分子生物学复习提纲

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分子生物学总体复习提纲

分子生物学总体复习提纲
• 简述RNA转录的概念及其基本过程。 • 比较复制和转录的异同点。 • 大肠杆菌、水稻、酵母、果蝇中分别有几种 RNA 聚合酶? • 大肠杆菌的终止子有哪两类?它们的结构特点? • 真核生物 mRNA 的加工包括哪些? • 简述3类内含子的剪接的共同点和不同点 • 简述RNA编辑及其生物学意义 • 简述3中RNA的结构特点及功能 • 简述原核与真核RNA的差异
• 基因家族的分类及其主要的表达调控模式 • 反式作用因子/转录因子的结构特征,各部分的结构特点。 • 调控蛋白DNA结合域的主要结构特征有哪些,并各举一例说明。 • 说出几种DNA聚合酶II的转录因子及其识别序列和DNA结合域的结
构特征。 • 真核生物转录前水平的基因调节主要有哪些方式? • DNA甲基化对基因表达的调控机制 • iRNA的概念及其对基因表达的调控 • 比较真核生物和原核生物转录水平调控与翻译水平调控的异同点
第五章 原核生物表达调控
• 名词:操纵子,弱化子,降解物抑制作用, 魔斑核苷酸
• 简述代谢物对基因表达调控的两种方式 • 什么是操纵子学说? • 简述乳糖操纵子的调控模型 • 当环境中没有色氨酸时,分别阐述阻遏蛋
白和弱化子是如何调控色氨酸操纵元的。
第六章 真核生物表达调控
• 名词解释:顺式作用元件,反式作用因子,启动子,增强子,基 因表达,看家基因,RNAi,SiRNA,miRNA
第一章 绪论
• 中心法则 • 分子生物学发展史中重要的事件?
第二章 基因、染色体和DNA
• 名词:半保留复制,半不连续复制,转座子 • 基因概念的发展和演变 • 原核生物和真核生物聚合酶 • DNA复制的过程 • DNA修复 • DNA转座
第三章 RNA转录
• 名词解释:编码链、模板链、剪接、剪接体、RNA编辑、 指导RNA、GT-AG规则、核酶、套索结构

分子生物学考试复习提纲

分子生物学考试复习提纲

分子生物学考试复习提纲一.名词解释(1)Ori and ARS;(2)Promoter;(3) -independent termination (4)SD sequence and Kozak sequence;(5)Operator and Operon;(6)Enhancer and silencer;(7)cis-acting element and trans-acting factor;(8)Open reading frame (ORF);(9)Gene;(10)DNA denaturation, Hyperchromatic effect, DNA Melting temperature (Tm); (11) RNA splicing, intron and exon; (12) RNAi; (13)polymerase chain reaction (PCR); (14) Southern blot, Northern blot, Western blot;二.简答和问答题1.RNA的种类和功能2.DNA半保留和半不连续复制3.端粒酶的工作原理4.原核DNA复制过程中遗传信息的保真机制5*.原核和真核复制,mRNA转录,蛋白翻译,基因表达调控的异同6.PCR与细胞内DNA复制的异同7.Southern blot, Northern blot, Western blot三种分子生物学技术差异8.复制,转录,翻译,调控中的各种保守序列及其功能9.乳糖操纵子和色氨酸操纵子(包括的衰减子)的工作原理三.分析题1.SDS-PAGE和双向电泳的原理2.顺式作用元件工作的原理3.DNA序列与蛋白功能(表型)非线形关系4.PCR的原理,包括它的特异性5.Western blot的原理,包括二抗工作的原理6.DNA变性中的增色效应与OD值测DNA含量的关系7.衰减子工作的必要条件。

分子生物学 复习提纲

分子生物学  复习提纲

分子生物学复习提纲免责声明:本资料仅供临床医学10级学习交流使用,基本覆盖上课重点。

由于课程的特殊性,特列成专题形式,个专题中重复部分在相应专题中都会覆盖。

凡应只使用本资料应试而造成的一切不良后果,均由使用者承担,本人不承担任何责任。

第一讲基因表达调控(转录水平的调节是基因表达调控的关键)分子生物学:是以生物大分子为研究对象,从分子水平去研究并解释一切生物学现象并在分子水平上改造和利用生物的一门新兴科学。

基因:编码RNA或蛋白质的全部核苷酸序列,包括结构基因和调控基因。

基因组:细胞或生物体中一套完整单倍体的遗传物质的总和,包括所有的基因和基因间区。

结构基因:编码RNA或蛋白质的核苷酸序列。

(原核:多顺反子、无内含子;真核:单顺反子、有内含子)转录单位:从启动子到转录终止子之间的DNA节段。

基因表达:是指DNA携带的遗传信息通过转录传递给RNA,mRNA通过翻译将基因的遗传信息在细胞内得以表达,合成具有生物功能的各种蛋白质的过程。

基因表达调控:是指对基因组中某一基因或一些功能相近的基因表达开启、关闭和表达强度的直接调节。

遗传密码:mRNA上按5’到3’方向排列的每三个核苷酸称遗传密码。

内含子:DNA或RNA中的非编码序列。

外显子:DNA或RNA中的编码序列。

多顺反子:一个结构基因转录产生一条mRNA ,编码几条功能相关的多肽链。

单顺反子:一个结构基因转录产生一条mRNA ,编码一条多肽链的生成。

启动子:是转录开始时RNA聚合酶识别、结合并开始转录起始所需的一段DNA序列。

终止子:提供转录终止信号的一段DNA序列。

增强子:能加强其上游或下游基因转录的DNA序列。

SD序列:mRNA5’端在起始密码子AUG 上游3~11bP处,含A-G 短序列,容易与16S r RNA3’-端含U-C 序列互补配对,称为SD 序列,它对mRNA与核糖体的有效结合并翻译至关重要。

