大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒说明书
皮质醇(Cortisol)测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法)产品技术要求豪迈
皮质醇（Cortisol）测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法) 适用范围：用于体外定量测定人血清中皮质醇（Cortisol）的含量。
1.1型号/包装规格
规格A：100人份/盒
规格B：100人份/盒
1.2主要组成成分
定标液和质控品的浓度具有批差异性，详见标签。
2.1 外观
试剂盒中的组分应澄清，应无沉淀和絮状物。
磁分离试剂摇匀后，应为均匀悬浊液，无明显凝集。
2.2 空白限
应不大于1ng/ml。
2.3 准确度
使用纯品作回收实验，其回收率应在(85%～115%)范围内。
2.4 线性
在[1,60]ng/ml测量范围内，剂量-反应曲线线性相关系数R≥0.9900。
2.5 重复性
用不同浓度的两个样本进行检测，各重复检测10次，其变异系数CV应不大于10%。
2.6 批间差
用三个批号试剂盒检测同一份样本，则三批试剂盒之间的批间变异系数CV 应不大于15%。
2.7 特异性
用测定试剂盒测定相应浓度的交叉反应物质，应满足下表要求：
2.8溯源性
根据GB/T 21415-2008及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，溯源至企业内部工作校准品，并与已上市产品比对赋值。
2.9 稳定性
试剂盒在规定的2℃～8℃下保存，有效期为12个月。
取到效期后的产品进行检测，结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.7项的要求。
罗氏中文说明书：Cortisol 11875116 122 V14
11875116 122 100测试主要用途用于体外定量检测人血清、血浆、尿液和唾液中皮质醇。
皮质醇检测用于鉴别和治疗肾上腺功能失调。
Elecsys和cobas e免疫分析仪的检测原理是电化学发光免疫法（ECLIA）。
概述皮质醇（氢化可的松）是机体最主要的糖皮质激素，对维持机体的多项生理机能有重要作用。
与其它糖皮质激素类似，皮质醇由共同的胆固醇前体在肾上腺皮质束状带合成。
血循环中约有90%的皮质醇与皮质类固醇结合球蛋白（CBG）和白蛋白结合后进行运输。
仅有少量的游离皮质醇与其受体发生反应。
1皮质醇最重要的生理作用是提高血糖水平（提高糖异生和糖分解）、抗炎和免疫抑制反应。
皮质醇由肾上腺合成和分泌并受下丘脑-垂体-肾上腺皮质-轴的负反馈调节。
如果血中的皮质醇浓度减低，下丘脑则分泌促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）。
CRH能促进垂体释放促肾上腺皮质激素（ACTH）。
ACTH能促进肾上腺合成和分泌皮质醇。
皮质醇本身对垂体和下丘脑起负反馈作用。
此外压力能够促进皮质醇的分泌。
1血清皮质醇的浓度具有昼夜节律性变化。
1通常最高峰值出现在清晨（700nmol/L或25.4mg/dL），随后逐渐降低，到夜间可降至峰值浓度的一半左右。
因此在解释结果时，明确采血时间是很重要的。
检测患者血循环中皮质醇的含量可用于诊断肾上腺、垂体和下丘脑的机能是否正常。
2，3因此检测血清皮质醇的浓度可用监测多种疾病，如浓度明显增高的库欣氏综合征4，5或浓度明显降低的艾迪生病。
同时也可用于库欣氏综合征使用地塞米松抑制治疗或艾迪生病使用激素替代治疗的疗效监测。
库欣氏综合征实验室诊断的另一选择是检测24小时尿液中的皮质醇浓度，因为尿液中排泄的皮质醇不受昼夜节律性分泌的影响。
6这种方法能够准确的区分健康人与库欣氏综合征患者。
尿液中排泄的皮质醇均未与转运蛋白结合，因此被称为尿游离皮质醇（UFC）。
通常尿游离皮质醇与血中具有生物活性的游离皮质醇具有一定的比例关系。
酶联免疫吸附法皮质醇浓度检测试剂盒说明书
EK8100-01Cortisol Competitive ELISA Kit检测试剂盒（酶联免疫吸附法）Catalog NumberEK8100-48EK8100-96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的皮质醇(Cortisol)浓度。
本产品仅用于科学研究，非诊断试剂，不能用于临床诊断。
一、产品介绍1.背景介绍皮质醇，也称为醋酸氢化可的松或化合物F，是糖皮质激素中的一种类固醇激素。
在人类中，它由肾上腺中的肾上腺皮质束状带产生，在压力和低血糖时释放，可作为压力的一个生物标志物。
皮质醇的产量与ACTH依赖的昼夜节律相关，在早晨达到峰值，随后逐渐降低。
皮质醇在很多基质中可被检测到，如血液、粪便、尿液和唾液。
血清中90-95%的皮质醇与蛋白结合，包括皮质类固醇结合球蛋白和血清白蛋白。
皮质醇主要参与代谢和免疫。
在代谢方面，它可促进糖异生、肝糖原沉积和降低葡萄糖利用率。
在免疫方面，作为重要的抗炎因子，在过敏、免疫抑制和疾病抵抗中发挥重要作用。
异常的皮质醇水平与许多状况有关，包括前列腺癌、抑郁症和精神分裂症。
身体组织中皮质醇过高是库欣综合征的诱因。
2.检测原理本试剂盒采用固相竞争酶联免疫吸附检测技术。
兔抗小鼠抗体预包被在高亲和力的酶标板上。
皮质醇特异性的单克隆抗体加入至孔中，经过孵育，与固相抗体结合。
洗涤后，加入辣根过氧化物酶标记的皮质醇和未标记的皮质醇或样本，竞争结合单克隆抗体上有限的结合位点。
在洗涤去除未结合的物质后，加入显色底物，颜色反应的深浅与皮质醇的浓度成反比。
加入终止液终止反应，在450nm波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。
本试剂盒已验证人、小鼠和大鼠血清样本，但其它物种的皮质醇预计也可被检测。
3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。
2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。
3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变，都将影响结合反应。
Cortisol中文说明书
用免疫学方法定量测定人血清或血浆中皮质醇（ｃｏｒｔｉｓｏｌ）的含量。电化学发光免疫测 · Ｅｌｅｃｓｙｓ 系统清洗液支架（Ａｄａｐｔｅｒ ｆｏｒ ＳｙｓＣｌｅａｎ） ）货号１１９３３１５９
定试剂，适用于罗氏Ｅｌｅｃｓｙｓ１０１０、２０１０和Ｅ１７０（Ｅｌｅｃｓｙｓ模块）免疫测定分析仪。 · Ｅｌｅｃｓｙｓ １０１０反应杯（Ａｓｓａｙ Ｃｕｐ） 货号１１７０６８２９
与其它糖皮质类固醇激素一样，皮质醇由共同前体胆固醇在肾上腺皮质区合成而来。 在外周血中，９０％的皮质醇与皮质类固醇结合球蛋白（ＣＢＧ）以及白蛋白结合后进行 运输。 皮质醇最重要的的生理机能是升高血糖，抗炎和免疫抑制作用。 皮质醇的合成和分泌受下丘脑－垂体－肾上腺皮质轴的负反馈机制的调节。当皮质 醇水平下降时，下丘脑分泌促肾上腺皮质激素释放激素（ＣＲＨ），使垂体分泌促肾 上腺皮质激素（ＡＣＴＨ），并由ＡＣＴＨ刺激肾上腺合成并分泌皮质醇。皮质醇本身对垂
Ｅｌｅｃｓｙｓ１０１０／２０１０分析仪需要 · Ｅｌｅｃｓｙｓ系统缓冲液（ＰｒｏＣｅｌｌ）货号１１６６２９８８
