动生化

DNA 复制：以DNA 两条单链为模板，安碱基互补配对原则合成两条新DNA 互补链的过程 cAMP:调节代谢信号的放大物质脂肪合成场所：（肝肾脑乳腺及脂肪等组织的）胞液PPP 场所：胞浆EMP 场所：胞浆TCA 场所：线粒体基质β—氧化场所：线粒体基质一分子葡萄糖完全氧化释放总能：32或30ATPPPP 反应物6 G-6-P + 12NADP+ +7 H2O 生成物： 5 G-6-P + 6CO2 + 12NADPH +12H 核糖体区别：原核生物：70S 核糖体（30S 亚基+50S 亚基）真核生物：80S 核糖体（40S 亚基+60S 亚基）PCP 三个阶段：高温变性、低温退火和中温延伸三个阶段名词解释蛋白质的一级结构 定义：就是蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序(sequence)是蛋白质最基本的结构。

它是由基因上遗传密码的排列顺序所决定的。

二级结构是在蛋白质分子中的局部区域内氨基酸残基的有规则的排列，常见的二级结构有α-螺旋和β-折叠。

二级结构是通过骨架上的羰基和酰胺基团之间形成的氢键维持的。

三级结构是蛋白质分子处于它的天然折叠状态的三维构象。

三级结构是在二级结构的基础上进一步盘绕、折叠形成的。

三级结构主要是靠氨基酸侧链之间的疏水相互作用、氢键范德华力和盐键（静电作用力）维持的。

四级结构多亚基蛋白质的三维结构。

实际上是具有三级结构的多肽链（亚基）以适当方式聚合所呈现出的三维结构。

超二级结构：也称之基元（motif ）。

在蛋白质中，特别是球蛋白中，经常可以看到由若干相邻的二级结构单元组合在一起，彼此相互作用，形成的有规则、在空间上能辨认的二级结构组合体。

结构域：在较大的蛋白质分子里，多肽链在二级结构基础上折叠成几个相对独立的球状区域。

它是较大球蛋白分子三级结构的折叠单位。

在蛋白质三级结构内的独立折叠单元。

结构域通常都是几个超二级结构单元的组合。

在肝细胞中脂肪酸的氧化不完全，经常出现一些脂肪酸氧化的中间产物，即乙酰乙酸、β—羟丁酸和丙酮，统称为酮体蛋白质的生理价值是指饲料蛋白质被动物机体合成组织蛋白质的利用率。

即100×氮的保留量氮的吸收量= 蛋白质的生理价值蛋白质的生理价值越高，其最低需要量就越小；反之就越大。

除了少数蛋白外，几乎所有分泌蛋白都在N-末端含有一段信号序列（Signal sequences ）或称为信号肽 。

信号识别蛋白（SRP ）能识别正在合成多肽并将要通过内质网膜的核糖体，与信号肽相结合，形成SRP-信号肽-核糖体复合物，并暂时停止多肽链的合成。

随即SRP 将复合体从细胞质引向内质网膜。

结合酶中的蛋白质称为酶蛋白(apoenzyme)；非蛋白质的小分子物质称为辅助因子(Cofactor)。

酶蛋白与辅助因子结合之后所形成的复合物，称为“全酶”(ho1oenzyme)。

全酶 ＝ 酶蛋白 十 辅助因子酶活力单位（U，active unit）：酶活力的度量单位。

1961年国际酶学会议规定：1个酶活力单位是指在特定条件（25℃，其它为最适条件）下，在1分钟内能转化1微摩尔底物的酶量，或是转化底物中1微摩尔的有关基团的酶量。

米氏方程（Michaelis-Menten equation）:表示一个酶促反应的起始速度（v）与底物浓度（[S]）关系的速度方程，v＝Vmax[S]/（Km+[S]）酶的比活力：每毫克酶蛋白所具有的酶活力单位数，用U/mg蛋白、IU/mg蛋白、Kat/mg 蛋白表示实质表示单位蛋白质的催化能力有些酶除了活性中心外，还有一个或几个部位，当特异性分子非共价结合到这些部位时，可改变酶的构象，进而改变酶的活性，酶的这种调节作用称为变构调节(allosteric regulation)，受变构调节的酶称变构酶(allosteric enzyme)，也称为别构酶，这些特异性分子称为效应物(effector)。