开放阅读框ORF:始于起始密码子并终于终止密码子的一串密码子所组成的核苷酸序列。

临床分子生物学检验复习提纲

临床分子生物学检验复习提纲

临床分子生物学检验复习提纲临床分子生物学是现代医学中非常重要的一个领域,它涉及到了分子生物学和临床医学的结合,以及各种分子生物学技术在临床诊断和治疗中的应用。

以下是一个临床分子生物学检验的复习提纲,希望能够帮助你更好地准备考试。

一、分子生物学基础知识复习1.DNA结构和功能-核苷酸的组成和结构-DNA链的方向性-DNA的雙螺旋结构-DNA复制的过程2.RNA结构和功能-mRNA、tRNA和rRNA的结构和功能-转录和翻译的过程3.基因组和染色体-基因组的组成和结构-染色体结构和功能-遗传密码子表4.基因表达调控-转录调控的机制-翻译调控的机制-转录后调控的机制5.基因突变和遗传变异-突变的类型和机制-染色体缺失、重复和易位等遗传变异二、临床分子生物学技术复习1.PCR技术-PCR的原理和步骤-PCR引物设计和优化-PCR产物的检测和分析2.DNA测序技术- Sanger测序法的原理和步骤-高通量测序技术的原理和应用3.基因组学研究技术-基因芯片技术的原理和应用-下一代测序技术在基因组学研究中的应用4.基因突变检测技术-PCR-RFLP分析-聚合酶链反应单链构象多态性分析-测序检测技术在基因突变检测中的应用5.基因表达分析技术-实时荧光定量PCR- Northern blotting-基因芯片技术在基因表达分析中的应用三、临床分子诊断和治疗复习1.临床遗传病的分子诊断-基因突变检测在临床遗传病诊断中的应用-基因芯片技术在临床遗传病诊断中的应用-高通量测序技术在临床遗传病诊断中的应用2.分子病理学的应用-分子病理学技术在肿瘤诊断中的应用-微卫星不稳定性的检测和分析-液体活检技术在肿瘤诊断中的应用3.分子靶向治疗技术-靶向药物的分子设计原理-靶向药物的应用和限制-基因突变检测在靶向治疗中的应用4.群体遗传学和个体化医疗-群体遗传学研究的意义和方法-个体化医疗的概念和发展-药物基因组学在个体化医疗中的应用。

分子复习总提纲汇总

分子复习总提纲汇总

分子生物学复习第一章绪论1.分子生物学的概念(广义)在分子水平上研究生命现象。

即(狭义)在核酸与蛋白质水平上研究基因的复制,基因的表达(包括RNA转录、蛋白质翻译),基因表达的调控以及基因的突变与交换的分子机制。

2.DNA的双螺旋结构是由沃森和克里克发现的,PCR技术是由生物化学博士Mullis发现。

3.分子生物学在哪些方面具有广泛的应用?动物克隆、人类基因组工程、亲子鉴定、转基因产品、物种鉴定、疫苗和癌症检测4.分子生物学的发展简史?(一)分子生物学萌芽阶段(经典遗传学阶段):1868年孟德尔遗传定律的发现——1910摩尔根的染色体学说;(二)分子生物学理论形成阶段:1941年比德尔和塔特姆的“一个基因一个酶”——1965年“乳糖操纵子学说”(三)分子生物学的发展阶段:20世纪70年代的遗传工程。

(四)现代分子生物学阶段:基因组测序等5.请简要介绍证明DNA是遗传物质的两个经典实验(1)Oswald Avery(美国):肺炎链球菌转化实验(1944年)发现转化要素(DNA)是主要的遗传物质。

第一次发现遗传物质是DNA,而不是蛋白质。

(2)美国Alfred Hershey(赫尔希)发现噬菌体感染细菌时,其DNA进入了细菌体内。

1969 年赫尔希获得了诺贝尔生理学和医学奖。

第二章基因概念的演变与发展1.经典基因的概念性状由遗传因子控制→遗传因子在染色体上→遗传因子是DNA→一个基因一个酶→基因是顺反子。

基因是产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列,是一个具有特定功能的、完整的、不可分割的最小遗传单位即顺反子。

