溶血卵磷脂对肉仔鸡脂类代谢的影响

溶血卵磷脂对肉仔鸡脂类代谢的影响

杨丹丹,黄　进,王　恬3

(南京农业大学动物科技学院,江苏南京　210095)

摘要:选200羽1日龄AA肉仔鸡,随机分成对照组和试验组(每组10个重复),试验组日粮添加011%溶血卵磷脂,研究溶血卵磷脂对肉鸡脂类代谢的影响。结果表明:溶血卵磷脂降低肝脏系数和肝脂率(P>0105)、血清总甘油三酯与低密度脂蛋白胆固醇(LDL2C)(P>0105)、LDL2 C/HDL2C和葡萄糖含量(P<0105),提高高密度脂蛋白胆固醇(HDL2C)和游离脂肪酸含量(P<0105),上调肉仔鸡肝脏载脂蛋白B(P< 0101)和脂肪酸合成酶(P=01155)mRNA表达水平;而对肉仔鸡的42日龄体重、腹脂率、皮下脂肪厚、肌间脂肪厚、腿肌和胸肌含脂率以及血清总胆固醇、三碘甲腺原氨酸、四碘甲腺原氨酸、促甲状腺激素刺激激素和胰岛素含量均无显著影响(P>0105)。结果提示:溶血卵磷脂对肉仔鸡有减少肝脂肪沉积及降血脂作用。

关键词:溶血卵磷脂;肉仔鸡;脂类代谢

中图分类号:S81617 文献标识码:A 文章编号:052925130(2008)0520018204

Effect of lysolec ith i n on li p i d m et abolis m i n bro ilers

Y ANG Dan2dan,HUANG J in,WANG Tian3

(College of Ani m al Science and Technol ogy,Nanjing Agricultural University,Nanjing210095,China)

Ab s trac t:T wo hundreds of12day2old A rborAcre br oiler chicks were random ly all ocated int o contr ol and treated gr oup s with ten rep licates, res pectively.The trial diet was supp le mented with011%lys olecithin t o deter m ine effects of lys olecithin on li p id metabolis m in br oilers.The results showed that lys olecithin supp le mentati on decreased although not significant in the liver index,ether extract(EE)percentage,seru m t otal triglyceride and LDL2C(P>0105),but significant in LDL2C/HDL2C and seru m glucose(P<0105).Significant increases in HDL2C, free fatty acid(P<0105)and hepatic exp ressi on of apoli pop r otein B(P<0101)were als o observed in lys olecithin2supp lemented birds, while the body weight and percentage of abdom inal fat,subcutaneous fat dep th,inter2muscular fat dep th,EE percentage of breast,high mus2 cle and concentrati ons of seru m t otal cholester ol,T3,T4,TSH and I N S at422day old were not affected(P>0105).The results indicated that dietary lys olecithin could decrease hepatic fat accu mulati on and seru m li p ids level.

Key wo rd s:lys olecithin;br oiler;li p id metabolis m

食物磷脂可促进动物对脂肪的吸收,调节机体脂类代谢,降低血液胆固醇含量[1-2]。溶血卵磷脂是由磷脂失去一分子脂肪酸生成的一种表面活性物质,目前作为一种优良的乳化剂应用于动物日粮,能促进动物的生长和对脂类等营养物质的吸收[3-4],但溶血卵磷脂对肉仔鸡脂类代谢的影响国内外尚未见报道。本试验主要研究日粮中添加011%溶血卵磷脂对AA肉仔鸡体脂重分配的作用,并通过对相关血清生化指标和肝脏载脂蛋白B(ApoB)、脂肪酸合成酶(F AS)基因mRNA表达水平的分析来初步探讨其作用机理。

收稿日期:2007207216

基金项目:国家重点基础研究发展计划(973) (2004CB117500)。

作者简介:杨丹丹(19832),女,硕士研究生。

3通讯作者。1　材料和方法

111　溶血卵磷脂和试验动物

溶血卵磷脂由美国建明工业(珠海)有限公司提供(含20%溶血卵磷脂)。试验动物为1日龄商品代AA肉鸡,购自江苏南京迈皋桥鸡场。

112　试验日粮

参照美国NRC(1994)肉鸡营养需要配制0～3周龄和4～6周龄两个阶段试验日粮(见表1),以粉料饲喂,试验组日粮中添加011%溶血卵磷脂。对照组和试验组2组同一阶段的日粮营养含量大致相同, 0～3周龄:ME12101MJ/kg,CP20%;4～6周龄: ME12130MJ/kg,CP18%。

