实验九 大肠杆菌(36).ppt10.10.24
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大肠杆菌PPT课件
生长，生长温度范围为15-46℃。
•
在普通营养琼脂上生长表现3种菌落形态：
•
（1）光滑型： 菌落边缘整齐，表面有光泽、
湿润、光滑、呈灰色，在生理盐水中容易分散。
•
（2）粗糙型：菌落扁平、干涩、边缘不整齐，
易在生理盐水中自凝。
•
（3）粘液型：常为含有荚膜的菌株
• 此菌兼性厌氧，在有氧条件下生长良好，最适生 长pH为6.8-8.0，所用培养基pH为7.0-7.5,若pH值低 于6.0或高于8.0则生长缓慢
1
• 肠杆菌科有一些共同特性，比如都是革兰氏 阴性小杆菌，好氧或兼性厌氧，没有芽孢
• 大小0.4～0.7×1～3um,无芽胞,大多数菌株有 动力。
• 有普通菌毛与性菌毛，有些菌株有多糖 类包膜，革兰氏阴性杆菌。
2
3
• MOTILITY TEST • 1. Pseudomonas aeruginosa（铜绿假单胞菌）：
8
•
9
•
10
• 生化反应
•
大部分菌株发酵乳糖产酸产气，并发酵葡萄糖、
麦芽胞、甘露醇、木胶糖、阿拉伯胶等产酸产气。
•
IMViC试验为“+、+、-、-”。即为典型大肠
杆菌。
• 抗原构造
•
比较复杂，主要由菌体O抗原、鞭毛H抗原、
夹膜K抗原组成。
大肠杆菌ppt课件
supE、supF等 gyrA、rpsL、Tn5、Tn10等 lacZ、lacZ M15、lacl q、ara、mtl、xyl、gal、srl等
与氨基酸代谢相关的基因型 gpt、thyA、asd、leuB、proA、proB、trpR、lys、metB、cysB、thr等
与维生素代谢等相关的基因型 bioH、thi等
突变类型： 自发突变：自然条件下产生的突变。在进行DNA自我复制时，在基因突变与基因修 复的共同作用下发生突变。 适应突变：在非致死条件下，延长培养时间细胞发生的一种使自身适应环境的自发 突变。 诱变：人为选择某些可强烈地影响DNA结构的诱变剂处理引发的突变。
大肠杆菌与沙门氏菌在鉴别培养基上的菌落特征
细菌／ 培养基
麦康凯 培养基
伊红美蓝 培养基
SS培养基
三糖铁琼 脂斜面
大肠杆菌
红色
紫黑色带金 属光泽
红色
斜面黄色，底层 变黄有气泡，不 产生H2S
沙门氏菌
淡桔红色
较小无色透 明
淡红色、半透
明 ， 产 H2S 菌 株菌落中心有
黑点
斜面红色、底层 变黄、有气泡、 部分菌株产H2S
甘露醇
蔗糖
吲哚试验 （IDN）
MR 试验
VP 枸橘酸盐 试验 （CIT）
H2S
动力 (MOT)
大肠杆菌 ⊕ ⊕/- ⊕ ⊕ V + + -
大肠杆菌PPT
3MTM PetrifilmTM大肠杆菌/大肠菌群测试片 大肠杆菌 大肠菌群测试片
24 h得出大肠菌群数 肉、家禽和海鲜，24 h 得出大肠杆菌数 其它食品，48 h得出大 肠杆菌数 E. coli O157表现为大肠 菌群
谢谢大家! 谢谢大家!