【经典的基因概念】基因是彼此孤立地、呈线性排列在染色体上的遗传实体。

→【负剂量效应、位置效应】染色体上的基因不是孤立的,基因的表达受染色体状态的影响(斯特蒂文特A.H.Sturtevant,1925)。

→【等位基因、复等位基因、拟等位基因】紧密连锁,控制同一性状的非等位基因称为拟等位基因(P19)。

生物分子学复习提纲

生物分子学复习提纲

分子生物学复习提纲(附考试原题)一、了解基因工程的主要研究成就。

(一)植物基因工程当前已鉴定和克隆化的植物基因有数百种,重组植物的野外试验已达千余宗。

与农业中的除草剂、抗昆虫、抗病(抗真菌、抗病毒)、抗不良环境因素、提高产量的光合作用、以及提高蛋白质有关。

(二)动物基因工程最突出——转基因动物及其发展。

1983年美国将生长激素基因注入小鼠受精卵——超级鼠。

缺点在于其盲目性。

外源性DNA引入受体细胞后可随机地插入受体细胞基因组中的任意位置,容易导致内源性有利基因的破坏和识货或激活有害基因。

表达水平难以预料。

目标:提高基因正常转化的效率,实现基因的定位整合。

(三)基因工程多肽药物与疫苗多肽药物:人胰岛素、人生长激素、干扰素、白细胞介素、组织血纤维蛋白溶酶原激活剂、肿瘤坏死因子、集落刺激因子……疫苗:细菌疫苗:麻风杆菌、百日咳杆菌、淋球菌……病毒疫苗:乙肝、甲肝、带疱、巨细胞病毒……寄生虫疫苗:疟原虫、利什曼虫、血吸虫……(四)基因诊断与基因治疗原指遗传性疾病的诊断,主要利用DNA探针(单链DNA小片段用核素、酶、荧光分子或化学催化剂等标记,之后同被检测的DNA中的同源互补杂交,从而检出所要查明的DNA)技术。

如诊断镰贫、地贫,也可诊断传染性疾病如结核。

多聚酶链反应PCR是一种体外扩增特异性DNA片段的技术。

基因治疗一般指将正常外源基因导入生物体靶细胞内以弥补所缺失的基因、关闭或降低异常表达的基因,以达到治疗遗传性疾病的目的。

方法普片采用逆转录病毒作为载体的基因导入法。

作为载体的逆转录病毒已缺失功能蛋白基因。

目前研究多属于单基因缺陷引起的遗传疾病基因治疗,如血友病,贫血等。

肿瘤和传染病也在研究。

(五)环境检测与净化环境监测:可用基因探针或PCR技术检测水中微生物。

环境净化:重组质粒导入细菌,降解有机物、农药等——超级菌;促进酶工业进步,提升经济效益等。

*二、掌握分子生物学的中心法则。

*三、掌握核酸的基本组成成分、基本性质。

分子生物学复习提纲

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分子生物学一、名词解释1. 中心法则是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质,即完成遗传信息的转录和翻译的过程。

也可以从DNA传递给DNA,即完成DNA的复制过程。

2. 半保留复制是亲代的两条链解开,每条链作为新链的模板,从而形成两个子代DNA分子,每一个子代DNA分子包含一条亲代链和一条新合成的链。

3. 重组除了被复制之外,细胞DNA还能发生重排,产生具有不同架设甚至新基因的新分子。

这一性质被泛称为重组。

4. 突变DNA序列中可遗传的改变称为突变。

5. 等位基因同源染色体含有以相同顺序出现的相同基因,这些基因不一定完全相同,他们在序列和功能上可能有少许差异,这些基因被称为等位基因6. 同源染色体在二倍体生物中对等的染色体叫做同源体或同源染色体。

二、选择题1. RNA聚合酶核心酶α、β和β’ 亚基一起构成了RNA聚合酶核心。

2. 碱基比例计算①双链DNA分子中,两互补碱基相等;任意两个不互补碱基之和恒等,各占碱基总数的50%,且不互补碱基之和的比值等于1.②双链DNA分子中A+T/G+C等于其中任何一条链的A+T/G+C③双链DNA分子中,互补的两条链中A+G/T+C互为倒数.即两不互补碱基之和的比值等于另一互补链中这一比值的倒数.④双链的DNA分子中,A+T占整个DNA分子碱基总数的百分比等于其中任何一条链中A+T 占该链碱基总数的比例3. PCR程序设定长的引物,非常容易引起发夹结构,或者其他互补情况,最后形成二聚体,引物CG含量到55%会稳定很多。

PCR聚合酶链式反应,用于体外扩增所需要的目的片段。

①DNA一般为双链。

首先,我们需要把它进行解链,从而产生两条单链,让引物结合上去。

达到复制的目的。

一开始我们设置的高温,刚好能够使得DNA双链解体。

约94~98℃,用3到5min即可。

此反应中我们用的TAQ酶,嗜热杆菌中提取的DNA聚合酶,也是高温启动的,初始的高温适合其开始在体系中的活性,但是约15分钟的高温会导致其半衰期,从而失去活性,使得反应效率降低,所以高温的时间不宜过长。

