分子生物学综述
分子生物学研究

分子生物学研究引言分子生物学是现代生物学的一个重要分支,主要关注生物体内的分子机制。
通过研究核酸、蛋白质等大分子的结构和功能,科学家们能够揭示生命的奥秘。
本文将简要介绍分子生物学的研究内容、方法以及一些重要的研究成果。
研究内容1. 核酸研究核酸包括DNA和RNA,是遗传信息的载体。
分子生物学的重要任务之一就是研究核酸的结构与功能。
例如,DNA双螺旋结构的发现为理解遗传信息的存储和传递奠定了基础。
此外,RNA在基因表达调控中的作用也是研究的重点之一。
2. 蛋白质研究蛋白质是生命活动的主要执行者。
分子生物学研究蛋白质的合成、折叠、功能及其与其他分子的相互作用。
通过了解蛋白质的功能,可以更好地理解细胞的生理过程。
3. 酶学研究酶是一类具有催化作用的蛋白质,能加速生物化学反应。
分子生物学研究酶的结构、催化机制及应用,如在医药和工业上的应用。
4. 信号传导研究细胞通过复杂的信号传导网络进行通信。
分子生物学研究这些信号通路的组成、调控及功能,以揭示细胞间的信息交流机制。
研究方法1. 分子克隆技术分子克隆技术是分子生物学的基本工具,用于获取、扩增和改造特定基因。
常用的方法包括PCR(聚合酶链式反应)和质粒构建。
2. 基因编辑技术CRISPR-Cas9等基因编辑技术的发展,使科学家能够精确地修改基因序列,从而研究基因的功能和治疗遗传疾病。
3. 高通量测序技术高通量测序技术(如NGS)能够快速测定大量DNA或RNA序列,极大地推动了基因组学和转录组学的发展。
4. 结构生物学方法X射线晶体学、核磁共振(NMR)和冷冻电镜(Cryo-EM)等技术用于解析蛋白质和其他生物大分子的三维结构,为理解其功能提供重要信息。
重要研究成果1. DNA双螺旋结构的发现沃森和克里克于1953年提出DNA双螺旋结构模型,这一发现奠定了现代分子生物学的基础。
2. RNA世界假说RNA世界假说认为早期生命形式主要以RNA为基础,RNA既是遗传物质又具有催化功能,为理解生命起源提供了新的视角。
综述现代分子生物学在医学检验中的应用进展

术,可在同一个 PCR 体系中增添 2 对以上引物,提高检测结
果准确性。 但将现代分子生物学技术应用在病原微生物检
测过程中难度较大,究其原因是病原微生物体积较小,且死
菌量较大,为确保检验结果准确性,需首先将死菌筛选出,使
用活菌进行检测。
采用其他技术检测病原微生物会受液体及其他因素影
用。 人们通过将特异性抗体固定在磁性纳米球表面,而后使
用酶、荧光染剂等进行检验。 将其与传统检验方案对比发
现,新型分子纳米技术检验敏感度、特异度较高,且具有操作
简单有优势。
应用分子纳米技术可对人体各种生化指标状态进行分
析,继而判断机体内是否存在足够的微量元素,其次分子纳
米技术可应用在病变基因修整中,促进损伤组织、细胞修复,
质检测中应用广泛。 例如,通过采集患者血液等标本,对机
体微量蛋白进行研究,通过分子生物遗传器可明确血液标本
特异性,继而为临床治疗、病情评估提供参考。
有报告指出,利用分子生物遗传器检验食物中大肠埃希
菌,灵敏度在 102- 103CFU / mL 之间,5 ~ 7min 便可完成一个
样品的检测,不仅稳定性较高,还可节约检测所需时间,亦可
体病变进行评估,为后期治疗提供更准确的引导,提高各疾
病控制效果。 因此分子蛋白组必然会成为医学检验的主流
方向,且在医学发展中占据重要地位。
五、 现代分子生物技术对病原菌微生物的检测
传统的病原菌检测技术耗时长、步骤繁杂,在检验过程
中需对病原微生物进行分离、培养,在检验过程中应用现代
分子生物学技术可提高检测效率及敏感度。 例如,在检测核
响,但应用现代分子生物技术可有效改善这一问题,既可提
关于分子生物学与医药的综述

分子生物学与医药专业:11生技姓名:檀慧芳学号:1102021036摘要:分子生物学是从分子水平上研究生物体生命活动及其规律的一门科学,其不仅是目前自然科学中进展最迅速、最具活力和生气的领域,也是新世纪的带头学科。
在医学中,分子生物学主要研究人体生物大分子的结构、功能、相互作用及其同疾病发生、发展关系,乃至在诊断治疗上的应用[1]。
医药是关于人类同疾病作斗争和增进健康的科学,医药产业是国民经济的重要组成部分,与人民群众的生命健康和生活质量等切身利益密切相关。
随着分子生物学和医药的逐步发展,分子生物学被越来越广泛的应用到生物医药行业中。
下文将通过对分子生物学和医药的介绍、分子生物学在医药领域的应用、分子生物学再生医药领域的发展趋势和展望这三方面内容来介绍分子生物学与医药。
关键词:分子生物学生物医药应用发展趋势与展望1、分子生物学与生物医药简介1.1分子生物学分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的学科,是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘,由被动地适应自然界转向主动的改造和重组自然界的基础科学。
分子生物学从分子水平上研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律,它涵盖了生命科学的各个领域,改变了或正在改变着整个生物学的面貌,其研究成果已在工业、农业、医学、食品、材料、能源、冶金、环保等领域得到了广泛的应用[2]。
分子生物学是研究所有生物学现象的分子基础,内容十分广泛,但可以把分子生物学的研究内容可以概括为以下五个方面:1.基因与基因组的结构与功能:基因的研究一直是影响整个分子生物学发展的主线。
近20年来,由于重组DNA技术的不断完善和应用,人们已经改变了从表型到基因型的传统研究基因的途径,能够直接从克隆目的基因出发,研究基因的功能及其与表型的关系,使基因的研究进入了反向生物学阶段。
2. DNA的复制、转录和翻译:此方面研究的重点是DNA或基因怎样在相关的酶与蛋白质因子的作用下按照中心法则进行自我复制、转录和翻译,以及对mRNA分子剪接、加工、编辑和对新生多肽链折叠成为功能结构的研究。
分子生物学综述论文(基因敲除技术)