底物水平磷酸化(substrate phosphorylation)：ADP或某些其它的核苷-5ˊ-二磷酸的磷酸化是通过来自一个非核苷酸底物的磷酰基的转移实现的。

这种磷酸化与电子传递链无关。

一碳单位（one carbon unit）即氨基酸在分解代谢过程中形成的具有一个碳原子的基团。

凡属于一碳单位的转移和代谢的过程，统称为一碳单位代谢，但不包括CO2与CH4的代谢解链温度Tm：通常将50％的DNA分子发生变性时的温度称为解链温度，一般用“Tm”符号表示。

DNA的Tm值一般在70一85℃之间。

复制是从DNA分子上的特定部位开始的，这一部位叫原点（origin）从原点开始同时向DNA链的两个方向进行，结果形成一个分叉，称为复制叉（fork）。

Y字型结构，在复制叉处作为模板的双链DNA解旋，同时合成新的DNA链。

半保留复制(s emiconservative replication)：DNA复制的一种方式。

每条链都可用作合成互补链的模板，合成出两分子的双链DNA，每个分子都是由一条亲代链和一条新合成的链组成。

单链结合蛋白（SSB，single-strand binding protein）:一种与单链DNA结合紧密的蛋白质，它的结合可以防止复制叉处的单链DNA本身重新折叠回双链区核心酶(core enzyme)：大肠杆菌的RNA聚合酶全酶由五个亚基（α2ββ'δ）组成，没有δ亚基的酶叫核心酶。

核心酶只能使已开始合成的RNA链延长，但不具有起始合成RNA 的能力，必需加入δ亚基才表现出全部聚合酶的活性。

互补DNA链（cDNA）：反转录酶以病毒RNA为模板，在引物参与下以四种dNTP为底物，按5’→3’方向催化合成一条与模板RNA互补的RNA-DNA杂交链，其中的DNA链称为互补DNA链（cDNA）。

然后再以新合成的RNA链为模板，合成另一条互补的DNA链，形成双链的DNA分子。

启动子（promoter）：DNA分子中RNA聚合酶能够结合并导致转录起始的序列。

信号识别蛋白（SRP）：能识别正在合成多肽并将要通过内质网膜的核糖体，与信号肽相结合，形成SRP-信号肽-核糖体复合物，并暂时停止多肽链的合成。

随即SRP将复合体从细胞质引向内质网膜。

Pribnow顺序（pribnow box）：现在发现原核生物的启动子顺序中存在两个共同的顺序，即-10顺序，也称为Pribnow顺序（pribnow box）和-35顺序。

-10的基本顺序是TA TAATG。

-10顺序被看作是双螺旋打开形成开放启动复合物的区域。

核不均一RNA〔hnRNA〕：在细胞内任何时候都存在着大量正在加工似乎无用的RNA分子。

这些分子总称。

核糖体（ribosome）：是蛋白质合成的主要场所。

它含有蛋白质合成中所需要的多种酶活性，能将mRNA分子的碱基顺序翻译成氨基酸顺序。

S.D序列：作为起始密码子的AUG通常离mRNA5’-末端约20-30个碱基，在这段前导顺序中，具有一段特殊顺序AGGAGGU，位于起始AUG之前的固定的位置上，称为S.D序列蛋白质:1、天然蛋白质因受物理、化学因素的影响，使蛋白质分子的构象发生了异常变化，从而导致生物活性的丧失以及物理、化学性质的异常变化。