分子生物学复习提纲资料讲解

分子生物学复习提纲资料讲解

分子生物学复习提纲1绪论证明基因就是DNA的实验。

中心法则的内容2 核苷酸的组成与结构(DNA RNA 组成结构)Chromosome Genome chromatin nucleotide pyrimidine purine Histon e真核细胞染色体的组成组蛋白的性质构成染色体的非组蛋白C value C value paradox Overlapping genes真核细胞DNA序列大致可分为3类:不重复序列中度重复序列高度重复序列Nucleosome组成DNA包装成染色体的过程chromatin structure 10nm fiber 30nm fiber原核细胞DNA的特点Semiconservative replication Replicon Semidiscontinuous replication SSB 蛋白DNA helicase Okazaki fragment PrimaseDNA的一级结构二级结构的特点A-B-Z-DNA的比较Z-DNA如何调控转录的DNA的高级结构为什么在DNA中通常只发现A—T和G—C碱基配对?那些条件可以促使DNA退火?DNA复制的主要方式(线性环状分几种类型)复制的起点方向速度原核生物复制的特点、过程DNA polymerase(原核真核)Klenow 酶DNA repair大肠杆菌中DNA的修复系统Mismatch repair Base excision repair Nucleotide excision repair Direct repair SOS repairTransposon 分类结构特征转座机制遗传效应真核生物中的转座子Ac element Ds element3转录Transcription translation sense strand coding strand template strand antisense strand Antisense gene Pseudogene initiator转录的基本过程(模板识别起始延伸终止)RNA polymerase 组成core enzyme holoenzyme σ亚基真核生物种三类RNA polymerase转录起始复合物的转换Promoter terminator transcription unit transcription factor core promoter initiation elongation termination转录起点真核原核生物启动子的结构原核生物转录的过程真核生物RNA polymerase I RNA polymerase II RNA polymerase III的启动子的结构RNA polymerase II 指导的基因转录过程-10 -35 区的最佳距离Enhancer 特点功能Upstream promoter element upstream activating sequence真核生物与原核生物mRNA的特征比较Cap ployA Cistron依赖、不依赖ρ因子的终止子抗终止作用Intron exon RNA splicing heterogeneous nuclear RNA ORF、splicesomeAlternative splicing生物体内的内含子的种类不同内含子的加工机制RNA editing snoRNA RNA processing Ribozyme GU-AG rule hnRNP4 翻译cognate RNA genetic codon mutation frameshift mutation Nonsense mutation codon biasinitiation codon terminator codon null mutation密码的性质简并性degeneracySynonymous codon wobbletRNA的结构种类ribosome 结构功能氨酰tRNA合成酶作用机制rRNA 种类为什么rRNA和tRNA分子比mRNA分子稳定?翻译的机制protein translocation 蛋白质前提的加工修饰蛋白质合成抑制剂蛋白质的转运降解Ubiquitin Molecular chaperone Signal peptide leader peptide5 原核真核基因表达调控Constitutive expression Negative regulation Repressor induction repression Regulator gene AttenuationGene expression coactivator inducer inducible gene negative/positive control negative/positive inducible Negative/positive repressible regulator gene structural gene pppGpp(ppGpp)operon operatorLactose operon 结构调控机制色氨酸操纵子的结构及调控机制Leucine zippe zinc fingercis-acting elements trans-acting factor Transcription factor Gene family interrupted gene euchromatin gene cluster housekeeping gene hypersensitive site真核生物DNA水平上的基因表达调控染色质结构对基因表达的影响基因的丢失基因的扩增基因的重排DNA的甲基化DNA甲基化乙酰化与基因的活性调控真核生物与原核生物在基因转录、翻译及DNA空间结构方面存在的差别?常见的顺式作用元件有哪些怎样作用的转录因子的DNA结合域分别有哪些,各自的作用特点是什么?分子生物学研究方法及实验技术cloning RNAi cDNA/genomic library Gene chip Transformation Hybridization Proteome probeYeast artificial chromosome plasmid Physical map ligation cloning vector expression vectorVector PCR blotting Restriction and modification DNA ligase denaturation endonuclease gene knockout蓝白斑筛选(α互补实验)重组DNA操作的基本步骤是什么基因工程中良好载体的条件分子杂交的原理southern northern blotting步骤基因工程常用的几种酶各自的作用特点质粒DNA 基因组DNA 提取的方法有哪些提取过程中常见试剂的作用PCR反应过程反应体系基本要素组成利用双脱氧末端终止法(Sanger法)测定DNA一级结构的原理与方法?对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面?。

分子生物学期末考试复习提纲(刘进元)

分子生物学期末考试复习提纲(刘进元)

分子生物学复习提纲H克隆载体H1质粒载体的设计1、线性载体片段自身环化所形成空质粒载体。

自环化载体可以通过转化克隆中销量提取质粒,然后进行酶解以及随后的琼脂糖凝胶电泳分析,但是不方便进行大规模筛选。

2、pBR322是最早开发出来的质粒载体,其包含两个抗生素基因,如果目的DNA片段插入到这两个基因的任意一个编码区内,就会发生插入失活,继而可以通过由转化子所显示的抗生素抗性来鉴定重组体。

