多重耐药菌识别标准
多重耐药菌鉴别与分析
多重耐药菌鉴别与分析实验室鉴别主要包括菌落形态观察、生物化学试验和分子生物学检测等。
菌落形态观察是最基本的鉴别方法之一、不同细菌菌种在琼脂平板上形成的菌落具有特定的形态，如形状、颜色、边缘等。
结合常见多重耐药菌的菌落形态特点，可以初步判断是否为多重耐药菌。
生物化学试验可以进一步确定细菌的种属和耐药性。
常用的生物化学试验包括氧气要求性试验、碳水化合物代谢试验、氧化酶试验等。
通过这些试验，可以对菌株的代谢特点进行分析，从而判断是否为多重耐药菌。
分子生物学检测是一种快速、准确、灵敏的多重耐药菌鉴别方法。
其中，PCR（聚合酶链式反应）是最常用的方法之一、PCR可以扩增细菌的DNA片段，并通过特异性引物和探针检测耐药基因的存在。
此外，核酸杂交、DNA芯片和基因测序等技术也可以用于多重耐药菌的检测与鉴定。
临床分析主要包括病原菌的分离培养、抗生素敏感试验和耐药机制分析等。
病原菌的分离培养是临床分析的第一步。
通过病人患处的标本（如血、尿、脑脊液等）进行分离培养，获取纯种菌株。
然后，对纯种菌株进行形态观察和生物化学试验，初步判断是否为多重耐药菌。
抗生素敏感试验是评价细菌对抗生素的耐药性的关键方法之一、常用的方法包括纸片扩散法和微量稀释法。
通过测定菌株的最低抑菌浓度或纸片对菌株的抑菌圈直径，可以判断细菌对抗生素的敏感性，并进一步确定其耐药性。
耐药机制分析是评价多重耐药菌的发展与传播的重要手段。
通过检测菌株中的耐药基因、检查耐药基因的编码区域及其功能，可以揭示多重耐药菌形成与扩散的机制。
此外，研究菌株的群体基因组学和质粒组学，还可以了解多重耐药菌的潜在传播途径及传播速度。
综上所述，多重耐药菌的鉴别与分析是一项复杂而重要的工作。
实验室鉴别和临床分析相结合，有助于准确、及时地识别多重耐药菌，为临床治疗提供有效的指导，降低多重耐药菌传播风险，保障公共卫生安全。
常见多重耐药菌的诊断与治疗
CTM基因型占ESBLs基因型的比例
美国 85.4%
中国 >70%
近10年中国CTX-M型ESBLs占ESBLs所有基因型的70%以上[16-18]。
CTX-M-15型ESBLs比例明显上升[18,19]。携带CTX-M-15型ESBLs的
细菌常常仅对碳青霉烯类、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦等敏感 性保持在80%以上.
我国ESBLs检出率高
39.9% 39.1%
51.7%
E. coli
53.0%
K. pneumoniae
55.6%
56.5%
45.2%
42.0%
43.4%
41.4%
50.70% 38.50%
2005
2006
2007
2008
2009
2011
2005-2011 CHINET细菌耐药性监测
社区感染产ESBLs细菌的比例
EUCAST expert rules in antimicrobial susceptibility testing. Clin Microbiol Infect 2013;19: 141-160.
对ESBLs实验室检测的建议
• 目前国内大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中流行的ESBLs基因型主要为
对 CTX-M型， 头孢噻肟和头孢曲松水解能力强，对头孢他啶和头孢
Clinical and Laboratory Standards Institute. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing: Twentieth Informational Supplement M100-S20. CLSI, Wayne, PA, USA, 2010.
