基泰长螺旋操作手册

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Plasmid Premier中文使用说明书

Plasmid Premier中文使用说明书

Plasmid Premier 2.02Plasmid Premier是由加拿大的Premier Biosoft公司推出的用于质粒作图的专业软件,主要用于进行质粒作图,质粒特征分析和质粒设计。

其主要界面分为序列编辑窗口(Genetank),质粒作图窗口(Plasmid Design),酶切分析窗口(Restriction Sites)和纹基分析窗口(Motif)。

打开程序就进入以下的序列编辑窗口,可以直接打开Genbank或Vector数据库中已知质粒的序列文件,将序列读入,并将有关于质粒的各种特征,包括编码区,启动子,多克隆位点以及参考文献等信息保存在Header中;也可以直接输入序列进行未知质粒的设计。

在该窗口中显示质粒序列的方式可以有按照正向链,反向链和双链格式显示,并在显示碱基分组上选择3个/组或10个/组,以及用5’ Seq No命令选择在环形质粒中开始编辑的序列5’端位置。

该程序提供的翻译功能是该程序独到的地方,可以实现DNA,RNA和蛋白序列之间的互相翻译,并且提供目前已知的所有密码表来进行翻译,还能够是用户可以对密码表进行编辑,有很高的自由度。

最为重要的是该程序提供了由蛋白向DNA按照IUPAC密码表进行逆向翻译的功能,得到了Translated DNA序列,通过在该序列中寻找序列中简并性低的区段由于进行猜测体探针的设计,这是该程序提供的在质粒作图之外的一个比较有特点的用途。

在序列编辑窗口中可以通过点击按钮进入以下的质粒作图界面在质粒图谱中主要包括质粒的四种特征元素,包括限制性酶切位点,特征序列(纹基,motif),开读框(ORF)和其他质粒特征(feature如编码区)。

其中前三种元素都是直接由程序对序列直接分析获得,也可以由用户再通过analyze 菜单再作进一步分析,而最后一中元素可以由header头信息定义,也可以由用户自由添加。

并切均可获得四种元素的列表。

对于图谱中各种元素,Plasmid Premier提供良好的图象处理支持,可以自由拖拽图中显示的各个元素,改变各个元素的显示,包括各个元素的字体,名称,位置和色彩等,并且通过点击途中的各个元素来获得其在序列上的相应位置,并且可以通过选择按钮选择只显示其中的一种元素,使界面简洁,易于进行编辑处理。

腺病毒载体操作手册中文版解析

腺病毒载体操作手册中文版解析

腺病毒载体操作手册中文版解析腺病毒载体操作手册中文版AdEasyTM操作手册目录缩写英文全称中文全称Ad Adenovirus 腺病毒Ad5 Adenovirus serotype 5 血清5型腺病毒AdV Adenoviral Vector 腺病毒载体Amp Ampicillin 氨苄青霉素β-Gal β-Galactosidase β-半乳糖苷酶bp Base Pair 碱基对BSA Bovine Serum Albumin 小牛血清白蛋白cDNA Complementary DNA 互补DNAcccDNA Closed Circular Coiled DNA 闭环螺旋DNACPE Cytopathic Effect 细胞病理效应CsCl Cesium Chloride 氯化铯DMEM Dulbecco’s Modified Eagle Medium DMEM培养基DMSO Dimethyl Sulfoxide 二甲基亚砜DTT Dithiothreitol 二硫苏糖醇EDTA Ethylene Diamine Tetraacetic Acid 乙二胺四乙酸EtBr Ethidium Bromide 溴化乙锭FBS Fetal Bovine Serum 胎牛血清Hr Hour 小时ITR Inverted Terminal Repeat 反向末端重复Kan Kanamycin 卡那霉素kb Kilobases 千碱基对KDa KiloDaltons 千道尔顿LB Luria-Bertani ( broth ) LB培养基MCS Multiple Cloning Site 多克隆位点Min Minute 分钟MOI Multiplicity of Infection (Virus/Cell ) 感染复数mRNA Messenger RNA 信使RNAMWCO MOIecular Weight Cut-offPAGE PolyAcrylamide Gel Electrophoresis 聚丙烯凝胶电泳PBS Phosphate Buffered Saline 磷酸盐缓冲液PFU Plaque Forming Unit 空斑形成单位pi Post Infection 感染后RCA Replication Competent Adenovirus 增殖性腺病毒RITR Right Inverted Terminal Repeat 右侧反向末端重复SDS Sodium Dodecyl Sulfate 十二烷基硫酸钠TBE Tris Borate/EDTA 三羟甲基氨基甲烷硼酸盐/乙二胺四乙酸TCID50 Tissue Culture Infectious Dose 50 50%组织培养感染剂量TCP Total Cellular Protein 细胞总蛋白TE Tris/EDTA TE溶液wt Wild Type 野生型X-Gal 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-D-Galactopyranoside 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷第一章简介当今基因输送技术的发展日趋复杂,一些治疗药物(生长激素、干扰素、抗病毒和抗癌复合物)和诊断性蛋白(单克隆抗体)的设计、发展与合成需要更高效的基因输送工具。

pMD18-T使用说明书(附序列)

pMD18-T使用说明书(附序列)
Q-3 欲对克隆 DNA 片段进行测序时,使用何种引物? A-3 本载体来源于 pUC18 载体。因此,用于 pUC18 载体测序的通用引物都可以使用。
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MEMO
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技术咨询热线:
0411-87641685,87641686 8008909508,4006518769
宝生物工程(大连)有限公司
●用 途
■ 进行 TA 克隆,克隆 PCR 产物。 ■ 对克隆后的PCR产物使用BcaBESTTM Sequencing Primers、M13 Primers进行DNA测序。
●pMD®18-T Vector的结构
pMD®18-T Vertor (2,692 bp)
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【pMD®18-T Vector相关位点说明】
B)结 果 使用Control Insert时的连接/转化结果如下,使用的感受态细胞的转化效率为:1.5×108 cfu/μg pUC19 DNA。
Control Insert
连接/转化效率 (cfu/μg Vector)
白色菌落比率(%)
效率(%)*

1.7×106
98.1
90 以上

1.1×105
注) ① 室温(25℃)也能正常进行连接反应,但反应效率稍微降低。 ② 5 分钟也能正常进行连接反应,但反应效率稍微降低。
4)全量(10 μl)加入至 100 μl JM109 感受态细胞中,冰中放置 30 分钟。 5)42℃加热 45 秒钟后,再在冰中放置 1 分钟。 6)加入 890 μl SOC 培养基,37℃振荡培养 60 分钟。 7)在含有 X-Gal、IPTG、Amp 的 L-琼脂平板培养基上培养,形成单菌落。计数白色、蓝色菌落。 8)挑选白色菌落,使用 PCR 法确认载体中插入片段的长度大小。