现代分子生物学课程论文题目基因敲除技术班别生物技术10-2学号 *********** 姓名陈嘉杰成绩基因敲除技术的研究进展要摘基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。
此后经历了近20年的推广和应用,直到2007年10月8日,美国科学家马里奥•卡佩奇(Mario Capecchi)和奥利弗•史密西斯(Oliver Smithies)、英国科学家马丁•埃文斯(Martin Evans)因为在利用胚胎干细胞对小鼠基因金星定向修饰原理方面的系列发现分享了2007年诺贝尔生理学或医学奖。
基因敲除技术从此得到关注和肯定,并对医学生物学研究做出了重大贡献。
本文就基因敲除的研究进展作一个简单的综述。
关键词基因敲除、RNAi、生物模型、同源重组前言基因敲除又称基因打靶,该技术通过外源DNA与染色体DNA之间的同源重组,进行精确的定点修饰和基因改制,具有转移性强、染色体DNA可与目的片段共同稳定遗传等特点。
应用DNA同源重组技术将灭活的基因导入小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES cells)以取代目的基因,再筛选出已靶向灭活的细胞,微注射入小鼠囊胚。
该细胞参与胚胎发育形成嵌合型小鼠,再进一步传代培育可得到纯合基因敲除小鼠。
基因敲除小鼠模型的建立使许多与人类疾病相关的新基因的功能得到阐明,使现代生物学及医学研究领域取得了突破性进展。
上述起源于80年代末期的基因敲除技术为第一代技术,属完全性基因敲除,不具备时间和区域特异性。
关于第二代区域和组织特异性基因敲除技术的研究始于1993年。
Tsien等[1]于1996年在《Cell》首先报道了第一个脑区特异性的基因敲除动物,被誉为条件性基因敲除研究的里程碑。
该技术以Cre/LoxP系统为基础,Cre在哪种组织细胞中表达,基因敲除就发生在哪种组织细胞中。
2000年Shimizu等[2]于《Science》报道了以时间可调性和区域特异性为标志的第三代基因敲除技术,其同样以Cre/LoxP系统为基础,利用四环素等诱导Cre的表达。
完整版)分子生物学总结完整版

完整版)分子生物学总结完整版分子生物学是研究生命体系中分子结构和功能的学科。
它包括结构分子生物学、基因表达的调节与控制、DNA重组技术及其应用、结构基因组学、功能基因组学、生物信息学和系统生物学等方面。
在DNA和染色体方面,我们可以了解到DNA的变性和复性过程,其中Tm是指DNA双链结构被解开成单链分子时的温度。
热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,称为退火。
此外,假基因是指基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列,以Ψ来表示。
C值矛盾或C值悖论是指C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致。
转座是可移动因子介导的遗传物质的重排现象,而转座子则是染色体、质粒或噬菌体上可以转移位置的遗传成分。
DNA的二级结构特点包括由两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成,碱基排列在外侧,两条链间存在碱基互补,通过氢键连系,且A=T、G≡C(碱基互补原则)。
真核生物基因组结构包括编码蛋白质或RNA的编码序列和非编码序列,包括编码区两侧的调控序列和编码序列间的间隔序列,具有庞大的结构和含有大量重复序列。
Histon(组蛋白)具有极端保守性、无组织特异性、氨基酸分布的不对称性、可修饰作用、富含Lys的H5等特点。
核小体由组蛋白和200bp DNA组成。
转座机制是一种基因组重排的方式。
在转座时,插入的转座子会位于两个重复的靶序列之间,而受体分子中的靶序列会被复制。
根据复制方式的不同,转座可以分为复制型和非复制型转座。
DNA生物合成时,采用半保留复制的方式。
这种方式下,母链DNA会解开为两股单链,各自作为模板合成与之互补的子链。
其中一股单链从亲代完整地接受过来,而另一股则是全新合成的。
这样,两个子细胞的DNA都与亲代DNA的碱基序列一致。
复制子是生物体内能够独立进行复制的单位。
在DNA复制中,有前导链和滞后链两种链。
前导链是以3'→5'方向为标准的模板链,而滞后链则是以5'→3'方向为标准的模板链。
分子生物学综述

聚合酶链反应技术在肿瘤病理研究中的应用分子生物学理论、方法出现的革命性创新并日臻完善,使生物医学进入分子时代,也将病理学带入分子病理学时代,对疾病的病因、发生、发展、发病机制及形态变化,从传统形态学概念深入至分子或基因水平,其中以肿瘤分子病理研究是最为热点的领域,,聚合酶链反应技术是目前常用的肿瘤的分子病理学的方法之一。
聚合酶链反应( PCR) 技术是一种快速的体外扩增DNA 技术。
PCR 技术应用于肿瘤的检测为肿瘤病理学研究提供了有效研究方法,推动了病理学的发展。
1实时定量PCR 检测IgH 重排在B 淋巴细胞恶性肿瘤中的应用自1985 年PCR 技术问世以来定量PCR 技术应用于癌基因检测等方面。
定量PCR 也经历了从粗略定量,半定量到精确定量,绝对定量的发展过程。
通常采用极限倍比稀释,竞争PCR 等对基因进行定量检测。
但这些方法步骤烦琐,费时,费力,且有易污染,不准确,灵敏度不够等缺点。
荧光探针实时定量PCR 较好的解决了上述问题。
它是在普通的PCR 体系中加入了一个能与靶基因结合的双荧光标记探针。
其5'端标有一个荧光报告基团3'端标有荧光淬灭基团。
在PCR 复性延伸阶段Taq酶利用其5',3' 外切酶活性将5' 端荧光报告基团切下,使其解除了3'端淬灭基团的淬灭作用而发射荧光。
被释放的荧光信号与PCR 产物成比例增长,通过检测PCR 过程中的荧光变化即可得知产物数量的信息[2]。
为了消除PCR 前很多步骤对定量的影响,常采用一些生物体内稳定存在的基因如β-actin (β肌动蛋白)GAPDH(3-磷酸甘油醛脱氢酶)等作内参照。
根据各自检测结果得出待测基因的相对浓度(待测基因浓度/ 参照物浓度)[3,4]。
用此法检测IgH 重排的难度在于其重排是多种多样的,不可能用单一的引物和探针进行扩增。
一般实验过程为:用IgH 基因中的保守序列设计共有引物(consensus primers)扩增出标本中的肿瘤克隆,对其测序,根据测序结果为每个病例设计一条克隆特异性的TaqMan 探针,再配合一端或两端的ASO(Allele’ specific oligonucleotides)引物进行RQ- PCR[5]。
现代分子生物学技术发展综述