机器自动稀释，机器会自动计算结果。 正常参考值：
· Ｅｌｅｃｓｙｓ 测量池清洗液（ＣｌｅａｎＣｅｌｌ）货号１１６６２９７０
上午时间 ７－１０ ａ．ｍ． ： １７１－５３６ ｎｍｏｌ／ｌ （６．２－１９．４μｇ／ｄｌ） （ｎ＝１４４） 下午时间 ４－８ ｐ．ｍ． ： ６４－３４０ ｎｍｏｌ／ｌ （２．３－１２．３μｇ／ｄｌ） （ｎ＝１３７） 如有必要，各实验室应自己测定一个正常值范围。
采取校正措施。 计算： 对每一个标本，仪器会自动计算皮质醇含量，单位是ｎｍｏｌ／ｌ，µg／ｄｌ或µg／ｌ。换算 方法 nmol/l x 0.03625 = µg/dl (x 0.3625 = µg/l)
皮质醇说明书
批准文号：国药准字S1*******使用前请详细阅读此说明书皮质醇放射免疫分析药盒说明书Cortisol Radioimmunoassay Kit北京北方生物技术研究所一、概述及临床意义皮质醇(Cortisol, 缩写为：Cor.)是一种主要由肾上腺皮质束状带分泌的糖皮质激素，属于21碳类甾体激素，分子量363D。
人每日分泌量有昼夜节律性变化，一般早晨分泌量多。
准确测定皮质醇的含量，对下丘脑垂体—肾上腺皮质轴功能试验及其病理、生理研究和临床诊断有重要意义。
对柯兴氏综合症，原发性付肾皮质机能低下症(阿狄森氏病)鉴别诊断特别有效。
本药盒用于测定血清中皮质醇的含量。
血清样品不用稀释，不用预处理，血清或血浆直接加样。
采用放射免疫分析技术，具有用血样量少，操作方法简便，检验周期短，测定结果重复性好等优点。
二、测定原理应用竞争机制原理，标准或样品中的Cor.和加入的125I-Cor.共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。
125I-Cor.与抗体的结合量与标准或样品中Cor.的含量呈一定的函数关系。
用免疫分离试剂（PR）将结合部分（B）与游离部分（F）分离后，测定结合部分的放射性强度，并计算相应结合率B/B0。
用已知标准Cor.含量与对应结合率作图，即得标准抑制曲线。
从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中Cor.的含量。
1四、试剂的配制、使用方法和保存1．Cor.标准品：将0标准1ml蒸馏水溶解，其余标准分别准确地加入0.5ml 蒸馏水溶解。
溶解15分钟后摇匀方可使用。
溶解后其浓度分别为0、10, 50, 100, 200, 500ng/ml。
标准复溶后2~8℃保存可稳定42天，冻干品-20℃保存有效期内稳定。
2．125I-Cor.标记物：冻干品用缓冲液溶解。
100管标记物加缓冲液10ml, 50管标记物加5ml，加样前摇匀。
100管标记物放射性不大于111KBq(3μCi)，2~8℃避光保存可稳定42天。
北京联众泰克皮质醇(Cortisol)测定试剂盒(电化学发光免疫分析法)产品技术要求
皮质醇(Cortisol)测定试剂盒（电化学发光免疫分析法）结构组成：试剂盒由磁分离试剂（M）、试剂a（Ra）、试剂b（Rb）和定标品（Cortisol-Cal）（选配）组成。
组成及含量见下表：预期用途：本试剂盒用于体外定量测定人体血清样本中皮质醇（Cortisol）的含量。
2.1 外观2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；2.1.2 磁分离试剂摇匀后应为棕色含固体微粒的均匀悬浊液，无明显凝集、无絮状物；2.1.3 其它液体组分应澄清，无异物，沉淀物或絮状物；2.1.4 包装标签应清晰、无磨损、易识别。
2.2 空白限应不大于0.5nmol/L。
2.3 准确度将已知浓度的Cortisol标准溶液加入到血清中，其回收率应在(85%～115%)范围内。
2.4 线性在[2.0，1750.0]nmol/L范围内，线性相关系数（r）应不小于0.9900。
2.5 精密度2.5.1 重复性在试剂盒的线性范围内，检测高、低两个水平的样品,检测结果的变异系数（CV）应不大于8%。
2.5.2 批间差在试剂盒的线性范围内，用3个批号试剂盒分别检测高、低两个水平的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于15%。
2.6 效期末稳定性本产品效期为15个月，试剂盒在2～8℃下保存至有效期末进行检测，检测结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1的要求。
2.7 溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求提供皮质醇（Cortisol）定标品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，定标品溯源至企业工作校准品。
皮质醇(Cortisol)测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法)产品技术要求zhonghangsaiwei
皮质醇（Cortisol）测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法)
适用范围：用于体外定量测定人血清、血浆中皮质醇（Cortisol）的含量。
1.1产品规格
50测试/盒，100测试/盒，200测试/盒
1.2主要组成成分
2.1外观
2.1.1试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；
2.1.2磁分离试剂摇匀后为均匀悬浊液，无明显凝集；
2.1.3液体组分应澄清，无沉淀或絮状物；
2.1.4包装标签应清晰，易识别。
2.2溯源性
应根据GB/T21415-2008及有关规定提供校准的来源、溯源的赋值和相应指标、以及不确定度等内容。
本试剂盒校准品可溯源至国际标准物质（编号SRM 921）。
2.3准确度
用国际标准物质(编号：SRM 921)进行检测，其测量结果的相对偏差应在±10%范围内。
2.4 空白限
应不大于0.4µg/dL。
2.5线性
在［1，60］µg/dL的测量范围内，相关系数r应≥0.9900。
2.6重复性
变异系数（CV）应不大于8%。
2.7质控品的赋值有效性
质控品的测量值应在质控范围内。
2.8批间差
变异系数（CV）应不大于15.0%。
2.9稳定性
试剂盒在2~8℃贮存，有效期为12个月，取到效期后的试剂盒样品进行检测，检测结果应符合2.3、2.4、2.5、2.6和2.7的要求。
Cortisol Elecsys皮质醇
皮质醇用途：用免疫学方法定量测定人血清或血浆中皮质醇(cortisol)的含量。
电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys1010、2010和E170（Elecsys模块）免疫测定分析仪。
测定皮质醇的含量可用于肾上腺机能紊乱的诊断和治疗。
概述:皮质醇（氢可的松）是最主要的糖皮质类固醇，对维持人体的多项机能有重要作用。
与其它糖皮质类固醇激素一样，皮质醇由共同前体胆固醇在肾上腺皮质区合成而来。
在外周血中，90%的皮质醇与皮质类固醇结合球蛋白（CBG）以及白蛋白结合后进行运输。
皮质醇最重要的的生理机能是升高血糖，抗炎和免疫抑制作用。
皮质醇的合成和分泌受下丘脑－垂体－肾上腺皮质轴的负反馈机制的调节。
