艾塞那肽概况

醋酸艾塞那肽项目介绍

一）艾塞那肽（Exendin-4）介绍：

艾塞那肽是从墨西哥巨蜥蜴毒液中分离出来的一种含有39个氨基酸的多肽序列，与GLP-1（胰高血糖素样肽，氨基酸序列：HDEFERHAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKTRG-OH）具有53%的同源性。可促进胰岛素分泌，具有半衰期长的优点，主要应用在Ⅱ型糖尿病治疗方面。商品名为百泌达（Bydureon），2011年欧盟获批，2012年FDA批准上市。

艾塞那肽序列：

单字母表示：HGEGTFTSDL SKQMEEEAVR LFIEWLKNGG PSSGAPPPS –NH2

三字母表示：H-His - Gly - Glu - Gly - Thr - Phe - Thr - Ser - Asp - Leu - Ser - Lys - Gln - Met - Glu - Glu - Glu - Ala - Val - Arg - Leu - Phe - Ile - Glu - Trp - Leu - Lys - Asn - Gly - Gly - Pro - Ser - Ser - Gly - Ala - Pro - Pro - Pro - Ser –NH2

分子式：C184H282N50O60S1

CAS NO：141758-74-9

残基数：39

分子量：4186.63 g/mol

等电点：pH 4.86

溶解性预测：较好的水溶性

图1 艾塞那肽亲水性分析

注：1）上边是亲水性，下边是疏水性

2）颜色表示: Acidic酸性Aromatic芳香性Basic碱性Aliphatic脂肪族Polar极性Cysteine半胱氨酸二）醋酸艾塞那肽（exenatide acetate）

分子式：C184H282N50O60S.C2H4O2

分子量：4262.67

CAS NO：141732-76-5

三）艾塞那肽合成：

合成方法：固相合成

合成树脂：Rink Amide MBHA Resin（loading: 0.3mmol/g）

溶剂：DMF

脱保护试剂：20% PIP

切割试剂：TFA/ED T/ Thioanisole / 2-Mercaptoethanol

图2 艾塞那肽合成流程图

四）HPLC 纯化（TFA盐艾塞那肽）

1）色谱填料选择。根据序列信息首先推荐大曹SP-100-8-ODS-P，根据实验情况可以推荐试用SP-100-8-C4-HP。

2）检测波长：210nm

3）样品制备。根据多肽序列的溶解性，可以用含少量乙腈的水溶液试溶，并根据溶解情况调节pH值，避免在等电点附近，确定合理溶解条件。

4）纯化流动相。A相：0.1% TFA水溶液；B相：0.1% TFA 的90%乙腈溶液

五）醋酸艾塞那肽反相转化方法（另有阴离子交换法转盐）

将制备获得TFA盐样品过反相柱，进行梯度洗脱。

转盐流动：A相：0.5%乙酸铵水溶液，B相：0.5%乙酸铵的90%乙腈溶液。

检测波长：210nm

六）艾塞那肽制备及纯化目前国内情况

1）齐鲁制药有限公司一种艾塞那肽的制备方法 -201310113805.2审中-实审

2）成都圣诺生物制药有限公司艾塞那肽的制备方法- 201310201952.5 审中-实审

3）上海昂博生物技术有限公司一种艾塞那肽的制备方法- 201110043778.7 审中-实审

4）江苏弘和药物研发有限公司聚乙二醇缀合的艾塞那肽的合成及应用- 201110435506.1 审中-实审

5）深圳翰宇药业股份有限公司自然偶联法制备艾塞那肽的方法- 201110396050.2 审中-实审

6）深圳市翰宇药业有限公司一种制备艾塞那肽的方法- 200910104990.2 有权

7）南京工业大学南京英沛生物技术有限公司一种艾塞那肽固相合成方法- 201210504949.6 审中-实审8）滨海吉尔多肽有限公司无锡亚肽生物科技有限公司吉尔生化(上海)有限公司一种大规模分离纯化艾塞那肽的方法- 201110105976.1 有权著录变更

9）深圳市翰宇药业有限公司一种纯化艾塞那肽的方法- 200910104987.0 有权

10）海南双成药业股份有限公司一种固相片段法合成艾塞那肽 - 201310165217.3 审中-实审

11）东莞市麦亘生物科技有限公司一种重组艾塞那肽的生产工艺- 201210094557.7 审中-实审

注：以上信息仅供参考