生化技术复习题 简答题 问答题
生化名解和简答
生化复习题一、名解：1.生物氧化：营养物质在生物体内彻底氧化分解，生成CO2和H2O并释放能量的过程称为生物氧化2.核酸的变性：DNA分子受到某些理化因素的作用，维系空间结构的氢键断裂，使双螺旋结构松散变成单链的过程3.蛋白质的二级结构：蛋白质的某一肽链的主链骨架原子的相对空间排列分布4.蛋白质变性：在某些理化因素的作用下，蛋白质特定的空间结构被破坏，从而导致其理化性质的改变和生物学活性的丧失5.呼吸链：在线粒体内膜上的递氢体和递电子体构成的链式反应体系6.酮体：脂肪酸在心肌，骨骼肌等肝外组织线粒体内氧化生成的乙酰CoA可直接进入三羧酸循环彻底氧化分解供能7.生物转化：非营养物质经过氧化，还原，水解和结合反应，使其极性增加或活性改变，而易于排出体外的这一过程8.糖的有氧氧化：葡萄糖或糖原在有氧条件下彻底氧化生成二氧化碳和水并释放大量能量的过程9.糖的无氧氧化：葡萄糖或糖原在无氧或缺氧条件下，分解生成乳酸并释放少量能量的过程10.翻译：DNA的遗传信息经过转录传给mRNA，按照mRNA分子中密码信息指导合成蛋白质的过程11.转录：以DNA为模板合成RNA，将DNA的遗传信息传递到RNA分子中的过程二、简答：1.八种必需氨基酸：蛋氨酸、色氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸2.糖在体内代谢途径以及意义：意义:生成5-磷酸核糖5-磷酸核糖是体内合成核苷酸及核酸的原料。
生成NADPH＋H＋葡萄糖或糖原在有氧条件下彻底氧化生成二氧化碳和水并释放大量能量葡萄糖或糖原在无氧或缺氧条件下分解生成乳酸并释放少量能量3.血浆脂蛋白的种类及功能：乳糜微粒(CM)，是外源性甘油三酯的主要运输形式。
极低密度脂蛋白(VLDL),是运输内源性甘油三酯的主要形式。
低密度脂蛋白(LDL),是转运肝合成的内源性胆固醇的主要形式。
高密度脂蛋白(HDL),是参与胆固醇的逆向转运,即将肝外组织的胆固醇转运到肝脏。
4.三种RNA在蛋白质的合成中发挥的作用：mRNA是蛋白质生物合成的直接模板tRNA有识别密码子和转运氨基酸的功能rRNA是多肽链合成的装配机5.蛋白质沉淀方法:①盐析②重金属盐沉淀法③生物碱试剂沉淀法④有机溶剂沉淀法6.什么是蛋白质沉淀？蛋白质分子相互聚集从溶液中析出的现象称为蛋白质的沉淀。
生化简答题
名词解释：1 、蛋白质：蛋白质是由许多氨基酸通过肽键联系起来的含氮高分子化合物，是机体表现生理功能的基础。
2 、蛋白质的变性：在某些物理和化学因素的作用下，蛋白质的空间构象被破坏，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失称为蛋白质变性。
3 、蛋白质的一级结构：蛋白质分子中氨基酸的排列顺序。
4 、蛋白质的二级结构：蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构，也就是该段肽链主链骨架原子的相对空间位置，并不涉及氨基酸残基侧链的构象。
5 、蛋白质的三级结构：整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置，即整条肽链所有原子在三维空间的排布位置。
6 、蛋白质的四级结构：蛋白质分子中各个亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用。
7 、蛋白质的等电点：当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。
8 、DNA的变性：在某些理化因素的作用下，DNA分子互补碱基对之间的氢键断裂，使DNA双螺旋结构松散，变成单链，称DNA变性。
9 、DNA的复性：变性DNA在适当条件下，两条互补链可以重新恢复天然的双螺旋构象，称为DNA的复性。
10 、核酸酶：所有可以水解核酸的酶。
可分为DNA酶和RNA酶。
11 、酶：由活细胞合成的，对其特异底物起高效催化作用的蛋白质，是机体内催化各种代谢反应最主要的催化剂。
12 、核酶：是具有高效，特异催化作用的核酸，是近年发现的一类新的生物催化剂。
13 、酶原：无活性的酶的前体称为酶原。
14 、酶的必需基团：酶分子结构中与酶的活性密切相关的基团称为酶的必需基团。
15、同工酶：指催化相同的化学反应，而酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。
16、糖酵解：缺氧情况下，葡萄糖生成乳糖的过程。
17 、酵解途径：由葡萄糖分解成丙酮酸的过程。
18 必需脂酸：某些不饱和脂肪酸，动物机体自身不能合成，需要从植物油摄取，是动物不可缺少的营养素，称为必需脂酸。
生化名词解释及简答题
生化简答题一、蛋白质1、蛋白的结构的层次性怎么理解？(1)蛋白质的一级结构是氨基酸序列;(2)二级结构是肽链结构,包括α-螺旋,β-折叠等;(3)超二级结构是二级结构单元相互聚集形成更高一级有规律的结构;(4)结构域是相对独立的紧密球状实体;(5)三级结构是二级结构组合成的多肽链;(6)四级结构是两条或两条以上有独立三级结构的多肽链的四聚体.2、常用的蛋白质分离纯化方法有哪几种？各自的作用原理是什么？(1)盐析与有机溶剂沉淀：在蛋白质溶液中加入大量中性盐，以破坏蛋白质的胶体性质，使蛋白质从溶液中沉淀析出，称为盐析。
凡能与水以任意比例混合的有机溶剂，如乙醇、甲醇、丙酮等，均可引起蛋白质沉淀。
(2)电泳法：蛋白质分子在高于或低于其pI的溶液中带净的负或正电荷，因此在电场中可以移动。
电泳迁移率的大小主要取决于蛋白质分子所带电荷量以及分子大小。
(3)透析法：利用透析袋膜的超滤性质，可将大分子物质与小分子物质分离开。
(4)层析法：利用混合物中各组分理化性质的差异，在相互接触的两相（固定相与流动相）之间的分布不同而进行分离。