革兰氏染色法： 革兰氏染色法：
• • •
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印有格子的纸 片
大肠菌群及大肠杆菌3M Petrifilm 检测法 大肠菌群及大肠杆菌
检样 25g(mL）样品+ 225mL稀释液 10倍系列稀释 只检测大肠菌群 接种1ml样品匀液到每张 PetrifilmTM大肠菌群测试片
36°C±1°C 24 h±2h
大肠杆菌和大肠菌群 同时检测 接种1ml样品匀液到每张PetrifilmTM 大肠杆菌/大肠菌群测试片
法国标准化协会（ 法国标准化协会（AFNOR）认证 ） 美国农业部（ 美国农业部（USDA）认证 ） 美国食品和药品管理局（ 美国食品和药品管理局（US FDA）认证 ） 美国食品安全与检测机构（ 美国食品安全与检测机构（USDA FSIS）认证 ） 日本食品安全法规标准分析方法 北美国家认证 加拿大健康保护协会认证 澳大利亚和新西兰食品安全认可方法 波兰标准化委员会（ 波兰标准化委员会（PKN）认证 ） 智利农业部（ 智利农业部（SAG）认证 ） 中国的GB和SN即将发布实施 中国的 和 即将发布实施
《大肠杆菌》PPT课件
整理课件ppt
14
1、产肠毒素大肠杆菌 (ETEC)
ETEC系一类致人和幼畜 (初生仔猪、犊牛、羔 羊及断奶仔猪)腹泻最常见的病原性大肠杆菌，其 致病力主要由黏附素性菌毛和肠毒素两类毒力因子 构成，二者密切相关且缺一不可。初生幼畜被 ETEC感染后常因剧烈水样腹泻，发病率和死亡率 均很高,如仔猪黄痢 。
兽医生物制品学-分论
大肠杆菌
小组成员：余兆鸿 罗洪瑶 胡国帅 黄荣浩
整理课件ppt
1
第一章 大肠杆菌
大肠杆菌是革兰氏阴性杆菌。
多数是肠道的正常菌群，少数为病原菌。
整理课件ppt
2
埃希菌属 （Escherichia)
埃希菌属有5个种，其中最重要的 是大肠埃希菌俗称大肠杆菌（E.coli)， 是最常见的临床分离菌。
于断奶后仔猪，生长快，体况健壮的仔猪常见。
整理课件ppt
23
羔羊大肠杆菌病
流行特点
主要是通过消化道感染， 其次是通过脐部感染，也有 部分是通过呼吸道感染。
发病特点及临床症状
羔羊发生一种以口鼻流沫、呼吸困难和胸膜肺炎为 主要特征的疾病。发病的羔羊据统计有121只，病羊多为 4～20日龄的羔羊，死亡54只，死亡率约44.6%，病程短， 如不及时治疗，约30min到数小时便死亡。发病的羔羊在 刚开始时体温升高，达41～42℃，精神委顿，食欲不振， 腹部胀气，继之出现呼吸困难，脉搏快而弱，口流白沫， 鼻流黏液，运动失调，卧地磨牙，头弯向一侧，最后在 昏迷中死亡，很少见有腹泻病羔。
大肠杆菌
重要的实验材料和研究对象
在分子生物学和基因工程实验中
也是重要的实验材料和研究对象
第二节 志贺菌属
shigella
是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌， 通称痢疾杆菌dysentery bacteria 形态 生化反应 无鞭毛，有菌毛 能分解葡萄糖，产酸不产气， 不分解乳糖,除宋内志贺菌 低于其他肠道杆菌，对酸敏感
正常菌群，一般不致病
两大原因可以致病