3、通过在转化和铺板的操纵中对于不同抗生素敏感性的菌株来进行重组型检测,过程较常规。

4、蓝白斑筛选(重点):利用一种蓝色化合物的形成作为指示剂,在此情况下失活的基因是lacZ,which编码β-半乳糖苷酶,受乳糖启动子的调控。

当大肠杆菌表达lac阻抑物的时候,载体上的lacZ基因由IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导表达,形成的酶可以利用底物(X-gal)形成一种蓝色化合物。

但如果重组质粒中的lacZ位点发生了插入失活,那么就不能形成蓝色菌落。

具体操作见书上92页。

5、多克隆位点,第一个部分有多个限制酶酶切位点,这一个区域称作MCS(蓝色斑就是没有插入片段,白色斑就是插入片段。

)目的DNA的插入在这些多克隆位点中的任意一个位点或者两个位点之间,都会使lacZ‘基因失活,并且在适宜的平板上产生白色菌落。

所以MCS让选择位点用于克隆的限制酶有一定的灵活性。

6、pUC载体附近有启动子,所以可以用来转录插入的DNA,从而可以表达插入基因的表达效果。

7、为了表达插入的目标基因,需要有相同定位(和lacZ‘基因)的可读框,并且是连续不间断的,这样在表达之后就会产生融合蛋白。

H2 噬菌体载体1、侵染大肠杆菌的λ噬菌体可以用作科伦载体,噬菌体颗粒将他的线性DNA注入细胞,DNA从而连成环状,然后DNA复制组装成噬菌体颗粒并且随细胞裂解释放到细胞外面,造成细胞死亡(裂解期),但如果是通过特异性位点进行整合进宿主基因组,就可以进行长期的插入表达(溶原性)。

(完整)分子生物学复习纲要

(完整)分子生物学复习纲要

第一章分子生物学发展简史一.名词解释分子生物学:分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能,并从分子水平上阐述蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系及其基因表达调控的机理的学科。

基因组:是某个特定物种细胞内全部DNA分子的总和二.论述题1写出分子生物学事件简表并简单叙述3个重要事件2。

简述现代分子生物学的建立和发展阶段①遗传信息传递中心法则的建立②对蛋白质结构与功能的进一步认识③DNA双螺旋发现三.填空题1。

DNA重组技术的具体内容就是采用人工手段将不同来源的含某种特定基因的DNA片段进行重组,以达到改变生物基因类型和获得特定基因产物的目的的一种高科学技术。

2. Buchner兄弟19世纪末提出酶,脲酶的提纯和结晶证明酶的本质是蛋白质3。

Watson和Crick提出了DNA双螺旋模型4。

Morgan发现了连锁遗传规律5.Avery证明了DNA是遗传学信息的载体6。

Oswald Avery确定DNA是遗传物质7。

Thomas Roderick在1986年提出基因组学8.Cohen和Berg开创了基因工程9 基因组学是指对所有基因进行基因组作图(包括遗传图谱、物理图谱、转录本图谱 ) ,核苷酸序列分析,基因定位和基因功能分析的一门科学.10 生物信息学是指应用信息科学的理论、方法和技术,管理、分析和利用生物分子数据的学科。

四.缩略词DNFB 二硝基氟苯 PCD 细胞程序性死亡 RT 逆转录酶RE 限制性内切酶 DNA 脱氧核糖核酸第二章遗传物质的分子本质一:名词解释核酸的变性:是指核酸受到加热、极端的pH或离子强度的降低等因素或特殊的化学试剂的作用,其双螺旋区的氢键断裂,变成单链的过程,其中并不涉及共价键断裂.复性:当去除变性因素是,解开的互补单链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象称为复性。

二:论述题1.化学断裂法基本原理是什么?碱基的修饰,碱基的脱落,戊糖—磷酸骨架被特异性切割,从而产生一组长度不同的DNA链降解产物,经聚丙烯凝胶电泳分离和放射自显影之后,可直接读出待测DNA片段的核苷酸序列.2.James Watson和Francis Crick于1953年提出的B型双螺旋,其主要内容是?(1)DNA由两条呈反平行的多聚核苷酸链组成,两条链相互缠绕形成右手双螺旋;(2)组成右手双螺旋的两条链是互补的,它们通过特殊的碱基对结合在一起,碱基配对规则是一条链上的A总是与另一条链的T,G总是和C以氢键配对.其中AT碱基对有二个氢键,GC碱基对有3个氢键;(3)碱基对位于双螺旋的内部,并垂直于暴露在外的脱氧核糖磷酸骨架。