(5)凝胶过滤法:蛋白质溶液加于柱之顶部，任其往下渗漏，小分子蛋白质进入孔内，因而在柱中滞留时间较长，大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出，因此不同大小的蛋白质得以分离。
(6)超速离心：利用物质密度的不同，经超速离心后，分布于不同的液层而分离。
3、蛋白质的两性解离与等电点(1)两性解离:蛋白质分子中带有可解离的氨基和羧基，这些基团在不同的pH溶液中可解离成正离子或负离子，因此蛋白质分子即可带有正电荷又可带有负电荷，这种性质称为蛋白质的两性解离。
根据蛋白质的两性解离性质，可采取电泳法和离子交换层析法分离纯化蛋白质。
(2)等电点:氨基酸分子所带净电荷为零时,溶液的PH值即为氨基酸的等电点.4、为何蛋白质的含氮量能表示蛋白质相对量？实验中又是如何依此原理计算蛋白质含量的？因为蛋白质中氮的含量一般比较恒定,平均为16%,这是蛋白质元素组成的一个特点,也是凯氏定氮测定蛋白质含量的计算基础.蛋白质含量的计算为:每克样品中含氮克数 *6.25*100即为100克样品中蛋白质含量.5、氨基酸的分类非极性氨基酸（疏水氨基酸）8种丙氨酸（Ala）缬氨酸（Val）亮氨酸（Leu）异亮氨酸（Ile）脯氨酸（Pro）苯丙氨酸（Phe）色氨酸（Trp）蛋氨酸（Met）极性氨基酸（亲水氨基酸）：1）极性不带电荷：7种甘氨酸（Gly）丝氨酸（Ser）苏氨酸（Thr）半胱氨酸（Cys）酪氨酸（Tyr）天冬酰胺（Asn）谷氨酰胺（Gln）2）极性带正电荷的氨基酸（碱性氨基酸）3种赖氨酸（Lys）精氨酸（Arg）组氨酸（His） 3）极性带负电荷的氨基酸（酸性氨基酸）2种天冬氨酸（Asp）谷氨酸（Glu）二、酶1、酶的必需基团有哪几种,各有什么作用?酶的必需基团有活性中心的必需基团和非活性中心的必需基团,活性中心的必需基团有催化基团和结合基团,催化基团改变底物中某些化学键的稳定性,使底物发生反应生成产物,结合基团与底物相结合,使底物和一定构象的酶形成中间产物.非活性中心的必需基团为维持酶活性中心的空间构象所必需.2、酶蛋白与辅助因子的相互关系如何？（1）酶蛋白与辅助因子组成全酶，单独哪一种都没有催化活性；（2）一种酶蛋白只能结合一种辅助因子形成全酶，催化一定的化学反应；（3）一种辅助因子可与不同酶蛋白结合成不同的全酶，催化不同的化学反应；（4）酶蛋白决定反应的特异性，而辅助因子具体参加化学反应，决定酶促反应的性质。
生化简答题
在pH4.2的环境中，清蛋白带正电荷，具有与阴离子染料溴甲酚绿 （BCG）结合的特性，而此时球蛋白基本不结合BCG，故可直接测定血 清中的清蛋白。BCG 法灵敏度高、操作简便、重复性好，能自动化。 虽然α和β球蛋白与BCG也能起慢反应，但缩短反应时间即能去除此非特 异性反应，自动分析法使显色反应10-30秒后即可进行比色，因而使该 血清中的蛋白质因为都是由氨基酸组成，性质相似，故除少数蛋白质有 某种特性可利用，如清蛋白能用BCG法测定外，其他蛋白测定都需制备 特异的抗血清，采用免疫化学方法测定。ALB、PA、AAT、AAG、Hp 、AMG、Cp、TRF、CRP，以及免疫球蛋白IgG、IgM、IgA和补体C3 、C4，这14种蛋白质目前已有国际公认的标准参考物质，能用免疫比浊 法测定血清和其他体液中的这些蛋白质。此外，免疫球蛋白轻链κ和λ、 甲胎蛋白（AFP）、β2微球蛋白等在体液中的浓度也可用上述方法测定 血浆脂蛋白包括CM、VLDL、LDL、HDL等，运输胆固醇、甘油三酯、 磷脂及脂肪酸，前清蛋白与清蛋白运输游离脂肪酸、某些激素、胆红素 、多种药物等，甲状腺素结合球蛋白运输甲状腺激素，皮质素结合球蛋 白运输皮质醇，类固醇激素结合球蛋白运输类固醇激素，视黄醛结合蛋 白运输视黄醛，转铁蛋白运输铁，结合珠蛋白运输血红蛋白，血色素结 合蛋白运输血红素，铜蓝蛋白运输铜。 1）用于贫血的鉴别诊断：在缺铁性贫血中TRF增加，同时有血清铁下 降及铁饱和度下降；再生障碍性贫血时TRF正常或低下，因红细胞对铁 的利用障碍，因而血清铁正常或增高，铁饱和度升高，可超过50%，甚 至达90%。（2）TRF在急性时相反应中含量往往降低。（3）作为营养 状态的一项指标，其生物半寿期较短，故能及时地反映脏器蛋白的急剧 当出现遗传性苯丙氨酸羟化酶缺乏或不足时，苯丙氨酸不能正常转变成 酪氨酸，体内的苯丙氨酸蓄积，并可经转氨基作用生成苯丙酮酸等代谢 产物。血中苯丙氨酸极度升高，苯丙酮酸也异常升高并出现苯丙酮酸尿 。PKU患者有智力缺陷，其严重程度与血苯丙氨酸升高的水平和持续时 间有关，因而患儿出生后3月内即需用低苯丙氨酸膳食治疗，控制血中 苯丙氨酸浓度，可以改善症状，防止痴呆发生。这种治疗最少至10岁， （1）尿酸排泄障碍：当肾小球滤过率下降，或近端肾小管对尿酸的重 吸收增加或（和）分泌功能减退时，便导致高尿酸血症。其中一部分是 机制不明的多基因性遗传缺陷引起，另一部分由继发性慢性肾疾患等引 起。（2）尿酸生成过多1）由嘌呤合成代谢紊乱引起，其中大多数属多 基因遗传缺陷，机制不明。其中酶缺陷引起者仅占少数：①次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺乏；②PRPP合成酶亢进；③葡萄糖6-磷酸酶（G6pase）缺乏，引起葡萄糖-6-磷酸增多，并沿磷酸戊糖代谢 途径转化成较多的PRPP，使嘌呤合成增多。④腺嘌呤磷酸核糖转移酶 （APRT）缺乏。2）嘌呤分解增加：在骨髓增殖性疾病等，有旺盛的细 血液pH为7.4时，尿酸钠的溶解度约为0.42mmol/L（7mg/dl），尿酸浓 度>0.42mmol/L 时血浆尿酸已成过饱和状态，当浓度>0.48mmol/L持久 不降，并出现血浆清蛋白及α1α2球蛋白减少、局部pH降低或局部温度 降低时即可使尿酸钠呈微小结晶析出。尿酸盐结晶较易沉淀在血管较 少，基质中粘多糖含量较丰富的结缔组织、软骨和关节腔内。