现代分子生物学技术发展综述20世纪50年代,录Wsaton和crick提出DNA双螺旋结构,标志着现代分子生物学的兴起,为揭开人类重生命现象的本质奠定了基础。
目前,分子生物学是生命科学中发民最快的领域,并且与诸多学科正在进行广泛的交叉与渗透,因此,分子生物学已成为主导21世纪生命科学的前沿科学。
一、现代分子生物学的含义分子生物学是从分子水平研究生命本质的一门新兴边缘科学,它是以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象的一门综合性学科。
包括:结构分子生物学、发育生物学、分子细胞生物学、分子神经生物学等。
主要研究基因或DNA 的复制、转录、表达和调控等过程,以及参与这些过程的蛋白质和酶的结构与功能。
二、现代分子生物学研究的内容分子生物学主要包含两个部分研究内容:一是核酸的分子生物学,以研究核酸的结构与功能为主,中心法则是其研究的理论核心。
内容包括:核酸的基因结构、遗传信息的复制、转录与翻译,基因修复与突变、基因的表达与调控基因工程的发展与应用等。
二是蛋白质的分子生物学,以研究蛋白质等大分子的结构与功能为主。
蛋白质具有较大的分子量,由简单的小分子核苷酸或氨基酸排列组合以蕴藏各种信息,并且具有复杂的空间结构而构成多样化生物个体,所以对蛋白质的研究难度较大。
三、现代分子生物学的主要任务分子水平指的是携带遗传信息的核酸和在遗传信息传递及细胞内、细胞间传递过程中发挥重要作用的蛋白质等生物大分子。
分子水平上研究生命的本质,是指对遗传、生殖、生长和发育等生命基本特征的分子机理的阐明,从而为改造生物奠定理论基础和提供新的手段。
阐明这些分子的结构与功能关系是分子生物学的主要任务。
四、现代分子生物学的发展前景21世纪是生命科学的世纪,分子生物学取得突飞猛进的的发展,分子生物技术让整个社会进入了生物经济时代。
诊断试剂、治疗药物、植物品种、畜用制品、环境工程、再生能源,分子生物技术无处不在,在工业、农业、医药卫生业带来全新的变革。
什么是分子生物学分子生物学发展简史(一)2024

什么是分子生物学分子生物学发展简史(一)引言概述:分子生物学是研究生命现象的最基本单位——分子的结构、功能和相互作用的学科。
它不仅为理解生命活动的机制提供了深入的认识,还在医学、农业、环境保护等领域发挥着重要作用。
本文将从分子生物学的起源开始,概述其发展的历史,并详细介绍分子生物学的五个重要方面。
一、分子生物学的起源1. DNA的发现和结构解析2. 基因的概念和遗传物质的特性3. DNA复制、转录和翻译的基本过程4. 蛋白质合成的分子机制5. 早期的技术手段对分子生物学研究的贡献二、基因调控1. 转录调控的基本原理2. 转录因子和启动子的结构和功能3. 转录后修饰对基因调控的影响4. 遗传密码和翻译的调控机制5. 长非编码RNA在基因调控中的作用三、基因突变与人类遗传疾病1. 点突变和染色体突变的分类和特征2. 突变对基因功能的影响3. 遗传疾病的发生机制4. 分子诊断技术在遗传疾病中的应用5. 基因治疗在遗传疾病中的前景四、基因工程技术1. 重组DNA技术的原理和方法2. 基因克隆和表达的应用3. 基因编辑技术的发展和应用4. 基因转导和基因治疗的原理5. 基因工程在农业和工业上的应用五、系统生物学1. 生物大分子相互作用网络的构建和分析2. 代谢通路的数学模型与仿真3. 生物系统的建模和模拟4. 生物大数据分析在系统生物学中的应用5. 系统生物学对药物筛选和疾病治疗的意义总结:分子生物学作为一门进展迅速的学科,通过研究分子结构和功能揭示了生命的奥秘。
从基因调控到基因突变与遗传疾病,再到基因工程技术和系统生物学,分子生物学在各个领域都发挥着重要的作用。
随着技术的不断发展,分子生物学将继续推动科学的进步,为人类的健康和未来的发展带来更多的希望。
简述分子生物学的主要研究内容(一)

简述分子生物学的主要研究内容(一)分子生物学的主要研究内容引言在生物学的广阔领域中,分子生物学作为其中的重要分支,致力于研究生物体内分子的结构、功能和相互作用。
通过对生物体内分子的研究,分子生物学揭示了生命的本质和生物体的运行方式。
本文将简要介绍分子生物学的主要研究内容。
分子生物学的主要研究内容分子生物学研究的内容广泛,包括以下几个方面:1.DNA与基因–DNA结构与功能:研究DNA的双螺旋结构、碱基配对、序列特征以及转录和复制过程中的功能;–基因表达调控:探究基因转录、后转录修饰以及DNA甲基化等调控机制,揭示基因表达的调控网络;–基因突变与遗传疾病:研究DNA突变的原因与机制,解析遗传疾病的发生与发展。
2.RNA与蛋白质–RNA结构与功能:研究RNA的二级、三级结构及其在转录后调节、翻译等方面的功能;–蛋白质合成与调控:揭示蛋白质的合成、折叠过程以及翻译后修饰、定位等方面的调控机制;–蛋白质间相互作用:研究蛋白质与蛋白质、蛋白质与核酸等之间的相互作用,解析细胞内信号传导和调控网络。
3.遗传工程与基因编辑–基因工程技术:利用DNA重组技术进行基因组改造、外源基因的表达等;–基因编辑技术:应用CRISPR-Cas9等工具对生物体进行精确基因组编辑,研究基因功能与表达调控的关系。
4.细胞信号传导–细胞信号通路:研究生物体内细胞外信号的传导机制和细胞内响应过程,揭示生命活动的调控网络;–信号分子与受体:研究激素、细胞因子、细胞外基质等信号分子与受体之间的相互作用,理解信号转导的病理机制。
5.分子进化与生物多样性–分子系统学:通过分析生物体内分子间的差异与相似性,探究不同物种之间的亲缘关系与演化历史;–病原体与宿主:研究病原体与宿主之间的相互作用,阐明感染、免疫等生物学过程。
结论分子生物学作为生物学的重要分支,通过对生物体内分子的研究,深入揭示了生命的奥秘。
从DNA与基因、RNA与蛋白质、细胞信号传导、遗传工程到分子系统学与生物多样性,分子生物学提供了丰富的理论和技术支持,推动了生命科学的发展。
分子生物学综述