这种现象称为蛋白质的变性蛋白质变性后的表现：生物活性丧失；溶解度降低，对于球状蛋白粘度增加；生化反应易进行；光吸收系数增大；组分和分子量不变。

引起蛋白质变性的主要因素:温度（热、冷）强酸、强碱尿素和盐酸胍的影响（破坏分子内部氢键、破坏疏水效应）表面活性剂的影响：如十二烷基硫酸钠（SDS）2、正电极性“赖、精、组”R基团有极性，且解离，在中性溶液中显碱性，亲水性强负电极性“天冬、谷氨酸”R基团有极性，且解离，在中性溶液中显酸性，亲水性强在紫外光区色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸有吸收光的能力。

其最大吸收波长(λ)分别为279、278、259nm。

3、溶液中氨基酸以两性离子的形式存在时，溶液的pH，称为该氨基酸的等电点，用pI表示。

一个氨基酸带电状况取决于所处溶液的pH，当pI < pH时，氨基酸带净的负电荷；当pI > pH时，带净的正电荷。

在一定的实验条件下，等电点是氨基酸的特征常数。

不同的氨基酸，由于R基结构的不同，而有不同的等电点。

当氨基酸处于等电点状态时，溶解度最小，容易发生沉淀；利用这一特性可以从各种氨基酸的混合物溶液中分离制取某种氨基酸。

4、显色：茚三酮反应茚三酮在弱酸性溶液中与氨基酸共热，具有游离氨基的氨基酸都生成紫色化合物（l470），而亚氨基酸，则生成黄色化合物双缩脲反应二个以上的肽键紫红色与2,4-二硝基氟苯反应（DNFB）DNFB在弱碱性溶液中与氨基酸发生取代反应，生成黄色化合物二硝基苯基氨基酸酚试剂反应Tyr的酚基将福林试剂还原6、测蛋白质含量方法7、镰刀型细胞贫血病（sickle-cell anemia）：血红蛋白分子遗传缺陷造成的一种疾病，病人的大部分红细胞呈镰刀状。

其特点是病人的血红蛋白β-亚基N端的第6个氨基酸残基是缬氨酸，而不是正常的谷氨酸残基。

血红蛋白分子一级结构上的轻微差别就可能导致功能上的很大不同，正常成年人血红蛋白中的β链的第六位的谷氨酸残基被缬氨酸取代就会导致镰刀形细胞贫血病的异常血红蛋白HbS 的生成。

8、酶活力测定方法分光光度法（spectrophotometry）多利用产物在紫外或可见光部分的光吸收性质，选择适当波长，测定反应过程的进行情况。

简便、节约时间和样品，可以检测nmol/L水平的变化。

荧光法(fluorometry)主要利用底物或产物的荧光性质。

灵敏度高，但易受到干扰。

同位素测定法同位素标记底物，反应后经分离，检测产物的脉冲数，即可换算成酶的活力单位。

灵敏度最高。

电化学方法：pH计、氧电极法9、酶的4种抑制作用酶促反应的速度也受到抑制剂的影响。

酶抑制剂可分为可逆和不可逆抑制剂。

可逆抑制剂与酶非共价结合，可逆抑制包括竞争性抑制（Km增加，而Vmax不变）、反竞争性抑制（Km 和Vmax都成比例地减少）、非竞争性抑制（Vmax减少、纯的非竞争性抑制Km不变，而混合型非竞争性抑制中Km增大或减少）。

不可逆抑制剂与酶共价结合，酶用不可逆抑制剂处理后，然后测定蛋白质片段的序列，有可能确定活性部位的氨基酸残基，有可能解释酶催10、米氏常数KmKm值表示酶与底物之间的亲和程度：Km值大表示亲和程度小，酶的催化活性低; Km值小表示亲和程度大,酶的催化活性高。

一般情况下，1/Km可以近似地表示酶对底物的亲和力大小，1/Km愈大，表明亲和力愈大。

11、糖酵解过程EMP场所：胞浆中每个分子葡萄糖经第一阶段共5个反应，消耗2个分子ATP为耗能过程第二阶段5个反应生成4个分子A TP为释能过程。

糖酵解是单糖分解代谢的共同途径。

催化糖酵解的10个酶都位于细胞质中。