链霉菌操作手册

链霉菌操作手册

链霉菌操作手册链霉菌室实验操作手册(2003年)第一章培养基抗生素生长因子 (3)常用抗生素及其使用浓度 (3)LB(Luria-Bertani)培养基 (3)LA (3)基本培养基(MM) (3)R5(1L)链霉菌原生质体转化时用 (4)YEME(酵母膏-麦芽膏培养基) 1L(液体培养链霉菌) (4)TSBY (1L)(液体培养链霉菌) (4)MS培养基 (5)2CMY培养基(用于井岗的接合转移) (5)YMS培养基(阿维,井岗产孢) (5)YD培养基 (5)生长因子补充物的使用浓度 (6)第二章DNA基本操作 (7)大肠杆菌质粒的抽提 (7)酶连反应 (7)DNA片段凝胶回收 (8)DNA纯化 (9)E.coil总DNA的提取 (9)链霉菌质粒DNA的小量提取(还需改进) (10)去磷酸化处理(详见分子克隆实验指南以及Takara的CIAP使用说明) (10)AT克隆(详见说明书) (10)Southern Blot (11)第三章PCR及相关技术 (13)PCR (13)PCR重组(详见《PCR技术实验指南》p429 重叠延伸技术) (14)PCR定点诱变(DpnI法) (14)第四章基因片段转移技术 (15)大肠杆菌CaCl2法制备感受态细胞及DNA转化 (15)DNA转化 (15)大肠杆菌质粒的快速检测 (15)接合转移(详见英文《手册》249页) (16)链霉菌原生质体的制备 (16)链霉菌原生质体的转化 (17)PCR-Targeting技术中E.coli电转化感受态的制备及电转化 (17)第五章RNA操作技术 (19)链霉菌总RNA的抽提 (19)链霉菌的RT-PCR(promega RT kit) (19)第六章蛋白质基本操作技术 (21)SDS-PAGE,考马斯亮蓝染色 (21)大肠杆菌可溶性蛋白表达及抽提(用于由IPTG诱导的表达体系):(21)链霉菌总蛋白抽提: (22)大肠杆菌目标蛋白的诱导及总蛋白检测(含T7表达系统如BL21菌株中的pET系列表达体系): (22)Western Blot (23)第七章遗传作图相关技术 (25)链霉菌孢子悬液的制备 (25)链霉菌中NF的证明 (25)孢子杂交 (25)在遗传图谱上两个标记基因之间定位新的基因 (25)第八章其他技术 (27)链霉菌菌种保藏 (27)检测链霉菌淀粉酶的活性 (27)第一章培养基抗生素生长因子常用抗生素及其使用浓度抗生素英文名称及缩写抗性基因贮藏液浓度(mg/ml)使用终浓度(μg/ml)链霉菌大肠杆菌M M2CM Y E M E L A或L B 氨苄青霉素氯霉素潮霉素卡那霉素壮观霉素链霉素硫链丝菌素红霉素阿泊拉霉素Ampicillin, Amp Chloramphenicol, Cml Hygromycin, Hyg Kanamycin, Km Spectinomycin, Spc Streptomycin, Str Thiostrepton, Thio Erythomycin, Ery Apramycin, Amblacathygaac或aphaadAstrtsrerm Eaac(3)IV10025(无水乙醇配)50255025(DMSO配) 10050R10102?5010510010R-2550502510-50R---50-2.55050-1002550505025不敏感2030-50*–表示无记录或不能使用,贮存液除特别说明外均用无菌水配制*此表仅供参考*R表示不敏感*Km 和Am有交叉抗性,所以同时具有这两种抗性基因时应适当提高抗生素的量,并作好对照。

la sota株﹢lg1株说明书

la sota株﹢lg1株说明书

la sota株﹢lg1株说明书La Sota株﹢LG1株是一种用于家禽疫苗免疫的病毒株。

下面将详细介绍该株的功能、使用方法、储存条件以及对家禽免疫效果等方面的信息。

一、功能说明La Sota株﹢LG1株是一种鸡传染性支气管炎疫苗株,广泛应用于农场家禽养殖中。

该株能有效预防和控制鸡传染性支气管炎,可以在家禽养殖环境中迅速建立免疫保护屏障。

二、使用方法1.养殖环境准备:密闭、消毒良好的养殖舍是疫苗施用的基础。

确保养殖环境干燥、清洁,无疫源携带者等。

2.疫苗制备:根据饲养规模选择合适的疫苗规格,按照说明书指导将冻干疫苗加入稀释液中,搅拌均匀。

3.疫苗接种:以雾化器或滴剂器等方式进行疫苗接种,确保每只鸡都能均匀接种到疫苗。

4.免疫程序:首次接种时间一般在2-3周龄,然后每4-6周重复接种一次,直到禽群满足免疫需求。

三、储存条件1.前期制备:在-196℃的液氮罐中存储冷冻疫苗,确保疫苗的有效性。

2.使用前准备:将冷冻疫苗放在2-8℃的冰箱中解冻,但不要接触阳光直射。

3.稀释后储存:将稀释后的疫苗存放在2-8℃的冰箱中,避免冻结。

四、家禽免疫效果La Sota株﹢LG1株的使用可以提供针对鸡传染性支气管炎的有效免疫保护,下面是一些相关效果:1.显著减轻或消除家禽鸡传染性支气管炎的症状,减少禽群死亡率。