1、条件致病
细菌居住部位改变引起的肠外感染：
尿路感染最常见 2、致病菌株 某些带有致病基因的血清型，引起肠道感染
二、致病性
1、致病物质
黏附素：也叫定植因子，本质是菌毛
肠毒素：不耐热和耐热2种，均由质粒编码 LPS 2、所致疾病 肠道外感染：泌尿系统感染，肠道外的化脓性感染
带菌者
新鲜脓血便/肛拭
微生物学检查
及时送检/暂用30%甘油缓冲盐水保存
快速诊断
分离培养 SS平板（无色透明小菌落）
荧光菌球试验 协同凝集试验
双糖培养基（生化反应）
血清学反应（玻片凝集）
最后诊断
预防：控制传染源，切断传播途径
链霉素依赖株活疫苗（Sd）
治疗：易引起耐药性，联合用药
第三节 沙门菌属（Salmonella）
2、带菌者检查
分离病原菌 查Vi抗体 TYPHOID MARY
大肠杆菌【精品课件】
大腸桿菌
Escherichia coliFra Baidu bibliotek
生物學性狀 1. 型態與染色 2. 抵抗力
致病性 1.致病物質:定居因子(黏附素、大腸桿菌 的菌毛、腸毒素(大耐熱腸毒素、耐熱 腸毒素 )
致病性 2.所導致疾病:腸外道感染(尿道炎、膀胱 炎等) 、急性腹瀉(腸產毒性大腸桿 菌、腸致病性大腸桿菌、腸出血性大 腸桿菌)
檢查法:衛生細菌學檢查(細菌總數、大腸 菌數指數 )
取樣檢查時,樣品中大腸桿菌越多,表示樣 品被糞便污染越嚴重,也表明樣品中存在 腸道致病菌的可能性越大。故應對飲水、 食品、飲料進行衛生細菌學檢查。
防治原則 1. 菌毛抗原 2. 治療可選用慶大霉素、丁胺卡那霉素 等
圖片1
圖片2
圖片3
THE END ~謝謝大家~
Escherichia coliFra Baidu bibliotek
生物學性狀 1. 型態與染色 2. 抵抗力
致病性 1.致病物質:定居因子(黏附素、大腸桿菌 的菌毛、腸毒素(大耐熱腸毒素、耐熱 腸毒素 )
致病性 2.所導致疾病:腸外道感染(尿道炎、膀胱 炎等) 、急性腹瀉(腸產毒性大腸桿 菌、腸致病性大腸桿菌、腸出血性大 腸桿菌)
檢查法:衛生細菌學檢查(細菌總數、大腸 菌數指數 )
取樣檢查時,樣品中大腸桿菌越多,表示樣 品被糞便污染越嚴重,也表明樣品中存在 腸道致病菌的可能性越大。故應對飲水、 食品、飲料進行衛生細菌學檢查。
防治原則 1. 菌毛抗原 2. 治療可選用慶大霉素、丁胺卡那霉素 等
圖片1
圖片2
圖片3
THE END ~謝謝大家~
大肠杆菌.ppt
V-P试验
枸橼酸盐试验
IMViC试验
三、大肠杆菌的基本结构
(一)细胞壁 大肠杆菌的细胞壁分外膜和肽聚糖层。 外膜是大肠杆菌细胞壁的主要成分，主要由磷脂、 蛋白质和脂多糖组成。 脂多糖是革兰氏阴性细菌的内毒素，也是革兰氏阴 性细菌细胞壁的特有成分，主要与抗原性、致病性 及对噬菌体的敏感性有关。
大肠杆菌可以透过 接合作用传递遗传 物质。
五、抗原及血清型
（一）抗原 O抗原，即菌体抗原，为细胞壁脂多糖。该抗原刺激 机体主要产生IgM类抗体。 H抗原， 即鞭毛抗原 ，H抗原主要刺激机体产生IgG 类抗体，与其他肠道菌基本无交叉反应。 K抗原，即荚膜抗原，位于O抗原外层，为多糖。具 有K抗原的菌株不能被其相应的抗O血清所凝集叫 “O不凝集性”。 据耐热性不同，K抗原又分为：L、A和B 三型。
