微生物实验室常用消毒剂杀菌效果研究

微生物实验室常用消毒剂杀菌效果研究
摘要】通过对目前实验室常用的消毒剂抑菌作用的比较实验，确定了过氧乙酸
为实验室抑菌效果较好的消毒剂。

实验结果显示，用含0. 03%过氧乙酸消毒剂溶
液对大肠杆菌作用1min，对金黄色葡萄球菌作用1min，杀菌率为100%。

【关键词】消毒剂；过氧乙酸；抑菌效果；台面消毒
消毒剂是指用于杀灭传播媒介上病原微生物，使其达到消毒或灭菌效果及无
害化要求的制剂。

在进行检验药品的微生物实验室中，消毒剂起到了十分重要的
作用，通过对环境中微生物数量的控制，可防止样品污染，保证了检验结果的准
确性。

目前消毒剂的种类很多，有过氧化物类消毒剂、醛类消毒剂、季铵盐类
消毒剂和酚类消毒剂等[1-2]，但各类消毒剂杀菌能力各不相同，本文对实验室常
用消毒剂的杀菌效果进行了比较研究，旨在为实验室选用有效的消毒剂提供理论
依据。

1.1 材料
1.1.1 消毒剂过氧乙酸、甲酚皂、新洁尔灭
1.1.2 菌种枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌(辽宁省食品药品检
验所)
1.1.3 培养基营养肉汤培养基、营养琼脂固体培养基(北京三药) 灭菌20mi n
1.1.4 试剂 5 g/ L 的硫代硫酸钠、0. 03 mol/ L 磷酸盐缓冲液(PBS)
1.1.5 牛津杯不锈钢(柱内径( 6±0.1) mm，外径( 8±0.1) mm，高( 10±0.1) mm)
1.2 方法
1. 2. 1 菌悬液的培养将活化好的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆
菌分别接种在营养肉汤培养基中，在37℃下培养24 h，使菌体浓度为107cfu/ ml。

1.2.2 抑菌试验
本试验采用杯碟法。

首先在培养皿内倒入营养琼脂固体培养基作为底层，凝
固后再在平板中倒入5ml 加有0.1ml 菌悬液的营养琼脂固体培养基，待凝后在其
上等距离分散地轻轻放上无菌牛津杯，在杯内分别注入消毒剂，37℃下培养24h
后用卡尺测定抑菌圈直径，每组做3 个平行实验，取其平均值。

1.2.3 中和剂选择试验[3]
配制 5 g/ L 的硫代硫酸钠中和剂，分组进行中和剂选择试验。

1.2.4 悬液定量杀灭试验[4]
取0.5ml 菌悬液分别加入4.5ml 不同浓度的消毒剂(阴性对照为磷酸盐缓冲液)，混匀，作用至规定时间，然后取0.5 ml 混合液，加入4.5ml 中和剂中和10min，
取样液进行活菌计数，计算杀灭率，每组做3 个平行实验。

2 结果与讨论
2.1 不同消毒剂的抑菌作用
3 种常用消毒剂对细菌的抑制作用，结果见表1。

表1 不同消毒剂的抑菌效果
注：试验温度为37℃，用含2.5%过氧乙酸对不同菌悬液作用10min，结果为
3 次试验的平均值由表可知，第1 组、第2 组和第6 组不长菌，第3~5 组组间菌
落数接近，相差不超过10%，说明硫代硫酸钠可有效中和过氧乙酸且所用浓度合适。

2. 3 悬液定量杀灭试验结果[5]
采用定量悬液法对过氧乙酸的杀菌效果进行评价，结果见表3。

表3 过氧乙酸的杀菌效果
注：试验温度为37℃，杀菌率为3 次试验的平均值
由表可知，当过氧乙酸的浓度大于或等于2%时，作用时间大于或等于5 分钟时，对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌率均为100%；作用时间大于10 分钟时，对枯草芽孢杆菌的杀菌率为100%。

结论
本文对实验室常用消毒剂的抑菌作用进行了比较研究，过氧乙酸的杀菌效果
最好。

此外，由于消毒剂使用以及微生物遗传物质本身的特性及其变异性，导致
细菌对特定的消毒剂和其他化学疗剂产生了越来越强的抵抗性。

因此，在使用消
毒剂时，应科学、合理、有效使用，以减少消毒剂抗性菌株的产生。

参考文献
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[3]谢明杰，陆敏，邹翠霞，等. 大豆异黄酮的抑菌作用[ J] . 大豆科学，2004，2: 101 - 105.
[4]卫生部. 消毒技术规范: 第一分册—实验技术规范[ M ] . 3 版. 1991: 11.
[5]袁洽劻. 实用消毒灭菌技术[ M ] . 北京: 化学工业出版社，2002 : 256.__。