2.长期免疫:接种La Sota株﹢LG1株可以为家禽提供长期免疫效果,提高禽群的抗病力。

3.高安全性:La Sota株﹢LG1株经过科学鉴定和长期应用验证,安全有效,在养禽场广泛使用。

五、注意事项1.严格遵守疫苗使用说明书中的使用剂量、接种程序和接种时间,以免影响疫苗的免疫效果。

2.在接种过程中,注意养殖环境的卫生,尽量减少应激对禽群的干扰。

3.储存疫苗时要避免阳光直射,保持适宜的温度,避免冻结,以免疫苗失效。

4.使用过期的疫苗会降低免疫效果,所以在使用前要查看疫苗的有效期。

总结:La Sota株﹢LG1株是一种常用于家禽疫苗免疫的病毒株,主要用于预防和控制家禽鸡传染性支气管炎。

EnviroLogix QuickToxTM 斯塔奇博茨和黑曲霉 使用说明书

EnviroLogix QuickToxTM 斯塔奇博茨和黑曲霉 使用说明书

QuickTox TM Kit for Stachybotrys and Aspergillus niger Contents of Kit – 2 sample cups, 2 swabs, 1 bottle extractionsolution, 2 test strips.INSTRUCTIONS – Please read carefully before beginning the tests. If you have any questions regarding the test, check our web site at : /moldtest or call us at 1-866-860-MOLD (6653). The web site also has information and links to useful materials on molds, cleanup, health impacts and other related topics. Intended Use: This test is intended for use by homeowners to rapidly identify areas of suspected mold contamination for the presence of Stachybotrys chartarum or Aspergillus niger spores. Until now, no tests have been available to identify these potentially toxic mold spores on-site, without laboratory culturing and microscopy or DNA analysis. Applicability: This test is designed to obtain, extract, and test obvious mold growth at the levels typically found on contaminated environmental samples, such as dry wall, ceiling tiles, and carpets. This rapid test is capable of detecting Stachybotrys chartarum and Aspergillus niger at levels as low as 100,000 spores per milliliter (spores/mL) of extraction solution for Stachybotrys chartarum and 5,000,000spores/mL for Aspergillus niger. The mold can be sampled from a variety of materials that do not interfere with the test including dust, dirt, soot, paper covered gypsum dry wall, ceiling tiles, carpet, cardboard, joint compound (wet and dry), spackling paste (wet and dry), wood, paint chips, linoleum, transparent tape, soot, and foam pipe insulation.All molds have the potential to cause health problems. Molds produce allergens (substances that cause allergic reactions), irritants, and in some cases, potentially toxic substances (mycotoxins).1The more serious health problems have been associated with the toxic greenish-black mold, Stachybotrys atra (chartarum).3 Aspergillus niger is one of the species of Aspergillus commonly found in the environment that can cause allergic reactions and pulmonary infection.4 It is usually a white or yellow mold covered with a dense layer of black spores.Inhaling or touching mold or mold spores may cause allergic reactions and asthma attacks in sensitive individuals. Mold exposure can irritate the eyes, skin, nose, throat and lungs of both mold-allergic and non-allergic people.1 These effects depend on:an individual’s sensitivity or allergies;the type, duration, and amount of mold exposure; andthe general health and age of the affected individual.Certain molds, including Stachybotrys chartarum and Aspergillus niger, may produce potent toxins (mycotoxins) that have been reported to yield human health effects ranging from skin rash to immune system suppression, acute or chronic liver damage, acute or chronic central nervous system damage, endocrine effects, and cancer.2Specificity and Cross Reactivity:This test does not distinguish between toxic and non-toxic Stachybotrys chartarum varieties or Aspergillus niger species. This test will distinguish Stachybotrys chartarum from Aspergillus niger and other Stachybotrys species so far identified.The following molds have been tested with this kit at the concentrations typically found on contaminated indoor materials and have been found to cause no false positive results: Alternaria sp., Aspergillus flavus, Chaetomium sp., Cladosporium sp., Penicillium sp., and Trichoderma sp. The test may give a positive result with a sample containing Memnoniella sp. (also a potentially toxic mold) at levels over 10,000,000 spores/mL. Sample Collection:Collect samples from visible moldy areas according to the instructions below. Do not touch mold or moldy items with bare hands, do not get mold or mold spores in your eyes, and do not breathe in mold or mold spores. If you must disturb moldy areas in order to collect samples, use the safety precautions identified in “Clean-up and remediation” below. Test Instructions: (refer to illustrations in the package)1.Place the sample cup upright on a flat, firm surface.2.Add 15 to 20 drops of extraction solution to the sample cup. Do notfill above the line approximately half way up the cup.3.Open the package containing the cotton-tipped swabs and remove asingle swab, holding it by the wooden end.4.Locate an area of obvious mold growth. Molds of concern typicallyappear as circular black, green, yellow, brown, or white “mats” withblack, green, or brown spores covering the mat.e the swab to collect the mold. Collect at least a thumbtack sizeamount of mold for testing. Collecting too much mold (completely covering the entire swab) may clog the test strip and invalidate the test. Collecting too little (less than a pinhead) may not provide enough material to be detected and result in a false-negative result.6.Place the swab head containing the mold sample into the extractionsolution in the sample cup. Carefully twirl the swab to extract the mold sample. The sample should be a cloudy or grayish-black liquid.If the extract is a slimy paste, too much sample was collected and the mold should be re-collected with less material. You will also need to discard the solution and add another 15 drops of extraction solution.If the extract is clear, insufficient material was collected and more mold sample should be added to the sample cup.7.While holding the cup, press the swab against the sample cup toremove excess liquid and discard the swab (see step 14).8.Open the foil pouch containing the QuickTox™ Test Strips by tearingthe seal at the indented edge. Remove one strip. Reseal the pouch.9.Place the strip into the sample cup with the arrows pointing down.The end with the arrows should be in the liquid.10.Let the test run for 5 minutes.11.Shortly after placing the strip in the liquid, you should see a pinkishliquid traveling up the test strip towards the absorbent pad at the top.When the liquid reaches the control line area, a pink line should develop. This indicates the test is properly functioning. If before 5 minutes the liquid stops flowing, the liquid in the cup dries up, or the strip is clogged and a control line does not develop, the test is invalid and must be run again.12.After the test has run for 5 minutes, remove the strip from the cupand read the test.13.If you wish to keep the test strip, cut off the bottom part of the strip.This is the end that is solid blue with the arrows.14.Place used samples, cups, swabs, and any other contaminatedmaterials in a plastic bag; close tightly and throw away. Interpretation:POSITIVE = 2 LinesA pink test line and a pink control line is a positive result for Stachybotrys chartarum.A grey, brown, or black test line and a pink control line is a positive result for Aspergillus niger.A positive test line means you have Stachybotrys chartarum or Aspergillus niger at the sample location, at levels detectable with this test. Although there are as yet no federal limits on mold or mold spores, your risk of exposure to these molds and their potential for producing harmful toxins will be greatly reduced by removing them from your home.You should confirm the results, and gain advice on what should be done to correct the problem, by contacting an experienced indoor air quality, environmental or remediation professional.If you have health concerns, consult a health professional. NEGATIVE = 1 LineNo line in the test line area and a pink control line is a negative result. This means that, in the sample taken, Stachybotrys chartarum and Aspergillus niger molds are not detectable within the limits of this test. You may have them in lower concentrations, in other locations, or may have other molds present in varying amounts.A strong positive result may safely be interpreted in as little as 2 minutes after sample addition. It is not safe, however, to conclude that a sample is negative before a full 5 minutes has elapsed. A weakly positive sample may require the full 5 minutes for a distinct test line to appear.In any case, you should clean up the suspected area (or have it cleaned up) and be sure to fix any moisture problems. All molds can gradually destroy the things they grow on. You can prevent damage to your home and furnishings, save money, and avoid potential health problems by controlling moisture and eliminating mold growth.1As with all tests, it is recommended that results be confirmed by an alternate method when necessary.INSTRUCTIONS CONTINUEOTHER SIDE ----------------------->Important Note: This test is only one tool to help understand the nature of mold problems in your home, if any. It should be used in further discussions with environmental and health professionals to determine your best course of action. It, alone, should not be used for decisions about remediation or safety of the situation. THERE ARE NO FEDERAL REGULATIONS FOR ASSESSING WHETHER THERE IS A MOLD CONTAMINATION PROBLEM IN AN AREA. However, it is generally agreed that ALL mold sites should be cleaned up and water problems eliminated, to prevent future mold growth and potential health hazards.Clean-up and Remediation: All molds, especially Stachybotrys, require moisture to grow. The first step to removing mold growth is eliminating the source of water and drying potential mold infestation sites. The EPA and other agencies suggest that mold sites under 10 square feet can be cleaned up by the homeowner using appropriate precautions which include an “N-95 respirator” (face mask obtained in most hardware stores), gloves and goggles. For infestations greater than 10 square feet, they recommend consulting an experienced professional. For further information, see the references at the end of this information.Kit Storage:Kit Storage: Store the kit at room temperature in a dry location. Note the expiration date on the kit package.Kit Handling:Kit Handling: Prolonged exposure to high temperatures may adversely affect the test results. Do not open the foil bag until ready to use the test strips. Do not wet the strips. Avoid tearing, bending, or twisting the strips.Detection Limit: Stachybotrys chartarum at 100,000 spores/mL, Aspergillus niger at 5,000,000 spores/mL.Precautions:This test kit does not contain any toxins, molds, or known contaminants of mold origin.Do not use kit components after the expiration date.This kit is designed to screen for presence or absence only and is not meant to be quantitative. This test has been calibrated using the extraction solution and procedure supplied with the kit. Use of other extraction solutions or procedures may invalidate the results of the test. Do not dilute the extraction solution or use samples not called for in the test procedure.While this test does not interfere with common materials supporting mold growth (ceiling tile, dry wall, etc.) it is impossible to ensure all such materials will not cause false positive results. If in doubt, test a small amount of the material that is not visibly contaminated with mold as a “negative control”. If the results are negative, it can be assumed the material does not interfere with the test and will not cause false positive results.This test is intended for testing samples collected from surface samples only, such as building materials, furnishings, and building contents. It has not been validated for use on air samples, nor is it intended for or validated for use as a human or animal diagnostic.This is a screening test. It is not intended to replace an inspection by a licensed environmental testing professional or testing laboratory. Resources:To locate an indoor air quality, environmental testing, industrial hygiene or remediation specialist, check your local Yellow Pages under those or similar headings, or the following:AIHA (American Industrial Hygiene Association) Consultants List, searchable by specialty and state (paid listings):/ConsultantsConsumers/html/consultantslist.asp Further information is contained on our web site at: / moldtest, including links to helpful detailed guides at the US Environmental Protection Agency, Centers for Disease Control, Federal Emergency Management Agency, or contact the Health, Environmental Health, Housing or Social Services departments of your city or country government. References:1“A Brief Guide to Mold, Moisture, and Your Home” USEPA (EPA 402-K-02-003)2“Mold Remediation in Schools and Commercial Buildings” USEPA (EPA 402-K-01-001)3“Dealing with Mold & Mildew in Your Flood Damaged Home” US FEMA (Federal Emergency Management Agency)4“Aspergillosis Technical Information” US CDC Division of Bacterial and Mycotic Diseases LIMITED WARRANTYEnviroLogix Inc. (“EnviroLogix”) warrants the products sold hereunder (“the Products”) against defects in materials and workmanship when used in accordance with the applicable instructions for a period of one year from the date of shipment of the products or if shorter, for a period not to extend beyond a product’s printed expiration date. If the Products do not conform to this Limited Warranty and the customer notifies EnviroLogix in writing of such defects during the warranty period, including an offer by the customer to return the Products to EnviroLogix for evaluation, EnviroLogix will repair or replace, at its option, any product or part thereof that proves defective in materials or workmanship within the warranty period. ENVIROLOGIX MAKES NO OTHER WARRANTIES, EXPRESSED OR IMPLIED, INCLUDING BUT NOT LIMITED TO ANY IMPLIED WARRANTIES OF MERCHANTABILITY OR FITNESS FOR A PARTICULAR PURPOSE. The warranty provided herein and the data, specifications and descriptions of EnviroLogix products appearing in EnviroLogix published catalogues and product literature are EnviroLogix’sole representations concerning the Products and warranty. 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LicenseEnviroLogix has developed this kit using proprietary reagents and certain other licensed reagents.US Patent Application Serial No. 60/311,458 pending.QuickTox, EnviroLogix, and the EnviroLogix logo are trademarks of EnviroLogix Inc.For technical support contact us at:EnviroLogix Inc.500 Riverside Industrial ParkwayPortland, ME 04103-1418 USAToll Free: 1-866-860-MOLD (6653)e-mail:********************website: /moldtest© EnviroLogix 2003。

