干扰实验

4．无论是方法特异性差或是受干扰，都影响到测定 结果的正确性，影响的程度与与非分析物的量有 关，所以产生的误差都是恒定系统误差，常以偏 差Bias作为统计量。
5．由某些物质引起测定结果的偏差，足以影响临床 解释者谓之干扰，但各项测定的临床要求至今仍 未确定，建议将该分析方法批内测定值±1.96s作 为控制限度。
2、干扰实验原理：
选用维生素C做GOD-POD法测血糖的干扰试 验，维生素C可和GOD反应生成的H2O2发生反应， 使部分H2O2不能参与第二步POD催化的偶联反应 ，从而降低显色强度，产生负的测定误差。
三、器材
微量移液器
计算器
三用水浴箱
722型可见光分光光度计
四、试剂
1．血清标本
含血糖6.7mmol/L的血清
实验六：干扰试验
一、实验目的
1．掌握GOD-POD法测定血糖的原理及临床意义。 2．掌握干扰试验的原理和方法。
二、实验原理
1、GOD-POD法测血糖原理：
葡萄糖氧化酶（glucose oxidase，GOD）能将葡萄 糖氧化为葡萄糖酸，并释放出过氧化氢。后者在过氧化物 酶（peroxidase，POD）的作用下与色原性氧受体4-氨基 安替比林偶联酚缩合成红色醌类化合物，即Trinder反应 。该红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
测定浓度
基础样品 干扰样品Ⅰ 干扰样品Ⅱ 干扰样品Ⅲ
加入干扰 物浓度
干扰值
干扰率
七、注意事项
1．干扰试验的对象有厂商研制的新产品；新建立的方 法；新引进的方法或试剂。
2．应做的主要干扰物：病人标本中常出现的黄疸、脂 血和溶血；某些药物如维生素C等；实验常用的抗 凝剂，防腐剂和稳定剂。
3．可疑干扰物浓度 加入可疑干扰物的浓度应明显高 于通常所见浓度的上限，有可能时应达到病理标本 的最高值。
八、方法学评价
干扰试验的方法主要有“配对差异”试验及用病 人标本作偏差分析。所谓“配对差异”试验，即将不 同浓度的干扰物加入到实验标本中，然后分别测定 加与不加干扰物的标本，比较二者有无偏差，并了 解干扰物浓度与偏差的关系。
所谓用病人标本作偏差分析即选择病人标本， 如肝脏、肾脏或心脏疾病患者，用服用了某种可能 有干扰的药物的病人标本，以及含有高胆红素，高 血脂和血红蛋白的标本，用候选方法和参考方法同 时测定，将两方法的测定结果进行比较，以确定某 物质对候选方法是否有干扰及干扰程度。本次实验 所选用的方法为“配对差异”试验。
2、按下表操作
加入物（ ml）
B
S
干基 干1 干2 干3
DDW 0.01
—
—
—
—
—
5.55mmol /糖标
—
0.01
—
—
—
—
各个样品 —
—
0.01 0.01 0.01 0.01
酶酚试剂 1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
混匀，置水浴箱37℃，15分钟，505nm空白管调 零，722型分光光度计分别测各管A值。
六、结果计算
1．干扰物加入浓度计算：
干扰物加入浓度＝干扰物溶液浓度× 干扰物溶m液 l 量 血清(m 量)l干扰物溶(m液 )l 量
2．干扰值计算：
干扰值(mmol/L)＝干扰样品测定浓度－基础样品测定浓度
3．干扰率计算：
干扰率＝
干扰值 基础样品浓度
×100%
4．计算结果请填入表内
：
样品编号
2．葡萄糖标准液（5.55mmol/L）
3．GOD-POD法测定葡萄糖试剂盒
4. 1g/L、2g/L 、3g/L维生素C溶液
五、操作步骤
1．干扰样品制备 基础样品：血清0.9ml+蒸馏水0.1ml。 干扰样品Ⅰ：血清0.9ml+1g/L维生素C溶液0.1ml 干扰样品Ⅱ：血清0.9ml+2g/L维生素C溶液0.1ml 干扰样品III：血清0.9ml+3g/L维生素C溶液0.1ml
这两种干扰试验各有优缺点，第一种方法的不 足之处是实验标Baidu Nhomakorabea的介质可能与病理标本的介质不 尽致，病理标本中的干扰物可能不是原来的药物， 加入的干扰物可能与病理标本中的干扰物不完全相 同。第二种方法的不足之处是①病人通常用多种药 物，难以确定干扰物；②不是每种测定项目均有参 考方法，而且有的参考方法难以在临床实验室中开 展；③参考方法亦可能受某些物质的干扰。两种方 法同时使用，会起互补作用。