_氨基丁酸测定方法的研究

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茶叶中γ-氨基丁酸的提取测定方法研究进展

茶叶中γ-氨基丁酸的提取测定方法研究进展

成 为一种新 型功能性因子 ,正逐渐被广泛用 于医药 、食 品保
健、 化工及农业等行业 。在近十十多年来 , G A研究开 发 对 AB
已经 引起 了极 大关注 ,兴起 了 G B A A热潮 ,产品不断推 陈出 新, 取得了可喜进 展。大量 的提取分离技术 和检测 方法应用 于
G B 的研究 中 ,如先进 的色谱 技术被 应用于 G B AA A A的检测
后 产生 了大量的 G B A A,含量 由一般百 克茶 , ) 工法 的 3 m i ̄ -t l 0g
基酸 分布 时 ,aao] 发现经 过发酵 处理 的米胚 芽中 G A T kyt 3 等 AB 的积 累量很高 , 达到 2 0~30 /0 g 0 0 mg10 。
随着 研 究 深 入 , B 的生 理 功 能不 断得 到 阐 明 ,已发 展 GA A


7 2: 一 3 ,) 2、 (2

【许 建对 工 制 莉 开 和 香 初 探 【福 茶 , 维 、人 控 茉 花 放 吐 的 步 讨J 建 叶 】 】 一
18 , ) 7 2 ・ 9 2( : — 8 42
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U_ y ce s y 94 6 ) 45 13 . h t hmi , 9 , ( : 3 — 4 7 J o P t 1 3 61 r 【 郭友嘉, 7 1 戴亮, 任清等 用吸附 一热脱捕集进样法研 究茉莉花香释放 过程 中化 学成分 U_ 1 9 , ( :1— 1, J 色谱, 4 2 ) 测 方 法

发芽糙米γ-氨基丁酸的检测及研究进展

发芽糙米γ-氨基丁酸的检测及研究进展
LU Ho g —me ,W E o —to,L0 Xig —d n,LU Ja —f n I n i I Ta a 1 n a I in e g
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发 芽糙 米 ^一氨 基 丁酸 的检 测 及研 究 进 展 y
刘 红梅 ,魏淘 涛 ,刘行 丹 ,刘建 丰
( 湖南农 业大学农学 ห้องสมุดไป่ตู้/ 作物生理与分子生 物学 教育部重点实验室 ,湖南 长沙 4 0 2 ) 1 18
q a i a m ae a sf rd e r c s ig o g iulu a r d t. u lt r w tr l o e p p o e sn fa rc t r lp o ucs y i Ke y wor ds:Ge mi ae r wn ie;GABA ; Dee mi a in meho r n td b o rc tr n to t d
meh d,mo i e a e h o t g a h to d f d p p rc r mao r p y,a n cd a ay e t o n e iai eh g e o ma c i u d c r mao r — i mi o a i n l z rme h d a d d rv t ih p r r n el i h o tg a v f q p y we e rv e e n v l ae n t i p p r Su i so h r e i w d a d e au td i s a e . t d e n GABA a c mu ain me h n s i e ia e r wn r e,g r h c u lt c a i o m n g r n t d b o c m i e— mi ain c n i o sa d p o e sp rmee s a o n b o d w r u n t o d t n n r c s aa tr th me a d a r a e e s mma z d o i i r e .Di e e t e e mi ai n me h d h u d i f r n tr n t t o ss o l d o b lc e c o d n o e p rme tlr q i me t Di e e tr e v reis o i e e tg n t y e h u d b n l z d i e e e t d a c r i g t x e i n a e u r e n . f r n c a i t r df r n e ei tp s s o l e a ay e n f i e f c od rt c e n rc a it s w t i h GAB o tn n i h gu a t e a b x lt n e z me a t i o s p l i h r e o s r e ie v r i i h g ee h A c n e ta d h g lt ma e d c r o y ai n y ci t t u p y h g o vy

液相色谱—串联质谱联用技术测定酒类产品中γ-氨基丁酸

液相色谱—串联质谱联用技术测定酒类产品中γ-氨基丁酸

收稿日期2016-02-25摘要建立液相色谱—四极杆串联质谱联用技术,测定酒类产品中γ-氨基丁酸。

结果表明:γ-氨基丁酸的浓度在0.01~0.50mg/L 范围内呈现良好的线性关系,相关系数r 2=0.9991。

食品中γ-氨基丁酸的检出限为0.003mg/L ,加标回收率在85%以上。

该方法快速、灵敏、准确。

关键词γ-氨基丁酸;酒类;液相色谱-四极杆串联质谱联用技术中图分类号TS262.2;TS261.7文献标识码A 文章编号1007-5739(2016)06-0272-02液相色谱要串联质谱联用技术测定酒类产品中γ-氨基丁酸伊芳(安徽省阜阳市食品药品检验检测中心,安徽阜阳236000)γ-氨基丁酸(GABA )是一种天然存在的非蛋白组成氨基酸,广泛分布在动植物体中,是很重要的抑制性神经递质,可改善脑、肾、肝等器官的生理活性,还能促进人体内氨基酸代谢的平衡,调节免疫功能。

γ-氨基丁酸在2009年经卫生部批准为一种新资源食品,能够被应用于饮料、巧克力及其制品、烘烤食品、糖果、可可制品等食品中,但不用于婴幼儿食品。

《国家食品安全标准食品添加剂使用标准(GB2760-2011)》将γ-氨基丁酸列入“表B.3允许使用的食品用合成香料名单”,并规定:食品用香料、香精在各类食品中按生产需要适量使用。

因此,γ-氨基丁酸在食品行业得到更广泛的研究和应用。

在酒类产品中,γ-氨基丁酸也得到了广泛研究,酒中添加适当剂量的GABA ,起到镇定、醒酒、促进乙醇代谢、增加饮用者酒量的作用。

葡萄酒和果酒中添加适当剂量的GABA ,配制成GABA 酒,可以满足更多消费群体的需求,如适合女性、中老年人群、白领人士享用的中高档花色果酒中可以添加GABA 。

GABA 具有对电化学、紫外、可见光不灵敏的特点,对其测定不能使用直接测定的方法。

关于GABA 的测定,近年来国内外有氨基酸分析仪测定[1-3]、柱层析荧光测定法、比色法[4]、薄层法[5]、纸电泳法[6]、毛细管电泳法[7]、离子色谱法[8]、高效液相色谱法[9-10]、液质联用法[11]等。