大型大量质粒提取试剂盒操作方法及步骤说明书

大型大量质粒提取试剂盒操作方法及步骤说明书

杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://PhasePrep EndoFree Maxi Kit大型/大量质粒提取试剂盒目录号:PL1401适用范围:适用于大量高纯或者转染级质粒制备和BAC/PAC大型质粒制备试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存20次(PL1401)RNaseA(10mg/ml)-20℃ 1.3ml溶液P1 4℃130ml溶液P2 室温100 ml溶液PⅢ室温110 ml杂质清除剂A 室温 3 ml杂质清除剂B 室温30 ml内毒素清除剂-20℃10 ml本试剂盒在室温储存18个月不影响使用效果。

储存事项:1.第一次使用时,将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后(终浓度100μg /ml)置于4℃保存。

如果溶液P1中RNase A失活,提取的质粒可能会混杂有微量RNA 残留,在溶液P1中补加RNase A即可。

2.内毒素清除剂在4℃可保存一个月,如果要长期保存,建议保存在-20℃!3.环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出出现浑浊或者沉淀,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。

4.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

产品介绍:本试剂盒用碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA,采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂,只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质,获得高质量的质粒DNA。

纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。

纯化后期过程均在1.5ml 小离心管中操作,方法简单,不需特殊设备,无需过柱,不用酚氯仿抽提;基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒,不必担心质粒DNA的丢失。

本方法提取纯化质粒DNA,对质粒损伤小,即使是10kb甚至100kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒,只要碱裂解法能够提取,就可以有效纯化。

DNA测序试剂盒BigDye%20vx.1中文操作手册[1]

DNA测序试剂盒BigDye%20vx.1中文操作手册[1]

DNA测序试剂盒中文操作手册 BigDye Terminator v3.1和v1.1BigDye Terminator试剂盒简称BDT。

BDT v3.1是DNA测序的标准试剂盒,而BDT v1.1则是专门为PCR 产物测序而优化设计的。

BDT v3.1适用于所有类型DNA模板的测序,对于长片段测序更具优势。

dGTP-BigDye Terminator试剂盒简称BDG。

BDT是DNA测序的标准试剂盒,而BDG则是专门为困难模板测序而优化设计的。

长的重复序列、二级结构、富含GC的片段等通常会干扰测序PCR反应,导致测序失败的DNA模板称为困难模板。

只有BDT v1.0、v2.0和v3.0有相应的BDG试剂盒,BDT v1.1和v3.1本身已有足够能力对付困难模板,所以没有相应的BDG试剂盒。

BDT v1.0、v1.1、v2.0以及BDG v1.0、v2.0可以使用同样的matrix或者光谱校正;BDT v3.0、v3.1以及BDG v3.0可以使用同样的matrix或者光谱校正。

Matrix与光谱校正是同义词。

在不同型号的仪器上,测序的Dye Set选择如下:BDT v3.1 BDT v1.1310/377 E E3100/3100-Avant Z E3700 v2.0 H E3700 v1.1和v1.1.1 D E注意:少数早期的3100和3100-Avant软件中没有MtxStd{Sequencing-SetZ}.par文件,这时可以用MtxStd{Sequencing-SetE}.par代替,用于做BDT3.1的光谱校正。

以下操作适用于BDT v1.1和BDT v3.1试剂盒,而且对于这两种试剂盒的操作完全一样,但是不适用于BDT v1.0、v2.0和v3.0以及 BDG v1.0、v2.0和v3.0试剂盒。

1. 测序DNA模板的纯度与用量DNA纯度:OD260 / OD280 = 1.6 ~ 2.0。

GeneTools 操作指南(中文)

GeneTools 操作指南(中文)
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描述栏
描述栏显示当前泳道的一些相关信息,您可以在“Tracks”菜单使用使用“Description” 来编辑当前泳道的描述。
剖面图栏
剖面图栏显示当先选中泳道的峰值剖面图。 如果您选择其中一个泳道作为条带匹配标准,其剖面图会一直显示在该栏,以于其他的 泳道进行对比分析。 在“Extras”菜单 “Configuration”里可以对各个项目的颜色进行更改。 您也可以在剖面图栏对各个条带进行编辑,通过鼠标右键。
5. 使用双向箭头选择于分子量标注的第一峰
GeneTools
入门指南
基因有限公司售后服务部编译
编者言 本手册系原版英文说明书编译而来,希望它能为您操作该软件时 带来帮助。由于译者的水平限制,手册中可能存在错误和遗漏,如与 英文说明书发生冲突,请英文原版说明书为准。本手册只作为您操作 的参考依据,不能作为其他评定标准。
基因公司售后部应用工程师:张传峰 2004-3-23
分子量标准库
当前使用的分子量标准
4. 在分子量标准库里选择所需的分子量标准
运行 GeneTools
1 点击开始按钮、选择程序菜单,进入 Syngene 子菜单,选择 GeneTools,双击运行。 根据程序的设置,用户名称对话框可能会出现在界面,如下图:
2 如果您先前已经输入用户名,您就可以从下拉框中选择您的用户名,否则输入您的用 户名。 用户名将被打印在报告中,保存在文件的历史记录中,以便于您追踪是谁创建和修改 了该文件。 如果您不想显示用户名提示对话框,您可以不选择“Show at program”,这样以来, 最后注册使用用户名就会被默认为当前用户,自动加载。 3 从 Extras 菜单中选择 Configuration,弹出 GeneTools configuration (软件属性 设置)对话框:

Rotor-Gene操作手册8.24

Rotor-Gene操作手册8.24

Rotor-Gene是一套实时显示DNA扩增和杂交过程的循环变温系统。

该装置能在其36孔转轮上容纳36个0.2 ml的标准离心管。

72孔的转头还能装上一种特殊的四联管,这种0.1 ml 的小管4个连在一起。

反应过程中转头以500 rpm旋转。

注意:转头旋转时要装满管子,不管是72孔还是36孔的转头。

如果样品管数不够,将空管填满转头,这将保证在旋转时每管受热的均一性,保证实验结果准确性。

Rotor-Gene有4个检测通道,通道1用于510 nm检测,通道2用于550 nm检测,通道3用于585 nm检测,通道4用于625 nm检测从而允许四种不同样品的同时检测。

当样品管转到检测通道时,高能量的LED发出激光激发样品,PMT检测收集信号(见下图)。

数据被传送到PC机桌面上并进行一系列处理后被实时地显示在屏幕上,以纵坐标是信号强弱,横坐标是循环数输出。

2.安装与维护2.1 安装Rotor-Gene与PC机都连接于UPS上。

2.2 维护用户唯一需要做的维护措施是保持透镜清洁,避免灰尘积累。

建议在不使用Rotor-Gene 时,盖子要盖好以免灰尘落进加热腔中。

反应舱侧壁上有透镜,发出的激光经过该透镜。

透镜应避免灰尘,但是如果样品管不干净,或是湿的,则有可能在旋转时将灰尘颗粒、水份甩到透镜上。

在透镜需要清洁时,可将转轮拆下,只要拧松上面的螺帽即可,然后用酒精棉球擦洗(建议由工程师进行),用户也可以自己用洗耳球将透镜口的灰尘吹出。

3.运行Rotor-Gene之前阅读以下注意事项:1)保证样品放满36孔或72孔,不足时用空管填满。

2)保证软件设置不在虚拟机状态。

从<File>进入<set up>。

3)运行程序前,保证Rotor-Gene处于“READY”状态,否则将无法设置“检测灵敏度”,也记录不到信号。

4)尽量使用进口的0.2mlPCR管(0.1为corbett research公司专配),如使用国产PCR管,一定要使用平头管盖PCR管,放入转子后加上RG3000专配的压环,将旋钮转紧.后才可以做PCR扩增.。

计量螺旋操作说明书_通用版

计量螺旋操作说明书_通用版

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计量螺旋输送机操作说明书
文档号.
TP 070000 - 00
13.6. 13.7. 13.8. 13.9. 14. 15. 15.1. 15.2. 15.3. 15.4. 15.5. 15.6. 15.7. 16.
替换链条 (适用于带链式驱动单元的型号) ....................................27 替换销钉挠性联轴器及其销钉 ...............................................27 替换电动变速箱 ...........................................................28 替换电机 .................................................................28 可能的故障、故障症状以及如何消除故障.....................................29 备品备件产品目录 ........................................................30 输送机本体 ...............................................................30 输送机驱动单元(含链式驱动) .............................................31 输送机驱动单元(销钉挠性联轴器) ...........................................32 输送机驱动单元(螺旋轴安装变速箱) .......................................33 主轴轴承 (浮动) ..........................................................34 主轴轴承(固定) .........................................................35 旋转运动传感器 ...........................................................36 运行日志草稿 ............................................................37

protaper使用方法

protaper使用方法

protaper使用方法、器械包括六根器械:Sx、S1、S2、F1、F2、F3.Protaper 手用器械的基本使用顺序1. 建立进入潜行管的直线入口2. 用次氯酸钠和EDTA交替冲洗3. 用8# 10# 15# K 锉直到估计的工作长度(EWL)4. 使用S1 到达工作长度5. 使用15# K 锉测量工作长度(很多时候我们在预备一定程度后还要重复测根管长度,尽量做到更准确)6. 如果需要,使用Sx 打开根管口(解除冠部阻力)7. S1 到工作长度8. 用次氯酸钠和EDTA充分冲洗9. S2到工作长度10. 用次氯酸钠和EDTA充分冲洗11. F1 到工作长度12. 用次氯酸钠和EDTA充分冲洗13. F2 到工作长度——最低限度14. 用次氯酸钠和EDTA充分冲洗15. 如果必要,F3到工作长度(F1直径0.2mm, F2直径0.25mm F3直径0.3mm)16. 所有的切割牙本质作用均由旋转动作完成17. 旋转量如遇到锁定现象,反向旋转取出器械18. 如果使用机旋转器械,可继续使用a. 开髓b. 用10# and 15# Kfile or K reamer 探查并建立根管通道。

C.如果15#锉能达到工作长度,贝U直接进行根管成形;如果15#锉不能到达工作长度,须用S1和SX锉建立根管冠1/3的straight line 通道1. S1不能超过15#锉的深度;2. 当根管口较窄时,建议配合使用S1和SX进行根管口成形;d. 再次探查根管,确定工作长度。

1. 测量长度时,保持髓腔干燥,根管内保持一定的湿度;2.患者的舌和唇都不能接触挫针, 测量挫针不能与其他器械接触操作时,如遇阻力,应及时取出,清除锉表面的牙本质碎屑。

试20# 主牙胶尖,如果20# 主牙胶尖能到达工作长度,则根管预备已完成,可进行根管充填。

(h. 如果根尖孔较大时,20#牙胶尖超出根尖孔,须选用F2 锉进行根尖区预备,使25#牙胶尖能达到恰充填。

pLenti-KBTBD6-sgRNA 产品介绍说明书

pLenti-KBTBD6-sgRNA 产品介绍说明书

pLenti-KBTBD6-sgRNA产品简介:pLenti-KBTBD6-sgRNA (KBTBD6基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA 和puromycin 抗性基因的质粒。

用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因,或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。

本质粒中sgRNA 的有效性已经通过T7EI 法的验证。

本质粒在细菌中为Amp 抗性,全长约13,000bp 。

本质粒的关键图谱信息请参考图1。

本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除,以及通过puromycin 筛选稳定细胞株;也可以与pMDLg 、Rev 及VSV-g 共转HEK293T 细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装,然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。

图1. 表达sgRNA 、Cas9和puromycin 抗性的pLenti-sgRNA 质粒关键图谱信息。

本质粒中的sgRNA 基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA 快速筛选和验证体系获得,sgRNA 的有效性已经通过T7EI 法验证。

本质粒用于实验时,建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP 的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。

碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的KBTBD6基因敲除的质粒(L09320 pLenti-KBTBD6-sgRNA)、慢病毒(L09321 KBTBD6 Knockout Lentivirus)、HEK293T 细胞(L09322 KBTBD6 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T 敲除细胞的RIPA 裂解液(L09323 KBTBD6 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T 敲除细胞的Trizol 裂解液(L09324 KBTBD6 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品,具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。