多重耐药菌判定标准
多重耐药菌判定标准多重耐药菌（Multidrug-Resistant Organism，MDRO），主要是指对临床使用的三类或三类以上抗菌药物同时呈现耐药的细菌。
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）：金黄色葡萄球菌对苯唑西林耐药耐万古霉素肠球菌（VRE）：肠球菌对万古霉素耐药产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌：细菌（大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属等）ESBLs检测阳性耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌（CRE）：肠杆菌科细菌（大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属、肠杆菌属、乳酸菌属、志贺菌属、沙门菌属等）对碳青霉烯类（亚胺培南、美罗培南、厄他培南等）全部耐药耐碳青霉烯类抗菌药物鲍曼不动杆菌（CR-AB）：鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类（亚胺培南、美罗培南等）全部耐药多重耐药铜绿假单胞菌（MDR-PA):铜绿假单胞菌对头孢菌素（头孢他啶、头孢吡肟等）碳青霉烯类（亚胺培南、美罗培南、厄他培南等）、β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂复合制剂（阿莫西林/他唑巴坦等）氟喹诺酮类（环丙沙星、左氧氟沙星）、氨基糖苷类（阿米卡星等）五类抗菌药物中三类及三类以上全部耐药。
泛耐药铜绿假单胞菌（PDR-PA)：铜绿假单胞菌对抗假菌头孢菌素类（头孢他啶、头孢吡肟等）、抗假单胞菌碳青霉烯类（亚胺培南、美罗培南等）、β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂复合制剂（哌拉西林/他唑巴坦等）、氟喹诺酮类（环丙沙星、左氧氟沙星等）、氨基糖苷类（阿米卡星等）五类抗菌药物全部耐药。
多重耐药菌致病、定植与污染的鉴别患者微生物检验标本中分离出的多重耐药菌不一定都是真正的的病原菌，既可能是致病菌，也可能是定植菌或污染菌，正确鉴别致病菌、定植菌和污染菌，无论抗感染治疗，还是对医院感染预防与控制，都有极为重要的意义。
因为如为致病菌，既需要抗感染治疗，也需要落实医院感染预防与控制措施。
如为定植菌，不需要抗感染治疗，但必须落实医院感染预防与控制措施；如为污染菌，则针对目标患者实施抗感染治疗和医院感染预防与控制措施均无必要。
多重耐药菌的判断标准
多重耐药菌的判断标准
多重耐药菌指的是对多种抗菌药物产生耐药性的细菌。
判断是否为多重耐药菌通常需要进行药敏试验和基因检测。
以下是常见的判断多重耐药菌的标准和方法：
1. 药敏试验：药敏试验是通过将分离的细菌培养在含有不同抗菌药物的培养基上，观察细菌对药物的抗性情况来判断是否为多重耐药菌。
如果细菌对多个不同类别的抗菌药物表现出抗性，可以初步判断为多重耐药菌。
2. MIC值：药敏试验中的最小抑制浓度（MIC）也是判断多重耐药菌的重要指标。
MIC值表示对某种抗生素的最低有效浓度。
对于多重耐药菌，其MIC值通常会较高，表明对抗生素的抗性程度较高。
3. 基因检测：基因检测可以进一步确定是否为多重耐药菌，并确定其耐药性的机制。
通过检测细菌中与耐药相关的基因，如耐甲氧西林基因（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA）等，可以确定是否存在多重耐药。
4. 报告和参考标准：根据检测结果，医院和实验室会根据世界卫生组织（WHO）和其他相关机构的标准，生成报告，指导临床用药和预防控制措施。
需要注意的是，判断多重耐药菌需要综合使用多个方法和指标，包括药敏试验和基因检测等，以提高诊断的准确性和可靠性。
此外，随着细菌的耐药性不断演变和变异，鉴定多重耐药菌也需要与时俱进，根据最新的科学研究和临床经验进行判断。
因此，对于具体的细菌菌株的耐药情况，最好咨询专业的医疗实验室或医生的意见。
多重耐药菌ESBLS的概念及检验方法
esblsESBLs是英文"Extended Spectrum Beta-Lactamases"的缩写，中文翻译为"超广谱β-内酰胺酶"。
大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌等通常最易生产，其次，阴沟肠杆菌、粘质沙雷氏菌、弗劳地枸橼酸菌、绿脓杆菌也可生产。
其特点是可以水解灭活青霉素类抗生素、头孢菌素(主要为第三代头孢菌素，如头孢他啶、头孢哌酮等，马斯平等除外)和单环β-内酰胺类抗生素(氨曲南、卡芦莫南等)，通常不水解头霉素类(头孢西丁、头孢美唑等)和碳青霉烯类(亚胺培南、美罗培南等)。