γ-氨基丁酸检测方法的比较

γ-氨基丁酸检测方法的比较

γ-氨基丁酸检测方法的比较徐慧慧;章益明;梁新珍【摘要】本文对检测γ-氨基丁酸的纸层析法、高效液相色谱法和氨基酸分析仪法进行了全面的比较研究.结果表明纸层析法检测γ-氨基丁酸,在使用展开剂V(正丁醇)∶V(冰醋酸)∶V(水)=4∶1∶3的条件下,具有简单、快速等优点,但精密度较低.高效液相色谱法以邻苯二甲醛作为衍生剂,用反相C18柱为分离柱,精密度较高,准确度较好,但是操作过程相对繁琐.氨基酸分析仪法采用茚三酮柱后衍生,稳定性好、灵敏度高、操作简便,但要求样品氨基酸浓度在100nmol/mL范围内,使用费用高.【期刊名称】《发酵科技通讯》【年(卷),期】2014(043)003【总页数】5页(P37-41)【关键词】γ-氨基丁酸;纸层析法;高效液相色谱法;氨基酸分析仪【作者】徐慧慧;章益明;梁新珍【作者单位】浙江新和成股份有限公司,浙江新昌,312500;浙江新和成股份有限公司,浙江新昌,312500;浙江新和成股份有限公司,浙江新昌,312500【正文语种】中文γ-氨基丁酸又名4-氨基丁酸(4-aminobutyric acid)和γ-氨酪酸,简称GABA,是一种天然活性成分,广泛分布于动植物体内。

其分子式为C4H9NO2,相对分子量为103.2,结构式如图1。

图1 GABA结构式GABA是一种抑制性神经传递物质,具有重要的生理活性,如:抗焦虑[1],降血压[2],治疗癫痫[3],改善睡眠[4],抗衰老[5],调节激素分泌[6]及神经营养[7]等。

GABA已成为一种新型功能性因子,正广泛应用于食品、医药和化工等领域。

GABA可以用化学合成法生产,也可以以植物富集法、微生物发酵法生产。

从产品质量检测角度考虑,GABA测定方法的可靠性和准确性至关重要。

关于GABA的测定方法有很多种,如纸电泳法、纸层析法、比色法、高效液相色谱法和氨基酸分析仪测定法等,它们具有各自的优缺点。

本实验以产GABA微生物发酵液为样本对GABA的测定方法进行了比较研究,确定了纸层析定性测定与高效液相色谱法定量测定GABA相结合的方法,优化了HPLC的条件和参数。

纸层析-酶标仪法测定发酵液中γ-氨基丁酸

纸层析-酶标仪法测定发酵液中γ-氨基丁酸

葡萄糖:,丁二酸钠5 ,厶-谷氨酸10; 15 C灭菌
30 min,1 mL/96孔板,75 mL/250 mL摇瓶,静置培养
3d。
12 试验方法
1.4.1 检测波长的选择
将新华一号滤纸裁剪成所需大小,滤纸下端2 cm处轻轻画1条直线,在线上每隔2 cm画1个小圆
圈,圈直径不超过3 mm ,用微量取样器吸取质量浓度
天然非蛋白质类氨基酸,具有降血糖4
及抗抑
郁等重要的生理功能,作为功 食品在市场上具有
较广的前景[)「4]。其主要是由谷氨酸脱E酶(glutam-
/ acid docarboxyluc, GAD)催化 L-谷氨酸形成。GA­
BA 的测定 有
,比如柱前衍生化高效液相
色谱法[5-7、核磁共振波谱技术[8]、气质联用法[7]、
为5.5 g/L标准样液1 jjlL点在小圆圈内,点样点干
纸卷成桶 定住
放进已

:h的层析缸内,密闭 一定时间,后取出滤
纸,并用烘
,待出现 斑点且斑点大小及
形 变时,将斑点剪下并放入5 mL洗脱液中,洗脱
条件:40 C , 80 s/miu ,水浴洗脱30 min。使用酶标仪
在200〜900 on进行全波长扫描,确定GABA的最大
10% ;洗脱液中乙醇与6 g/L CUSO4・5比0配比优
化时设为(体积比)39: 1、38:2、33:3、36:4。
1.4.4 标准曲线的建立
精确配制:g/L的GABA标准液,分别稀释成
摘要建立纸层析-酶标仪法对微孔板发酵液中Y淀基丁酸产量进行测定。对影响纸层析-酶标仪法测定结
果的重要因素进行优化,并建立相应的分AA度法。优化后层析液中显色剂-乙三酮的浓度为8 /L,展2剂-正

茶叶中γ氨基丁酸的功效及含量测定研究进展

茶叶中γ氨基丁酸的功效及含量测定研究进展

安徽农业科学,J o ur na l ofAnhui A面.Sci.2013,41(21):9063—9064,9067 责任编辑李菲菲责任校对况玲玲茶叶中甲氨基丁酸的功效及含量测定研究进展殷美华1,陈孝权2,赵亚华3,刘敏4 (大益集团勐海茶业有限责任公司技术中心实验室,云南勐海666200)摘要1一氨基丁酸是茶叶中具有保健功效的重要物质之一,具有降血压、抗焦虑、治疗哮喘、治疗癫痫、调节激素分泌等作用。

对茶叶中’·氨基丁酸的性质、保健功效、含量测定等进行了综述,并对其发展作了展望。

关键词^y-氨基丁酸;茶叶;功效;含量测定中图分类号$571 文献标识码A 文章编号0517—6611(2013)21—09063—02Tl他Research Progress of v-aminobu tyric Acid’S Efficiency and Determination Method in TeaYIN Mei-hua et al(r11le Center lab of Menghai Tea Indus try,Ta et ea Group,Menghai,Y unnan 666200)Abstrac t^y-am inobu tyric acid,one of important materials in tea,benefits people with high blood pre ss u re,a nx ie t y,a s th ma,e pi l ep sy an d hormone secretion disorder.ne char act ers,h eal th functions,content dete rm in a ti on were re vi ew e d,t h e future d e v el o p m en t of.y-amin obuty ric acid was forecasted.Ke y w or ds_Y.aminobutyric;Tea;Efficacy;Determination method1一氨基丁酸是一种非蛋白质组成的氨基酸,具有一定的药理作用,在动物、植物及微生物中均有发现,是一种重要的神经抑制性递质或递质前体,参与神经活动,具有很高的生理活性。