载体构建步骤

载体构建步骤

一.载体酶切线性化(TOYOBO EcoR I)1.载体pCDNA浓度0.8 ug/ul2.酶切体系(总50ul体系)pCDNA 3ul10*H Buffer 5ulddH2O 41ulEcoR I 1ul(8U/ul)3.反应条件37°C 1h 至多2h*已经试过37°C过夜,本以为会酶切充分,但是不想把条带全切成小片段了,而且电泳后是一条宽宽的泳谱*另外,多次酶切证实,所加的酶量过多在酶切一小时的情况下仍然会出现酶切过度的情况,尽可能按照说明书上的量和时间做二.取2ul稀释成5ul于1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定有无条带及大小用大凝胶回收pcDNA(按2.5:1加入SYBR Green)电泳30min准备两支EPPendorf管,调60°C水浴锅切胶称重(1.5ml EPPendorf管重约0.82g)三.OMEGA gel purification kit回收pcDNA1.平衡柱子加200ulBuffer GPS到DNA收集柱中,静置4min,12000xg*2min,加700ulDEPC处理H2O,12000xg*2min2.溶胶按1ml/kg的比例加Binding Buffer到凝胶中3.60°C水浴7mins,迅速转移至DNA收集柱中(至多700ul,超过的再转移一次),10000xg*1min,弃收集管中的液体4.加300ulBinding Buffer,10000xg*1min,弃收集管中的液体5.加700ulwash Buffer,10000xg*1min,弃收集管中的液体6.加350ulwash Buffer,10000xg*1min,弃收集管中的液体7.最大转速(>13000rpm)空转2min,弃收集管8.转移收集柱至1.5mlEPPendorf管,打开盖子静置2min9.加30ulElution Buffer静置2min,最大转速1.5min,弃收集柱10.取2ul稀释成5ul点胶*所加Elution Buffer的量是根据所纯化的产物的量来判断的,如果回收产物较多可以增加其量至50ul*纯化的理论效率为70%,如果先加一次Elution Buffer 20ul,静置2min,1000xg*1min,然后再加一次Elution Buffer20ul,静置离心。

Protarper机扩使用方法

Protarper机扩使用方法

Protarper机扩使用方法使用原则:1. 使用器械直至遇到轻微阻力,请不要施加压力2. 在使用器械时一定要充分冲洗和润滑根管3. 使用适宜的完成挫顺入根管,达到预期的长度… 然后随即拔出挫针4. 使用250-350 rpm的固定转速旋转5. 经常清洁挫针的凹槽,并检查是否有扭曲变形和疲劳的迹象6.?器械寻直线进入根管7. 始终保持根管湿润,并使用手用器械获得可以反复出入的顺滑根管通道操作顺序:根管探查:使用10号K型不锈钢手用挫针,轻轻地往复运动。

不要用力,逐渐前进直至达到略短于预期的工作长度。

在髓腔内贮满Glyde 或次氯酸钠 (NaOCI),进行最初的根管润滑和通入。

现在首先使用带有紫色圈环的 S1 塑形挫作为ProTaper 使用顺序的起始。

将S1 挫插入根管并向根尖方向移动,直至略短于手用挫针到达的深度。

对于比较困难的根管,可以来回扩挫一两次,以扩大根管的冠2/3。

冲洗根管并重新使用10号的K型手用挫针将碎屑带出,然后再次冲洗。

然后使用Sx 挫 (不带颜色的圈环) 和刷划的动作,选择性地切削牙本质,使根管远离根分叉的危险区域并获得笔直的根管入口。

此时入口更加通畅,将Sx 挫稍稍向根管深部顺入,直至感到轻微的阻力。

感到阻力之后就以从根尖部向冠部拂刷的动作从根管内抽出。

继续使用Sx 挫,直至挫针刃部长度的2/3都位于根管口的下方。

不要忘记冲洗根管。

当完成了根管的预扩大过程,根管冠部2/3的通道都已经预备好之后,使用预弯的10号手用挫针贯通根管剩余的部分,确定根尖孔和工作长度。

在确定好工作长度和得到了通向根尖的顺滑通道之后,就使用S1 塑形挫达到工作长度。

在使用S1挫之后,冲洗根管,并使用手柄上带有白色圈环的S2 塑形挫。

这一挫针将首次达到工作长度的全长,之后,冲洗根管。

当根管的冠部2/3已经预备好的时候,就可以完成根尖1/3的预备了。

F1完成挫有一个黄色的圈环 (ISO 20号),在根管内充满灌洗液的情况下,使用F1挫达到工作长度并随即拔出。

c16全自动核酸提取仪操作说明

c16全自动核酸提取仪操作说明

c16全自动核酸提取仪操作说明仪器构造简介:1 触控屏HID-Pro 3202 仪器前门3 样品盘适配器4 LED指示灯5 触摸感应器1 带滤芯的枪头2 收集管3 枪头、洗脱管放置架4 压板5 样品槽(可直接放置试剂板或加装适配器后放置试剂条)6 传送轨道7 试剂条适配器样品架穿孔工具1 InnuPure接口2 网络接口3 USB接口简易操作说明:1.插上仪器电源线,打开仪器背部的电源开关,仪器前面LED指示灯显示红色,此时仪器为待机状态。

用手指轻触触摸感应器圆形键一秒钟(注意,不要使劲按),手指拿开后LED指示灯由红色变为绿色,此时仪器为工作状态。

开机后界面如下图所示:Menu:菜单Select protocol:选择程序Tools:工具Settings:一般设置2.样品准备和纯化1)样品盘放入样品架,打开夹板。

2)将试剂板放入样品槽。

试剂板上的红线要与样品槽上的红点对齐。

3)将条管适配器放入样品槽。

同样适配器上的红点要与样品槽上的红点对齐。

4)将试剂条放入样品槽。

注意:有“AJ”字样的一头朝向样品盘上刻字的一边。

5)试剂条管放完后,放下压板。

6)放入枪头和收集管。

注意:没放试剂条的位置不要放。

7)将试剂条管第一和第三孔刺穿,可以使用穿孔工具也可以使用干净的枪头。

(“AJ”字样边为第一孔)8)将裂解后的样品加入第一孔。

(具体操作详见试剂盒说明)9)准备好的样品盘放入仪器内,轻推,样品盘会自动进入。

10)根据起始样本选择合适的程序,点击开始即可。

11)纯化完成后样品盘会自动退出,盖子盖好纯化产物放冰箱保存待用。

3.软件功能介绍①菜单:设置新用户、设置开机密码等②日期时间:设置日期时间③选择程序:开始、导入、删除程序④工具:自动校正、仪器初始化、磁力测试等仪器自检功能⑤一般设置:用户管理、语言、更新等⑥版本信息。

T4 DNA Ligase使用说明书

T4 DNA Ligase使用说明书

T4 DNA Ligase使 用 说 明 书TaKaRa Code: D2011A包 装 :T4 DNA Ligase(350 U/μl) 25,000 Units10×T4 DNA Ligase Buffer 1 ml保 存 : -20℃●制品说明本酶催化相邻DNA链的5’-P末端和3’-OH末端以磷酸二酯键结合的反应,需ATP作辅酶。

本酶不仅可以催化粘性末端之间或平滑末端之间的DNA的连接,也可以催化DNA与RNA之间以及少数RNA之间的连接。

●酶贮存溶液Tris-HCl(pH 7.5) 10 mMKCl 50 mMDTT 1 mMEDTA 0.1 mMGlycerol 50 %●起 源: Escherichia coli carrying the plasmid that enable highly expression of T4 DNALigase gene。

●活性定义在20 μl的连接反应体系中,6 μg的λDNA-Hin d III的分解物在16℃下反应30分钟时,有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

本酶的1 U相当于ATP-PPi交换反应中0.008 Weiss Unit。

●纯 度1)2,000 U的本酶和1 μg的λ-Hin d III片段在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