现代分子生物学复习提纲

现代分子生物学复习提纲

现代分子生物学复习提纲1.分子生物学的发展史(具体科学家)2.分子生物学是干什么的?3.染色体的组成4.原核与真核基因组的区别5.C值,C值谬论,C值反常现象6.Z-DNA7.DNA的结构(了解),高级结构(正超和负超螺旋)8.DNA复制的机理:半保留复制,特点:半不连续复制;复制叉,复制子(在原核和真核的区别)9.复制的几种方式(线性DNA和环状DNA-θ型,滚环型和D环型;各自属于哪类生物)10.线性DNA复制存在的问题-丢失11.DNA聚合酶(4种)及作用12.RNA引物酶(需了解)13.复制的影响因子及这些因子在复制中的作用14.DNA的修复(5种修复)15.转座子的概念,分类,还有Ac-Ds系统16.转座作用的遗传学效应(了解)17.编码链,有义链,无义链18.转录的3个1,R NA聚合酶在原核生物的组成成分与功能,2,RNA聚合酶与DNA聚合酶的异同点,3,三大酶的产物是什么19.原核启动子的结构特征,功能20.增强子的概念,作用1,原核生物mRNA的特征与真核生物mRNA的特征,2,基因家族的区分,结构和功能21.抗终止的作用22.加工:mRNA的剪接(剪切和连接),RNA的编辑,再编码与化学修饰,生物学意义23.核酶的概念,ⅠⅡ内含子的方式,有哪些是核酶。

RNA在生物进化中的地位(了解)24.遗传密码特性,S-D序列25.TRNA的L型二级结构,三级结构,tRNA的功能和种类26.核糖体的亚基构成,核心位点27.活化,起始,延伸,终止的参与因子及其作用28.蛋白质的加工包括那几个点,分子伴侣。

29.蛋白质转运机制:边翻译边转运30.基因工程(看课件),对象,(感受态的制备,DNA的转化概念),PCR,核酸凝胶电泳,基因组DNA文库的概念,31.(RNA的操作技术)围绕cDNA文库的构建32.SNP的标记,分子标记包括?33.DNA的变性(课件第2章),复性,分子杂交及其影响因素34.基因表达调控分为(永久性调控和适应性调控),基因表达调控表现在哪些方面(329页)35.操纵子的组成,概念,2大操纵系统(正,负调控),形式36.什么是弱化子37.转录后调控(8种,小标题)38.基因家族,分类,发育调控的家族有那些39.DNA甲基化与基因活性的影响40.真核基因转录机器的主要组成(了解),增强子,反式作用因子(举例说明,属于这两大类型?)41.乙酰化与去乙酰化的影响,42.DNA结构域,位置,5大类43.激素与热激蛋白对基因表达的影响,应答元件概念44.其他表达调控(加入到基因表达调控中),调整方式45.致癌基因与原癌基因,基因治疗与基因工程的区别46.人类基因组测序的科学意义。

分子生物学复习大纲

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第二章有机体、染色体和基因1、定义Genome、C值、C值矛盾、Operon、Regulon、Promoter、Operator、Discontinuous gene、Gene family、基因簇、假基因、DNA变性、DNA复性、DNA杂交、DNA熔点、基因定位2、计算题(1)已知E. coli的基因组大小为4.2×106 bp,Cot1/2为4。

一个物种的基因组为21×106 bp,求该物种基因组的Cot1/2?(2)已知某真核生物基因组的中速复性组分的化学复杂长度为2×108 bp(占整个基因组的30%),其Cot1/2为2。

计算中速复性组分的动力学复杂长度和重复频率各是多少?(3)某条染色体上有三个基因a、b、c,通过双因子杂交试验确定AB与ab杂交时重组体出现的频率为10%,AC与ac杂交时重组体出现的频率为38%,BC与bc杂交时重组体出现的频率为35%,试推断这三个基因在染色体上的排列顺序以及它们之间的遗传图距。

3、其他知识点(1)原核生物大肠杆菌染色体上基因组织结构特点。

(2)影响Cot1/2值的因素有哪些?(3)真核生物DNA序列类型有哪些?(4)构成染色体的3要素是什么?(5)原核生物与真核生物基因组差异有哪些?(6)内元与外元的特点第三章DNA复制1、名词解释复制原点、连环分子、切刻平移、链的置换、模板转辙、引发酶、引发体、转录激活、共价延伸、复制体、复制元、复制元族2、DNA的复制方式有哪些?3、DNA复制叉处发生的反应有哪些?4、简述大肠杆菌复制原点的结构特征。

5、原核生物线形DNA复制中如何解决末端隐缩问题?6、真核生物引发酶的特点是什么?7、试述SV40 DNA复制的过程。

第四章突变1、名词解释Mutation、诱发突变、转换、颠换、移框突变、同义突变、错义突变、无义突变、回复突变、抑制突变、抑制基因、增变基因、突变热点、离体定向诱变2、问答题(1)简述错义突变的基因内和基因间抑制突变的抑制机理。

分子生物学复习提纲

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分子生物学复习提纲一、重组DNA技术1、基本概念1)DNA克隆:获得DNA相同副本或拷贝的过程。

2)基因工程:实现基因克隆所用的方法及相关的工作称基因工程,又称重组工艺学。

3)限制性核酸内切酶:是一类能识别双链DNA分子中的某些特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。

4)DNA载体:携带目的基因,实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。

5)DNA体外重组:在DNA连接酶的催化作用下,将外源DNA分子(目的基因)与载体DNA分子连接成一个重组分子的过程。

6)粘性末端:在双链DNA分子的末端,有一条链的3’或5’端比另一条链的3’或5’端要长,这样的双链DNA分子的末端称为粘性末端。

7)基因组DNA文库:存在于转化细胞内由克隆载体所携带的所有基因组DNA的集合。

2、重组DNA技术的基本过程1)分2)切3)接4)转5)筛6)表达3、重组DNA技术中常用工具酶有哪些?各有什么特点和作用。

限制性核酸内切酶:识别特异序列,切割DNA。

DNA连接酶:催化DNA中相邻的5´磷酸基和3´羟基末端之间形成磷酸二酯键,使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接。