高效液相色谱法测定乳酸菌中的_氨基丁酸

高效液相色谱法测定乳酸菌中的_氨基丁酸

2008, Vol. 29, No. 06食品科学※分析检测324高效液相色谱法测定乳酸菌中的γ-氨基丁酸葛菁萍,蔡柏岩,宋明明,凌宏志,宋 刚,平文祥*(微生物黑龙江省高校重点实验室,黑龙江大学生命科学学院,黑龙江 哈尔滨 150080)摘 要:建立了邻苯二甲醛柱前衍生高效液相色谱法。

定量测定短乳杆菌中γ-氨基丁酸的方法,为进一步研究乳酸菌中的γ-氨基丁酸奠定了方法基础。

在对浓缩发酵上清液柱前衍生后,利用Nova2pakC18色谱柱,以50mmol/L的乙酸钠(pH6.8)-甲醇-四氢呋喃(A相,82:17:1;B相,22:77:1,V/V)为流动相进行梯度洗脱,可以检测到痕量γ-氨基丁酸(2.2mg/100g)。

精确度和回收率实验表明,该方法可以用于痕量γ-氨基丁酸的检测。

关键词:高效液相色谱法;邻苯二甲醛;γ-氨基丁酸;乳酸菌Determination of γ-Amino Butyric Acid in Lactobacillus brevis Fermentation Liquid by HPLCGE Jing-ping,CAI Bai-yan,SONG Ming-ming,LING Hong-zhi,SONG Gang,PING Wen-xiang*(Key Laboratory of Microbiology, College of Life Science, Heilongjiang University, Harbin 150080, China)Abstract :High performance liquid chromatography with o-phthaldialdelhyde pre-colomn derivatization was used to determinethe content of γ-amino butyric acid (GABA) in Lactobacillus brevis. After pre-colomn derivatization of concentratedfermentation supernatant, separation of GABA was carried out on Nova2pakC18 column with the gradient elution of 50 mmol/Lacetate sodium (pH 6.8), methanol and THF (solution A 82:17:1; solution B 22:77:1, V/V). The results of accuracy and recoveryrate showed that this menthod can be used to detect trace content of GABA.Key words:HPLC;o-phthaldialdelhyde;GABA;lactid acid bacteria中图分类号:O657.72;TQ922.9 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2008)06-0324-03收稿日期:2007-04-06基金项目:黑龙江省科技攻关重大项目(GB05B401)作者简介:葛菁萍(1972-),女,教授,博士,研究方向为微生物学。

γ-氨基丁酸(GABA)的研究进展

γ-氨基丁酸(GABA)的研究进展

周俊萍,徐玉娟,温靖,等. γ-氨基丁酸(GABA )的研究进展[J]. 食品工业科技,2024,45(5):393−401. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023050004ZHOU Junping, XU Yujuan, WEN Jing, et al. Research Progress of γ-Aminobutyric Acid (GABA)[J]. Science and Technology of Food Industry, 2024, 45(5): 393−401. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023050004· 专题综述 ·γ-氨基丁酸(GABA )的研究进展周俊萍1,2,徐玉娟1,温 靖1, *,吴继军1,余元善1,李楚源3,翁少全3,赵 敏3(1.广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所,农业农村部功能食品重点实验室,广东省农产品加工重点实验室,广东广州 510610;2.华南农业大学食品学院,广东广州 510642;3.广州王老吉大健康产业有限公司,广东广州 510623)摘 要:γ-氨基丁酸(GABA )是一种广泛分布于动、植物和微生物体内的非蛋白氨基酸,于2009年被我国卫健委批准为“新资源食品”,在食品、医药、饲料等领域具有十分广阔的应用前景,近年来有关GABA 的研究也逐渐成为热点。

本文阐述了GABA 的生物合成与代谢途径,归纳了GABA 的化学合成、植物富集方法及目前常用的GABA 检测技术,并对比分析其优缺点。

此外,本文对GABA 的主要生理功能及其作用机制进行总结,并对GABA 的未来研究和发展趋势进行展望,以期为今后GABA 的研究与应用提供参考。

关键词:γ-氨基丁酸,代谢途径,富集,检测方法,生物活性本文网刊:中图分类号:TS201.2 文献标识码:A 文章编号:1002−0306(2024)05−0393−09DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2023050004Research Progress of γ-Aminobutyric Acid (GABA)ZHOU Junping 1,2,XU Yujuan 1,WEN Jing 1, *,WU Jijun 1,YU Yuanshan 1,LI Chuyuan 3,WENG Shaoquan 3,ZHAO Min 3(1.Sericultural & Agri-Food Research Institute Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Key Laboratory of Functional Foods, Ministry of Agriculture, Guangdong Key Laboratory of Agricultural Products Processing,Guangzhou 510610, China ;2.College of Food Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China ;3.Guangzhou Wanglaoji Lychee Industry Development Company Co., Ltd., Guangzhou 510623, China )Abstract :γ-aminobutyric acid (GABA) is a non-protein amino acid discovered in animals, plants, and microorganisms that was approved as the "new resource food" by the National Health Commission of the People's Republic of China (NHC) in 2009. It has a wide range of applications in food, medicine, feed, and other industries, and the research has grown increasingly popular in recent years. The paper reviews the bio-synthesis and metabolic processes of GABA, summarizes the methods of chemical synthesis, plant enrichment, and present GABA detection techniques, and discusses their advantages and limitations. Furthermore, the main physiological functions and mechanism of GABA are summarized, and GABA’s research and development trend is also presented, in order to provide reference for future research and application of GABA.Key words :γ-aminobutyric acid ;metabolic pathways ;enrichment ;detection method ;bioactivityγ-氨基丁酸(GABA )又称4-氨基丁酸,氨基取代基位于C-4位置,分子式为NH 2(CH 2)3COOH ,结构式如图1,其相对分子量为103.12,熔点202 ℃,白色至浅黄色结晶物质,易溶于水,不溶于或难溶于有收稿日期:2023−05−04基金项目:国家荔枝龙眼产业技术体系(CARS-32-13);广东省农业科技创新及推广项目(2023KJ107-3);茂名市荔枝现代贮运保鲜关键技术研究项目(2021S0061);广东荔枝跨县集群产业园(茂名)项目;广东省农业科学院学科团队建设项目(202109TD )。