底层和斜面均呈 发酵葡萄糖和乳 大肠杆菌 糖；大量产酸产气 黄色，底层有气 葡萄糖 泡 乳糖 沙门菌 只发酵葡萄糖 底层黄色，斜 蔗糖 产酸产气 面保持红色 硫酸亚铁 能产硫化氢菌株 因形成硫化亚铁而使培养基呈黑色
对照 假单胞菌 志贺氏菌 沙门氏菌 大肠杆菌 变形杆菌 三糖铁培养基
吲哚试验
甲基红试验
L型K抗原：对热敏感，100℃ 1h破坏其抗原性，并 失去与相应抗体的结合力和凝集性，位于被膜中， 偶见于荚膜中。 A型K抗原：耐100℃ 1h ，但121℃ 2.5h破坏其抗 原性和O不凝集性，但保留与相应抗体结合能力。 位于荚膜中，抗A血清可使具有相应A抗原的菌体出 现荚膜肿胀现象。 B型K抗原：100℃ 1h 破坏其抗原性与相应抗体的 凝集性，但保留其与相应抗体结合力。
《实验九大肠杆菌》课件
实验九大肠杆菌
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 结论
01
实验目的
了解大肠杆菌的特性
01
02
03
生物学特性
大肠杆菌是一种革兰氏阴 性菌，呈杆状，无芽孢， 无鞭毛，需氧或兼性厌氧 。
生态分布
大肠杆菌是肠道正常菌群 ，通常存在于人和动物的 肠道中，但在一定条件下 可引起肠道外感染。
对实验技术的改进和展望
改进实验技术
在今后的实验中，我们可以采用更先进的实验技术，如基因工程技 术、蛋白质组学技术等，以更深入地研究大肠杆菌的特性。
拓展研究范围
除了对大肠杆菌本身的研究，我们还可以拓展到大肠杆菌与其他微 生物的相互作用、大肠杆菌在自然界中的分布和演化等方面的研究 。
加强实践应用
大肠杆菌在工业、农业、医学等领域具有广泛的应用价值，我们可以 加强实践应用方面的研究，发掘其更多的应用潜力。
THANKS
感谢观看
。
兼性厌氧
大肠杆菌既能在有氧条 件下生长，也能在厌氧
条件下生长。
发酵乳糖
大肠杆菌能发酵乳糖并 产生大量酸和气，这一
特性常用于鉴别。
大肠杆菌的分离和纯化原理
选择性培养基
利用大肠杆菌的生物学特性， 选择特定的培养基，如伊红美 蓝培养基，使其与其他菌种区
分。
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 结论
01
实验目的
了解大肠杆菌的特性
01
02
03
生物学特性
大肠杆菌是一种革兰氏阴 性菌，呈杆状，无芽孢， 无鞭毛，需氧或兼性厌氧 。
生态分布
大肠杆菌是肠道正常菌群 ，通常存在于人和动物的 肠道中，但在一定条件下 可引起肠道外感染。
对实验技术的改进和展望
改进实验技术
在今后的实验中，我们可以采用更先进的实验技术，如基因工程技 术、蛋白质组学技术等，以更深入地研究大肠杆菌的特性。
拓展研究范围
除了对大肠杆菌本身的研究，我们还可以拓展到大肠杆菌与其他微 生物的相互作用、大肠杆菌在自然界中的分布和演化等方面的研究 。
加强实践应用
大肠杆菌在工业、农业、医学等领域具有广泛的应用价值，我们可以 加强实践应用方面的研究，发掘其更多的应用潜力。
THANKS
感谢观看
。
兼性厌氧
大肠杆菌既能在有氧条 件下生长，也能在厌氧
条件下生长。
发酵乳糖
大肠杆菌能发酵乳糖并 产生大量酸和气，这一