引言概述:分子生物学是研究生物体内分子结构、功能和相互作用的科学领域。
它深入探索了生物体的分子组成、基因表达、蛋白质合成以及遗传信息传递的机制。
分子生物学的发展已经在医学、农业和生物技术等领域发挥了重要作用。
本文将综述分子生物学的核心概念、技术和应用,并探讨其对人类生活的意义。
正文:一、分子生物学的核心概念1.1DNA和基因1.1.1DNA的结构和功能1.1.2基因的定义和定位1.1.3基因表达与调控1.2RNA和蛋白质1.2.1RNA的种类和功能1.2.2蛋白质的合成和功能1.2.3RNA与蛋白质的相互作用1.3酶和催化1.3.1酶的种类和功能1.3.2酶与底物的结合和催化作用1.3.3酶的调控和抑制二、分子生物学的技术工具2.1PCR技术2.1.1PCR的原理和步骤2.1.2PCR的应用领域和意义2.1.3PCR的局限性和改进2.2DNA测序技术2.2.1传统测序方法和新一代测序方法2.2.2DNA测序的原理和步骤2.2.3DNA测序的应用和前景2.3基因编辑技术2.3.1CRISPRCas9系统的原理和应用2.3.2基因编辑的方法和限制2.3.3基因编辑技术在医学和农业领域的应用三、分子生物学在医学中的应用3.1分子诊断技术3.1.1基因突变的检测和诊断3.1.2基因表达分析和分子标记的应用3.1.3分子生物学在肿瘤学中的应用3.2基因治疗3.2.1基因治疗的原理和方法3.2.2基因治疗在遗传病和癌症中的应用3.2.3基因编辑技术在基因治疗中的前景四、分子生物学在农业中的应用4.1转基因技术4.1.1转基因作物的定义和制作过程4.1.2转基因作物的优点和争议4.1.3转基因技术在农业中的应用和前景4.2遗传改良技术4.2.1遗传改良的目的和方法4.2.2分子标记辅助选择和遗传改良的应用4.2.3遗传改良技术在粮食产量和品质改良中的作用五、分子生物学对人类生活的意义5.1对人类健康的影响5.1.1疾病的早期诊断和基因治疗的发展5.1.2药物开发和个体化医学的实现5.1.3健康生活方式的指导和预防策略的制定5.2对粮食生产的影响5.2.1高产和抗病虫害作物的培育5.2.2营养改良和耐盐碱作物的培育5.2.3食品安全和可持续发展的实现总结:分子生物学作为现代生物学的核心学科,在疾病预防、医学治疗以及农业生产等方面发挥着重要的作用。
生物文献综述范文

生物文献综述范文生物学作为一门研究生命的科学,涉及的领域广泛且深奥。
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遗传学是研究遗传变异与遗传规律的科学,其研究对象涉及到基因、染色体、遗传物质等。
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分子生物学文献综述

分子生物学文献综述分子生物学文献综述是对分子生物学领域的研究论文、研究报告、综述文章等进行综合分析和评价,以全面了解该领域的研究现状、研究进展和发展趋势。
以下是一篇分子生物学文献综述的示例:标题:分子生物学研究进展综述摘要:本文综述了近年来分子生物学领域的研究进展,包括基因组学、蛋白质组学、代谢组学等方面的研究进展,以及这些研究在医学、农业、生态等领域的应用。
本文还讨论了分子生物学研究中存在的问题和挑战,以及未来的研究方向。
一、引言分子生物学是研究生物分子结构、功能、相互作用以及生物体遗传信息传递规律的科学。
随着科学技术的发展,分子生物学已经成为了生命科学领域的重要分支。
本文将对近年来分子生物学领域的研究进展进行综述。
二、基因组学研究进展基因组学是研究生物体基因组结构和功能的科学。
近年来,随着测序技术的发展,基因组学研究取得了重要进展。
例如,人类基因组计划的完成,为人类疾病的研究和治疗提供了重要的基础数据。
同时,基因组编辑技术的发展,如CRISPR-Cas9系统,为基因治疗和遗传疾病治疗提供了新的手段。
三、蛋白质组学研究进展蛋白质组学是研究蛋白质的表达、修饰和功能变化的科学。
近年来,蛋白质组学研究取得了重要进展。
例如,通过质谱技术对蛋白质进行定性和定量分析,可以更深入地了解蛋白质的结构和功能。
同时,蛋白质相互作用的研究也为理解生物体内复杂的信号传导网络提供了重要信息。
四、代谢组学研究进展代谢组学是研究生物体内代谢物变化的科学。
近年来,代谢组学研究取得了重要进展。
例如,通过对尿液、血液等体液的代谢物进行分析,可以了解人体健康状况和疾病发展过程。
同时,代谢组学研究也为农业、生态等领域提供了重要的基础数据。
五、应用领域分子生物学在医学、农业、生态等领域有着广泛的应用。
例如,在医学领域,通过对癌症、糖尿病等疾病的基因和蛋白质进行研究,可以为疾病的治疗和预防提供新的手段。
在农业领域,通过对农作物基因和蛋白质进行研究,可以提高农作物的产量和品质。
分子生物学 简介

分子生物学简介
分子生物学是研究生物体内分子结构、功能和相互作用的科学。
通过研究分子生物学,我们可以深入了解生物体内的生命活动,揭示生命的奥秘。
分子生物学的研究对象主要是生物体内的分子,包括DNA、RNA、蛋白质等。
DNA是生物体遗传信息的载体,它决定了生物体的遗传特征。
RNA则参与了遗传信息的传递和转录过程。
蛋白质是生物体内最重要的功能分子,它们在细胞中扮演着各种重要的角色。
分子生物学研究的核心问题之一是基因的表达调控。
基因的表达调控是指在不同细胞和不同发育阶段中,如何通过调控基因的转录和翻译过程来决定细胞的功能和特性。
分子生物学通过研究转录因子、启动子、转录调控元件等分子机制,揭示了基因表达调控的分子机理。
另一个重要的研究领域是细胞信号转导。
细胞信号转导是指细胞内外信号分子的传递和转导过程。
通过研究细胞膜受体、信号转导通路和细胞内信号分子等,分子生物学揭示了细胞信号转导的分子机制,并且在研究疾病的发生机制和药物研发中有着重要的应用价值。
分子生物学还研究了细胞凋亡、细胞周期调控、DNA修复等一系列重要生物过程。
这些研究为我们理解生物体内分子之间的相互作用和调控提供了重要的线索。
分子生物学是一门研究生物体内分子结构和功能的科学。
通过研究分子生物学,我们可以深入了解生命的本质和生命的奥秘。
分子生物学的研究成果不仅为人类健康和疾病的治疗提供了重要的理论基础,也为生物技术的发展和应用提供了重要的支持。
分子生物学综述论文(基因敲除技术)