_氨基丁酸测定方法的研究

_氨基丁酸测定方法的研究
联 用 法 、柱 层 析 荧 光 测 定 法 、纸 电 泳 比 色 、毛 细 管 气 相色谱法[2]、放射性受 体 法[3]、毛 细 管 电 泳 法[4], 以 及 高 效液相色谱 法[5, 6]等 , 这 些 方 法 大 多 用 于 医 学 领 域 , 且 价格昂贵, 不适用于大量的定量分析。在进行高产 GABA 乳 酸 菌 株 的 筛 选 中 , 以 及 菌 株 发 酵 条 件 优 化 中, 都要进行大量的 GABA 定量分析, 显然需要一种 简便、价廉的定量测定方法, 因此本文研究了纸层析 法 [7, 13] 定 量 测 定 GABA 的 方 法 。 在 需 要 精 确 测 定
2 结果与讨论
2.1 HP LC 法测定 GABA
GABA 的 PITC 衍生物进行紫外扫描[12], 在254nm 处 有 最 大 吸 收 波 长 。GABA 标 样 和 乳 酸 菌 发 酵 液 经 PITC 柱前衍生后在 254nm 的图谱分别见下图 1、图 2。
30
25
20
15
10

10
15
图 1 GABA 标样的 HPLC 图
茚三酮浓度( %)
A520
0.1
0.244
0.2
0.280
0.3
0.300
0.4
0.358
0.5
0.360
0.6
0.361


10
15
图 2 样品中 GABA 的 HPLC 图
236 2007 年第 05 期
2.2.2 显色温度和时间的选择 为了定量的准确性和 重现性, 减少操作引起的误差, 应将显色温度和洗脱
近 年 来 , GABA 在 食 品 中 的 应 用 研 究 正 在 掀 起 , 而食品中 GABA 的测定方法的报道尚不多见。由于 GABA 对电 化 学 和 紫 外 、可 见 光 的 不 灵 敏 性 , 导 致 用 直接方法对它进行测定比较困难。关于 GABA 的测 定 近 年 来 国 内 外 有 氨 基 酸 分 析 仪 测 定 、酶 法[1]、色 质

快速测定红曲中γ-氨基丁酸含量的薄层色谱-比色法研究

快速测定红曲中γ-氨基丁酸含量的薄层色谱-比色法研究

快速测定红曲中γ-氨基丁酸含量的薄层色谱-比色法研究李利;陈莎;赵颖;陈福生【摘要】通过对红曲中γ氨基丁酸(GABA)的提取方法、薄层色谱(TLC)展开剂及其显色斑洗脱液的比色法测定波长及范围的研究,建立了一种简便、快速测定红曲中GABA含量的方法.结果表明,红曲中GABA最佳提取方法为水提法,TLC分离的最佳展开剂为95%乙醇:25%氨水=4:1,GABA显色斑洗脱液的最大吸收波长为512nm,在2~10μg范围内GABA的含量同洗脱液光密度的线性关系良好(R2=0.9983).此方法对红曲样品中GABA的测定结果与高效液相色谱法0致性好,回收率为91.00%~96.33%,适合于大批量菌株筛选和发酵条件优化实验中GABA含量的定量分析.【期刊名称】《长江大学学报(自科版)农学卷》【年(卷),期】2012(009)012【总页数】4页(P23-26)【关键词】红曲;γ-氨基丁酸;薄层色谱;分光光度法【作者】李利;陈莎;赵颖;陈福生【作者单位】华中农业大学食品科学与技术学院,湖北武汉 430070【正文语种】中文【中图分类】TS201.2红曲亦名丹曲,是以大米为原料,经红曲菌(Monascus spp.)发酵而成的米曲。

红曲在我国的应用至今已有一千多年的历史,它广泛用于酿酒、食品着色、发酵及中药等方面[1]。

γ-氨基丁酸(GABA)被认为是红曲中降压的主要成分[2-4]。

研究证明,GABA是哺乳动物中枢神经系统的抑制性神经递质,是一种生理活性物质,能够降低血压、促使精神安定、促进脑部血流、增进脑活力、改善脑机能、增加生长激素分泌,以及改善更年期综合症等[3,5-6]。

由于GABA对于电化学和紫外、可见光等不灵敏,因此,对其进行直接检测存在一定困难。

目前,国内外报道的GABA检测方法有高效液相色谱法[5,7]、毛细管电泳法[8]、放射受体法[9]、酶法[10]、纸层析法[11]等,但这些方法大多价格昂贵,多应用于医学领域。

金白龙茶中γ-氨基丁酸的双波长薄层扫描测定法研究

金白龙茶中γ-氨基丁酸的双波长薄层扫描测定法研究

茶中的 一 氨基丁酸含量的检测方法。
1仪■ 、 材料 与试剂 11主要仪器 .
C M G T C S A N R 35 l A A L C N E ; 微量 点样针 ;点样毛细 管 ( 1 ; 5 ) 旋转蒸发仪 R 5—8 ( E 29 上海亚荣生化仪器厂 ) ;
S B Ⅲ循 环水 式多用真空泵 ( H一 郑州长城科工 贸有 限公司 ) ;
R-8n 锯齿扫描法进行检测 , 究表 明, = 0m) 6 研 该方法快速 准确 , 简单 , 操作 精密
度, 线性 范 05t . IL~1 IL 重复性好 , 用于 一氨基丁酸的痕量检 测。 , 5t , , 适
关键词
一氨基丁酸
双波长薄层扫描

氨基 丁酸(A A是 一种非蛋 白质 ( n - rt n氨基 G B) n - po i) o e
展开 剂 的选 择 一般采 用纸 层析法 对 展开 剂 系统进 行考 察, 将点 好样 品 ( 水提液 ) 的滤纸板 , 分别 放进加有 叔丁醇 : 乙酸 : ( 95: 95: , ; 水 6 . 2 . 1V v) 正丁醇 : 酸 : ( 3: 醋 水 7: 1 V V) 正 丁醇 : / ; 醋酸 : ( 1: / ; 丁醇 : 酸 : 水 4: 1 VV) 正 醋 水 ( 5: / 的不同溶剂系统的层析缸 中进行单 向展 7: 1 VV)
3一过滤一合并两次滤液一减压浓缩至 5m 8o 一浓缩 h 0 l( 0C) 液 中加 2 体积 9%乙醇醇沉一 静置 2一过滤一去 乙醇得提 倍 5 h
硅胶 G( 岛海洋化工有限公 司 ) 青 水合茚 三酮 ( R) 西德进 A ( 口分装 ) 正丁醇 ( R) 国药集 团化学试剂有 限公 司 ) A ( 冰醋酸