运动、饮 酒、应激、局部损伤等都可诱发这些部位急性炎症发作，如运动使这些 组织容易发生缺氧，于是出现糖酵解加速，乳酸产生增多，pH降低， 导致局部尿酸钠结晶析出。微小的尿酸钠结晶表面可吸附IgG，在补体 参与、多型核白细胞吞噬作用及各种炎症介质作用下，导致组织发生炎 胰岛素原被分解为胰岛素与31个氨基酸的C肽，二者以等摩尔数分泌入 血，C肽虽然没有生物学活性但对于保证胰岛素的正常结构是必需的。 C肽的半寿期约35min，比胰岛素更长，且其降解不在肝脏而在肾脏， 肝脏的代谢可以忽略，所以与外周血胰岛素浓度相比，可更好地反映胰 岛β细胞功能。而且C肽不受外源性胰岛素干扰，也不与胰岛素抗体反应 影响的激素有胰岛素、胰高血糖素、肾上腺素、生长激素、皮质醇、甲 状腺激素、长抑素。 影响因素有：包括HbA1和HbA0 、 糖化血红蛋白的形成是不可逆的 、 反映过去6～8周的平均血糖水平、 用胰岛素治疗的糖尿病人，应将糖 化血红蛋白作为常规检测指标
现代生化技术复习题
现代⽣化技术复习题. 第⼀章提取与分离技术⼀、名词解释1、机械破碎法2、物理破碎法3、温度差破碎法4、压⼒差破碎法5、超声波破碎法6、渗透压变化法7、化学破碎法8、酶促（学）破碎法9、⾃溶法10、抽提11、盐溶12、盐析13、沉淀分离法14、分段盐析15、K S分段盐析16、β分段盐析17、等电点沉淀法18、有机溶剂沉淀法19、复合沉淀法20、⾦属盐沉淀法21、选择性变性沉淀法⼆、填空题1、细胞破碎的⽅法有、和。
2、机械破碎法按照使⽤机械的不同可分为、和。
3、常⽤的物理破碎法有、和等。
4、常⽤的压⼒差破碎法有、和等。
5、化学破碎法采⽤的表⾯活性剂有和两种。
其中之⼀按其带电荷性质⼜可分为和两种。
6、根据抽提时所采⽤的溶剂或溶液的不同。
抽提的⽅法主要有、、和等7、常⽤的沉淀分析法有、、、、和等。
8、常⽤的⾦属盐沉淀法有和。
9、蛋⽩质盐析时，带⼊⼤量盐离⼦杂质，可采⽤、和⽅法脱盐。
10、要分离和提纯核酸过程中，常⽤来沉淀DNA和RNA。
11、常⽤的使蛋⽩质沉淀的⽅法有、、、和等。
12、三、是⾮题（对的打√、错的打×）1、渗透压变化法可⽤于⾰兰⽒阳性菌的破碎。
（）2、有机溶剂破碎细胞主要是使细胞膜磷脂结构破坏，从⽽使细胞膜的透过性增强。
（）3、⽤化学法破碎细胞提取酶时，经常⽤离⼦型表⾯活性剂。
（）4、⽤化学法破碎细胞提取酶时，⽤⾮离⼦型表⾯活性剂最好。
（）5、对于具有细胞壁结构的细胞采⽤酶法破碎时，应根据细胞壁结构选择不同的酶。
（）6、酸性物质易溶于酸性溶剂中，碱性物质易溶于碱性溶液中。
（）7、在等电点时两性电解质溶解度最⼩。
（）8、抽提两性电解质时应避开其等电点。
（）四、选择题1、利⽤突然降压法破碎⾰兰⽒阴性⼤肠杆菌应选择期的细胞破碎效果最佳。
A 调整期B 对数⽣长期C 平衡期D衰退期2、提取膜结合酶采⽤法破碎细胞最佳。
A ⾼压冲击法B 突然降压法C 渗透压变化法3、超声波破碎法最适合于破碎。
生化复习简答题与论述题
生化复习简答题与论述题Document serial number【UU89WT-UU98YT-UU8CB-UUUT-UUT108】第一章1．何为蛋白质的变性作用其实质是什么答：在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间构象变成无序的空间结构，从而导致其理化性质和生物活性的丧失。
变性的实质是破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。
2.何谓分子伴侣它在蛋白质分子折叠中有何作用答：分子伴侣：是指通过提供一个保护环境从而加速蛋白质折叠成天然构象或形成四级结构的一类蛋白质。
它在蛋白质分子折叠中的作用是：（1）可逆地与未折叠肽段的疏水部分结合随后松开，如此重复进行可防止错误的聚集发生，使肽链正确折叠；（2）可与错误聚集的肽段结合，使之解聚后，再诱导其正确折叠；（3）在蛋白质分子折叠过程中指导二硫键正确配对。
3.试述蛋白质等电点与溶液的pH和电泳行为的相互关系。
答：PI>PH时，蛋白质带净正电荷，电泳时，蛋白质向阴极移动；PI<PH时，蛋白质带净负电荷，电泳时，蛋白质向阳极移动；PI=PH是，蛋白质净电荷为零，电泳时，蛋白质不移动。
4.试述蛋白质变性作用的实际应用答：蛋白质的变性有许多实际应用，例如，第一方面利用变性：（1）临床上可以进行乙醇、煮沸、高压、紫外线照射等消毒杀菌；（2）临床化验室进行加热凝固反应检查尿中蛋白质；（3）日常生活中将蛋白质煮熟食用，便于消化。
第二方面防止变性：当制备保存蛋白质制剂（如酶、疫苗、免疫血清等）过程中，则应避免蛋白质变性，以防止失去活性。
第三方面取代变性：乳品解毒（用于急救重金属中毒）。
第二章1.简述RNA的种类及其生物学作用。
答：（1）RNA有三种：mRNA、tRANA、rRNA；（2）各种RNA的生物学作用：①mRNA是DNA的转录产物，含有DNA的遗传信息，从5’-末端起的第一个AUG开始，每三个相邻碱基决定一个氨基酸，是蛋白质生物合成中的模板。
生化题库简答题含答案
1. 解释单糖溶液的变旋现象。
2. 阐述生物膜模型及结构特点。
3. 阐述生物膜的两侧不对称性。
4. 阐述膜转运的不同方式。
5. 试述脂质的分类与结构特点。
6. 举例说明蛋白质在生命运动中，起着哪些重要生理功能？7. 蛋白质由哪些元素组成？测定蛋白质含量以什么元素为标准？怎样计算？8. 哪些氨基酸是极性的？哪些氨基酸是非极性的？9. 什么是氨基酸的 pK 值？什么是氨基酸的 pI 值？二者有何区别？10. 为什么几乎所有蛋白质在 280nm 处，均有强吸收？11. 有哪些因素参于维持蛋白质的空间结构？12. 简述α－Helix 与β－Sheet 的特点？13. 什么是蛋白变性？变性蛋白有何特性？降解与变性有何区别？14. 蛋白质的分离、纯化有哪些常用方法？简述各种方法的原理15. 以血红蛋白为例，简述蛋白质空间结构与功能的关系。
