戊巴比妥钠半数有效量的测定
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药理学实验报告
实验:戊巴比妥钠半数有效量(ED50)的测定
一、实验目的和原理
测定戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠催眠作用的ED50值。
戊巴比妥钠为巴比妥类镇静催眠药,用适当剂量给小鼠腹腔注射后产生的催眠效应,常用翻正反射的消失来判断,该指标仅有阳性(睡眠)和阴性(不睡眠)两种现象,属于质反应。
质反应量效曲线的横坐标为对数剂量,而纵坐标采用阳性反应发生的频数时,一般为常态分布曲线。
如改用累加阳性频数为纵坐标时,可以得到标准的S型曲线。
该曲线的中央部分(50%反应处)接近一条直线,斜度最大,其相应的剂量也就是能使群体中半数个体出现某一效应的剂量,通常称为半数效应量。
如效应为疗效,则称半数有效量(ED50);如效应为死亡,则称半数致死量(LD50)。
这些数值是评价药物作用强度和药物安全性的重要参数。
孙氏改进的Kaerber法的设计条件是:各组实验动物数相等,各组剂量呈等比数列,各组动物的反应率大致符合常态分布。
若以Xm 为最大反应率组剂量的对数,i为组间剂量比的对数,p为各组反应率,Pm为最高反应率,Pn为最低反应率,n为实验组数,则:
ED50=lg-1[Xm-i(∑P-0.5)+i/4(1-Pm-Pn)]
含0%及100%反应率时,
ED50=lg-1[Xm-i(∑P-0.5)]
ED 50的95%可信限=lg -1(lgED 50±1.96·S )
其中S =i 1
2
--∑∑n P
P
二、实验材料
小鼠50只,1% 戊巴比妥钠(sodium pentobarbital solution )小鼠笼,天平,0.5ml 或0.25ml 注射器。
三、实验步骤
1、确定给药剂量:先以少量动物做预实验,以获得小鼠对戊巴比妥钠催眠反应率为100%的最小剂量(ED 100)和反应率为0%的最大剂量(ED 0)。
然后在此剂量范围内,按等比数列分成几个剂量组(一般4~8组),各组剂量的公比(r )为 r =n-1√ED 100/ED 0
求得r 后,自第一剂量组(ED 0)开始乘以r ,可得相邻的下一个组的剂量。
若共分为5个组,各组剂量分别为ED 0、r ·ED 0、r 2·ED 0、r 3·ED 0、r 4·ED 0、r 5·ED 0。
2、给药:取体重25g 左右的健康小鼠50只,查随机数字表,随机分为5个组,每组8只(除去极端重量小鼠2只)。
按表1所列的各组给药浓度分别腹腔注射0.1ml/10g 。
3、记录结果:以翻正反射消失为入睡指标,观察药物的催眠效应,记录各组腹腔注射后15min 内睡眠鼠数,填入表1。
四、实验结果
表1 计算戊巴比妥钠ED50用表
组别小鼠
数
药物浓度
(mg/ml)
给药剂量
(mg/kg)
对数
剂量
催眠
鼠数
P P2
18 2.020 1.30100 0 0 28 2.626 1.4150 3 0.375 0.141 38 3.535 1.5441 4 0.500 0.250 48 4.646 1.6628 6 0.750 0.563 58 6.060 1.77818 1 1
根据表1的数据和上述公式可求得ED50=31.90
注意事项
1、为减少误差,由1人配药
2、保持环境安静
3、如果第一组出现阳性动物,则向下按公比增加一个低剂量组(d0=d1/r)
4、最后一组动物未全部阳性,向上增加一个剂量(dk+1=dkr)
但具体落到实处应该是一种尊重,一种接人待物的方式方法。
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