当皮质醇水平下降时，下丘脑分泌促肾上腺皮质激素释放激素（CRH），使垂体分泌促肾上腺皮质激素（ACTH），并由ACTH刺激肾上腺合成并分泌皮质醇。
皮质醇本身对垂体和下丘脑起负反馈作用。
另外，机体在应急状态下，皮质醇分泌增加。
皮质醇在血中的含量呈现昼夜的周期性变化。
在清晨含量达到最高峰（700nmol/l或25.4mg/dl），随后在白天含量逐渐下降，到夜间含量降到最低点，大约是峰值的一半。
因此，在分析结果时，了解采血时间是很重要的。
检测患者血中皮质醇的含量可用于诊断肾上腺、垂体和下丘脑机能紊乱与否。
皮质醇含量增高见于库欣综合征，含量降低见于艾迪生病。
在对上述疾病进行相应的地塞米松抑制治疗或激素替代治疗中，可检测皮质醇含量进行监测。
原理：采用竞争法原理，整个过程18分钟完成。
·第1步：20µl标本与生物素化的抗皮质醇抗体和钌（Ru）标记的皮质醇衍生物混匀，分别形成复合物，数量取决于标本中待测物的浓度。
生物素化的抗皮质醇抗体一部分与标本中待测物结合，另一部分与Ru标记的皮质醇衍生物结合。
·第2步：加入链霉亲和素包被的微粒。
形成的复合物通过生物素、链酶亲和素之间的反应结合到微粒上。
皮质醇(Cortisol)测定试剂盒(化学发光法) 产品技术要求广州科方生物
皮质醇（Cortisol ）测定试剂盒（化学发光法）2. 性能指标2.1 试剂盒性能指标2.1.1 外观试剂盒包装应完整，各组分应齐全，品名、批号和有效期应清晰。
各瓶试剂外观应完整，标签应清晰，无破损，无渗漏。
M 试剂为黄褐色磁微球悬浮液，沉淀属于正常现象；R 试剂为澄清透亮液体，没有沉淀和悬浮物。
2.1.2 净含量试剂盒各规格净含量应符合表1的要求。
表1 净含量要求2.1.3 准确度 用国家标准物质（GBW09221）或企业参考品作为样本进行检测，其测量结果的相对偏差应在±15%范围内。
2.1.4 空白限空白限应不高于 0.5μg/dL。
2.1.5 线性线性范围 1.495μg/dL～59.8μg/dL，相关系数 r 应不低于 0.9900。
2.1.6重复性批内变异系数（CV）应≤10%。
2.1.7批间差批间变异系数（CV）应≤15%。
2.2校准品性能指标2.2.1外观校准品外包装应完整，标签标示应清晰，为澄清透亮液体。
2.2.2装量校准品装量应不少于标示量。
2.2.3校准品赋值准确性用经校准品校准的化学发光免疫分析仪检测国家标准物质（GBW09221）或企业参考品，结果的偏倚在±10%内。
2.2.4均匀性a）瓶内均匀性：CV≤10%；b）瓶间均匀性：CV≤10%。
2.3质控品性能指标2.3.1外观质控品外包装应完整，标签标示应清晰，为澄清透亮液体。
2.3.2装量质控品装量应不少于标示量。
2.3.3预期结果用经校准品校准的化学发光免疫分析仪检测质控物，结果应在靶值范围内。
2.3.4均匀性a）瓶内均匀性：CV≤10%；b）瓶间均匀性：CV≤10%。
皮质醇(Cor)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求kemei
皮质醇（Cor）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）
适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中皮质醇的含量。
1.1产品型号：
2.1外观
组分齐全、完整；标签清晰，无磨损；液体试剂无渗漏，无混浊、沉淀或絮状物；包被板包装袋无破损、漏气现象。
2.2准确性
平均回收率应在90.0～110.0%之间。
2.3剂量反应曲线的线性
用双对数数学模型拟合，在校准浓度范围（10～500ng/mL）内，剂量反应曲线的相关系数r(绝对值)应不低于0.9900。
2.4 空白检出限
不大于8ng/mL。
2.5 重复性
用低、高两个浓度水平的质控血清，各重复检测10次，其变异系数（CV）应满足：仪器自动操作法应不大于10.0%，手工操作法应不大于15.0%。
2.6 批间差
用三个批号试剂盒，分别检测同一质控血清，三个批号试剂盒之间的变异系数(CV)应不大于15.0%。
2.7质控血清测定值
质控血清测值应在允许的质控范围内
（±2SD）。
2.8 稳定性
2℃～8℃保存，有效期12个月。
皮质醇lcms的检测标准
皮质醇lcms的检测标准皮质醇（Cortisol）是一种重要的激素，对于维持机体稳态和应对压力具有重要意义。
LC-MS（液相色谱-质谱法）是检测皮质醇的常用方法，具有高灵敏度、高准确性和高分辨率等特点。
关于皮质醇LC-MS的检测标准，以下几点值得关注：1. 样本处理：皮质醇LC-MS检测的样本通常为生物体液（如血清、尿液等）。
在检测前，需要对样本进行适当的处理，如离心、过滤、萃取等，以去除杂质和干扰物质。
2. 色谱条件：为了获得较好的分离效果和检测灵敏度，需要优化液相色谱条件，如色谱柱、流动相、梯度洗脱等。
不同类型的色谱柱和流动相组合可能对皮质醇的检测效果产生较大影响。
3. 质谱条件：质谱条件的优化对于皮质醇的检测灵敏度和准确性至关重要。
常用的质谱检测方式有负离子电喷雾质谱（ESI-MS）和多反应监测（MRM）等。
优化质谱条件包括选择合适的离子源、气体流量、碰撞能量等。
4. 标准品：选择合适的标准品对于建立和验证LC-MS检测方法至关重要。
皮质醇的标准品可以是纯品或已知含量的商业制品。
在使用标准品时，应注意其保质期、储存条件等因素。
5. 方法验证：为确保LC-MS检测方法的准确性和可靠性，需要进行方法验证。
方法验证通常包括线性范围、检测限、精密度、回收率等指标的评估。
6. 数据处理和分析：LC-MS检测产生的数据需要进行处理和分析，以获得准确的皮质醇浓度。
常用的数据处理方法包括基线校正、峰识别、定量分析等。
在我国，皮质醇LC-MS的检测标准主要参照GB（国家标准）和WS（卫生行业标准）等体系。
此外，还可以参考国际标准，如世界卫生组织（WHO）和美国临床实验室标准化协会（CLSI）等制定的相关标准。
在实际检测过程中，应根据具体应用场景和需求，参照相关标准进行方法建立和优化。
同时，关注制造商的技术支持和质量控制，确保皮质醇LC-MS检测的准确性和可靠性。
鱼皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析(ELISA)
鱼皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定鱼血清，血浆及相关液体样本中皮质醇(Cortisol)的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼皮质醇(Cortisol)水平。
用纯化的鱼皮质醇(Cortisol)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入皮质醇(Cortisol)，再与HRP标记的皮质醇抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中鱼皮质醇(Cortisol)浓度。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
小鼠皮质醇(Cortisol)ELISA检测试剂盒应用方法
小鼠皮质醇（Cortisol）ELISA检测试剂盒应用方法小鼠皮质醇（Cortisol）ELISA检测试剂盒说明书检测原理试剂盒采纳双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被皮质醇（Cortisol）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。