16. 如何分析蛋白质的一般结构？用于一级结构分析的常见试剂有哪些？17. 简述两类核酸的基本结构单位，主要组成，在细胞中分布的部位，基本单元以什么键相连？18. 简述 DNA 双螺旋结构的特点双螺旋结构是 DNA 二级结构最基本的形式，是在 1953 年由 J.Watson 和 F.Crick 提出的。
DNA 二级结构的主要形式有 B－DNA 、A－DNA 、Z－DNA，其中， B－DNA 是普遍形式。
19. 简述 RNA 有哪些主要类型，比较其结构与功能的特点。
RNA 是以 DNA 为模板合成的单链线形分子，其 mRNA 具有聚腺苷酸的尾结构和甲基化鸟苷酸的帽子结构。
tRNA 二级结构呈三叶草结构。
而 rRNA 是细胞中核糖体的骨架。
RNA 又分 mRNA 、tRNA 、rRNA 三种。
20. 对一双链 DNA 而言，如一条链(A+G)/(T+C)=0.7 则互补链中(A+G)/(T+C)=？在整个 DNA 分子中(A+G)/(T+C)=？如一条链中(A+T)/(G+C)=0.7 互补链中(A+T)/(G+C)=？在整个 DNA 分子中(A+T)/(G+C)=？21. 写出 DNA 变性、复性和杂交的定义。
生化复习资料简答题与论述题
第一章1．何为蛋白质的变性作用？其实质是什么？答：在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间构象变成无序的空间结构，从而导致其理化性质和生物活性的丧失。
变性的实质是破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。
2.何谓分子伴侣？它在蛋白质分子折叠中有何作用？答：分子伴侣：是指通过提供一个保护环境从而加速蛋白质折叠成天然构象或形成四级结构的一类蛋白质。
它在蛋白质分子折叠中的作用是：（1）可逆地与未折叠肽段的疏水部分结合随后松开，如此重复进行可防止错误的聚集发生，使肽链正确折叠；（2）可与错误聚集的肽段结合，使之解聚后，再诱导其正确折叠；（3）在蛋白质分子折叠过程中指导二硫键正确配对。
3.试述蛋白质等电点与溶液的pH和电泳行为的相互关系。
答：PI>PH时，蛋白质带净正电荷，电泳时，蛋白质向阴极移动；PI<PH时，蛋白质带净负电荷，电泳时，蛋白质向阳极移动；PI=PH是，蛋白质净电荷为零，电泳时，蛋白质不移动。
4.试述蛋白质变性作用的实际应用？答：蛋白质的变性有许多实际应用，例如，第一方面利用变性：（1）临床上可以进行乙醇、煮沸、高压、紫外线照射等消毒杀菌；（2）临床化验室进行加热凝固反应检查尿中蛋白质；（3）日常生活中将蛋白质煮熟食用，便于消化。
第二方面防止变性：当制备保存蛋白质制剂（如酶、疫苗、免疫血清等）过程中，则应避免蛋白质变性，以防止失去活性。
第三方面取代变性：乳品解毒（用于急救重金属中毒）。
第二章1.简述RNA的种类及其生物学作用。
答：（1）RNA有三种：mRNA、tRANA、rRNA；（2）各种RNA的生物学作用：①mRNA是DNA的转录产物，含有DNA的遗传信息，从5’-末端起的第一个AUG 开始，每三个相邻碱基决定一个氨基酸，是蛋白质生物合成中的模板。
②tRNA携带运输活化的氨基酸，参与蛋白质的生物合成。
③rRNA与蛋白质结合构成核糖体，核糖体是蛋白质合成的场所。
生化考试题库及答案解析
生化考试题库及答案解析一、选择题1. 酶的催化作用机制中，以下哪项是正确的？A. 酶可以降低反应的活化能B. 酶可以改变反应的平衡常数C. 酶可以改变反应的速率常数D. 酶可以改变反应的热力学性质答案：A解析：酶作为生物催化剂，其主要作用是降低化学反应的活化能，从而加速反应速率。
酶并不改变反应的平衡常数或热力学性质。
2. 下列哪种物质不是核酸的组成部分？A. 磷酸B. 核苷酸C. 脱氧核糖D. 氨基酸答案：D解析：核酸由磷酸、核苷酸、脱氧核糖或核糖组成，而氨基酸是蛋白质的基本组成单位。
二、填空题1. 细胞内能量的主要储存形式是________。
答案：ATP解析：三磷酸腺苷（ATP）是细胞内能量的主要储存和传递分子。
2. 蛋白质的一级结构是由________构成的。
答案：氨基酸序列解析：蛋白质的一级结构是指氨基酸的线性排列顺序。
三、简答题1. 简述细胞呼吸的过程。
答案：细胞呼吸是细胞内有机物氧化分解，释放能量的过程。
主要包括糖酵解、丙酮酸氧化脱羧、三羧酸循环和电子传递链四个阶段。
在这些过程中，有机物质被逐步氧化分解，最终产生二氧化碳和水，同时释放能量，部分能量以ATP的形式储存。
2. 描述DNA复制的过程。
答案：DNA复制是细胞分裂前，DNA分子精确复制自身的过程。
主要包括解旋、合成引物、链的延伸和引物的移除与填补四个步骤。
在复制过程中，双链DNA首先被解旋酶解旋，然后DNA聚合酶在引物RNA 的帮助下，沿着模板链合成新的互补链，最终形成两个相同的DNA分子。
四、计算题1. 如果一个酶促反应的速率常数（k）是0.1秒^-1，求在10秒内反应的总反应次数。
答案：总反应次数 = (1 - e^(-kt)) / (1 - e^(-k))，其中t=10秒，k=0.1秒^-1。
解析：根据指数衰减公式，可以计算出在给定时间内反应的总次数。
将给定的数值代入公式，计算得出结果。
五、实验题1. 设计一个实验来验证酶的专一性。
生化专业考试题及答案
生化专业考试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 酶的催化作用主要依赖于：A. 酶的浓度B. 酶的活性中心C. 酶的分子量D. 酶的溶解度答案：B2. 下列哪一项不是蛋白质的功能？A. 催化作用B. 运输作用C. 储存作用D. 调节作用答案：C3. 细胞色素c在细胞呼吸链中的作用是：A. 电子传递体B. 质子泵C. ATP合酶D. 氧化磷酸化酶答案：A4. 糖酵解过程中，下列哪个化合物不是最终产物？A. 乳酸B. 乙醇C. 丙酮酸D. ATP答案：B5. 核酸的组成单位是：A. 氨基酸B. 核苷酸C. 脂肪酸D. 单糖答案：B二、填空题（每空2分，共20分）6. 细胞膜上的蛋白质主要包括________和________。