其活性可以被克拉维酸、舒巴坦、他唑巴坦等β-内酰胺酶抑制剂所抑制。
我国的产ESBLs菌株主要是分解头孢噻肟的CTX-M型。
耐药特点如果临床出现产ESBLs菌株，那么对青霉素类、第三代头孢菌素(头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、头孢曲松等)、单环β-内酰胺类抗生素(氨曲南)耐药，ESBLs在实验室有一专门的检测方法，如果病人的药敏报告单已注明为产ESBLs菌株，那么说明已经实验室确证。
如果病人药敏报告单未注明为产ESBLs菌株，三代头孢菌素和单环酰胺类抗生素中有一种MIC≥2ug/ml，或符合CAZ≤22mm、ATM≤27m m、CTX≤27mm、CRO≤25mm 其中一个，那么提示菌株可能产ESBLs，这种情况下，即使实验室报告为敏感的第三代头孢菌素和单环β-内酰胺类抗生素，在临床也不推荐使用。
预防第三代头孢菌素和单环β-内酰胺类抗生素的广泛应用是导致产ESBLs菌株出现及传播的主要因素，此外，尚有其它因素。
假设临床出现产ESBLs菌株，会在病人和医院之间及不同菌株之间相大肠杆菌互传播，导致临床高死亡率及高比率持续性定殖，应充分引起注意。
因此，在治疗时，减少第三代头孢菌素和单环β-内酰胺类抗生素的应用，可以显著降低产ESBLs菌株的出现。
选择治疗哌拉西林/他唑巴坦首先，一旦确定为产ESBLs菌株，应立即停止使用第三代头孢菌素和单环β-内酰胺类抗生素的治疗。
多重耐药菌的判定与抗菌药物的选择
多重耐药菌的判定与抗菌药物的选择《多重耐药菌医院感染预防与控制技术指南（试行）》（卫办医政发﹝2011﹞5号）中多重耐药菌（multi-drug resistant organism，MDRO）的定义为：主要是指对临床使用的三类或三类以上抗菌药物同时呈现耐药的细菌。
由多重耐药菌引起的感染呈现复杂性、难治性等特点，主要感染类型包括泌尿道感染、外科手术部位感染、医院获得性肺炎、导管相关血流感染等。
近年来，多重耐药菌已经成为医院感染重要的病原菌。
一、常见多重耐药菌1.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）2.耐万古霉素肠球菌（VRE）3.产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌4.耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌（CRE）5.耐碳青霉烯类抗菌药物鲍曼不动杆菌（CR-AB）6.多重耐药/泛耐药铜绿假单胞菌（MDR/PDR-PA)二、多重耐药菌判定标准在2010年美国、瑞典、以色列、希腊、荷兰、瑞士、澳大利亚等国的一些专家共同提出的关于MDR(multidrugresistant)、XDR(extensivelydrugresistant)、PDR(pandrugresistant)术语国际标准化建议（草案）的基上，Magiorakos等专家正式发表了MDR（多重耐药）、XDR（泛耐药）、PDR（全耐药）耐药菌暂行标准定义。
1.葡萄球菌属MDR、XDR、PDR定义标准定义MDR、XDR、PDR葡萄球菌属的抗菌药物类别及代表性药物见表1。
1.1 MDR(1)只要是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)就可以定义为MDR;(2)对表1中17类抗菌药物中的3类或3类以上（每类中的1种或1种以上)抗菌药物不敏感。
1.2 XDR对表1中17类抗菌药物中的15类或15类以上(每类中的1种或1种以上)抗菌药物不敏感。
1.3 PDR对表1中所有代表性抗菌药物均不敏感。
2.肠球菌属MDR、XDR、PDR定义的标准定义MDR、XDR、PDR肠球菌属的抗菌药物类别及代表性药物见表2。
多重耐药菌定植和感染的判断
有暴发：隔离尽可能长，直到暴发解除。 主动筛查阳性但未采取去定植措施：宜隔离到出院或死亡。 其他患者：何时接触隔离不明。
酶抑制剂的复合制剂
哌拉西林-他唑巴坦
抗假单胞菌头孢菌素
头孢他啶
头孢吡肟
单环类
氨曲南
抗假单胞菌碳青霉烯类
亚胺培南
美洛培南
多利培南1
磷酸类
磷霉素
多粘菌素类
多粘菌素E
多粘菌素B
喹诺酮类
环丙沙星
左氧沙. 星
正确送检和解读微生物学结果
“被引导但不被误导”
送检时机 开始经验性使用抗菌药物时 现有药物疗效不佳，需要考虑换药时
培养标本1：无菌生长 培养标本2：鲍曼不动杆菌（对亚胺培南耐药，未做头
孢哌酮/舒巴坦敏试）
鲍曼：污染、定植、致病？
.
改为头孢哌酮/舒巴坦 3g q6h+米洛环素0.1 bid治疗。患 者湿罗音减少，胸片示双肺斑片影略有吸收。但患者仍 发热。使用头孢哌酮/舒巴坦后第2天后再次去气道抽吸 物培养（标本3），示鲍曼不动杆菌生长（敏试结果与 标本2一致）。
.