用底物TMB 显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最后的黄色。
颜色的深浅和样品中的皮质醇（Cortisol）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避开任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：假如样本收集后不适时检测，请按一次用量分装，冻存于20℃，避开反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。
试验中不用的板条应立刻放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对比或者空白；依照说明书操作时样本已经稀释5倍，最结束果乘以5才是样本实际浓度。
严格依照说明书中标明的时间、加液量及次序进行温育操作。
全部液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒构成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无停止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0S5）浓度依次为：0、0.75、1.5、3、6、12ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
Elabscience Porcine Cortisol ELISA Kit, 说明书
8th Edition, revised in October, 2018（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）猪皮质醇（Cortisol）使用说明书Porcine Cortisol ELISA Kit产品货号：E-EL-0159c96T使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话************电子邮箱（销售）********************电子邮箱（技术）**************************QQ客服800110755网址联系时请提供产品货号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务Copyright ©2018-2020Elabscience Biotechnology Co. Ltd. All Rights Reserved用途该试剂盒用于体外定量检测猪血清、血浆中Cortisol浓度，其余样本类型检测请咨询技术支持。
灵敏度、检测范围、特异性和重复性●灵敏度：0.48ng/mL●检测范围：0.78-50ng/mL●特异性：可检测样本中的Cortisol ,且与其它结构类似物无明显交叉反应。
●重复性：板内，板间变异系数均<10%。
背景介绍皮质醇由于与应激反应相关联而常被称为应激激素。
它由肾上腺产生，是甾体类激素之一。
皮质醇的分泌是由下丘脑、垂体和肾上腺控制，该组合腺体通常被称为下丘脑-垂体-肾上腺轴。
由于机体大部分细胞都含有皮质醇受体，因此皮质醇在机体内拥有许多不同的功能。
皮质醇能帮助控制血糖水平、调整代谢、减少发烧和帮助记忆的形成。
皮质醇对盐和水的动态平衡有控制作用并能帮助控制血压的稳定。
对于女性，皮质醇能支持着妊娠期间发育中的胎儿。
当然，低水平的皮质醇会引起被原发性肾上腺机能不全或肾上腺皮质功能衰竭症的问题，而原发性肾上腺机能不全是一种自身免疫疾病，继而导致对肾上腺的损害。
猪皮质酵(Cortisol)ELISA ELISA 快速检测试剂盒 说明书
猪皮质醇猪皮质醇(Cortisol)(Cortisol)(Cortisol)ELISA ELISA 快速检测试剂盒快速检测试剂盒使用说明书使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号产品编号：CSB-E06811p检测范围检测范围：：0.31 ng/ml -80 ng/ml最低检测限最低检测限：：0.2 ng/ml特异性特异性：：本试剂盒可同时检测天然或重组的猪皮质醇，且与其他相关蛋白基本无交叉反应。
有效期有效期：6个月（2-8℃避光保存）预期应用预期应用：：ELISA 法定量测定猪血清，血浆及其它相关生物液体中皮质醇的含量。
说明1. 浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
2. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
实验原理采用竞争酶联免疫法法检测皮质醇含量。
首先用羊抗兔包被微孔板，制备成固相二抗，然后加入待测标本及辣根过氧化物酶标记的睾酮和抗睾酮抗体，使之形成包被二抗-抗皮质醇抗体-酶标记皮质醇的复合物。
经显色后在酶标仪测定吸光值（OD 值），通过计算机或作图拟合浓度-吸光度曲线，反算出待测标本中皮质醇含量。
试剂盒组成及试剂配制1. 酶联板(Assay plate )： 一块（96孔）。
2. 标准品标准品（Standard ）： 5×0.5ml/瓶。
标准品S1 S 2 S3 S4 S5 浓度(ng/ml)0.31 1.25 5 20 803. 酶结合物酶结合物（（HRP-conjugate ）： 1×6ml/瓶。
4. 抗体抗体（（Antibody ）： 1×6ml/瓶 5. 显色剂A （Substrate A ）： 1×7ml/瓶。
6. 显色剂B （Substrate B ）： 1×7ml/瓶。
7. 浓洗涤液（Wash Buffer ）： 1×15ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释20倍。
Toxoplasma IgG ELISA测试产品说明书
Toxoplasma IgG ELISA Catalog Number SE120126Storage Temperature 2–8 °CTECHNICAL BULLETINProduct DescriptionToxoplasma gondii causes toxoplasmosis, a common disease that affects 30–50 of every 100 people in North America by the time they are adults. The mean source of infection is direct contact with cat feces or from eating undercooked meats. Toxoplasmosis generally presents with mild symptoms in immunocompetent individuals. In the immunocompromised patient,however, the infection can have serious consequences. Acute toxoplasmosis in