现代分子生物学课程论文题目基因敲除技术班别生物技术10-2学号 *********** 姓名陈嘉杰成绩基因敲除技术的研究进展要摘基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。
此后经历了近20年的推广和应用,直到2007年10月8日,美国科学家马里奥•卡佩奇(Mario Capecchi)和奥利弗•史密西斯(Oliver Smithies)、英国科学家马丁•埃文斯(Martin Evans)因为在利用胚胎干细胞对小鼠基因金星定向修饰原理方面的系列发现分享了2007年诺贝尔生理学或医学奖。
基因敲除技术从此得到关注和肯定,并对医学生物学研究做出了重大贡献。
本文就基因敲除的研究进展作一个简单的综述。
关键词基因敲除、RNAi、生物模型、同源重组前言基因敲除又称基因打靶,该技术通过外源DNA与染色体DNA之间的同源重组,进行精确的定点修饰和基因改制,具有转移性强、染色体DNA可与目的片段共同稳定遗传等特点。
应用DNA同源重组技术将灭活的基因导入小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES cells)以取代目的基因,再筛选出已靶向灭活的细胞,微注射入小鼠囊胚。
该细胞参与胚胎发育形成嵌合型小鼠,再进一步传代培育可得到纯合基因敲除小鼠。
基因敲除小鼠模型的建立使许多与人类疾病相关的新基因的功能得到阐明,使现代生物学及医学研究领域取得了突破性进展。
上述起源于80年代末期的基因敲除技术为第一代技术,属完全性基因敲除,不具备时间和区域特异性。
关于第二代区域和组织特异性基因敲除技术的研究始于1993年。
Tsien等[1]于1996年在《Cell》首先报道了第一个脑区特异性的基因敲除动物,被誉为条件性基因敲除研究的里程碑。
该技术以Cre/LoxP系统为基础,Cre在哪种组织细胞中表达,基因敲除就发生在哪种组织细胞中。
2000年Shimizu等[2]于《Science》报道了以时间可调性和区域特异性为标志的第三代基因敲除技术,其同样以Cre/LoxP系统为基础,利用四环素等诱导Cre的表达。
文献综述

疾病的分子生物学研究分子生物学是从分子水平上研究生物体的结构、组成和功能的一门科学,其研究对象包括DNA蛋白质等生物大分子。
它是一门现代生物学,是生物化学与遗传学、微生物学、细胞学、生物物理学等学科相结合发展起来的前沿学科。
“分子生物学”一词最早在1945年由William Astbury在Harvey Lecture上应用。
1953年James Watson和Francis Crick首次提出DNA的双螺旋结构,标志着分子生物学的建立。
分子生物学越来越多的应用于医学,医学与时俱进的发展,本文主要探讨分子生物学在医学诊断和治疗疾病当中的应用分子诊断(molecular diagnosis)狭义上是基于核酸的诊断,即对各种DNA(RNA)样本的病原性突变的检测以便实现对疾病的检测和诊断。
随着人类基因图谱的完成,分子诊断得到了空间的机会。
随着蛋白组学的研究,分子诊断有赋予了新的外延—生物大分子。
蛋白质组学的发展,成为分子诊断的一个必不可少的工具。
分子诊断是当前的一种临床实际,从Kan 及其同事首次应用DNA 杂交实现α-地中海贫血的产前诊断,到Saiki 发明PCR 技术特别是实时荧光定量PCR 的应用,再到高通量自动化的生物芯片技术以及变性高效液相层析、SNP 分析等技术的应用;从利用分子杂交、PCR 等单一技和定性诊断发展到多项技术的联合应用和半定量、定量和多基因病分子诊断,再到基因表达产物的生物大分子的诊断;从治疗性诊断,发展到针对高危人群进行疾病基因或疾病相关基因的筛查和预防性分析评价。
分子诊断正处于学科发展的黄金时代。
而且,随着分子生物学理论和技术的继续发展,分子诊断还将出现更加辉煌的明天。
分子治疗(molecular therapy)分子治疗作为一项全新的疾病治疗手段,近20年来迅速发展,当今,分子生物已应用在各种疾病的治疗上。
1,肿瘤治疗随着对肿瘤发生发展分子机制的深入研究,包括基因治疗在内的生物治疗已经成为肿瘤综合治疗中的第四种模式。
分子生物学论文范文(前沿资讯6篇)

分子生物学论文范文(前沿资讯6篇)分子生物学作为一门新生的学科,仍然处于成长的初级阶段。
学科背景迥异的科学家从各自的知识领域出发,对分子生物学领域的基本问题不断探索,由单一分析转向综合分析,去研究生物的多样性与生命本质的一致性。
下面是6篇分子生物学论文,希望你阅读后有收获。
分子生物学论文范文精选一:题目:牛病毒性腹泻病毒分子生物学特性研究进展摘要:牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)是引起牛黏膜病的病原,该病原给养牛业造成重大的损失,致病机理十分复杂。
与丙肝病毒同属黄病毒科,二者有很高的同源性,所以被用作HCV的模式病毒。
其基因组为一单股正链RNA分子,编码4种结构蛋白和8种非结构蛋白,这些蛋白质在病毒的复制、翻译及与宿主细胞的相互作用中发挥重要作用。
随着对该病毒及同属的其他病毒研究的深入,人们对该病毒的致病机制、免疫逃避、遗传特性等方面有了一定的认识。
本文综述了该病毒及其同科病毒编码的蛋白质的主要功能,为该病的防治及其他病毒的深入研究提供参考依据。
关键词:牛腹泻病毒;致病机理;RNA病毒;免疫逃避;遗传牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)是引起牛腹泻病及粘膜病的主要病原,临床症状复杂多样,可表现为亚临床感染,或出现繁殖障碍和由免疫抑制导致的呼吸系统、消化系统性疾病,以及由血小板减少、出血导致的致死性粘膜病。
由于BVDV致病机理复杂,并且缺乏有效的防控技术,因此BVDV在世界范围内广泛流行,是造成全球乳/牛业经济损失的重要病原。
此外,随着体外受精与胚胎移植在养牛业中的普及和应用,研究人员发现利用感染有BVDV的精液培育出来的胚胎若移植到受体母牛代孕后,受体母牛和新生犊牛均会成为BVDV携带者,这会进一步造成养牛产业的经济损失。
近年来,BVDV病毒疫情呈现再次爆发的势头,给畜牧业和人类健康带来了严重危害。
分子生物学总结完整版