DNA聚合酶:以DNA为模板合成双链DNA分子。

4、作为基因工程载体所需具备的基本条件:1)能自主复制2)有多个单一酶切位点,称为多克隆位点(MCS),利于外源DNA分子插入3)具有两个以上的选择性遗传标记,便于重组体的筛选和鉴定4)分子量小,以容纳较大的外源DNA5)拷贝数高6)具有较高的遗传稳定性人工染色体载体包含的调控元件7、人工接头有什么特点?有什么用途?人工接头特点:有限制性核酸内切酶的酶切位点人工接头用途:在平末端上形成粘性末端8、宿主细胞应具备的条件1)处于感受态2)对载体无严格限制3)限制酶和重组酶缺陷4)不对外源DNA进行修饰5)能表达重组体所提供表型特征9、原核表达体系有什么特点?其优点:简单、迅速、经济、适合大规模生产。

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基因:是生物的基本遗传单位,是控制遗传性状的功能单位
基因组:一种生物所含的全套遗传物质。

基因表达:指细胞在生命过程中,把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子。

质粒:是附加到细胞中的非细胞的染色体或非核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子。

顺式作用元件:存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列,包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等,它的作用是参与基
因表达的调控,本身不编码任何蛋白质。

顺反子:是基因的基本功能单位,一个结构基因就是一个顺反子。

外显子:真核生物基因转录区的初级转录产物经过转录后加工之后保留于成熟RNA中的序列和转录区内的对应序列,属于编码序列。

内含子:真核生物基因转录区内位于相邻外显子之间的序列及初级转录产物中的对应序列,属于非编码序列。

启动子:是一段DNA序列,常位于基因转录区的上游,是DNA在指导合成RNA时被RNA聚合酶识别、结合并启动转录的碱基序列,具有方
向性,属于调控序列。

终止子:位于转录区下游的一段DNA序列,是转录的终止信号。

病毒,原核生物,真核生物基因组的特征与区别?
答:病毒基因组特征 1、病毒的基因组可能是DNA或RNA
2、可能是单链分子或双链分子,可能是闭环结
构或线性结构
3、DNA病毒基因组为单一DNA分子,多数RNA分子
基因组为单一RNA
4、基因组为单倍体且基因为单拷贝
5、基因组序列基本上都是编码序列
6、相关基因丛集成一个转录单位
7、有些基因组存在重叠基因
原核生物基因组特征 1、基因组DNA常为单一闭环双链分子
2、基因组DNA只有一个复制起点
3、基因组所含基因数量较多,且形成操纵子结构
4、编码序列几乎都是连续的,没有内含子结构
5、编码序列占基因组的50%
6、非编码序列主要是一些调控序列
7、多拷贝基因很少
8、基因组中含转座子序列
真核生物基因组特征 1、染色体DNA是线性分子
2、每个染色体DNA分子都有多个复制起点
3、染色体DNA与组蛋白、非组蛋白、RNA形成染色体结构染色体数目都是一定的,除配子为单倍体,体细胞一般为二倍体
基因组序列中仅有不到10%为编码序列
基因在基因组中分散分布,基因之间被大量不含编码信息的基因间序列隔开
基因组包含大量重复序列
基因多为断裂基因,其转录区由外显子和内含子交替构成
蛋白质编码基因的转录产物是单顺反子mRNA
、基因组中存在大量顺式作用元件
、基因组中存在各种基因家族
、基因组中含有大量转座子、逆转录转座子、逆转录子等可移动序列
端粒、端粒酶的结构特征与功能?
端粒是染色体DNA线性分子末端的一种短串联重复序列,用于稳定染色体末端结构
端粒酶是一种以自身RNA为模板的逆转录酶,负责催化复制终止阶段,涉及端粒合成
基因表达具有时空性分别指什么?举例?
基因表达具有时间特异性:指在生命的同一发育阶段,不同基因的表达水平不同;同一基因在生命的不同生长发育阶段的表达水平不同。

基因表达具有空间特异性:指在同一生长发育阶段,不同基因在同一组织器官的表达水平不同;同一基因在不同的组织器官的表达水平也
不同。

如何理解“基因表达呈现多层次及复杂性”
基因表达的多级调控:由基因激活、重排、甲基化程度到转录开始、转录后加工、mRNA降解到蛋白质翻译、翻译后加工修饰、蛋白质降

何为表观遗传学?DNA甲基化的作用?RNA干扰?
表观遗传学是研究基因的核苷酸序列不发生改变的情况下,基因表达的可遗传变化。

DNA甲基化可引起染色体结构,DNA构象,DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。

RNA干扰是指在mRNA水平上改变遗传信息的过程。

分子杂交技术包括哪些?有什么用途?
印迹杂交技术(DNA印迹法,RNA印迹法,蛋白质印迹法),原位杂交(组织原位杂交法,菌落杂交法,噬菌斑杂交法),斑点杂交法,狭缝杂交法,等位基因特异性寡核苷酸杂交法。