pregnant women can result in miscarriage, poor growth, early delivery, or stillbirth. Treatment of an infected pregnant woman may prevent or lessen the disease in her unborn child. Treatment of an infected infant will also lessen the severity of the disease as the child grows. IgG and IgM antibodies to Toxoplasma can be detected with 2–3 weeks after exposure. IgG remains positive, but the antibody level drops overtime. ELISA can detect Toxoplasma IgM antibody one year after infection in over 50% of patients. Therefore, IgM positive results should be evaluated further with one or two follow up samples if primary infection is suspected.The Toxoplasma IgG ELISA Kit is intended for the detection of IgG antibody to Toxoplasma in human serum or plasma. Diluted serum is added to wellscoated with purified Toxoplasma antigen. Toxoplasma IgG specific antibody, if present, binds to the antigen. All unbound materials are washed away and the enzyme conjugate is added to bind to the antibody-antigen complex, if present. Excess enzyme conjugate is washed off and substrate is added. The plate isincubated to allow the oxidation of the substrate by the enzyme. The intensity of the color generated isproportional to the amount of IgG specific antibody in the sample.ComponentsReagents and Equipment Required but Not Provided.1.Distilled or deionized water2.Precision pipettes3.Disposable pipette tips4.ELISA reader capable of reading absorbance at450 nm5.Absorbent paper or paper towel6.Graph paperPrecautions and DisclaimerThis product is for R&D use only, not for drug,household, or other uses. Please consult the Safety Data Sheet for information regarding hazards and safe handling practices.Preparation Instructions Sample Preparation1. Collect blood specimens and separate the serum.2.Specimens may be refrigerated at 2–8°C for up toseven days or frozen for up to six months. Avoid repetitive freezing and thawing.20x Wash Buffer ConcentratePrepare 1x Wash buffer by adding the contents of the bottle (25 mL, 20x) to 475 mL of distilled or deionized water. Store at room temperature (18–26 °C).2Storage/StabilityStore the kit at 2–8 °C.ProcedureNotes: The components in this kit are intended for use as an integral unit. The components of different lots should not be mixed.Optimal results will be obtained by strict adherence to the test protocol. Precise pipetting as well as following the exact time and temperature requirements is essential.The test run may be considered valid provided the following criteria are met:1.If the O.D. of the Calibrator is >0.250.2.The Ab index for Negative control should be <0.9.3.The Ab index for Positive control should be >1.2. Bring all specimens and kit reagents to room temperature (18–26 °C) and gently mix. 1.Place the desired number of coated strips into theholder.2.Negative control, positive control, and calibrator areready to use.Prepare 21-fold dilution of testsamples, by adding 10 µL of the sample to 200 µLof Sample Diluent. Mix well.3.Dispense 100 µL of diluted sera, calibrator, andcontrols into the appropriate wells. For the reagent blank, dispense 100 µL of Sample Diluent in 1Awell position. Tap the holder to remove air bubbles from the liquid and mix well. Incubate for20 minutes at room temperature.4.Remove liquid from all wells. Wash wells threetimes with 300 µL of 1x wash buffer. Blot onabsorbent paper or paper towel.5.Dispense 100 µL of enzyme conjugate to each welland incubate for 20 minutes at room temperature. 