2)2,000 U的本酶和1 μg的Supercoiled pBR322 DNA在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

3)2,000 U的本酶和1 μg的16S,23S rRNA在37℃下反应16小时,RNA的电泳谱带不发生变化。

●用 途1)DNA片段和载体DNA的连接。

2)DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。

●使用注意连接反应因末端碱基顺序的不同而反应速度各异,一般有下列倾向:突出末端:Hin d III>Pst I>Eco R I>Bam H I>Sal I平滑末端:Hae III>Alu I>Hin c II>Sma IEco R V>Sca I>Pvu II>Nru I其中连接Hin d III末端的速度约为连接Sal I末端速度的10~40倍;而连接Hae III末端的速度约为连接Sma I末端速度的5~10倍。

Brightspeed 场地准备手册(多层螺旋CT)

Brightspeed 场地准备手册(多层螺旋CT)

否 否
日期
4.备注:
签字 医院项目负责人:
日期:
GE 公司项目工程师:
日期:
g GE 梦想启动未来
场地准备技术要求
场 地 准 备 技 术 要 求
第1页
g GE 梦想启动未来
场地准备技术要求
房间尺寸要求:(参见图一)
1. 扫描间推荐净尺寸(长 x 宽 x 高) ·······6.0m x 4.8m x 2.8m 2. 病人及设备出入门推荐净尺寸(宽 x 高) ····1.3m x 2.1m 3. 与设备出入门相临走廊的推荐宽度 ······2.5m 4. 观察窗参考尺寸(宽 x 高) ··········1.5m x 0.8m 5. 窗底边距地面 ···············0.8m 6. 操作间推荐净尺寸(长 x 宽 x 高) ·······3.0m x 4.5m x 2.8m 7. 操作间门推荐净尺寸(宽 x 高) ········1.0m x 2.0m 8. 设备间推荐净尺寸(长 x 宽 x 高) ·······3.0m x 2.2m x 2.8m
注: PE线除了在总配电箱处和N线相接以外,其他各分箱处均不得相连接。
B. 若院方提供的电源供电制式为 TN-C, 必须将其制式改为 TN-C-S, 在 GE 配电柜的前一级 配电柜将 PEN 线分成与 PEN 线等截面的 PE 线和 N 线, 同时须在 GE 设备附近就近设置一 接地电阻小于 2 欧姆的重复接地极, 并将此接地极与 GE 设备配电柜内的 PE 端子相连接, 具体接法如下图所示:














2.资料移交

GravityPLUS 3D细胞悬滴培养板操作手册

GravityPLUS 3D细胞悬滴培养板操作手册
Figure 4: HCT-116 coloncarcinoma microtissue cultured in GravityTRAP™. Picture acquisition with a Zeiss Axiovert25 microscope, 5× objective.
6