γ氨基丁酸富集方法的研究进展

γ氨基丁酸富集方法的研究进展

γ氨基丁酸富集方法的研究进展γ氨基丁酸(GABA)是一种重要的神经递质,它在中枢神经系统中发挥着重要的调节作用。

GABA的浓度异常与多种疾病的发生发展密切相关,因此,研究γ氨基丁酸的富集方法对于深入了解其功能和疾病机理具有重要的意义。

本文将对γ氨基丁酸富集方法的研究进展进行综述。

目前,γ氨基丁酸的富集方法可以分为生物传感器、色谱法和质谱法三类。

生物传感器是一种便捷、高灵敏度的分析方法。

目前,常用的生物传感器包括电化学传感器和光学传感器。

电化学传感器通常基于电化学检测技术,如循环伏安法、方波伏安法和常数电流伏安法等,通过使用具有选择性的电极材料来实现对GABA的富集和检测。

光学传感器则是通过将荧光染料与GABA结合,在特定波长下测量荧光强度来实现对GABA的检测。

这些生物传感器具有操作简便、分析快速、检测灵敏度高等优点,但其仍存在复杂样品的应用局限性。

色谱法是一种常用的分离和测定方法。

根据分离原理的不同,色谱法可以分为气相色谱法(GC)、液相色谱法(LC)和毛细管电泳法(CE)。

这些方法通常需要在样品前处理过程中加入衍生剂,以提高GABA的稳定性和检测灵敏度。

在色谱法中,气相色谱法是最常用的方法之一,主要用于低浓度GABA的分析。

液相色谱法和毛细管电泳法则常用于复杂样品中GABA的富集和分离。

这些色谱方法具有分离效果好、分析精确度高、灵敏度较高等优点,但也受到操作复杂、设备昂贵等局限性。

质谱法是一种常用的结构分析和定量测定方法。

基于不同的离子化方式,质谱法可以分为质谱质谱法(MS/MS)、质谱色谱法(LC-MS)和质谱成像法(MALDI-MSI)等。

这些方法通常需要在样品前处理过程中进行萃取、衍生化或染色,以提高GABA的检测灵敏度。

质谱法具有高灵敏度、高分辨率和广泛的分析范围等优点,可以用于不同浓度范围内GABA的定量分析,但其操作过程较为复杂,需要较高的设备和技术要求。

综上所述,目前γ氨基丁酸富集方法的研究进展主要包括生物传感器、色谱法和质谱法三类。

γ-氨基丁酸测定

γ-氨基丁酸测定

茶叶中γ- 氨基丁酸的提取测定方法研究进展黄怀生陈金华李志刚.福建茶叶,2006,3:7-9γ- 氨基丁酸(G ABA)是一种非蛋白质(non-protein)氨基酸,具极强的生理活性,广泛存在于自然界的动植物体内。

(}ABA对降低血压、改善肝脏功能、促进乙醇代谢具有良好的功效,可用于高血压等疾病的辅助治疗。

植物在缺氧、冷害、热刺激、机械刺激、干旱、盐胁迫等多种逆境条件下GABA 含量增加。

在逆境条件下GABA 积累的机制及其对植物体缓解逆境胁迫的作用引起人们的关注。

现代科学研究早已证明:伽玛氨基丁酸有如下作用一、健脑作用,由于伽玛氨基丁酸为谷氨酸的三羧循环提供了另外一种途径(GABASHUNT),所以能有效的改善脑血流通,增加氧的供给,促进脑的代谢功能,可用于治疗因脑中风、头部外伤后遗症、脑动脉硬化后遗症等产生的头痛、耳鸣、意识模糊等病症。

并对改善肝脏、肾脏的功能也有作用。

二、降压作用,伽玛氨基丁酸(GABA)能促进脑部血流,增加氧气供给,促进脑的代谢,另一方面作用于延髓的血管运动中枢,使血压下降,同时抑制抗利尿荷尔蒙激素的分泌,扩张血管,降低血压。

三、促进儿童生长激素分泌的作用,具有激活运动员的潜能功能,在神经系统的发育过程中具有营养作用,是一种神经营养因子。

四、治疗癫痫。

研究发现,当人体中缺乏伽玛氨基丁酸时,容易诱发癫痫。

五、改善脂质代谢,防止动脉硬化的功能,在临床上可以作为改善脑动脉硬化引起的各种症状的药物使用:改善高血脂症、防止肥胖。

六、醒酒功能。

七、防止皮肤老化、清除体臭的功能八、增强风味之功能,其具有类似于谷氨酸甜味,能够增强食品风味。

九、伽玛氨基丁酸还有更多的功能正在研究之中...张晖,徐永,姚惠源等[11]通过对点样量、展开体系、显色方法等研究,解决了利用纸层析法定量测定了γ- 氨基丁酸误差大、重现性差的问题,从而建立了以纸层析法定量测定γ- 氨基丁酸的方法。