痰中培养出念珠菌 不能作为诊断念珠菌肺炎的依据，多数情况下反映上呼
吸道菌群失调或者是定植； 多项针对死亡患者的尸检结果表明，呼吸道样本中检出
念珠菌患者很少患有肺念珠菌病 即便是在接受大量抗菌药物治疗的ICU患者或癌症死亡
病例中，肺念珠菌病也很少见
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区分感染和定植：感控的角度
对于多重耐药菌感染者：临床症状缓解或治愈 卫生部《医院隔离技术规范》WSIT 311-2009
MDR、XDR、PDR多重耐药菌暂行标准定义
表３ 用于定义肠杆菌科ＭＤＲ、ＸＤＲ、ＰＤＲ的抗菌药物 类别及代表性药物
抗菌药物类别
代表性抗菌药物
固有耐药*
氨基糖苷类
抗ＭＲＳＡ的头孢菌 素 抗假单胞菌青霉素＋ 酶抑制剂 碳青霉烯类
非广谱头孢菌素类： 第一、二代头孢菌素
庆大霉素 妥布霉素 阿米卡星 奈替米星
表３续 用于定义肠杆菌科ＭＤＲ、ＸＤＲ、ＰＤＲ的抗菌药 物类别及代表性药物
抗菌药物类别 代表性抗菌药物
青霉素类＋酶抑 阿莫西林／克拉维酸 制剂
氨苄西林／舒巴坦
氯霉素类 膦酸类 多粘菌素类
四环素类
氯霉素 磷霉素 粘菌素
四环素 多西环素 米诺环素
固有耐药*
弗氏柠檬酸杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、蜂房哈夫尼菌、 摩氏摩根菌、雷氏普罗威登斯菌、斯氏普罗威登斯菌、黏质沙 雷菌 弗氏柠檬酸杆菌、克氏柠檬酸杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、 蜂房哈夫尼菌、 雷氏普罗威登斯菌、黏质沙雷菌
抗菌药物类别 氨基糖苷类（不包括链霉素） 链霉素 碳青霉烯类 氟喹诺酮类 糖肽类 甘氨酰环素类 脂肽类
噁唑烷酮类
青霉素类 链阳菌素类 四环素类
代表性抗菌药物
庆大霉素（高水平）
链霉素（高水平） 亚胺培南 美罗培南 多尼培南 环丙沙星 左氧氟沙星 莫西沙星 万古霉素 替考拉宁
替加环素 达托霉素
利奈唑胺
氨苄西林 奎奴普丁／达福普汀 多西环素 米诺环素
２ 肠球菌属MDR、XDR、PDR定义的标准
２．１ ＭＤＲ 对表２中１１类抗菌药物中的３类或３类以上（每类 中１种或１种以上）抗菌药物不敏感。
２．２ ＸＤＲ 对表２中１１类抗菌药物中的９类或９类以上（每类 中１种或１种以上）抗菌药物不敏感。
多重耐药、广泛耐药和泛耐药细菌的定义
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2019
ppt资料
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概述
随着抗菌药物的广泛应用，细菌耐药性也 不断增强。在过去的20年出现了许多新的 多重耐药（MDR）、广泛耐药（XDR）甚 至泛耐药（PDR）的“超级细菌”，给全 球公共卫生领域和临床医学带来巨大的挑 战。 目前对细菌耐药性的研究不断深入,但对各 类耐药细菌的概念和定义却比较混乱，至 今没有一个统一的共认识，给临床诊治、 研究和预防控制工作带来了困难。
二、临床具体耐药细菌的定义标准
（二）耐药铜绿假单胞菌的定标准
具有抗铜绿假单胞菌活性的抗菌药物包括：
1、头孢类（头孢吡肟、头孢他啶） 2、碳青霉烯类（亚胺培南、美罗培南） 3、氟喹喏酮类（左氧氟沙星、环丙沙星） 4、氨基糖甙类（阿米卡星） 5、加酶抑制剂（头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦） 6、多黏菌素
一、多重耐药、广泛耐药和泛耐药 细菌的基本定义
一开始只把对一类以上抗菌药物耐药的称 为MDR。 所以据此把细菌耐药的情况分为“不耐 药”、“对一类药物耐药”和“对多类药 物耐药”。 随着细菌耐药性的发展和认识的深入，又 把对所有大类的抗菌药物全部耐药的称为 PDR。
一、多重耐药、广泛耐药和泛耐药 细菌的基本定义
一、多重耐药、广泛耐药和泛耐药 细菌的基本定义
3.泛耐药细菌（ pandrug-resistant bacteria,PDR)：泛耐药细菌指对所 有分类的常用抗菌药物全部耐药，革 兰氏阴性杆菌对包括黏菌素和替加环 素在内的全部抗菌药物耐药，革兰氏 阳性球菌对包括糖肽类和利奈唑胺在 内的全部抗菌药物耐药。