探针是什么?包括哪些类型?
探针是一小段DNA或RNA片段
分为基因组DNA探针、RNA探针、cDNA探针和寡核苷酸探针
什么是生物芯片?包括哪些类型?功能?
生物芯片是通过微电子或微加工技术,用生物大分子或细胞在数平方厘米大小的固相介质表面构建的微型分析系统。

主要包括基因芯片,蛋白质芯片,组织芯片,微流控芯片和芯片实验室
用于对基因、抗原或活细胞、组织等生物组分进行快速、高效、灵敏的分析及处理,具有高通量、微型化和集成化的特点。

PCR是什么?反应体系?产物生成特征?与PCR产物特异性相关因素包括哪些?
PCR是一种在体外选择性扩增DNA的技术。

反应体系组成:DNA聚合酶、DNA引物、dNTP、目的DNA模板和缓冲溶液条件优化:控制反应温度和反应时间,控制循环次数
简单了解基因测序
基因测序是一种新型的基因检测技术,能锁定个人病变基因,提前预防和治疗。

什么是重组DNA技术?如何构建重组质粒?(操作流程)
重组DNA技术也称基因工程,是制备DNA克隆所采用技术与相关工作的统称。

获取目的DNA,选择载体,构建重组DNA,将重组DNA导入合适的细胞,筛选和鉴定获得重组DNA宿主细胞,扩增表达
分子剪刀、胶水分别是什么?作用方式?
限制酶(限制性内切酶):识别双链DNA的特定顺序,水解该序列内部或附近的磷酸二酯键
DNA连接酶:催化DNA切口处的5’-磷酸基与3’-羟基连接,形成磷酸二酯键载体是什么?有哪些种类?特征?
将目的DNA片段连接到一种特定的、可以自我复制的DNA分子上,这种DNA分子就是载体
质粒载体、噬菌体载体、细菌人工染色体、真核载体、表达载体,穿梭载体
转基因食品
什么是基因编辑技术?包括哪些?有什么优缺点?
指能让人类对目标基因进行编辑,实施对特定DNA片段的敲除、加入。

目前基因诊断和基因治疗常用方法分别包括哪些?
基因诊断常用方法:核酸分子杂交技术、PCR技术、基因芯片、DNA测

基因治疗常用方法:基因增补、基因置换、基因修复、基因干预、自杀基因
治疗、免疫基因治疗
哪些疾病可用于基因治疗?
1、对被治疗的疾病已有充分认识,并且传统治疗无效或效果不佳
2、疾病
相关基因及其变异已经在DNA水平上阐明,并且目的基因已经克
隆3、目的基因可以在体外进行操作,并且能与载体重组4、载
体能把目的基因导入靶细胞,并且可以正常表达5、目的基因的
表达水平不需要严格控制,并且只要在低水平表达即可治愈或改
善症状 6、基因治疗方案必须经过审批。

基因治疗的局限性?
目前可以应用的目的基因数量不多,基因导入效率低,而且基因导入技术靶向性不足。

现多用于治疗隐性遗传缺陷型单基因病。

细胞凋亡、细胞周期是如何被调控的?
细胞凋亡过程受促凋亡途径和抗凋亡途径的严格调控
细胞周期控制系统包括CDK、cyclin、CDKI等
细胞凋亡过度、不足分别会引起哪些疾病?
凋亡过度会引起阿尔兹海默症、艾滋病、心肌缺血与缺血再灌注损伤、胸腺萎缩等
凋亡不足会引起自身免疫病、肿瘤
H型糖尿病胰岛素抵抗相关的基因包括?
什么是原癌基因?抑癌基因?癌基因?各自特点?
原癌基因受物理、化学、生物等因素刺激时会发生功能获得性突变,激活成癌基因。

抑癌基因存在于正常细胞内、调节细胞生长的一类基因,具有潜在抑制细胞恶性转化的作用。

癌基因是原癌基因激活后形成的,是导致肿瘤发生的重要分子基础,其编码产物可以在动物体内导致肿瘤发生或使培育细胞发生恶性转
化。

什么是信号转导?
信号转导是改变信号转导分子数量,结构和分布的过程,,将一种信号转换为另一种信号
受体特征?分类?例子?
受体是一种细胞膜跨膜蛋白或细胞内可溶性蛋白,可以通过直接与化学信号特异结合而变构
受体分为细胞内受体和细胞膜受体
G蛋白偶联受体
G蛋白偶联受体通过三聚体G蛋白作用转导信号,是一个细胞膜受体的大家族,在真核生物中普遍存在。

通过G蛋白偶联受体转导的信号有
激素、信息素、生长因子、神经递质等
第二信使
许多化学信号(第一信使)与细胞膜受体结合,引起细胞内一些小分子物质的浓度的改变,这些小分子是下游效应蛋白的变构剂,通过对
效应蛋白进行变构调节来转导信号,称为第二信使
细胞周期与凋亡。

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