答案：跨膜蛋白；外周蛋白7. 蛋白质的四级结构是指由多个多肽链组成的蛋白质分子的________。
答案：空间结构8. 细胞周期包括G1期、S期、G2期和________。
答案：M期9. 糖酵解过程中，NAD+被还原成NADH，这个过程发生在________。
答案：第7步10. 核糖体是蛋白质合成的场所，它由rRNA和________组成。
答案：蛋白质三、简答题（每题10分，共30分）11. 简述DNA复制的半保留性特点。
答案：DNA复制的半保留性指的是在DNA复制过程中，每个新合成的DNA分子都包含一个原始链和一个新合成的互补链。
这意味着原始的两条链被保留下来，而每条链都作为模板来合成新的互补链。
12. 描述细胞凋亡与细胞坏死的区别。
答案：细胞凋亡是一种程序化的细胞死亡过程，由细胞内部的程序控制，通常不引起炎症反应。
而细胞坏死是一种非程序化的细胞死亡，通常由于外部因素如缺氧、毒素等引起，会导致炎症反应。
13. 解释什么是基因表达调控，并举例说明。
答案：基因表达调控是指细胞内控制基因转录和翻译过程的机制。
它包括转录前调控、转录调控、转录后调控以及翻译调控等。
例如，转录因子可以结合到启动子区域，增强或抑制基因的转录。
生化简答题
简答题第一章1.蛋白质的基本组成单位是什么？其结构有什么特征？答：蛋白质的基本组成单位是氨基酸（除甘氨酸外），均为L-α-氨基酸，在α-碳原子上连有一个氨基、一个羧基、一个氢原子、一个侧链。
每个氨基酸的侧链各不相同，使其表现不同性质的结构特征。
2.简述蛋白质的主要理化性质。
答：蛋白质由氨基酸组成，又是生物大分子物质，所以其既有氨基酸的性质，又有其作为生物大分子的独特性质。
（1）两性电离：蛋白质是两性电解质，具有两性解离的性质。
在某一PH值溶液中，其解离成正、负离子的趋势相等，此时溶液PH值即为等电点。
（2）蛋白质的胶体性质：蛋白质颗粒表面形成水化膜及带电荷，使蛋白质在溶液中稳定存在。
（3）蛋白质变形、沉淀和凝固：某些理化因素可以破坏蛋白质的空间构象，使其变性，变性后的蛋白质容易发生沉淀，将变性后的蛋白质加热，使其不再溶于强酸、强碱中，此即为蛋白质的凝固作用。
（4）蛋白质的吸收：蛋白质的分子中也有含共轭双键的酪氨酸和色氨酸，因此在280nm处有特征性吸收峰，据此性质可作为蛋白质定量测定。
（5）蛋白质的显色反应：I茚三酮反应：氨基酸+茚三酮水合物——还原茚三酮+还原茚三酮—茚三酮——蓝紫色化合物，此性质可作为氨基酸的定量分析方法。
II双缩脲反应：肽键+硫酸铜——（加热、稀碱溶液）紫色、红色物，氨基酸无此反应，此可作为检测蛋白质的水解程度的方法。
3.试比较蛋白质的一、二、三、四级结构及维持其稳定的化学键。
答：（1）多肽链中氨基酸的排列顺序称为蛋白质的一级结构，维系蛋白质一级结构中的主要化学键是肽键，有些蛋白质还包含二硫键。
（2）蛋白质的二级结构是指蛋白质分子中某一段肽键的局部空间结构，也就是该肽链主链骨架原子的相对空间位置，并不涉及氨基酸残基侧链的构象。
蛋白质二级结构包括α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲。
维持蛋白质二级结构的化学键是氢键。
（3）蛋白质的三级结构是整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置，即整条肽链所有原子在三维空间的排列位置。
生化往年试题简答题及其答案
生化往年试题简答题及其答案生化往年试题简答题及其答案1.简述磷酸戊糖的产物及其产物的生理意义具有重要生理意义的两个代谢产物是(A) 6－磷酸葡萄糖，6－磷酸葡萄糖酸内酯(B) 6－磷酸葡萄糖酸，5－磷酸核酮糖其生理意义：1》产生NADP 2》生成磷酸核糖，为核酸代谢做物质准备 3》分解戊糖2.简述密度分类法血浆脂蛋白的种类及其功能超速离心分类法（密度分类法）分类情况：其中密度最小的为乳糜微粒（CM ），在最上层。
依次为极低密度脂蛋白（VLDL ）、低密度脂蛋白（LDL ）和高密度脂蛋白（HDL ）。
a. 乳糜微粒:密度非常低，运输甘油三酯和胆固醇酯，从小肠到组织肌肉和adipose 组织。
b. 极低密度脂蛋白VLDL:在肝脏中生成，将脂类运输到组织中，当VLDL 被运输到全身组织时，被分解为三酰甘油、脱辅基蛋白和磷脂，最后，VLDL 被转变为低密度脂蛋白。
c. 低密度脂蛋白:把胆固醇运输到组织，经过一系列复杂的过程，LDL 与LDL 受体结合并被细胞吞食。
d. 高密度脂蛋白:也是在肝脏中生成，可能负责清除细胞膜上过量的胆固醇。
当血浆中的卵磷脂：胆固醇酰基转移酶将卵磷脂上的脂肪酸残基转移到胆固醇上生成胆固醇脂时，HDL 将这些胆固醇脂运输到肝。
3.简述PCR 技术的反应体系和主要步骤a.反应体系：扩增缓冲液，dNTP 混合物，引物，模板DNA ，DNA 聚合酶b.主要步骤：变性，95℃，引链退火，小于5℃，引物和模板的结合。
延伸，72 ℃，引物3＇端为合成的起点，以单核苷酸为原料，沿模板以5＇→3＇方向延伸，合成DNA 新链。
4.真核生物由hnRNA 转变为mrRNA 包括哪些加工过程？a.在专一的酶促作用下，5‘端形成特殊的帽子结构b.在RNA 末端腺苷酸转移酶的作用下，在3’端添加polA 尾巴。
c.通过特殊的机制，去掉内含子，将外显子连接起来d.对链内特定的核苷酸进行甲基化修饰。
5.试述肝脏如何维持血糖浓度相对平衡？当血糖含量升高时，可以迅速使胰岛β细胞的活动增强并分泌胰岛素。
生化简答题