6.Remove enzyme conjugate from all wells. Washwells three times with 300 µL of1x wash buffer.Blot on absorbent paper or paper towel7.Dispense 100 µL of TMB substrate and incubate for10 minutes at room temperature.8.Add 100 µL of stop solution.9.Read O.D. at 450 nm using ELISA reader within15 minutes. A dual wavelength is recommendedwith reference filter of 600–650 nm.3ResultsCalculations1.Check Calibrator Factor (CF) value on thecalibrator bottle. This value might vary from lot tolot. Make sure the value is checked on every kit. 2.Calculate cut-off value: Calibrator OD x CalibratorFactor (CF).3.Calculate the Ab (Antibody) Index of eachdetermination by dividing the mean values of each sample by cut-off value.Example of typical results:Calibrator mean OD = 0.8Calibrator Factor (CF) = 0.5Cut-off Value = 0.8 x 0.5 = 0.400Positive control O.D. = 1.2Ab Index = 1.2/0.4 = 3Patient sample O.D. = 1.6Ab Index = 1.6/0.4 = 4.0Note:Lipemic or hemolyzed samples may cause erroneous results.InterpretationThe following is intended as a guide to interpretation of Toxoplasma IgG antibody index (Ab Index) test results; each laboratory is encouraged to establish its own criteria for test interpretation based on sample populations encountered.<0.9 –No detectable IgG antibody to Toxoplasma byELISA0.9–1.1 –Borderline positive. Follow-up testing isrecommend if clinically indicated.>1.1 –Detectable IgG antibody to Toxoplasma by ELISA References1.Wilson, M. et al., Evaluation of six commercial kitsfor detection of human immunoglobulin Mantibodies to Toxoplasma gondii. The FDAToxoplasmosis Ad Hoc Working Group.2.Obwaller, A. et al., An enzyme-linkedimmunosorbent assay with whole trophozoites ofToxoplasma gondii from serum-free tissue culturefor detection of specific antibodies. Parasitol. Res., 1995;81(5):361-4.3.Loyola, A.M. et al., Anti-Toxoplasma gondiiimmunoglobulins A and G in human saliva andserum. J. Oral Pathol. Med., 1997; 26(4):187-91. 4.Doehring, E. et al., Toxoplasma gondii antibodies inpregnant women and their newborns in Dar esSalaam, Tanzania. Am. J. Trop. Med. Hyg., 1995;52(6):546-8.5.Cotty, F. et al., Prenatal diagnosis of congenitaltoxoplasmosis: the role of Toxoplasma IgAantibodies in amniotic fluid [letter]. J. Infect. Dis.,1995;171(5):1384-5.6.Altintas, N. et al., Toxoplasmosis in last four yearsin Agean region,Turkey. J. Egypt. Soc. Parasitol.,1997;27(2):439-43.RGC,CH,MAM 10/14-1©2014 Sigma-Aldrich Co. LLC. All rights reserved. SIGMA-ALDRICH is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC, registered in the US and other countries. Sigma brand products are sold through Sigma-Aldrich, Inc. Purchaser must determine the suitability of the product(s) for their particular use. Additional terms and conditions may apply. Please see product information on the Sigma-Aldrich website at and/or on the reverse side of the invoice or packing slip.。
EnzoLifeSciences皮质醇ELISA试剂盒说明书