分子生物学总结完整版分子生物学是一门研究生物大分子,特别是核酸和蛋白质的结构、功能及其相互关系的科学。
它的发展为我们理解生命的奥秘提供了强大的工具和理论基础。
分子生物学的核心内容之一是对核酸,尤其是 DNA 的研究。
DNA 是遗传信息的携带者,它以双螺旋结构存在。
这种独特的结构使得DNA 能够稳定地储存遗传信息,同时又能通过碱基配对的方式进行复制,从而将遗传信息准确地传递给下一代。
DNA 的复制过程是一个高度精确和复杂的机制,涉及到多种酶和蛋白质的协同作用。
基因是 DNA 上具有特定功能的片段。
基因的表达是指基因中的遗传信息被转录为 RNA,然后再翻译为蛋白质的过程。
转录是在 RNA 聚合酶的作用下,以 DNA 为模板合成 RNA 的过程。
而翻译则是在核糖体上,以 mRNA 为模板,按照密码子的规则合成蛋白质的过程。
在这个过程中,tRNA 起着重要的作用,它能够识别密码子并携带相应的氨基酸。
蛋白质是生命活动的主要执行者,其结构和功能的研究也是分子生物学的重要内容。
蛋白质的结构分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。
一级结构是指氨基酸的线性排列顺序,二级结构则包括α螺旋、β折叠等,三级结构是蛋白质的三维空间构象,四级结构是指多个亚基组成的蛋白质的整体结构。
蛋白质的功能与其结构密切相关,例如酶通过其特定的结构与底物结合并催化反应。
分子生物学技术的发展为研究带来了巨大的便利。
PCR 技术(聚合酶链式反应)能够快速扩增特定的 DNA 片段,在基因检测、疾病诊断等领域发挥了重要作用。
基因克隆技术使得我们能够获得大量特定的基因,为基因功能的研究和应用提供了基础。
DNA 测序技术的不断发展,让我们能够快速准确地测定 DNA 的序列,为基因组学的研究提供了有力支持。
在医学领域,分子生物学的应用非常广泛。
通过对疾病相关基因的研究,我们能够更好地理解疾病的发生机制,为疾病的诊断和治疗提供新的靶点和方法。
例如,在肿瘤研究中,发现了许多与肿瘤发生发展相关的基因,如癌基因和抑癌基因。
分子生物学实验文献综述

分子生物学实验文献综述分子生物学实验是研究生物分子结构、功能和相互作用的一种重要手段。
本文将综述分子生物学实验的相关研究文献,介绍其在生物科学领域的应用和进展。
一、PCR技术在分子生物学实验中的应用PCR(聚合酶链反应)是一种常用的分子生物学技术,用于扩增DNA 序列。
该技术具有高度灵敏性和特异性,被广泛应用于基因克隆、突变检测、基因表达研究等领域。
研究表明,PCR技术的应用可以提高实验效率,减少实验成本,加快研究进展。
二、蛋白质表达与纯化技术的研究进展蛋白质表达与纯化是分子生物学实验中的重要环节,用于获取大量纯化的特定蛋白质。
研究人员通过优化表达载体、宿主菌株和培养条件等方面的因素,提高蛋白质表达的效率和纯化的质量。
此外,一些新兴的蛋白质表达系统如细胞外表达系统和细胞质表达系统也为蛋白质的高效表达提供了新的途径。
三、基因敲除技术在分子生物学实验中的应用基因敲除技术是研究基因功能的重要手段,通过特定的方法将目标基因进行敲除,从而观察敲除后生物体的表型变化。
利用基因敲除技术,研究人员可以揭示基因在发育、生理和疾病等方面的作用机制。
近年来,CRISPR-Cas9技术的出现使基因敲除技术更加简便高效,加速了分子生物学实验的进展。
四、荧光染料在分子生物学实验中的应用荧光染料广泛应用于分子生物学实验中的多个环节,如蛋白质和核酸的检测、细胞成像等。
研究人员通过选择合适的荧光染料,可以实现对生物分子的高灵敏度、高选择性的检测和成像。
此外,一些新型的荧光探针的出现,如荧光蛋白、量子点等,进一步拓展了荧光染料在分子生物学实验中的应用领域。
五、RNA干扰技术在基因功能研究中的应用RNA干扰技术是通过引入双链RNA分子,选择性地抑制特定基因的表达,从而研究基因功能。
该技术广泛应用于基因沉默、基因功能验证和药物研发等领域。
近年来,CRISPR-Cas9技术的引入为RNA 干扰技术提供了新的可能性,使得基因功能研究更加灵活和高效。
分子生物学综述

