高中生物 第四章第2节蛋白质的提取和分离知能演练轻巧夺冠 北师大版选修1

【优化方案】202X高中生物第四章第2节蛋白质的提取和分离知能
演练轻巧夺冠北师大版选修1
A卷
1．下列相关说法不．正确的是
A．提取乳酸脱氢酶同工酶时要用新鲜的动物心脏、肝脏、骨骼肌等
B．乳酸脱氢酶一般含有5种同工酶
C．提取乳酸脱氢酶同工酶可在任意条件下进行，包括环境温度等
D．最终观察电泳乳酸脱氢酶的结果应该是5个条带
解析：选C。

乳酸脱氢酶同工酶可以与特定的底物进行反应，形成特殊的蓝紫色产物。

同工酶检测必须依靠其具有催化活性的特点，从而使其和其他的可溶性蛋白质区分开来。

因此在提取此类蛋白质时必须提供必要的缓冲系统和低温环境以保持其生物活性。

2．202X·贵阳一中高二质检各种动物血清内乳酸脱氢酶同工酶的组成是不同的。

可以通过比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶差异的大小来判断动物之间亲缘关系的远近。

下列各种实验方法中，不．能采用的方法是
A．测乳酸脱氢酶同工酶的氨基酸序列
B．测控制乳酸脱氢酶同工酶合成的基因的碱基序列
C．用电泳法，比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶的电泳带
D．检测不同动物的乳酸脱氢酶同工酶的7
in的速度离心10 min，若分子戊存在于沉淀中，则分子丙也存在于沉淀中
D．若五种物质为蛋白质，用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最近
解析：选C。

透析的原理是相对分子质量小的物质能透过半透膜，相对分子质量大的物质不能透过，乙保留在袋内，甲则不一定；凝胶色谱柱分离时，相对分子质量小的物质路程长、移动慢；离心时相对分子质量大的物质先沉淀，戊沉淀，则乙、丁、丙均已沉淀；电泳分离时，电荷量相差越大的物质相距越远。

5．下列叙述中正确的是
A．不同类型的凝胶吸水量不同，凝胶膨胀体积的倍数也不同
B．不同类型的凝胶膨胀所需的时间不同
C．若凝胶中含有空气、细菌等不影响分离度
D．可以用高温、高压的方法来加速凝胶的膨胀
解析：选B。

不同类型的凝胶吸水量不同，如G－25为每克凝胶膨胀时吸水 g，G－200表示每克凝胶膨胀时吸水20 g；但凝胶吸水后体积膨胀基本上都是吸水量的2倍。

不同类型的凝胶膨胀所需时间不同，如使用软胶时，自然膨胀需24 h至数天。

加热可加速凝胶的膨胀，但不能采用高温加压等。

6．在利用凝胶电泳法分离蛋白质时，一定要加入缓冲溶液，其作用主要是
A．使酶的活力最高B．使蛋白质的活力最高
C．维持蛋白质所带的电荷D．使蛋白质带上电荷
解析：选C。

蛋白质具有两性，在一定H下，蛋白质分子的某些基团会带上正电荷或负电荷。

在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。

电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。

因此，加缓冲溶液的目的是维持蛋白质所带的电荷不发生改变而不是使蛋白质带上电荷。

7．凝胶色谱技术是一种快速而又简单的分离技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很好的分离效果，目前已经在生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛应用，不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。

据图回答问题：
1a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是________________，原因是
________________________________________________________________________。

2自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由________________替代。

3装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是
________________________________________________________________________。

4洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体________填“相同”或“不同”，洗脱时，对洗脱液的流速要求是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。

解析：用凝胶色谱技术分离各种大分子物质时，大分子物质先洗脱出来，然后是小分子物质。

大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布于颗粒之间，所以向下移动的速度较快。

小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外，还可以进入凝胶颗粒的微孔，即进入凝胶内，在向下移动的过程中，从一个凝胶颗粒内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒，如此不断地进入和扩散，小分子物质的下移速度落后于大分子物质从而落后于大分子物质洗脱出来。

在色谱柱中装填凝胶的时候要尽量紧密，以降低凝胶颗粒之间的空隙。

一是在装填凝胶柱时，不得有气泡存在，因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。

二是凝胶色谱操作过程中，不能发生洗脱液流干，露出凝胶颗粒的现象。

一旦发生上述两种情况，凝胶色谱柱需要重新装填。

答案：1a a相对分子质量较大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快
2尼龙网和尼龙纱
3气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果
4相同保持稳定
8．科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。

这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。

1分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的____________、大小及形状不同，在电场中的__________不同而实现分离。

2可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。

抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供____________和____________。

3分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。

培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的____________，确定该蛋白质的抗菌效果。

4细菌培养常用的接种方法有______________和________________。

实验结束后，对使用过的培养基应进行__________处理。

解析：本题综合考查蛋白质分离的原理、微生物的接种和培养等知识。

1电泳法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子的带电情况、大小、形状不同，在电场中的迁移速度不同而实现分离。

2在微生物的培养过程中，培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供碳源和氮源。

3若抗菌活性蛋白的抗菌效果好，则在培养基中加入该抗菌蛋白后，接种等量的菌液，与未加入抗菌蛋白的培养基相比，菌落数目应该少，否则数目应该相当。

4细菌培养接种的常用方法有平板划线分离法和涂布平板分离法，在实验结束时，应对使用过的培养基进行灭菌，防止污染环境。

答案：1电荷带电情况迁移速度2碳源氮源
3数量4平板划线分离法涂布平板分离法稀释混合平板法灭菌
1．同工酶是指催化相同的化学反应而酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。

2．乳酸脱氢酶一般含有5种同工酶，其相对分子质量相同，但所带电荷不同，所以其电泳结果应形成5个条带。

3．乳酸脱氢酶同工酶可以与特定的底物进行反应，形成特殊的蓝紫色产物。

4．蛋白质在立体网状的琼脂糖凝胶中电泳时，其迁移率主要取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。

5．提取蛋白质必须提供必要的缓冲系统和低温环境以保持其生物活性。