表明,此法定量测定γ- 氨基丁酸简单易行,耗费低廉,可作为食品中γ- 氨基丁酸分析测定的手段。

_氨基丁酸测定方法的研究

_氨基丁酸测定方法的研究

_氨基丁酸测定方法的研究氨基丁酸(GABA)是一种重要的神经递质,参与多种生理活动,如抑制神经递质的释放、神经调节和抗焦虑等。

因此,对于氨基丁酸的测定方法的研究具有重要的理论和应用价值。

本文将综述氨基丁酸测定方法的研究进展,并对其在不同领域的应用进行讨论。

现有的氨基丁酸测定方法主要分为生物传感器法和色谱法,其中色谱法包括气相色谱法(GC)和高效液相色谱法(HPLC)。

生物传感器法主要基于氨基丁酸与酶活性或亲和力的特异性相互作用,构建合适的生物传感器实现氨基丁酸的快速检测。

而色谱法则利用在特定条件下氨基丁酸与色谱柱内充填物的分离和定量,实现对氨基丁酸的准确测定。

生物传感器法具有快速、灵敏和便于实时监测的优点。

基于GABA转氨酶的生物传感器可以通过监测催化反应中电流、电压或荧光信号的变化来实现氨基丁酸的测定。

较新的研究表明,利用纳米材料修饰生物传感器的电极界面能够显著提高检测灵敏度和选择性。

此外,亲和分子和免疫传感器也能实现对氨基丁酸的测定,通过反应特异性和配体与靶分子的亲和力实现快速准确的检测。

色谱法则在氨基丁酸的测定中得到了广泛的应用。

气相色谱法通过气相色谱柱对氨基丁酸进行分离,再通过检测器进行定量。

气相色谱法具有灵敏、准确、稳定的特点,但需要对样品进行前处理,对仪器设备的要求较高。

高效液相色谱法则通过液相色谱柱对氨基丁酸进行分离和定量。

相比于气相色谱法,高效液相色谱法对样品处理要求较低,可用于复杂样品的分析。

最近,高效液相色谱法和质谱技术的结合也被用来测定氨基丁酸的含量和浓度。

除了上述方法,近年来还有一些新的氨基丁酸测定方法被提出。

例如,基于表面增强拉曼散射的方法通过金属纳米材料增强氨基丁酸的散射信号,提高了氨基丁酸的检测灵敏度。

此外,基于电化学和电化学发光的方法也在氨基丁酸的测定中取得了一些进展。

总结来说,氨基丁酸测定方法的研究主要集中在生物传感器法和色谱法两个方向。

生物传感器法具有快速、灵敏和实时监测等特点,适用于部分样品的快速检测。

_氨基丁酸的生理功能和研究进展

_氨基丁酸的生理功能和研究进展

_氨基丁酸的生理功能和研究进展氨基丁酸(γ-氨基丁酸,Gamma-aminobutyric acid,简称GABA)是一种重要的神经递质,在中枢神经系统中起着调节神经活动的关键作用。

它作为抑制性的神经递质,参与了大脑的许多生理功能,包括抑制神经元的活动、调节情绪、睡眠和疼痛等。

近年来,对GABA在健康和疾病中的功能和研究进展越来越受到关注。

GABA在中枢神经系统中的主要功能是抑制神经元的兴奋性活动。

它通过与GABA受体结合并增加神经元膜的氯离子通透性,使细胞内充分入侵而抑制细胞的兴奋。

这样,GABA能够调节大脑中神经元活动的强度和频率,维持神经系统的稳态。

在情绪调节方面,GABA同样扮演着重要的角色。

研究表明,GABA能够通过调节脑内的兴奋性和抑制性神经递质的平衡,影响人的情绪状态。

过量或不足的GABA水平都可能导致情绪失调,如焦虑、抑郁等。

此外,GABA还与睡眠和疼痛感知有关。

研究发现,GABA能够促进睡眠,并且它的缺乏会导致睡眠障碍。

另外,GABA能够降低神经元的兴奋性,从而减轻疼痛的感知和传导。

近年来,GABA的生理功能和研究进展也成为研究的热点。

其中,研究GABA受体的结构和功能是一个重要的方向。

对GABA受体的研究有助于揭示其调节神经传递的分子机制,并为设计和开发新型的神经调节药物提供了基础。

此外,研究GABA在神经系统中的定位和分布也是当前的研究重点。

通过揭示GABA在不同脑区的分布情况和水平变化,有望提供更具体和精准的神经疾病诊断和治疗方法。

另外,GABA相关的神经疾病也备受关注。

许多研究发现,GABA的异常水平与多种神经疾病存在关联,如癫痫、精神分裂症和自闭症等。

因此,研究GABA在这些疾病中的变化机制和相关调控因素,对于疾病的早期诊断和治疗具有重要意义。

总的来说,GABA作为一种重要的神经递质,在中枢神经系统中起着调节神经活动的关键作用。

它参与了大脑的许多生理功能,包括抑制神经元的活动、调节情绪、睡眠和疼痛等。

γ氨基丁酸鉴定方法

γ氨基丁酸鉴定方法

γ氨基丁酸鉴定方法
γ-氨基丁酸(GABA)是一种重要的神经递质,在中枢神经系统中具有多种生理功能。

因此,对GABA的鉴定方法进行研究具有重要的意义。

以下是γ-氨基丁酸鉴定方法的详细介绍:
一、概述
γ-氨基丁酸鉴定方法主要包括化学分析法、色谱法、质谱法等。

这些方法各有优缺点,需要根据具体需求和条件进行选择。

二、化学分析法
化学分析法是鉴定GABA的经典方法之一,主要包括滴定法、分光光度法等。

滴定法是通过滴定反应来确定GABA的含量,具有操作简便、结果准确等优点。

分光光度法则是通过测定GABA在特定波长下的吸光度来确定其含量,具有灵敏度高、操作简便等优点。

三、色谱法
色谱法是一种分离和鉴定复杂混合物中各组分的方法,包括高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)等。

HPLC具有分离效果好、分辨率高等优点,常用于分离和鉴定GABA及其代谢物。

GC则主要用于分析气体样品,如呼吸气等,可直接检测样品中的GABA。

四、质谱法
质谱法是一种基于质荷比进行物质鉴定的方法,具有灵敏度高、分辨率高等优点。

通过质谱法可以鉴定GABA的分子量、分子式等信息,有助于深入了解其结构特征和性质。

五、其他方法
除了以上方法外,还有核磁共振法、红外光谱法等可用于鉴定GABA。

这些方法各有特点,可以根据具体需求进行选择。

γ氨基丁酸(GABA)

γ氨基丁酸(GABA)

陈海军用异硫氰酸苯酯柱前衍生,紫外检测发 酵液中GABA浓度,在254nm处有最大吸收峰。 杨胜远采用7%(V/V)乙酸水溶液对发酵醪进行 预处理,以异硫氰酸苯酯为衍生剂,用反相 C18柱为分离柱,柱温27℃,阶段洗脱,在 254nm下进行检测。结果表明,发酵醪中的 GABA获得了很好的分离,GABA在0~1.5 mmol/L内线性相关性好,其线性方程 为:y=14106.5713x-258.2493(r=0.9993)。
孟祥勇采用2,4—二硝基氟苯柱前衍生法 测定发芽前后糙米中GABA的含量,结果 显示:糙米中的γ-氨基丁酸由5.01 mg/ 100g提高到35.03mg/100g。
γ-氨基丁酸与异硫氰酸苯酯(PITC) 衍生
N=C=S + NH2-CH2-CH2-CH2-COOH
NH-C=S
NH
CH2-CH2-CH2-COOH
氨基酸分析仪测定
方法:以日立835—30型氨基酸分析仪为例,先 按仪器说明配制缓冲溶液及茚三酮溶液,标准 GABA溶液用0.02mol/L盐酸配制成不同浓度, 测得峰面积,绘制标准曲线。把处理的样品按以 上方法峰面积,求出样品中GABA的含量。
张华和何轶通过此方法测得南瓜中GABA 含量为2.956%和沙棘果汁GABA含量为 13.4mg/100ml。Chen和Komatsuzaki也 采用氨基酸分析仪检测发酵牛奶中GABA 含量和发芽糙米经过浸泡和厌氧处理后 GABA含量,结果显示用乳酸菌发酵的牛 奶和发芽糙米处理后GABA含量为80.6mg/ 100g 和24.9 mg/100 g。
纸电泳法
方法:取上清液用于点样于滤纸上,以标准GABA溶 液做对照,在电压300V、室温条件下电泳60min,电 泳缓冲液为吡啶-冰醋酸混合溶液[吡啶:冰醋酸:蒸 馏水(体积比)=2:2:121,pH4.7]。电泳完毕后取出 电泳纸,水平摆放,室温下自然晾干,再在80℃电烘 箱中风干。用喷雾法向电泳纸上均匀喷洒显色剂,于 电热恒温干燥箱中90℃烘10 min,即显出在有氨基酸 区域呈紫红斑点的层析图谱。将与GABA标准品位置 一致的斑点剪下,加4ml洗脱液[洗脱液V(0.1%硫酸铜 溶液):V(75%乙醇溶液)=1:19]洗脱90min,在520nm 波长处比色测定洗脱液的吸光度。