动物遗传性状复制与整合研究方法综述柯荣(南昌大学,药学系08药学一班,6301708002)摘要:植物通过嫁接的形式可保持原品种性状不变。
引伸到动物体甚至人类,在基因序列检测、基因重组以及基因转导等技术的前提下,将两个机体各自的特殊性状整合到一个集体当中,最终在该机体中同时能够表达出上一代亲代的性状,从而可实现动物遗传性状的复制与整合。
关键字:遗传性状、复制与整合、基因序列测定、基因重组、基因转导正文:1、引言进入21世纪,生命科学以及基因工程技术获得了许多重大性的突破。
基因工程又有基因拼接技术或DNA重组技术之称,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一中生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。
但现今它的应用主要有:基因工程与作物育种;基因工程与药物研制;人们可以利用基因工程获得高产,稳产和具有优良品质的农作物,培育出各种具有抗逆性的作物新品种;利用基因技术还可以高效率的生产各种高质量,低成本的药品,如:胰岛素,干扰素和乙肝疫苗等。
经过嫁接技术的植物嫁接苗生长发育快,增强了适应不良环境的能力,增强植株的抗病虫害能力,且能获得两亲代的共同性状。
由嫁接技术我们联想到如果能将动物体的优良性状整合到一个机体中则大大提高了动物体的生长机能以及增加其特殊性状。
从植物分类学上讲,亲缘关系越近的植物嫁接越易成活,这是植物组织结构的不同造成的。
这就如同器官的移植一样,二者之间会存在一定的排斥效应。
理论上,如果要求某一特殊性状在没有此性状的其他机体内得以表达,则需要将表达此性状的基因提取出来再注入机体,或者破译出控制此性状的基因的碱基对排列顺序再重组一条新的碱基序列注入机体,使得进入机体并能够完好的表达,则可达到遗传性状的复制和整合。
2、电泳及PCR技术先用DNA限制性内切酶将控制某一形状的基因剪成单个的游离的碱基,在通过电泳的方法排列出碱基的排列顺序。
基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。
[生物]分子生物学研究概述
![[生物]分子生物学研究概述](https://img.taocdn.com/s3/m/ab48113dce2f0066f433222a.png)
[生物]分子生物学研究概述分子生物学研究概述概念:分子生物学是从分子水平研究生命本质为目的的一门新兴边缘学科,它以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象,是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。
分子生物学的发展为人类认识生命现象带来了前所未有的机会,也为人类利用和改造生物创造了极为广阔的前景。
所谓在分子水平上研究生命的本质主要是指对遗传、生殖、生长和发育等生命基本特征的分子机理的阐明,从而为利用和改造生物奠定理论基础和提供新的手段。
这里的分子水平指的是那些携带遗传信息的核酸和在遗传信息传递及细胞内、细胞间通讯过程中发挥着重要作用的蛋白质等生物大分子。
这些生物大分子均具有较大的分子量,由简单的小分子核苷酸或氨基酸排列组合以蕴藏各种信息,并且具有复杂的空间结构以形成精确的相互作用系统,由此构成生物的多样化和生物个体精确的生长发育和代谢调节控制系统。
阐明这些复杂的结构及结构与功能的关系是分子生物学的主要任务。
发展历史:一、准备和酝酿阶段19世纪后期到20世纪50年代初,是现代分子生物学诞生的准备和酝酿阶段。
在这一阶段产生了两点对生命本质的认识上的重大突破:确定了蛋白质是生命的主要基础物质19世纪末buhner兄弟证明酵母无细胞提取液能使糖发酵产生酒精,第一次提出酶(enzye)的名称,酶是生物催化剂。
20世纪20-40年代提纯和结晶了一些酶(包括尿素酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、黄酶、细胞色素、肌动蛋白等),证明酶的本质是蛋白质。
随后陆续发现生命的许多基本现象(物质代谢、能量代谢、消化、呼吸、运动等)都与酶和蛋白质相联系,可以用提纯的酶或蛋白质在体外实验中重复出来。
在此期间对蛋白质结构的认识也有较大的进步。
1902年eilfisher证明蛋白质结构是多肽;40年代末,sanger创立二硝基氟苯(dnfb)法、edan发展异硫氰酸苯酯法分析肽链n端氨基酸;1953年sanger和thpsn完成了第一个多肽分子--胰岛素a链和b链的氨基全序列分析。
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基于特定引物PCR的DNA分子标记技术研究进展摘要:PCR是一种选择性体外扩增DNA的方法,分子标记是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展起来的一种比较理想的遗传标记技术。
SSR、SCAR、SRAP 和TRAP是四种最新发展的基于特定引物PCR的新型DNA分子标记技术,具有简便、高效、重复性好等优点,已在遗传育种的种质资源等各个方面得到广泛应用。
介绍了这四种分子标记的基本原理和特点,综述了它们在分子生物学研究中的应用。
关键词:分子标记SSR SCAR SRAP TRAPDNA分子标记技术的研究始于1980年,本质上是指能反映生物个体或种群间基因组某种差异的特异性DNA片段,DNA分子标记大多以电泳谱带的形式表现生物个体之间DNA差异,通常也称DNA的指纹图谱。
与其他几种遗传标记相比具有的优越性有:大多数分子标记为显性,对隐性的农艺形状的选择十分便利;基因组变异及其丰富,分子标记的数量几乎是无限的;在生物发育的不同阶段,不同组织的DNA都可用于标记分析;分子标记揭示来自DNA的变异;表现为中性,不影响目标形状的表达,与不良性状无连锁;检测手段简单、迅速。
目前DNA分子标记技术已有数十种,主要可分为4大类:基于分子杂交的DNA 分子标记技术;基于随机/特定引物PG R的DNA分子标记技术;基子限制性酶切与PCR技术的分子标记技术;基于芯片技术的DNA分子标记技术。
概述新型的基于特定引物PCR的DNA分子标记技术,包括SSR,SCAR,SRAP和TRAP。
目前这些I3;VA分子标记技术的应用仍具有相当的局限性,如何将它们有效地利用于分子生物学研究是函待解决的问。
1序列特异扩增区域SCAR1. 1 SCAR标记的原理序列特异扩增区域(sequence characterised am-plifiedreginn)简称SCAR标记,是1993年Paran和Michelma记[1]]建立的一种可靠、稳定、可长期利用的RAPD 标记技术。
SCAR标记的基本流程:先用随机引物进行RAPD筛选,获取特异的RAPD标记,然后对标记进行克隆和测序,根据测定RADII标记两末端的序列设计一对引物,此引物通常包含有原来的RAPD引物序列,多为20-24,再用该引物对所研究的基因组DNA进行PCR扩增,这样就可以把与原来的RAPI3片段相对应的单一位点鉴定出来。
1. 2 SCAR标记的特点SCAR标记方便、快捷、可靠,适合于大量个体的快速检测,结果稳定性好,重复性高。
由干SCAR标记使用的引物长,因而试验的可重复性高,它克服了RAPD重复性欠佳的弱点,同时具有STS标记的优点,因此比RAPn及其他利用随机引物的方法在基因定位和作图中的应用要好,在分子标记辅助育种、种质资源鉴别等方面有着潜在的应用前景,SCAR标记是共显性遗传的。
待检DNA间的差异可直接通过有无扩增产物来显示,这甚至可省却电泳的步骤。