1.什么事蛋白质的二级结构？它主要有哪几种？各有何特征？蛋白质的二级结构：指蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构，也就是该段肽链主链骨架原子的相对空间位置，并不涉及氨基酸残基侧链的构想。
其维持结构稳定的作用力是氢键。
蛋白质二极结构的常见形式有：a-螺旋，b-折叠，b-转角和无规卷曲。
2.简述DNA 和RNA 的主要区别（1）DNA 是由脱氧核苷酸单元通过3’，5’磷酸二酯键相连形成的大分子，碱基为A 、T 、C 、G ，戊糖是B-D-2-脱氧核糖;而RNA 是由核糖核苷酸单元通过3’，5’磷酸二酯键相连形成的大分子，碱基为A 、G 、C 、U ，戊糖为B-D-核糖;（2）DNA 的结构是由两条反向平行的多聚核苷酸链形成的双螺旋结构，分子量较大;而RNA 的结构以单链为主，只是在单链中局部可形成双链结构，分子量较小;（3）DNA 位于细胞的细胞核和线粒体，RNA 存在部位包括细胞液、细胞核和线粒体;（4）DNA 的主要功能是携带遗传信息，决定细胞和个体基因型，而RNA 的主要功能是参与细胞内DNA 遗传信息的表达。
3.酶的特征性常数是什么？简述Km 和Vm 的意义。
酶的特征性常数是：米氏常数，即Km 。
Km 是单底物反应中酶与底物可逆的生成中间产物和中间产物转化为产物这三个反应的速度常数的综合。
即：P E ES S E k K +−→←−→←+31，Km=（K2+K3）/K1，米氏常数Km 值数值上等于酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度；（1）Km 的意义为①Km 值等于酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。
②当K2≥K3时（即ES 解离成E 和S 的速度大大超过分解为E 和P 的速度时），Km 值表示酶对底物的亲活力。
Km 值越小，酶与底物的亲活力越大，反之亦然。
③Km 值是酶的特征性常数之一，每一种酶都有它的Km 值。
Km 值只与酶的结构、酶所催化的底物和反应环境（温度、PH 、离子强度）有关，与酶的浓度无关。
生化试题答案
生化试题答案一、选择题1. 生化过程中，下列哪项是细胞获取能量的主要途径？A. 光合作用B. 呼吸作用C. 蛋白质合成D. 核酸代谢答案：B2. 酶的催化作用主要依赖于其结构中的哪个部分？A. 活性中心B. 辅基C. 亚基D. 底物结合位点答案：A3. 在蛋白质合成过程中，tRNA的主要功能是什么？A. 运输氨基酸B. 提供能量C. 催化肽键形成D. 指导蛋白质折叠答案：A4. 核糖体的主要功能是在哪里？A. 细胞核B. 内质网C. 线粒体D. 核糖体答案：B5. 以下哪种物质不是脂肪酸β-氧化的产物？A. 乙酰辅酶AB. 丙酮酸C. 还原型NADHD. 二氧化碳和水答案：B二、填空题1. 细胞呼吸的最终电子受体是________，在有氧条件下是氧气，在无氧条件下可能是其他物质如硫化氢等。
答案：氧气2. 三羧酸循环的第一步反应是由________酶催化的，该反应的产物是柠檬酸。
答案：柠檬酸合成酶3. 在DNA复制过程中，负责解开双链DNA的酶是________。
答案：解旋酶4. 蛋白质的一级结构是指其________的线性排列顺序。
答案：氨基酸5. 脂肪酸合成过程中，每次延长碳链需要消耗一个分子的________。
答案：丙二酸单酰辅酶A三、简答题1. 简述酶的动力学特性及其影响因素。
答：酶的动力学特性通常通过Michaelis-Menten动力学来描述，包括最大速率（Vmax）和Michaelis常数（Km）。
Vmax表示在饱和底物浓度下酶催化反应的最大速率，Km则是底物浓度在Vmax一半时的值。
酶活性受多种因素影响，包括温度、pH值、底物浓度、酶浓度、底物亲和力以及可能存在的抑制剂或激活剂等。
2. 描述细胞膜的结构特点及其在细胞中的功能。
答：细胞膜是由磷脂双层构成的半透膜，其中嵌入有多种蛋白质。
磷脂双层的疏水尾部朝向内部，亲水头部朝向细胞内外环境。
细胞膜的功能包括维持细胞形态、保护细胞内部稳定性、选择性物质输送（通过通道蛋白和载体蛋白）、信号传导（通过受体蛋白）以及细胞间的相互作用等。
生化简答题及论述题
简答题及论述题1、请描述沃森和克里克在1953年提出的DNA双螺旋结构模型1、两条反平行链，右手螺旋；碱基在链内侧，戊糖磷酸在外侧，碱基垂直于螺旋轴，碱基与糖垂直。
10个核苷酸形成一个螺旋，螺距3.4nm。
碱基互补配对，一个A对应一个T，一个G对应一个C。
2、某些金属和非金属离子以及一些有机小分子对酶的结构和功能有何影响？2、（1）通过结合底物为反应定向。
（2）通过可逆地改变金属离子的氧化态调节氧化还原反应。
（3）通过静电效应稳定或屏蔽负电荷。
（4）作为辅酶或者辅基起到电子或原子的传递作用。
3、使酶活力降低或丧失的可能因素有哪些？3、（1）温度升高（2）酸碱变化（3）有机溶剂或重金属离子4、试比较酶的变性与失活有什么异同4、酶是由蛋白质组成的，所以具有蛋白质的性质。
即在高温、过强的酸、碱环境下会发生组成或是结构的改变，这就是变性。
由于组成或者结构改变，酶的功能也会受到破坏。
酶的变性往往是不可逆的。
当温度或者酸碱度达到一个程度时，酶的活性持续下降，当把条件恢复到初始状态时，酶活并没有恢复，这说明酶已失活。
但是酶的结构或组成没有发生改变。
在经过特殊处理后，酶活能够得到恢复。
5、试列举五种测定蛋白质分子量的方法5、渗透压法、化学组成法、沉降分析法、凝胶过滤法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法。
6、什么是蛋白质的二级结构？它主要有哪几种形式？6、蛋白质主链的折叠产生由氢键维系的有规则的构象，成为蛋白质的二级结构。
二级结构包括α螺旋、β折叠、β转角和β突起以及无规则卷曲。
7、什么是抗体？简述其结构特点（可用简图表示）7、机体是在抗原物质刺激下，由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。