氨基丁酸测定方法

氨基丁酸测定方法

氨基丁酸测定方法氨基丁酸(Aminobutyric Acid, GABA)是一种重要的非蛋白氨基酸,广泛存在于多种生物体内,并在中枢神经系统中具有重要的生理与药理作用。

因此,准确、快速地测定氨基丁酸的含量对于生物、医学和食品工业等领域有着很重要的意义。

常见的氨基丁酸测定方法主要包括高效液相色谱(HPLC)法、气相色谱(GC)法和荧光法等。

以下将对这些方法进行详细介绍。

1.高效液相色谱法(HPLC)HPLC是一种常用的分离和定量分析方法。

其基本原理是通过液相色谱柱实现目标化合物与混合样品中其他化合物的分离,采用特定的检测器进行定量测定。

氨基丁酸的HPLC测定方法主要有两种:预染色法和后染色法。

预染色法是指在样品中加入荧光标记剂,使氨基丁酸产生荧光,并与其他物质分离。

后染色法是指将样品中的氨基丁酸与染色剂反应后分离,再进行测定。

2.气相色谱法(GC)GC是一种基于气相载体的色谱技术。

其原理是通过样品的蒸发和气化,将气体样品在色谱柱中进行分离,然后通过检测器进行定量测定。

氨基丁酸的GC测定方法常采用衍生化技术,即通过化学反应将氨基丁酸转化为易于气相色谱检测的衍生物,如酯化衍生物或甲基化衍生物。

这样可以提高氨基丁酸的稳定性和检测灵敏度。

3.荧光法荧光法是一种基于物质在荧光发射和吸收过程中特定波长的发射光和激发光之间相互转化的方法。

其原理是通过荧光染料与氨基丁酸结合形成复合物,测定复合物的荧光强度或荧光寿命来定量分析氨基丁酸。

荧光法具有快速、灵敏和选择性好的特点,可用于测定低浓度的氨基丁酸。

除了以上方法,还有其他一些测定氨基丁酸含量的方法,如电化学法、光谱法等。

各种方法的选择应根据需要考虑样品的性质、检测的要求和仪器设备的可用性等因素。

总之,准确、快速地测定氨基丁酸的含量是很有意义的。

通过选择合适的测定方法,可以有效地实现对氨基丁酸的分析与检测,为相关领域的科学研究和应用提供重要的支持。

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收稿日期: 2006- 10- 30 作者简介: 陈海军( 1981- ) , 男, 在读硕士, 研究方向: 食品生物技术。
GABA 时 , 本 文 研 究 了 PITC 柱 前 衍 生 - 紫 外 检 测 GABA 的 HPLC 法[8]。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
乳酸菌发酵液 实验室筛选乳酸菌发酵后所得; GABA、L- 谷 氨 酸 ( Glu) 上 海 生 化 试 剂 公 司 ; 磷 酸 吡 哆醛( PLP) 、异硫氰酸苯酯 Sigma 公司; 乙腈 、甲 醇 、 乙 醇 、三 乙 胺 均 为 色 谱 纯;冰 醋 酸 、磷 酸 氢 二 钠 为 分析纯, 长沙市天恒科学仪器设备有限公司。
峰面积
1000000 800000 600000
y=2E+06x+53156 R2=0.9995
400000
200000


0.2
0.4
0.6
GABA 浓度( !g/mL)
图 3 GABA 浓度与峰面积的曲线图
由图 3 可以看出, GABA 的 PITC 柱前衍生 HPLC 法检测 GABA 时线性关系良好, 可以作为 GABA 的 精确定量分析方法。 2.1.2 精密度测定 取同一份经衍生处理后的样液, 分 多次进样, 每次进样 10μL, 测得 RSD 为 1.2%( n=5) 。 2.1.3 回 收 率 测 定 取 已 知 浓 度 的 GABA 标 样 衍 生 液适量, 分别加入原含有不同已知 GABA 量的样品 衍 生 液 中 。 取 10μL 进 样 测 定 , 计 算 回 收 率 , 结 果 为 101.4%。
不准确的缺点, 本文改进了显色方法, 将一定量的茚 三酮溶解于展开剂中, 在展开过程中, 茚三酮随着展 开剂沿滤纸向上移动, 由于固定了显色剂的量, 使测 定 结 果 更 准 确 。不 同 浓 度 的 茚 三 酮 显 色 、洗 脱 后 比 色 结果显示, 0.4%的浓度较合适( 见表 1) 。
表 1 不同茚三酮浓度对 A520 的影响
茚三酮浓度( %)
A520
0.1
0.244
0.2
0.280
0.3
0.300
0.4
0.358
0.5
0.360
0.6
0.361