Advantages of the GravityPLUS™ Kit:
1. Robust hanging-drop spheroid formation using GravityPLUS™ Plate
2. Straightforward spheroid transfer to GravityTRAP™ Plate
The GravityTRAP™ Plate
The GravityTRAP™ Plate (Tissue Receiver and Assay Plate) is a special nonadhesively coated 96-well microtiter plate. It is designed to receive and accomodate microtissues for convenient long-term cultivation and analysis. Microtissues are positioned in an observation chamber at the bottom of each well, which prevents inadvertent aspiration and loss during medium exchange.
GravityPLUS™ Kit Manual
Figure 3: GravityTRAP™ Tissue Receiver and Assay Plate – arrows indicating positioning pins for precise transfer of microtissues from the GravityPLUS™ hanging drop plate.
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42、所以人员做到‘三不伤害’,‘不伤害别人’‘不被别人伤害’‘不伤害自己’。
钢筋笼加工焊接设备使用
1、钢筋笼的加工必须符合设计要求,用料符合标准。
2、钢筋笼的加工长度要和孔深基本一致,加工数量要听从管理人员的安排,以免造成不必要的浪费。
3、钢筋机械应选择坚实平整的地面,放置平稳。非作业人员禁止进入施工现场。
14、钢筋弯曲机工作时,弯曲钢筋的旋转半径和机械部设固定销的一侧不准站人,弯曲好的半成品应堆放整齐,弯钩不得向上。
15、弯曲未经冷却或带有锈蚀的钢筋时,操作人员应戴好防护眼镜和口罩,作业过程中不得用手清除金属屑。
16、夜间作业时,照明设施应在张拉危险区外。当需要装设在场地上空时,其高度应超过5m,灯泡应加防护罩。
4、作业前必须检查机械设备、工作环境、照明设施等,确认符合安全要求后方可作业。
5、机械作业时,操作人员不得戴手套,女工作业时长发不得露在外面,并应戴好工作帽。作业过程中严禁进行检修。加油或更换部件等。
6、机械的链条=齿轮和皮带等传动部分,必须安装防护罩或 防护板。
7、钢筋机械 要做好接零或接地保护,安装漏电保护器。
11、高处作业一定要有安全登高设施并布置合理,高处作业人员应以规定的梯道上下。
13、启动前,应将操纵杆放在空挡位置。启动后,应作空运转试验,检查仪表、温度、音响、制动等各项工作正常,方可作业。
14、桩机移位时应有专人指挥,并安排人员移动电源线以防碰压。支脚下松软时应用枕木等辅垫以保证接地比压。
15、桩机移动、回转时严禁用上盘、履靴顶土或排除障碍物。
特别提示:钻机、回转时移动前应及时清土、清障处理;支腿支起否则极易发生钻机损坏事故,影响正常施工。
39、桩机操作,不得野蛮操作,禁止没有经过培训人员进行操作。禁止野蛮维修拆装。
40、机组人员作登高检查或维修时,必须系安全带;工具和其他物件应放在工具包内,高空人员不得向下随意抛物。未系安全带就登高作业者,班组罚款2000元,个人罚款500元。
41、现场一切辅助施工车辆人员,必须听从桩机现场管理人员或桩机组长调度安排,在没有使用时,必须开到安全距离停放,司机不得随意到桩机附近闲逛玩耍。
7、高空作业人员作业前必须认真检查机械设备、用具、安全帽、安全带等有无损坏,确保机械性能良好及各种用具无异常现象方能上岗操作。
8、不得乘坐非乘人的升降设备上下,也不得跟随起吊件上下。
9、高空作业时,在到达作业地方时,第一件事,就是把安全绳挂到牢靠的地方。
10、高空作业,一定要胆大心细,沉稳可靠者操作。作业时一定站稳,防止摔倒或作业时用力过猛摔倒。
3、安全带(索):
①安全带(索)应高挂低用,防止摆动和碰撞,安全带(索)上各种部件不得任意拆掉。
②安全带应经常性作重力试验,试验方法为:用80kg重的砂袋做自由落体试验,未出现破损,断裂者方可继续使用。若有轻微破损,都不得进入工地现场使用。
③安全带(索)若外观有破损和发现异味(发霉味)时,立即更换。
基泰长螺旋桩机操作手册
1、桩机司机必须经培训合格后,方可上机操作,所有工作人员应穿绝缘鞋,戴安全帽。
2、桩机应配正副司机各一人,司机酒后或患病不得上机操作。
3、施工现场,非工作人员不得进入。
4.钻机操作人员必须按规定正确着装使用个人劳动保护用品。
5、桩机司机必须进行设备的日常维护保养,对机械状况认真填写记录。
6、桩机司机必须对引孔或浇灌混凝土起止时间深度,详细记录,妥善保管。最后交给管理人员。
7、每次组装设备时,对设备进行进行全面维修保养,对易损件进行检查更换,对设备润滑部分进行加油保养,对电器设备检查紧固绝缘。
8、工作前每个班组应检查电机及其它电器绝缘情况,对钻杆链接螺丝以及卷扬机钢绳和传动部件进行检查紧固,发现问题随即处理。对润滑油、机油、液压油进行检查添加。
20、钻孔时注意调整立柱垂直度,并应使支脚与履靴同时接地。
21、施钻时,应先将钻杆缓慢放下,使钻头对准桩位,先使钻头接触地面,再使钻杆转动,不得晃动钻杆。
22、遇到孤石,立即停机,报告现在管理人员。
23、钻孔中卡钻时,应立即切断电源,停止下钻。未查明原因前,不得强行启动。
24、钻孔时,当机架出现摇晃、移动、偏斜或钻头内发出有节奏的响声时,应立即停钻,经处理后,方可继续施钻。
33、钻机作业中,电缆应有专人负责收放,严禁一切车辆碾压。如车辆必须通过时,必须挖沟或用木方等把电缆保护起来才能通过。如遇停电,应将各种控制器放置零位,切断电源,将钻头接触地面。
34、钻孔时,严禁用手清除螺旋片中的泥土。发现紧固螺栓松动时,应立即停机,在紧固后方可继续作业。
35、作业后,应将钻杆及钻头全部提升至孔外,先清除钻杆和螺旋叶片上的泥土,再将钻头按下接触地面,各部制动住,操纵杆放到空挡位置,切断电源。
6、作业时应穿戴防护服、绝缘鞋、电焊手套、防护面罩、护目镜等防护用品,高处作业时需系好安全带。
7、在易燃易爆气体或液体扩散区域内、承压状态的压力容器及管道、带电设备、装有易燃易爆物品的容器内以及受力构件上严禁焊接或切割。严禁在已喷涂过油漆和塑料的容器内焊接。
8、施焊地点潮湿时,焊工应站在干燥的绝缘板或胶垫上作业,配合人员应穿绝缘鞋或站在绝缘板上。绝缘鞋的绝缘情况应定期检查。
9、严禁用拖拉电缆的方法移动焊机,移动焊机时必须切断电源,焊接中途突然停电,必须立即切断电源。
10、高空焊接或切割时,必须系好安全带,焊接周围和下方应采取防火措施,并应设专人监护。
11、当清除焊缝焊渣时,应戴防护眼镜,头部应避开焊渣飞溅方向。
气焊与气割的使用
1、氧气瓶和乙炔瓶应有明显的标志,氧气瓶表面涂有天蓝色并设有黑色“氧气”字样,乙炔瓶瓶体一般为白色,并标有红色“乙炔”和“不可进火”字样。
④安全带(索)使用3年后,必须立即报废,不得进入现场使用。
4、高空作业人员要定期体检,必要时应随时检查,发现不宜登高的病症则不应登高作业,并严禁酒后登高作业。
5、高空作业人员必须衣着灵便,穿软底防滑鞋,而且禁止穿拖鞋、凉鞋、高跟鞋和其它易滑鞋。
6、高空作业人员应认真做到“十不准”:一不准违章作业;二不准工作前和工作时间内喝酒;三不准在不安全的位置上休息;四不准随意往下面扔东西;五严重睡眠不足不准进行高处作业;六不准打赌斗气;七不准乱动机构、消防及危险用品用具;八不准违反规定要求使用安全用品、用具;九不准在高处作业区域追逐打闹;十不准随意拆卸、损坏安全用品、用具及设施。
36、桩机正在作业时,操作人员不得离开岗位。作业中,因故障或其它原因停机时间长,应把支架打好,做好警示隔离工作。
37、本机在六级以下风力工作。在大风雨雪天气应停止施工,且在大风时应加缆绳予以保护。雷雨天气应该把电源切断,关好配电箱和驾驶室门窗。人员不得靠近桩机。
38、施工中钻孔时下放钻头,应当时刻关注电流表,电流过大时禁止下放,应空转一会,电流恢复正常再缓慢下放。施工中若桩机回转支路频繁自动停止,其一应检查电机综合保护器电流刻度调节值是否合适,其二应及时排除桩机回转过程中的障碍。
以上条例经现场管理人员发现,不严格执行人员,班组罚款1000元,个人罚款300元。屡教不改者予以解聘。
基泰高空作业人员安全操作规程
1、高空作业必须正确系挂安全带,安全带须符合现行国家最新标准的要求,不能使用不合格的材料做的安全带,安全带每次使用前应按规定进行受力检查。
2、安全帽:在配戴安全帽时,应先检查安全帽外壳是否有破损,内部帽带是否齐全,无破损、发霉;帽扣是否有脱落、破坏;如发现以上情况,应及时更换安全帽,不得戴有“病”的安全帽进入现场进行工作。
9、桩机施工现场应在离开高压电线(缆)、油气管道的有关规定危险距离以外工作。
10、起落立柱应有专人指挥与操作,支脚与履靴应同时接地,前支腿伸于前方,立柱、斜撑下严禁站人。
11、钻机应放置平稳、坚实。并应用自动微调或线锤调整挺杆,使之保持垂直。
12、启动前应检查并确认钻机各部件连接牢固,传动带的松紧度适当,减速箱内油位符合规定,钻深限位报警装置有效。
2、氧气瓶应设有防震圈和安全帽,并应与气压易燃汽瓶、油脂和易燃易爆物品分别存放,且不得同车运输。
3、氧气瓶严禁在阳光下曝晒和沾染油脂,软管接头不得采用铜制材料制作,夏天露天作业时,应搭设防晒罩、棚。距明火的距离不得小于10m,与乙炔瓶的距离不得小于5m。
4、气瓶与电焊机在同一作业点使用时,瓶底应垫上绝缘物,防止气瓶带电。与气瓶接触的管道和设备应有接地装置,防止产生静电造成燃烧和爆炸。
29、同一根桩的混凝土必须连续浇注完毕。
30、正在浇注混凝土或下放钢筋笼的桩孔周围10m半径,非必须的操作人员,其他人一律退开。
31、吊装振动棒和钢筋笼时,钢绳必须挂装牢靠,保险锁死,方圆10m半径内,人员不得靠近。
32、震动棒在没有浇灌好混凝土时,不得提起悬挂在空中,必须放在地上。在下放钢筋笼以后,必须马上放到地上。
17、钢筋机械作业完毕,应切断电源并锁好开关箱门。
电焊机的使用
1、电焊机安装时应做好防雨措施,以免受潮。一次线长度不应超过5m,二次线长度不应超过30m,一二次接线柱处应加设防护罩。严禁利用建筑物的金属结构、管道、轨道或其他金属物体搭接行程焊接回路。
2、电焊机外壳必须设有可靠的保护接零,必须定期检查电焊机的保护接零线。接线部分不得腐蚀、受潮及松动。
16、施工现场不平度应小于2°,地面承载力不小于100kPa。
17、做业区应有明显标志或围栏,非做业人员不得入内。钻杆运转过程中,操作人员必须在距离桩锤中心5m以外监视。
18、机组人员登高检查或维修时,必须系安全带;工具和其他物件应放入工具包内,高空做业不但饿向下随意抛物。
19、所有电力驱动桩工机械斗都应按照有关规定进行接零保护,并在负荷线首端安装漏电保护器。
25、引孔达到要求时,应停止钻杆下放,稍松数圈,使管内存土全部输送到地面,即停钻。
26、打桩过程中,遇到地坪隆起或下陷时,应随时调平打桩机。
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