EnzoLifeSciences皮质醇ELISA试剂盒说明书广泛使用的敏感皮质醇 ELISA 试剂盒，具有多种样品类型和高度可重复的结果，适用于压力、自身免疫性疾病和癌症研究。
Enzo Life Sciences 皮质醇ELISA试剂盒是一种比色竞争性酶免疫测定试剂盒，可在 3 小时内得出结果。
在 405 nm 处读取吸光度。
该套件在同行评审的出版物中被高度引用。
提供的即用型液体颜色编码试剂安全、无放射性，可减少实验室中的错误。
宽广的动态范围可让您准确测量各种样品基质中的皮质醇水平。
Enzo Life Sciences 皮质醇ELISA试剂盒特点：1.在同行评审的文献中被高度引用2.可靠 - 日复一日和批复的结果3.灵敏 - 检测生物基质中低水平的皮质醇4.易于使用 - 预涂板和液体颜色编码试剂可节省时间并减少错误皮质醇ELISA试剂盒参数：灵敏度： 56.72 皮克/毫升（范围 156 - 10,000 皮克/毫升）检测时间：3小时应用： ELISA，比色检测应用说明：用于定量测定任何物种的培养上清液、血浆、血清、唾液和尿液中的皮质醇。
被引样本类型包括粪便。
波长：405纳米物种反应性：物种独立交叉反应：皮质醇 (100%)、泼尼松龙 (122.35%)、皮质酮 (27.68%)、11-脱氧皮质醇 (4.0%)、黄体酮 (3.64%)、泼尼松 (0.85%)、睾酮 (0.12%) 和 <0.10%：雄烯二酮，可的松、雌二醇船运：蓝冰未冷冻长期储存：+4°C内容：GxM IgG 微量滴定板、偶联物、抗体、检测缓冲液、浓缩洗涤缓冲液、标准品、pNpp 底物、终止溶液、类固醇置换试剂科学背景：皮质醇（氢化可的松，化合物 F）是一种由胆固醇合成的类固醇激素。
它是肾上腺皮质产生和分泌的主要糖皮质激素。
皮质醇以游离皮质醇或与皮质类固醇结合球蛋白 (CBG) 结合的形式存在于血液中。
血清水平在清晨最高，全天下降。
大鼠糖皮质激素GC酶联免疫分析试剂盒使用方法
大鼠糖皮质激素（GC）酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围：96T1.6ng/ml -70 ng/ml使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中糖皮质激素（GC）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠糖皮质激素（GC）水平。
用纯化的大鼠糖皮质激素（GC）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入糖皮质激素（GC），再与HRP标记的糖皮质激素（GC）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的糖皮质激素（GC）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠糖皮质激素（GC）浓度。
标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
皮质醇测定试剂盒(均相酶免疫法)产品技术要求注册版
医疗器械产品技术要求编号：皮质醇测定试剂盒（均相酶免疫法）1.产品型号/规格及其划分说明注：校准品、质控品靶值批特异，详见靶值单。
2.1外观试剂1为无色至黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为无色至黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；校准品为无色至黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
质控品为无色至黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2净含量试剂的净含量应不少于标称量。
2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度A340nm下测定空白吸光度应≤1.8000。
2.3.2试剂空白吸光度变化率A340nm下测定试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应在0.08～0.24范围内。
2.4准确度使用试剂盒对国际标准物质ERM-DA193进行测试，准确性偏差应不超过±15%。
2.5分析灵敏度样本浓度为200ng/mL时，其吸光度变化应不小于0.0200。
2.6线性在[20，750]ng/mL区间内，线性相关系数r≥0.990，在[20，150]ng/mL区间内测定的绝对偏差应不超过±15ng/mL，在(150，750]ng/mL区间内测定的相对偏差应不超过±10.0%。
2.7测量精密度2.7.1重复性使用高、低不同浓度的样本重复测定20次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于10.0％。
2.7.2批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10.0%。
2.8质控品赋值有效性使用质控品进行测定，所得结果应在质控范围内。
2.9稳定性试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为12个月。
在试剂盒有效期满后一个月以内进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1、2.8的要求。
2.10溯源性按照GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，提供所用产品校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度，试剂盒校准品溯源至国际标准物质ERM-DA193。
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大鼠皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析试剂盒
使用说明书
厦门慧嘉生物科技有限公司
本试剂盒仅供体外研究使用!
预期应用
ELISA法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中皮质醇(Cortisol)含量。
实验原理
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗皮质醇(Cortisol)抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗皮质醇(Cortisol)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
ELISA法
试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板：一块（96孔）
2. 标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，