特性常用于鉴别。
大肠杆菌的分离和纯化原理
选择性培养基
利用大肠杆菌的生物学特性， 选择特定的培养基，如伊红美 蓝培养基，使其与其他菌种区
分。
《大肠杆菌》课件
04
大肠杆菌的检测与防治
检测方法与技术
微生物学检测
免疫学检测
分子生物学检测
生物传感器检测
通过培养、分离、鉴定 等方法检测大肠杆菌。
利用抗原-抗体反应原理 ，通过免疫学方法检测
大肠杆菌。
利用DNA或RNA探针、 PCR等技术检测大肠杆
菌。
利用生物传感器技术， 将大肠杆菌的特异性反
应转化为可测信号。
致病性或提高其生物合成能力，为工业生产和医疗应用提供新途径。
未来展望与挑战
深入研究致病机制
进一步深入探究大肠杆菌的致病机制，为开发更有效的抗 菌药物和治疗方法提供理论支持。
加强跨学科合作
加强生物学、化学、物理学等领域的跨学科合作，利用新 技术和新方法，推动大肠杆菌研究的创新发展。
提高应用价值
将大肠杆菌的研究成果应用于实际生产和医疗实践中，提 高其应用价值和社会效益。同时，需要关注伦理和安全问 题，确保研究工作的合规性和可持续性。
。
食物中毒通常发生在食用被污染 的肉类、奶制品、蔬菜等食品后 ，因此食品生产和加工过程中的
卫生控制至关重要。
抗生素抗性与超级细菌
抗生素是治疗细菌感染的重要药物，但长期使用抗生素会导致细菌产生抗药性。
大肠杆菌等细菌在长期接触抗生素的过程中，会逐渐适应并抵抗抗生素的作用，形 成超级细菌。
超级细菌对多种抗生素具有抗药性，给治疗带来了极大的困难，也对全球公共卫生 安全构成了严重威胁。
肠道杆菌分析ppt演示课件
. 23
参考答案
• • • • • 沙门菌属 肠热症（发热、相对缓脉、脾肿大、WBC↓） 血液、粪便、尿液均可，查到病原菌即可 采集标本→分离培养→鉴定 肥达试验
.
24
• 患者，男，26岁，在饮用不清洁水后出现发热、 全身不适、四肢酸痛，并有腹痛、腹泻、脓血 便、里急后重等症状。 • 查体示体温39.2℃，腹部压痛。WBC 16×109 /L，中性粒细胞0.93。大便常规检查：脓细胞 （＋＋＋）、RBC（＋＋）。 • 讨论： 1）该病诊断是什么？诊断依据是什么？ 2）病人为何会出现腹痛、腹泻、脓血便、里急 后重等临床表现？ 案例3 3）此为何种血症？
肠壁上皮细胞坏死、炎症、溃疡 脓血黏液便
慢性感染、带菌者（传染源）
. 10
痊愈
中毒性痢疾患儿
.
11
第四节 沙门菌属（伤寒杆菌）
根据其对宿主的致病性, 可分为 伤寒杆菌 副伤寒杆菌 (甲、乙、丙) 鼠伤寒杆菌 肠炎杆菌 猪霍乱杆菌 人 儿童伤寒 人、动物 急性胃肠炎 肠热症
.
12
肠热症：
病人 带菌者 粪-口
.
20
• 本病例最可能的诊断是什么？该病原菌如 何传播？ • 诊断：细菌性痢疾 • 该疾病由痢疾杆菌引起，经消化道传播。 • 进行微生物学检查时，应如何取材？采送 时应注意哪些问题？ • 用药前取患者新鲜粪便的脓血或粘液部分 做标本。 • 专人立即送检；标本勿与尿液相混合；若 不能及时送检，应及时保存标本，防止病 原菌死亡。
参考答案
• • • • • 沙门菌属 肠热症（发热、相对缓脉、脾肿大、WBC↓） 血液、粪便、尿液均可，查到病原菌即可 采集标本→分离培养→鉴定 肥达试验
.