抗体是具有4条多肽链的对称结构，其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链)；2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链)。
链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。
8、简述从蛋白质与氨基酸的混合物中分离和鉴定氨基酸的方法8、分配柱层析、纸层析、离子交换层析、薄层层析等，具体见书151到153页。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
思考题一.生物大分子物质的制备简述生化分离方法与一般化学分离法相比的特点?特点：与化学产品的分离制备相比较，生物大分子的制备有其特殊性：（1）生物材料的组成极其复杂，常常包含有数百种乃至及几千种化合物。
还有很多化合物未知，有待人们研究和开发。
（2）有的生物大分子在分离过程中还在不断的代谢，所以生物大分子的分离纯化方法差别极大，想找到一种适合各种不同类生物大分子分离制备的标准方法是不可能的。
（3）许多生物大分子在生物材料中的含量甚微。
分离纯化的步骤繁多，流程又长，有的目的产物要经过十几步，几十步的操作才能达到所需纯度的要求。
（4）生化分离制备几乎都在溶液中进行，影响因素很多，经验性较强。
（5）许多具有生物活性的物质一旦离开活体，很容易变形破坏，因此常选用比较温和的条件。
生物材料选择的一般原则有哪些？生物材料选择的一般原则是:制备生物大分子，首先要根据目的选择合适的生物材料。
材料选择的一般原则是，有效成分（即欲提取的物质）含量高、来源丰富、制备工艺简单、成本低等。
但在实际工作中，则只须考虑材料的选择符合实验预定的目标要求即可。
材料选定后要尽可能保持新鲜，尽快加工处理。
生物材料如暂不提取应冷冻保存。
常用于细胞破碎方法可分为哪些类型？简述细胞破碎的目的意义。
细胞的破碎方法可分为：机械法，包括（1）捣碎法（2）研磨法（3）匀浆法物理法，包括（1）反复冻融法（2）超声波处理法（3）压榨法化学与生物化学方法，包括（1）酶解法（2）化学法目的意义：除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶之外，对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化，都需要事先将细胞和组织破碎，使生物大分子充分释放到溶液中，并不丢失生物活性。
不同的生物体或同一生物体不同部位的组织，其组织破碎的难易不一，使用的方法也不相同。
何谓提取？影响提取有效成分的因素有哪些?提取定义：提取是指在一定的条件下，用适当的溶剂（溶液）处理原料，使欲分离物质充分溶解到溶剂（溶液）中的过程，也称为抽提。
常用稀盐溶液、缓冲溶液和有机溶剂等来提取生物大分子。
影响提取有效成分的因素：（1）溶液（溶剂）的性质（2）离子强度（3）PH（4）温度（5）防止酶的降解作用简述透析法的原理及应用原理：透析是利用小分子能通过，而大分子不能通过半透膜的原理把它们分开而除去小分子杂质的一种重要手段。
应用：透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
常用的浓缩方法有哪些，试简述其原理?浓缩的方法有：（1）透析法：把装抽提液的透析袋埋在吸水力强的聚乙二醇（PEG）或甘油中，10ml抽提液可在1h内浓缩到几乎无水的程度。
（2）沉淀法：在抽提液中加入适量的中性盐或有机溶剂使有效成分变为沉淀。
（3）吸附法：将干葡聚糖凝胶G25(或吸水棒）加入抽提液中，两者比例为1:5。
由于凝胶吸水之故，抽提液的体积可缩小三倍左右，回收蛋白质量约80%。
冷冻干燥的原理及优点原理：冷冻干燥是先将生物大分子的水溶液冰冻，然后在低温和高真空下使冰升华，留下固体干粉。
优点：（1）由于是由冰冻状态直接升华为气态，所以样品不起泡、不暴沸（2）得到的干燥样品不粘壁、易取出。
（3）冻干后的样品是疏松的粉末，易溶于水。
什么是沉淀法，沉淀蛋白质的几种主要方法的原理及应用沉淀法：利用某种试剂使生物大分子沉淀，但不影响大分子结构的方法。
主要方法：（1）中性盐沉淀（盐析法）：中性盐的亲水性大于蛋白质和酶分子的亲水性，所以在加入大量中性盐后，其夺走了水分子，破坏了水膜。
同时又中和了电荷，破坏亲水胶体，蛋白质分子即形成沉淀。
应用：除了蛋白质和酶以外，多肽、多糖和核酸等都可以用盐析法进行沉淀分离。
盐析法应用最广的还是在蛋白质领域。
（2）有机溶剂沉淀法：降低了水溶液的介电常数，减小了溶剂的极性。
同时削弱了溶剂分子与蛋白质分子间的相互作用，从而导致蛋白质溶解度降低而沉淀。
除此以外，使带电溶质分子更易互相吸引而凝集，破坏了蛋白质的水化膜，从而发生沉淀。
应用：生化制备。
（3）选择性变性沉淀法：利用蛋白质、酶与核酸等生物大分子与非目的生物大分子在物理化学性质等方面的差异，选择一定的条件使杂蛋白等非目的物质变性沉淀而得到提纯，称为选择性变性沉淀法。
应用:通常用于生物大分子分离纯化的初期，是分离纯化流程中附带进行的一个分离纯化步骤。
（4）等电点沉淀法：等电点沉淀法是利用具有不同等电点的两性电解质在达到电中性时溶解度最低，易发生沉淀，从而实现分离的方法。
应用：此法主要用于在分离纯化流程中去除杂蛋白，而不用于沉淀目的物。
（5）有机聚合物沉淀硫酸铵沉淀蛋白质的原理是什么？使用硫酸铵应注意什么？为什么要防止局部浓度过高？硫酸铵沉淀蛋白质的原理：硫酸铵破坏蛋白质的水化膜，中和蛋白质电荷，破坏了胶体，从而形成沉淀。
注意事项：纯度要高，否则夹带的杂质会使硫酸铵的浓度不准确，甚至引起蛋白质和酶的变性；添加硫酸铵后，要使其充分溶解，至少放置30min以上，待蛋白质沉淀完全，然后将沉淀分离。