由于RAPD 扩增过程中错配几率较高,RAPD标记片段同源性高导致SCAR标记的转化成功率较低,而由SRAP和I55R分子标记转化得到的。
SCAR标记转化成功率较高。
1.3 SCAR标记的应用SCAR标记直接采用专一特异性引物进行PC R扩增,排除了随机引物结合位点之间的竞争,且避免了筛选引物、估算样品间遗传相似性和构建遗传聚类图的繁琐过程,稳定性和重复性得以显著提高。
SCAR标记目前已被广泛用于农林经济作物的种质鉴定、分子标记辅助育种、遗传连锁图谱构建和基因定位等诸多领域[2]。
吴学谦等[3]通过对香菇菌株IG2和申香1U号的RAPD分析中分别获得一个多态性片段,再将该片段转化为特异的SCAR标记,该标记能快速鉴定这两个菌株。
谢宝贵等[4]将金针菇子实体白色基因连锁的RAPD标记转化为SCAR 标记,认为可应用于白色金针菇良种选育,提高育种效率。
Masuzeki等利用8对SC AR锚定引物构建洋葱的SCAR标记连锁图谱,并将此用于其他葱类的遗传分析。
Shimada等在黄酮生物合成基因内含子长度多态性的基础上,建立SCAR 标记,可有效鉴定龙胆草极其变种,从而保护育种者权利。
假单胞菌可代替农药用于雪霉病的生物防治,Halm-berg等应用SCAR标记来有效监测假单胞菌的生物防治作用效果。
2相关序列扩增多态性(SRAP )2.1 SNAP标记的原理相关序列扩增多态性简称SRAP,是一种新型的基于PCR技术的分子标记系统,由美国加州大学蔬菜作物系LI与Q博士于2001年提出,又叫基于序列扩增多态性。
该标记通过一对引物对开放读码框进行扩增,上游引物长17 bp,5'端的前10bp是一段填充序列,紧接着是CCGG,它们组成核心序列及3'端3个选择碱基,对外显子进行特异扩增。
下游引物长18 bp , 5'端的前10一11帅是一段填充序列,紧接着是AATT,它们组成核心序列及3'端3个选择碱基,对内含子区域、启动子区域进行特异扩增,因个体不同以及物种的内含子、启动子与间隔长度不等而产生多态性。
2. 2 SRAP标记的特点SRAP标记测序显示多数标记为外显子区域,25条多态性带中16条序列GC含量超过35%,表明可能是外显子部分;Blas t搜索表明,60%条带与已知基因序列高度一致,这就确认了SRAP产生的多数标记包含了可译框中的外显子。
测序还表明SRAP多态性产生于两个方面:由于小的插入与缺失导致片段大小改变.而产生共显性标记;核昔酸改变影响引物的结合位点,导致显性标记产生。
该标记的优点:多态性高、产率中等;重复性好;操作简单;在基因组中分布均匀:可显示大量的共显性标记;较易对扩增得到的目标片段进行测序;引物具有通用性,而且其正向引物可以与反向引物两两搭配组合,因此用少量的引物可组配得到多个引物对,提高了引物的使用效率,降低引物合成成本。
2. 3 SRAP标记的应用SRAP分子标记系统主要应用于物种资源鉴定与评价、遗传图谱构建、绘制基因转录图谱、基因定位以及标记重要基因并克隆测序。
该分子技术最早是在芸甚属作物开发出来,目前已在其他作物如马铃薯、水稻、生菜、油菜、大蒜、苹果、樱挑、柑橘与芹菜中也成功扩增。
李翠翠等[5]利用SRAP分子标记对12个真姬菇进行遗传多样性分析,结果表明SRAP稳定性好,适于真姬菇的种内鉴定。
金梦阳等构建了甘蓝型油菜的SRAP标记遗传图谱,得到了202个SRAP标记。
朱坚等[6]将SRAP分子标记用于金针菇的种质资源分析。
Peag等应用SRAP分析研究23个种群的红花及其两个近缘种种群的造传多样性,发现23个红花种群遗传差异较大,两个近缘种群间亲缘关系极为密切;运用SRAP标记对86个柑橘亚科柑橘属品种及其近缘种的遗传多样性和亲缘关系进行研究,共产生376个多态性片段,但他们在系统树上的差异并不明显,亲缘关系极近。
Liu等首次将SRAP 标记应用于自交系竺麻DIV A水平的变化的研究,为竺麻的杂交育种提供理论依据,结果发现巴西的竺麻品种可能为中国品种进化而来的。
4靶位区域扩增多态性(TRAP)3. 1 TRAP标记的原理靶位区域扩增多态性简称TRAP,也是一种新型的基于PCR的植物基因型标记技术,由美国农业部北方作物科学实验室Hu与Vick于2003年提出。
与SRAP,RAPD和AFLP等标记技术无须任何序列信息即可直接PC R扩增不同,TRAP技术是基于已知的cDNA或EST序列信息。
它借助日益增长的庞大的生物序列信息利用生物信息工具和EST数据库信息,产生目标候选基因区多态性标记。
TRAP技术是从SRAP技术改进而来的,SRAP使用两个任意引物,而TRAP 是使用长度为16 - 20核昔的固定引物(fixed primer)与任意引物(HF}11tI8I)如mC}o固定引物以公用数据库中的靶EST序列设计而来;任意引物与SRAP所用的一样,针对外显子和内含子的特点。
设计为分别富含GC或AT核心区的任意序列。
固定引物的设计步骤:从EST数据库中鉴别所需序列,再采用有关引物设计软件(如Prirner3等)设定核着酸序列合理长度(18个碱基)与最适、最大和最小Tm值( 53 , 55 , 50} ) ,最后选定最适的引物。
任意引物设计完全同S1iAP技术,PCR扩增前5个循环采用35℃的退火温度,后35个循环采用5D℃的退火温度,每次TRAP-PCR反应在6. 50%聚丙烯酸胺测序胶可产生54一900bp的片段34 -50个。
3.2 TRAP标记的特点TRAP标记技术不但具有PAPD技术的操作简单、易于建立的特点。
而且具有AFLP技术强大功能的优势,它是一种新的基于PC R的植物基因型标记技术,具有操作简单、重复性好、多态性丰富、效率高和稳定性好的特点。
3. 3 TRAP标记的应用TRAP技术适用于在不同作物上用于各种目的的研究,包括遗传图谱的构建、重要性状基因标记、种质资源的多样性研究和鉴定评价、标记辅助选择育种、gDNA与。
DNA指纹分析乃至图位克隆等方面。
Hu等L})将TRAP标记运用于植物的基因分型研究。
金梦阳等[3]构建了甘蓝型油菜的TRAP标记遗传图谱,得到了14个TRAP标记。
杜晓华等「zs ]用TRAP标记对多年生向日葵的1G个种进行了遗传多样性研究,建立的系统树与基于形态特征的分类结果相似。
研究表明,TRAP可以有效地应用于接骨木的普通种、栽培种和野生选育种的遗传多样性评估。
H ong等利用TRAP标记对天葵的遗传变异种进行评价研究,发现该TRAP标记系统非常适合于天葵选育种的分类鉴定。
Alwal}等利用TRAP分子标记进行甘蔗种间杂交的连锁图谱和基因组分析研究,结果发现TRAP标记比A.FLP标记和SRAP标记的效果都要好,因为该标记具有靶基因定位功能。
4 SSR标记SSR标记又称为sequence tagged microsatellite site,简写为STMS,是目前最常用的微卫星标记之一。
由于基因组中某一特定的微卫星的侧翼序列通常都是保守性较强的单一序列,因而可以将微卫星侧翼的DNA片段克隆、测序,然后根据微卫星的侧翼序列就可以人工合成引物进行PCR扩增,从而将单个微卫星位点扩增出来。
由于单个微卫星位点重复单元在数量上的变异,个体的扩增产物在长度上的变化就产生长度的多态性,这一多态性称为简单序列重复长度多态性(SSLP),每一扩增位点就代表了这一位点的一对等位基因。
由于SSR重复数目变化很大,所以SSR标记能揭示比RFLP高得多的多态性。
4. 2 SSR标记的特点SSR具有以下优点;(1)检测快速、信息量大;(2)一般检测到的是一个单一的多等位基因位点;(3)微卫星呈共显性遗传,故可鉴别杂合子和纯合子;(4)所需DNA 量少,即便降解了也能有效地分析鉴定出。