24
• 患者，男，26岁，在饮用不清洁水后出现发热、 全身不适、四肢酸痛，并有腹痛、腹泻、脓血 便、里急后重等症状。 • 查体示体温39.2℃，腹部压痛。WBC 16×109 /L，中性粒细胞0.93。大便常规检查：脓细胞 （＋＋＋）、RBC（＋＋）。 • 讨论： 1）该病诊断是什么？诊断依据是什么？ 2）病人为何会出现腹痛、腹泻、脓血便、里急 后重等临床表现？ 案例3 3）此为何种血症？
肠壁上皮细胞坏死、炎症、溃疡 脓血黏液便
慢性感染、带菌者（传染源）
. 10
痊愈
中毒性痢疾患儿
.
11
第四节 沙门菌属（伤寒杆菌）
根据其对宿主的致病性, 可分为 伤寒杆菌 副伤寒杆菌 (甲、乙、丙) 鼠伤寒杆菌 肠炎杆菌 猪霍乱杆菌 人 儿童伤寒 人、动物 急性胃肠炎 肠热症
.
12
肠热症：
病人 带菌者 粪-口
.
20
• 本病例最可能的诊断是什么？该病原菌如 何传播？ • 诊断：细菌性痢疾 • 该疾病由痢疾杆菌引起，经消化道传播。 • 进行微生物学检查时，应如何取材？采送 时应注意哪些问题？ • 用药前取患者新鲜粪便的脓血或粘液部分 做标本。 • 专人立即送检；标本勿与尿液相混合；若 不能及时送检，应及时保存标本，防止病 原菌死亡。
《大肠杆菌病》PPT课件
波及腹部和颈部的皮下，有些猪无。 – 病程：一般1-2天。可长达7天， – 病死率：约90%
猪水肿病
姿眼 势睑
水 肿 、 充 血 前 肢 呈 跪 爬
•
眼睑水肿，前额皮下水肿
病变
– 水肿 • 各组织发生水肿，胃壁尤以大弯和贲门部水肿 明显，粘膜层和肌层之间胶冻样水肿，严重可 增厚2-3厘米 • 肠系膜及淋巴结水肿，肺水肿，肾包膜水肿， 脑水肿等
F6 （987P）、F41 抗原式：O8：K25：H9
病原
– 致病力 – 抗原构造不同，能产生毒素 – 内毒素：耐高热，100℃30分钟 – 肠毒素： • 不耐热（LT）：60℃10分钟破坏 • 耐热（ST）：60℃以上较长时间
– 抵抗力：不强 – 50℃30分钟、60℃15分钟死亡 – 常用消毒药均有效
素治疗（恩诺沙星注射液），投服泻剂。 3、特异治疗-----抗水肿病血清
禽大肠杆菌病
• 禽大肠杆菌病：是由大肠杆菌感染所引起的多种禽病的总称 • 家禽感染后，因大肠杆菌致病力、感染途径、年龄和抵抗力
不同，产生不同病型： 1 .气囊炎、肝周炎、心包炎 2 .脐炎 3 .卵黄性腹膜炎 4 .输 卵 管 炎 5 .大肠杆菌性肉芽肿 6.肠炎 7.禽蜂窝织炎 8.肺炎、肿头综合症、全眼球炎及滑膜炎。
流行病学
多发于断奶前后的仔猪，发病率不高 （20%左右），病死率高。
猪水肿病
姿眼 势睑
水 肿 、 充 血 前 肢 呈 跪 爬
•
眼睑水肿，前额皮下水肿
病变
– 水肿 • 各组织发生水肿，胃壁尤以大弯和贲门部水肿 明显，粘膜层和肌层之间胶冻样水肿，严重可 增厚2-3厘米 • 肠系膜及淋巴结水肿，肺水肿，肾包膜水肿， 脑水肿等
F6 （987P）、F41 抗原式：O8：K25：H9
病原
– 致病力 – 抗原构造不同，能产生毒素 – 内毒素：耐高热，100℃30分钟 – 肠毒素： • 不耐热（LT）：60℃10分钟破坏 • 耐热（ST）：60℃以上较长时间