原因：防止蛋白质共沉。
提取生物活性物质时，活性保护性措施有哪些？提取一些具有生理活性的物质时，除了考虑被提取物溶解度外，还应考虑被提取物活性的保护。
对于一些生物大分子如蛋白质、酶和核酸来说，主要措施有如下几点：（1）采用缓冲系统；（2）加入保护剂；（3）抑制水解酶的破坏；（4）其它一些特殊要求的保护措施。
生物大分子的保存需注意哪些问题？空气温度水分光线样品pH 时间生物大分子的制备分为哪几个阶段，包括哪些方法和技术？生物大分子的制备通常需经前处理、粗分级、细分级三个阶段。
前处理包括材料的选择、细胞的破碎和提取等步骤。
粗分级，即早期分离纯化。
通常用盐析、等电点沉淀、超滤、有机溶剂分级等简便、处理量大的方法从混合液中除去大量杂质，得到浓缩溶液。
细分级，即后期分离纯化。
选用分辨率高的方法进一步提纯，如经过凝胶过滤、吸附层析、离子交换层析、亲和层析、HPLC以及凝胶电泳、等电点聚焦电泳等。
简述生物活性物质分离纯化方法的主要原理。
一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中，如盐析，有机溶剂提取，层析和结晶等；二是将混合物置于单一物相中，通过物理力场的作用使各组分分配于来同区域而达到分离目的，如电泳，超速离心，超滤等。
综合评价生物大分子分离纯化方案设计的好坏应从哪些方面进行？比活性（活性单位数/毫克蛋白）、纯化倍数（每步的比活性/粗抽提液的比活性）、收得率（每步的总活性/粗抽提液总活性*100%）层析技术根据分离原理不同，层析技术可以分为哪几种，其基本原理分别是什么?根据分离原理不用，可分为：吸附层析、分配层析、凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析等。
吸附层析：是以吸附剂为固定相，根据待分离物质与吸附剂之间吸附力不同而达到分离的层析技术。
分配层析：是根据物质在两互不相溶的溶剂系统中，分配系数不同而达到分离的一种层析技术。
凝胶过滤层析：是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相，根据物质在凝胶颗粒的微孔中扩散的速度进行分离，大分子移动的速度快，先被洗脱出来而小分子物质移动的速度慢，后被洗脱出来。
离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有不同的静电力而将它们分离。
亲和层析：是根据生物大分子和配体之间的特异性亲和力（如酶与抑制剂、抗体和抗原、激素和受体等），将某种配体连接在载体中作为固定相。
固定相的配基与生物分子间的特殊生物亲和能力不同进行相互分离的技术。
柱层析的基本操作包括哪些步骤?（1）装柱（2）层析柱的平衡（3）加样（4）洗脱（5）分离物质的收集、鉴定及保存（6）基质的再生离子交换层析的基木原理及一般操作原理：基于各种带电荷物质与交换剂的亲和力差异，即物质的电荷性、极性、与离子交换基团的交换能力差异，通过控制条件将它们分离。
一般操作：离子交换剂的带电基团吸附溶液中相反电荷的物质，被吸附的物质随后与带相同类电荷的其他离子所置换而洗脱。
离子交换剂有哪几部分组成？何为阳离子和阴离子交换剂?3部分，化学合成的树脂类纤维素凝胶引入带负电荷的解离基团称为阳离子交换剂，引入带正电荷解离基团称为阴离子交换剂。
简述常用离子交换剂分类，选择离子交换剂的一般原则有哪些？3部分，化学合成的树脂类纤维素凝胶选择离子交换剂的一般原则：（1）选择阴离子或阳离子交换剂，取决于被分离物质所带的电荷性质。
如被分离物质带正电，则用阳离子交换剂，如被分离物质带负电，则用阴离子交换剂。
（2）交换剂的基质是疏水性还是亲水性，对被分离的物质有不同的作用性质，因此对被分离物质的稳定性和分离效果均有影响。
（3）强型离子交换剂使用的PH范围很广,所以常用它来制备去离子水和分离一些在极端PH溶液中解离且较稳定的物质。
（4）选择离子交换剂，取决于交换剂对各种被分离物质的结合力。
离子交换层析洗脱方法有哪些？并说出各种方法的洗脱原理。
增加洗脱液的离子强度、改变洗脱液的pH。
试述公式V e =V0 + K d V i 各字母的物理意义。
公式Ve=V0+KdVi中Ve 代表被分离组分的流经体积，V0代表外水体积，Vi 代表内水体积。
Kd 称作“排阻系数”或“分配系数”，它反映了物质分子进入凝胶颗粒的程度。
对一定种类规格的凝胶，物质的Kd 值为该物质的特征常数。
排阻系数：当Kd=1时，洗脱体积Ve=V0+Vi，为全渗入。
当Kd=0时，洗脱体积Ve=V0，为全排阻。
0＜Kd ＜1时，洗脱体积V e=Vo+KdVi，为部分渗入。
凝胶过滤的基本原理是什么?根据分子大小这一物理性质进行分离纯化的。
分子越大的组分越先流出，分子越小的组分越后流出。
凝胶层析的应用主要有哪些？并说明其原理。
分离生物大分子浓缩和脱盐除热原物质蛋白质分子量测定凝胶过滤层析：是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相，根据物质在凝胶颗粒的微孔中扩散的速度进行分离，大分子移动的速度快，先被洗脱出来而小分子物质移动的速度慢，后被洗脱出来。
从而将大分子和小分子分开。
亲和层析的原理是什么？主要特点是什么？亲和层析原理：根据流动相中的生物大分子与固定相表面偶联的特异性配基发生亲和作用，有选择性吸附溶液中的溶质而进行的层析分离方法。
主要特点：（1）待分离物质与配基专一性地结合，分辨率高，操作简单，通过一次操作即可得到较高纯度的分离物质（2）具有浓缩作用，可以从含量很低的溶液中得出浓度很高的样品，有的纯化倍数达几千倍。
（3）利用生物学的特异性进行分离，所以分离条件比较温和，能够很好地保持样品原有的生物学性质。
电泳技术何谓电泳？电泳的基本原理是什么？影响带电颖粒在电场中泳动速度的因子有哪些?电泳指带电粒子在电场的作用下发生迁移的现象。