨水 中,37℃ 24小时,观查生长情况。盐含量 0、3、7、9、11% , 在3-7 %生长良好。
0 3 7 9 11
食品中副溶血性弧菌的检验
生研肠炎弧菌(副溶血弧菌)型别鉴定用血清使用说明书译文

肠炎弧菌(副溶血弧菌)型别鉴定用血清使用说明书一、使用说明1、请勿以体外诊断试验以外的目的使用本品。
2、请综合其他有关的检查结果和临床症状做出诊断。
3、如果不按照该说明书的方法进行操作,将无法保证结果的可靠性。
4、因为本品有添加叠氮化钠作为保存剂,如果不慎误服或沾染到皮肤或眼内,请立即使用大量流水冲洗,必要时请就医。
二、本品性状、构成1、单品:1)K型血清(1)混合血清有混合血清单品Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ共9种,含有肠炎弧菌型别鉴定血清各2ml,含有针对肠炎弧菌K抗原的免疫球蛋白,检出的对象为以下血清型。
保存剂为质量浓度0.08%的叠氮化钠。
检出对象:混合血清Ⅰ:K1、K3、K4、K5、K6、K7、K8混合血清Ⅱ:K9、K10、K11、K12、K13、K15、K17混合血清Ⅲ:K18、K19、K20、K21、K22、K23、K24混合血清Ⅳ:K25、K26、K28、K29、K30、K31、K32混合血清Ⅴ:K33、K34、K36、K37、K38、K39、K40混合血清Ⅵ:K41、K42、K43、K44、K45、K46、K47混合血清Ⅶ:K48、K49、K50、K51、K52、K53、K54混合血清Ⅷ:K55、K56、K57、K58、K59、K60、K61混合血清Ⅸ:K63、K64、K65、K66、K67、K68、K69(2)单一血清有单一血清单品:K1、K3、K4、K5、K6、K7、K8、K9、K10、K11、K12、K13、K15、K17、K18、K19、K20、K21、K22、K23、K24、K25、K26、K28、K29、K30、K31、K32、K33、K34、K36、K37、K38、K39、K40、K41、K42、K43、K44、K45、K46、K47、K48、K49、K50、K51、K52、K53、K54、K55、K56、K57、K58、K59、K60、K61、K63、K64、K65、K66、K67、K68、K69、K70、K71共65种,含有肠炎弧菌型别鉴定血清2ml,含有针对肠炎弧菌K抗原的免疫球蛋白,检出对象为瓶身标签标识。
副溶血弧菌TDH蛋白高效表达、免疫原性分析及初步应用

副溶血弧菌TDH蛋白高效表达、免疫原性分析及初步应用李欣彤;陈永军;刘迎春;白雪瑞;王少辉;韩先干;刘永杰;王权;蒋蔚【摘要】副溶血弧菌是引起细菌性食物中毒的主要食源性致病菌,耐热直接溶血毒素(theromostable direct hemolysin,TDH)是其公认的主要致病因子.本研究根据已发表基因序列(GenBank登录号:M10069)设计引物,以副溶血弧茵SHJLA株基因组DNA为模板,扩增编码TDH蛋白的基因,克隆至表达质粒pET28a(+)中,重组质粒经限制性酶切鉴定后测序,结果表明插入片段长度为576 bp.重组原核表达质粒pET28a-tdh转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经诱导可表达分子量约为27 kDa 的融合蛋白,主要以包涵体形式表达.对包涵体进行复性,Western blot分析表明经过复性后的重组蛋白能够被感染副溶血弧菌SHJLA株的小鼠血清识别.重组蛋白免疫家兔,ELISA检测多抗血清效价在1:256 000以上.将该多抗初步应用于斑点-ELISA(Dot-ELISA)方法的建立,TDH阳性的致病性副溶血弧菌检测到阳性斑点,而TDH阴性的副溶血弧菌及其他细菌未检测到特异性斑点.本研究可为深入研究TDH 的蛋白功能,建立致病性副溶血弧菌免疫学快速诊断方法以及保护性疫苗的研制提供研究基础.【期刊名称】《中国动物传染病学报》【年(卷),期】2015(023)006【总页数】7页(P56-62)【关键词】副溶血弧菌;直接溶血素;蛋白表达;斑点-ELISA【作者】李欣彤;陈永军;刘迎春;白雪瑞;王少辉;韩先干;刘永杰;王权;蒋蔚【作者单位】中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京210095;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京210095;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京210095;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241【正文语种】中文【中图分类】S852.616副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种革兰氏阴性嗜盐菌,普遍存在于河口、海洋和沿海环境,夏季和春季是该菌引起食物中毒的高发季节,可引起人严重的急性胃肠炎、败血症和伤口感染[1-3]。