– 抵抗力：不强 – 50℃30分钟、60℃15分钟死亡 – 常用消毒药均有效
素治疗（恩诺沙星注射液），投服泻剂。 3、特异治疗-----抗水肿病血清
禽大肠杆菌病
• 禽大肠杆菌病：是由大肠杆菌感染所引起的多种禽病的总称 • 家禽感染后，因大肠杆菌致病力、感染途径、年龄和抵抗力
不同，产生不同病型： 1 .气囊炎、肝周炎、心包炎 2 .脐炎 3 .卵黄性腹膜炎 4 .输 卵 管 炎 5 .大肠杆菌性肉芽肿 6.肠炎 7.禽蜂窝织炎 8.肺炎、肿头综合症、全眼球炎及滑膜炎。
流行病学
多发于断奶前后的仔猪，发病率不高 （20%左右），病死率高。
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SS平板 SS平板－分离肠道病原菌的强选择培养基 平板－
成分和作用： 成分和作用：
1、基础培养基：提供氮源和碳源 基础培养基： 2、胆盐、枸橼酸钠、煌绿：可抑制肠道非致病菌的生 胆盐、枸橼酸钠、煌绿： 长，而对肠道致病菌抑制作用弱。 而对肠道致病菌抑制作用弱。 3、乳糖，中性红（pH6.8-8.0，红→橙黄） ：致病菌 乳糖，中性红（pH6.8-8.0， 橙黄） 不分解乳糖，但分解蛋白胨产生碱性物质→ 不分解乳糖，但分解蛋白胨产生碱性物质→菌落淡黄 色；大肠杆菌分解乳糖产酸，菌落呈红色 大肠杆菌分解乳糖产酸，菌落呈红色
观察、 观察、记录结果
出具实验报告
姬姆萨染色方法： 姬姆萨染色方法：
1、触片、干燥。用甲醇固定3-5分钟。 触片、干燥。用甲醇固定3 分钟。 2、将固定的触片浸于盛有稀释液的染色缸中（姬姆萨原液 将固定的触片浸于盛有稀释液的染色缸中（ 10滴加于10毫升中性或弱碱性蒸馏水中即可），染色30-60 10滴加于10毫升中性或弱碱性蒸馏水中即可） 染色30滴加于10毫升中性或弱碱性蒸馏水中即可 30 分钟，或过夜。 分钟，或过夜。 3、水洗、干燥。 水洗、干燥。 4、镜检：细菌呈蓝黑色，组织、细胞等呈其他色。 镜检：细菌呈蓝黑色，组织、细胞等呈其他色。
三糖铁琼脂
生化反应
血清学鉴定
内脏、淋巴结 内脏、
病毒材料
50%甘油磷酸盐缓冲液 甘油磷酸盐缓冲液
病料的采集 包装、 包装、运送
液态材料
小家畜、 小家畜、家禽或胎儿
【动物尸体剖解wk.baidu.com注意事项】
怀疑死于炭疽的动物严禁尸体剖解。 怀疑死于炭疽的动物严禁尸体剖解。 有针对性的采集病料。 有针对性的采集病料。 作好个人的防护和环境消毒工作。 作好个人的防护和环境消毒工作。 盛装病料的容器要求无菌。 盛装病料的容器要求无菌。 无菌操作。 无菌操作。 病料必须注明名称。 病料必须注明名称。 必须低温保存,及早送检。 必须低温保存,及早送检。 动物尸体必须妥善处理(深埋、焚烧) 动物尸体必须妥善处理(深埋、焚烧)。
动物尸体剖解顺序
观 察 体 表 剥 皮 皮肤消毒 切开颈腹部皮肤 开腹腔 观察病变
观 察皮下病 变 开 胸 腔 观 察病 变
观察内脏病变 开胃肠
肠道菌实验室诊断包含的微生物 实验技术：