表1　日粮组成%

项目

0～3周龄

对照组试验组

4～6周龄

对照组试验组

玉米64196418717018

豆粕2815281522192219

鱼粉2222

石粉1128112211121119磷酸氢钙11741181151152

蛋氨酸01201201140114

预混料①1111

食盐0138013801340135溶血卵磷脂011011

注:每kg日粮提供:V

A

12000U,V D33000U,V E20mg,V K 313mg,V B1212mg,V B210mg,V B310mg,choline400mg,

V B550mg,V B64mg;B i otin0104mg,V B111mg,V B1201013

mg,Fe60mg,Cu715mg,Mn110mg,Zn65mg,I111mg,

Se014mg,Bacitracin Zinc30mg等。

113　试验分组与饲养管理

选1日龄AA肉仔鸡200羽,随机分为2组,每组100羽(公母各半,含10个重复)。试验期为42 d。按照常规免疫程序进行疫苗接种,自由采食和饮水。试验鸡每天12h光照(6:00～18:00),室温控制:第1周36℃左右,以后每周降2℃,最后适应外界环境。

114　屠宰试验

于42日龄清晨7:00(此前停饲12h)每组随机取10只试验鸡(公母各半),称重并记录活体重,颈静脉放血致死。开膛后剥离腹部板油和肌胃周围的脂肪(肠脂不计算在内)称重,计算腹脂率(腹脂率=脂肪重/活重×100%);用游标卡尺在尾椎前端、背正中线切开的皮肤转角处测量皮下脂肪厚度,取平均值;在胸骨剑突末端处测量胸肌边缘脂肪带宽度,为肌间脂肪厚度。

115　样品采集

屠宰时采鸡血置离心管中,自然析出血清后于离心机以4℃、3500r/m in离心15m in,血清样于-20℃保存。鸡宰杀后立即取肝脏称重,计算肝脏系数[肝脏重(g)/活重(kg)],去表面血污后取1g左右肝脏放入液氮保存,另取肝脏、胸肌和腿肌各30g 左右,-20℃保存。

116　生化指标分析

肝脏、胸肌和腿肌的粗脂肪含量分析采用国标(G B643226439286),肝(肌)脂率=脂肪重(g)/肝脏(肌肉)干重(g)×100%。血清生化指标:采用试剂盒(购自南京建成生物工程研究所)提供方法测定血清总甘油三酯(TG)、总胆固醇(T C)、血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL2C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL2C)和血糖;采用放射免疫法(试剂盒购自北京北方生物技术研究所)测定血清胰岛素(I N S)、促甲状腺激素释放激素(TSH)、三碘甲状腺氨酸(T

3

)、甲状腺素(T

4

)含量;采用一次提取比色法测定血清游离脂肪酸(FF A)含量。

117　肝脏FAS及ApoB的基因表达

取肝脏组织约30mg,按照TR I z ol总RNA提取试剂(TI A NGEN)说明书进行,同时进行紫外定量。采用25μL反转录体系,其中总RNA2μg,随机引物1μg,dNTP2μg(10mmol/L),补加DEPC水至12μL,混匀,70℃变性5m in后冰浴冷却。然后加入5×RT buffer5μL、RNA酶抑制剂(Pr omega)012μL(1000U)、M2MLV逆转录酶(Pr omega)015μL (10000U)、补DEPC水至总反应容积为25μL,混匀,37℃反应1h,95℃变性5m in,终止反应,冰浴冷却5m in,-20℃冰箱保存。PCR反应采用Strategene MX3000PT M Realti m e PCR仪进行,设β2 actin为内参照物。PCR反应按SY BR2Green Realti m e PCR MasterM ix(T OY OBO)说明书进行。引物终浓度012μmol/L(引物见表2)。PCR反应参数为:95℃预变性10m in,95℃变性30s,58～60℃退火30 s,72℃延伸20s,设置38个循环。

表2　引物序列

引物名称引物序列产物长度β2Actin

上游5′2TGCGTG ACAT CAAGG AG AAG23′

下游5′2TGCCAGGGT ACATTGTGGT A23′

300bp ApoB

上游5′2CACGCCTCACAG ACCAAGT A23′

下游5′2CCAGTCAAACGGCACAT CT A23′

407bp

F AS

上游5′2TG AAGG ACCTT ATCGCATTGC23′

下游5′2GCATGGG AAGCATTTTGTTGT23′

196bp

118　数据处理

采用SPSS1310软件进行统计学处理。结果用平均数±标准误表示。差异显著性检验采用独立样本t 检验。

2　结果与分析

211　对体脂含量的影响

由表3可见,溶血卵磷脂有降低肉仔鸡肝脏系数(P=01069)和肝脂率(P=01164)的趋势,对肉仔鸡的体重、腹脂率、皮下脂肪厚、肌间脂肪厚、腿肌和胸肌含脂率均无显著影响(P>0105)。

212　对血清生化指标的影响

由表4可见,溶血卵磷脂显著提高肉仔鸡HDL2 C含量(P=01019),降低血清LDL2C/HDL2C(P= 01022)、TG(P=01071)和LDL2C含量(P= 01096),不影响血清TC含量(P>0105);显著降低