酶工程课程复习要点

5. 某学者构建了产纳豆激酶的基因工程菌，但发现该酶在水溶液
中10-12分钟就分解，请提出你的稳定性改造方案；
6. 一种新的氧化酶，结构信息不详且活性不高，但碘乙酸能强烈
抑制其活性，若对该酶进行侧链基团修饰，试给出方案；
思考题汇总
1、举例说明纤维素酶的三种活力测定方法 2、举例说明三种糖苷键水解酶的应用实例 3、试分析淀粉对－淀粉酶的诱导作用机制； 4、对于中期合成型动力学特征的产酶过程，如何提高产酶水平？
8. 酶的改造方法：物理、化学、生物和人工模拟方法 9. 酶分子修饰的主要方法和酶修饰的三种作用； 10. 大分子结合修饰（PEG修饰）、侧链基团修饰、氨基酸置 换修饰等的原理和一般过程； 11. 酶的生物法改造（定点突变和定向进化）：酶定向进化的
基本概念及过程，基因突变方法，筛选的方法
12. 酶的固定化方法及其特点比较，主要是四种基本固定化方 法的特点及其比较；酶固定化的优势与性质变化（活性、稳 定性和连续使用）
10、试以聚乙二醇修饰为酶为例论述酶分子修饰对酶功能改进的作
11、哪几类酶反应器适合使用固定化酶，固定化酶强度如何影响反应器选择? 12、对于底物/产物抑制严重的酶反应，如何选择合适的酶反应器
期中考试题目
1.试分析农产品加工副产物作为微生物发酵碳源和氮源之优缺点？
2. 如何判断微生物发酵产酶的合成模式？对于滞后合成型产酶模
式，如何提高产酶量和活性？试给出实验方案； 3. 试比较动物细胞培养产酶与微生物发酵产酶的异同点； 4. 某学者采用海藻胶固定化细胞发酵产α-淀粉酶，发现酶产量没 有提高且细胞破碎严重，试分析原因及解决措施；
13.细胞固定化方法及其应用特点（吸附和包埋法）； 14. 酶的人工模拟概况，抗体酶的概念和基本制备过程 15. 非水相酶促反应的种类（有机相、超临界流体、气相、离 子液体等） 16. 水和溶剂对酶促反应的影响:必须水概念、水含量的控制、
溶剂极性系数、溶剂的选择等；酶在有机溶剂中的催化特性
变化； 17. 酶反应器的类型（按照操作方式、酶的使用形式分类）和 混合方式、特点及选择，酶反应器的选择方法，酶反应器的 设计主要步骤。 18. 酶的应用：结合具体内容进行归纳。
5、植物细胞培养需要无机盐吗？请简述培养基中无机盐的配置方法；
6、植物细胞生长需要光照，请根据不同培养方式给出光照的实现方式； 7、何为动物细胞的锚地依赖性，培养过程中如何克服锚地依赖性的影响；
8、请结合动物细ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ的特点分析动物细胞反应器设计与放大的策略和注意点；
9、如何确定某一个酶结构中含有组氨酸或酪氨酸，若欲对该酶通过分子修饰 进行改造，简述你的实验思路;
3. 提高微生物发酵酶产量的措施（三种方法及其原理）；并结 合酶生成动力学进行分析；对同步合成、滞后合成、中间合 成等现象的分析及解决手段；
4. 固定化细胞、固定化原生质体发酵产酶的特点；
5. 植物细胞的特点，植物细胞培养的一般过程及特征要求，如
培养基特点及光照要求等；
植物细胞培养产酶的具体过程及操作要点 6. 动物细胞的特点，动物细胞培养的一般过程及其特殊性，动 物细胞的器壁依赖性，动物细胞培养的培养基和培养条件特 点； 7. 蛋白类酶的提取过程，适用于酶蛋白分离的各种提取方法之 分离原理等。如何保持分离过程中酶的活性？
课程要点
1. 酶工程的发展历史；氨基酰化酶、青霉素酰化酶、葡萄糖异 构酶、天冬氨酸酶等酶的应用； 常见酶如蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、糖苷酶和果胶酶等的 作用机理；酶的三大催化特性；
2. 酶生物合成的调节机理（主要是原核生物）：转录水平调节
，操纵子概念；分解代谢（葡萄糖效应原理）、诱导阻遏（
诱导物的种类）、代谢产物阻遏；