10
15
图 2 样品中 GABA 的 HPLC 图
236 2007 年第 05 期
2.2.2 显色温度和时间的选择 为了定量的准确性和 重现性, 减少操作引起的误差, 应将显色温度和洗脱
2.2 定量纸层析法测 GABA
2.2.1 展开剂和显色剂浓度选择 关于纸层析法定量 测定氨基酸, 不同文献使用了不同的展开剂和配比, 但没有专门分离 GABA 的报道, 本文选择了几种展 开剂配方, 发现展开剂配方为正丁醇∶醋酸∶水=4∶1∶3 时 , 测 A520 值[13], 能 够 很 好 地 将 GABA 与 其 它 氨 基 酸 分 离 。为 了 克 服 传 统 喷 雾 显 色 造 成 的 重 现 性 差 、定 量
100 75 50 25
从 图 1、图 2 可 以 看 出 , 在 本 文 所 确 定 的 实 验 方 法下 GABA 标 样 出 峰 时 间 短 ( GABA 的 保 留 时 间 为 6.241min) , 峰型好, 乳酸菌发酵液中的 GABA 与其它 物质分离效果好。 2.1.1 HPLC 法测定 GABA 的标准曲线制作 配制不 同浓度的 GABA 溶液, 各取 10μL 进样, 上柱分离检 测后, 以 GABA 浓度对标准峰面积绘制标准曲线, 如 图 3 所示。
关键词: GABA, 纸层析法, 高效液相色普法
Abstr act:In this p a p e r, p a p e r c hroma tog ra p hy me thod a nd hig h p re s s ure liq uid c hroma tog ra p hy we re s tud ie d on q ua lita tive a na lys is a nd q ua ntita tive te c hniq ue of GABA whic h fe rme nte d b y la c tob a c illus . As a re s ult the imp rove me nt p a p e r c hroma tog ra p hy me thod whic h e xp e rime nte d in this te xt ma ke s ure to c a rry on the fis t s te p in q ua lita tive a na lys is a nd q ua ntita tive a na lys is a re via b le . The n ma tc h the PITC p illa r d e ve lop e d b e fore - the HPLC me thod of the ultra viole t e xa mina tion c a rrie d on the a c c ura te q ua ntita tive a na lys is , re s ult is a c c ura te , with hig h re p rod uc ib ility.
Key wor ds :γ- a minob utyric a c id ; p a p e r c hroma tog ra p hy me thod ; hig h p re s s ure liq uid c hroma tog ra p hy
中图分类号: TS201.2 文献标识码: A 文 章 编 号 : 1002- 0306( 2007) 05- 0235- 04
分析检测
Vol.28,No.05,2007
食品工业科技
γ- 氨基丁酸Байду номын сангаас定方法的研究
陈海军 1, 林亲录 2, 王 婧 1, 李丽辉 1 ( 1. 湖南农业大学食品科学与技术学院, 湖南长沙 410128; 2.中南林业科技大学食品科学与工程学院, 湖南长沙 410004)
摘 要 : 在 用 乳 酸 菌 发 酵 生 产 γ- 氨 基 丁 酸 ( γ- aminobutyric acid, GABA) 时, 为了对发酵液 中 的 GABA 进 行 定 性 与 定 量 分 析 , 本 文 对 纸 层 析 法 、高 效 液 相 色 普 法 ( HPLC) 进 行 了 研 究, 结果发现用本文中实验所确定的改良纸层析法进行 初 步 的 定 性 与 定 量 分 析 是 可 行 的 , 再 配 合 PITC 柱 前 衍 生- 紫外检测的 HPLC 法进行精确定量分析, 结果准确, 重复性好。
近 年 来 , GABA 在 食 品 中 的 应 用 研 究 正 在 掀 起 , 而食品中 GABA 的测定方法的报道尚不多见。由于 GABA 对电 化 学 和 紫 外 、可 见 光 的 不 灵 敏 性 , 导 致 用 直接方法对它进行测定比较困难。关于 GABA 的测 定 近 年 来 国 内 外 有 氨 基 酸 分 析 仪 测 定 、酶 法[1]、色 质
联 用 法 、柱 层 析 荧 光 测 定 法 、纸 电 泳 比 色 、毛 细 管 气 相色谱法[2]、放射性受 体 法[3]、毛 细 管 电 泳 法[4], 以 及 高 效液相色谱 法[5, 6]等 , 这 些 方 法 大 多 用 于 医 学 领 域 , 且 价格昂贵, 不适用于大量的定量分析。在进行高产 GABA 乳 酸 菌 株 的 筛 选 中 , 以 及 菌 株 发 酵 条 件 优 化 中, 都要进行大量的 GABA 定量分析, 显然需要一种 简便、价廉的定量测定方法, 因此本文研究了纸层析 法 [7, 13] 定 量 测 定 GABA 的 方 法 。 在 需 要 精 确 测 定
2007 年第 05 期 235
食品工业科技
Science and T echnology of Food I ndustry
分析检测
HPLC 法测定 GABA 含量。 1.2.3.3 色谱条件 色谱柱: vensuil×BP- AA 氨基酸专 用柱 5μm, 100", 4.6×250mm; 流动相: 流动相 A 为乙 腈 ∶70 mmoL/L- 1 醋 酸 缓 冲 液(pH 6.5) =25∶975; 流 动 相 B 为乙腈∶水∶甲醇=450∶400∶150; 洗脱条件: 流动相 A∶流 动 相 B=50%∶50%, 流 速 1.0mL/min, 洗 脱 时 间 20min。 紫 外 检 测 波 长 254nm; 柱 温 40℃; 进 样 量 10μL。 1.2.3.4 溶液配制 样品稀释液: 5μmoL/L 的 Na2HPO4 缓冲溶液, pH7.4; 样品干燥液: 甲醇∶1.0moL/L 醋酸钠∶ 三乙胺 = 2∶2∶1 ( v∶v∶v) ; 衍生化试剂: 异 硫 氰 酸 苯 酯 ( PITC) ∶甲醇∶乙醇∶三乙胺∶水= 1∶6∶1∶1∶1( v∶v∶v∶v∶v) ; 需 新鲜配制。 1.2.3.5 样 品 衍 生 化 取 超 滤 液 20μL 注 入 0.5cm× 5cm 的 玻 璃 试 管 中 , 冷 冻 干 燥 , 然 后 加 入 干 燥 液 10μL, 再 一 次 冻 干 , 再 加 入 20μL 衍 生 化 试 剂 , 室 温 衍生 20min 后经冻干置冰箱 4℃保存。50μL 样品 稀 释液复溶, 10μL 或 20μL 进样。 1.2.4 纸层析法测定 GABA 1.2.4.1 样品处理 同 1.2.1。 1.2.4.2 样品测定 吸取 10μL 的 GABA 样品, 点样 线距滤纸 2.0cm, 样品间距 2.0cm。 将 点 样 后 的 滤 纸 条在展开剂中展开、风干显色 , 将与标准品位置一致 的斑点剪下, 用 0.1%硫酸铜: 75%乙醇=2∶38 的洗脱 液洗脱, 520nm 处比色测定。
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