然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为180 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成180 ng/ml，90 ng/ml，45 ng/ml，22.5 ng/ml，11.25 ng/ml，
5.63 ng/ml，2.82 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制90 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 180 ng/ml的上述标准品加入含有
0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml。
4. 检测稀释液A：1×10ml。
5. 检测稀释液B：1×10ml。
6. 检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算
好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B 1:100稀释。
稀释方法同检测溶
液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
11. 覆膜：5张
12. 使用说明书：1份
自备物品
1. 酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热）
2. 微量加液器及吸头，EP管
3. 蒸馏水或去离子水，全新滤纸
标本的采集及保存
1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可
检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15
分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本
放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。
实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标
准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。
每孔加检测溶液A工作液100μl（在使用前一小时内配制），
酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，
甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液）100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干
（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标
准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。
终止液的加入顺序应尽量与底
物液的加入顺序相同。
为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。
在加终止液后立即进行检测。
注：
1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。
实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本/ 标准品，酶结合物或底物时，第一个孔与最后一
个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
一次加样时间（包括标准品及所有样品）最好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，
以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔
中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响最后的酶标仪读数。
5. 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或
瓶盖的液体沉积到管底。
标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。
请精确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置（如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl），以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化（比如，每隔10分钟），如颜
色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。
洗板方法
1. 手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水
纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。
2. 自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性
本试剂盒可同时检测重组或天然的大鼠皮质醇(Cortisol)，且与其它相关蛋白无交叉反应。
计算
以标准物的浓度为纵坐标（对数坐标），OD值为横坐标（对数坐标），在对数坐标纸上绘出标准曲线。
推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如curve expert 1.3，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度，再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
检测范围：2.82 ng/ml - 180 ng/ml
最低检测限：1.41 ng/mL
说明
1. 只有全部使用试剂才能保证检测效果，因为所有试剂都是有关联的，不能混用其他制造商的产
品。
只有严格遵守试剂的试验说明才会得到最佳的检测结果。
2. 在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。
所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染，试剂
避免受到微生物的污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
3. 试剂盒保存：请收到试剂盒后尽快将标准品、检测溶液A和检测溶液B保存于-20℃，其余试
剂短期保存请置于4℃，长期保存则置于-20℃。
4. 浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
5. 刚开启的酶联板孔中可能会有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
6. 所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
7. 有效期：6个月。
8. 本操作说明适用于48T试剂盒，但48T试剂盒所有试剂减半。