无菌操作技术 显微镜使用技术 培养基制备技术 细菌分离纯化技术 细菌染色技术 微生物的消毒灭菌技术 动物实验技术
作业：
1、鸭大肠杆菌病的实验室诊断意义、步骤。 鸭大肠杆菌病的实验室诊断意义、步骤。 2、绘出油镜下组织触片的大肠杆菌形态图。 绘出油镜下组织触片的大肠杆菌形态图。
思考题：
1、大肠杆菌和沙门氏菌在和培养特征上有何 差异？ 2、试述生化试验在肠杆菌科细菌的鉴定与诊 断中的意义。
EMB（Eosin Methyl Blue)平板－分离肠道 （ 平板
病原菌的弱选择培养基
病原菌： 透明， 病原菌： 透明，无色 非致病菌： 非致病菌：紫黑色
本次实验操作步骤： 本次实验操作步骤：
解剖病死鸭
心脏、 心脏、肝脏等脏器的分离接种 平板、 （SS平板、三糖铁琼脂） 平板 三糖铁琼脂）
37℃、18-24h ℃ 组织触片（血片、肝片等） 、吉姆萨染色、镜检 组织触片（血片、肝片等） 吉姆萨染色、
沙门氏菌、 沙门氏菌、大肠杆菌的一般诊断程序图
病料
37℃、18-24h ℃ 选可疑菌落，移植到以下培养基 选可疑菌落， 37℃、18-24h ℃ 营养琼脂斜面 纯种检验、 纯种检验、革兰氏染色镜检
增菌（亚硒酸盐汤等） 增菌（亚硒酸盐汤等） 37℃、18-24h ℃
培养基） 直 接 划 线 分 离（麦 康 凯 、 SS 琼 脂和EMB培养基） 培养基
大肠杆菌与沙门氏菌的常规 实验室诊断可按阶段划分
阶段划分（ 阶段） 阶段划分（1— 4阶段） 阶段
第一阶段：增菌、 第一阶段：增菌、直接分离培养 第二阶段：纯培养、识别菌落、三糖铁接种。 第二阶段：纯培养、识别菌落、三糖铁接种。 第三阶段：生化鉴定（IMViC、H2S、硝酸盐还原、运动力、五种糖） 第三阶段： 、 、硝酸盐还原、运动力、五种糖） 第四阶段：血清学鉴定。 第四阶段：血清学鉴定。
实验九
大肠杆菌
大肠杆菌：是引起家畜、家禽大肠杆菌病的病原。 大肠杆菌：是引起家畜、家禽大肠杆菌病的病原。 可导致家畜、家禽死亡；大肠杆菌是条件致病菌。 可导致家畜、家禽死亡；大肠杆菌是条件致病菌。
心包炎、肝周炎
实验目的： 实验目的
1、学习大肠杆菌与沙门氏菌常规微生物学诊断方法。 、学习大肠杆菌与沙门氏菌常规微生物学诊断方法。 大肠杆菌与沙门氏菌常规微生物学诊断方法 2、了解大肠杆菌与沙门氏菌的形态与染色特性。 、了解大肠杆菌与沙门氏菌的形态与染色特性。 大肠杆菌与沙门氏菌的形态与染色特性 3、熟悉大肠杆菌与沙门氏菌的主要培养特性。 、熟悉大肠杆菌与沙门氏菌的主要培养特性。 大肠杆菌与沙门氏菌的主要培养特性
麦康凯培养基—具中等强度选择性， 麦康凯培养基—具中等强度选择性，抑菌力
略强，少数阴性菌不生长。 略强，少数阴性菌不生长。 1、利用胆盐、龙胆紫来抑制革兰阳性细菌的生 长，而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用． 2、利用乳糖发酵，中性红的颜色可把分解乳和 不分解乳糖的细菌区别开． 沙门菌及志贺菌呈无色菌落， 沙门菌及志贺菌呈无色菌落， 大肠埃希菌呈 大肠埃希菌呈桃红色菌落．