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S h e n y a n g i n 2 0 1 3
L I U Na DO NG Xu e L I J i y a o Z HANG G u o b i n G A0 Da n L IXi n S h e n y a n g C e n t e r f o r D i s e a s e Co mr o I a n d P r e v e n t i o n , S h e n y a n g , L i a o n i n g P r o v i n c e ,1 1 0 0 3 1 C h i n a
论 著
C h i n e & F o r e i g n M e d — i c a l T r e a t m e n t 口固 — — ■ ■ 警 | _
沈 阳市 2 0 1 3 年 副溶血弧菌 临床分离株 的血清 分型 研究 0 3 1 李 欣 沈 阳市疾病 预防控制中心 , 辽宁沈 阳
s e r o t y p e s , o f w h i c h , t h e p r e d o m i n a n t s e mt y p e w a s O 3 : K 6( 3 2 . 8 4 %) . C o n c l u s i o n T h e s e r o t y p e s o f V i b r i o p a r a h a e m o l y t i c u s i s o l a t e d
c l i n i c a l l y f o r f o o d - b o r n e mo n i t o r i n g i n S h e n y a n g i n 2 0 1 3 s h o we d h i g h d i v e r s i t y , a n d t h e p r e d o mi n a n t s e r o t y p e 03 : K6 c o u l d c a u s e
Me t h o d s 2 5 0 c l i n i c a l c a s e s wi t h f o o d - b o r n e mo n i t o in r g i n S h e n g y a n g we r e c o l l e c t e d f r o m Ma y t o S e p t e mb e r 2 0 1 3 or f i s o l a t i n g .
【 中圈分类号】R 3 7 8
【 文献标识码】A
【 文章编号】1 6 7 4 — 0 7 4 2 ( 2 0 1 5 ) o 2 ( c ) 一 0 0 1 5 — 0 3
S t u d y o n t h e S e r o t y p e o f Vi b r i o P a r a h a e mo l y t i c u s I s o l a t e d Cl i n i c a l l y i n
[ A b s t r a c t ]0 b j e c t i v e T o s t u d y t h e s e r o t y p e d i s t r i b u t i o n o f V i b r i o p a r a h a e m o l y t i c u s i s o l a t e d c l i n i c a l l y i n S h e n y a n g i n 2 0 1 3 .
株 可分为 1 6个血清型 , 其 中以 O 3 : K 6型为主 , 约占 3 2 . 8 4 %。结论 2 0 1 3年沈阳市食源性监测副溶血弧菌临床分离株 的血清 型呈现多样性 , O 3 : K 6型是引起食物 中毒 的优势血清型 。
【 关键词】 副溶血弧 茵; 血清分型 ; 食 源性致病 菌
【 摘要】 目的 了解 2 0 1 3 年沈 阳市副溶血弧菌 临床分 离株血清型分布 。 方法 2 0 1 3 年5 —9 月采集沈 阳市食源性 监测临床病 例2 5 0 份进行分离培养 、 生化鉴定 , 采用血清玻 片凝集试 验对 6 7 株分离株进行血清分 型。结果 6 7 株 副溶 血弧菌临床分离