色谱柱的维护保养
色谱柱的使用和维护
色谱柱的使用和维护
色谱柱是一种用于分离混合物的重要工具，广泛应用于化学分析、环
境检测、药物研发等领域。为了保证色谱柱的正常使用和延长其寿命，以
下将介绍色谱柱的使用和维护方法。
一、色谱柱的使用
1.色谱柱的激活
新购买的色谱柱通常需要进行激活处理，以去除柱内杂质和保证柱的
稳定性。常见的激活方法包括使用最终使用的溶剂/流动相进行洗脱或者
使用强极性溶液进行反向激活。激活后，需用洗脱溶剂或流动相进行平衡。
2.样品的前处理
样品的前处理对色谱柱的使用和维护至关重要。首先，要确保样品的
纯度和浓度，以避免对色谱柱产生污染。其次，对于有机溶剂溶解的样品，最好使用过滤器进行过滤，以防止固体颗粒和杂质进入色谱柱。
3.流动相的选择
正确选择和配置流动相对于色谱柱的使用非常重要。根据需要分离的
组分特性，选择合适的流动相性质和组成，并根据需要进行酸碱调节、添
加缓冲剂等。此外，注意保持流动相的流速稳定，并定期更换或再生。
4.检测器的设置
根据需要检测的组分，选择合适的检测器并进行适当的设置。常见的
检测器包括紫外-可见吸收光谱仪（UV-Vis）、荧光检测器、质谱仪等。
在使用检测器前，要确保其正常工作并进行校准。
5.流量控制
使用色谱仪时，应保持流量的稳定性。定期检查和校准流量控制器，
并调整至适当的设置，以确保色谱柱正常运行。
6.色谱条件的优化
根据分析需要，在保证分离效果的前提下，进行色谱条件的优化。包
括优化流速、温度、柱渗透性、梯度洗脱程序等，以提高分离效果和保护
色谱柱。
二、色谱柱的维护
1.洗脱和平衡
每次使用完色谱柱后，应进行洗脱以去除残留的样品和杂质，并用适
离子色谱柱维护
离子色谱柱维护
1.淋洗液环境密封保存，避免用水冲洗，在酸性或碱性条件下更容易抑制菌的生长。
2.长期不使用时，需定期用淋洗液清洗，防止内部干燥和菌生长。
3.运用2个月后用0.2mol/L的Nacl、含量1%的酒石酸溶液清洗，能够有效的维护色谱柱的性能。
4.如果长时间不再使用色谱柱，需用含量3%的硼酸密封连同抑制器放置在低温环境中保存。
5.尽量避免对污染较大的工业废水等进行分析，如果必须使用，需事先对选取的样品进行严格的前期处理、预处理。
液相色谱柱的维护与保养
液相色谱柱的维护与保养
液相色谱柱的维护与保养非常重要，可以延长柱的使用寿命并保证分离效果的稳定性。以下是液相色谱柱的维护与保养的一些建议：
1. 保持柱的洁净：在使用结束后，及时用纯水和有机溶剂洗净色谱柱。可以采用逆向流动的方法，即用纯水从柱底往上流动直到洗净。避免使用酸碱溶液以及有机溶剂中的含有杂质的溶液来清洗，避免杂质残留。
2. 避免干燥：柱在储存或者不使用时要避免干燥。可以用保湿的方式，例如在储存时使用密封塑料袋或保湿剂。避免长时间暴露在空气中，避免干燥引起的柱损坏。
3. 正确使用柱：避免使用超过柱最大压力或流速的方法进行色谱分离，这会导致柱壁破裂或分离效果恶化。遵守柱的使用说明和规格。
4. 定期检查：定期检查柱的使用情况，例如检查是否有柱壁表面损坏或吸附物的形成。如果发现有问题，应及时更换色谱柱。
5. 柱的再生：某些类型的液相色谱柱可以通过柱的再生来延长使用寿命。具体的再生方法可以参考柱的使用说明书或与供应商咨询。
6. 注意避免柱受到冲击：在搬运和使用过程中要轻拿轻放，避免柱受到冲击造成损坏。
总之，正确的维护与保养可以延长液相色谱柱的使用寿命并保证其分离效果的稳定性。根据柱的材质和类型，还可以采取适当的措施进行再生以延长柱的使用寿命。
液相色谱柱的保存 液相色谱维护和修理保养
液相色谱柱的保存液相色谱维护和修理保养
1.反相色谱柱每天试验后的保养：
使用缓冲液或含盐的流动相，试验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应当在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
2.长期保存色谱柱：
如色谱柱要长时间保存，必需存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度好是室温。
液相色谱柱的使用和维护
在液相色谱操作过程中，我们需要下面的问题，便利维护液相色谱柱。 A柱子在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。必需防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。 B.假如仪器用来做常规分析，样品种类有限，但分析次数多，则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。 C.避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的蓦地变化或者使液相色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形；柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料，因此在调整流速时应当缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。 D.应渐渐更改溶剂的构成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂更改为全部是水，反之亦然。 E.如使用柱温掌控装置时，应注意在通人流动相后才能升温。 F.一般说来液相色谱柱不
能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会快速降低柱效。 G.选择使用适合的流动相，以避开固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一个预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避开分析柱中的硅胶基质被溶解。 H.避开将基质多而杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。保护柱一般是填有相像固定相的短柱。保护柱可以而且应当常常更换。 I.常常用强溶剂冲洗液相色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂渐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50—75mL。 J.保存液相色谱柱时应将柱内充分乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。确定禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。 K.液相色谱柱使用过程中，假如压力上升，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进人柱内，使柱头被污染；假如柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头显现塌陷，死体积增大。 L.在完成分别分析工作之后，不能立刻就关机，需适时对色谱分析系统进行冲洗，一般0.5h以上，以除去液相色谱柱内的杂质。
液相色谱的维护保养
液相色谱的维护保养
液相色谱(LiquidChromatography,简称LC)是一种常用的色谱分析技术，广泛应用于化学、生物、医药等领域。为了保证LC的分析结果准确可靠，必须对仪器进行定期的维护保养。
1. 液相色谱系统的清洁
在使用液相色谱前，必须对系统进行清洁，以避免污染对结果的影响。清洁步骤包括：
- 清洗色谱柱：根据柱子类型选择合适的洗涤溶液，如纯水、乙腈、甲醇等，按照厂家提供的清洗步骤进行操作。
- 清洗进样器：将进样器从系统中拆下来，用洗涤溶液进行清洗，再用纯水冲洗干净。
- 清洗管路：将管路中的溶液排空，并用纯水进行多次冲洗，确保管路干净。
2. 液相色谱系统的保养
液相色谱系统的保养包括：
- 定期更换耗材：如柱子、进样器、滤膜等。
- 定期校准：校准泵的流量、检测器的灵敏度等参数，保证仪器的准确性。
- 定期检查电子元件：如检测器的灯管、电极等，保证其正常工作。
3. 液相色谱系统的存储
如果液相色谱系统长时间不用，必须进行正确的存储，以避免损
坏设备。存储步骤包括：
- 将溶液从系统中排空，清洁干净。
- 拆下柱子和进样器，将其分别用保护塞封住。
- 将检测器的灯管、电极等拆下，放在干燥、通风的地方存放。
以上是液相色谱维护保养的主要内容。只有定期进行维护，才能保证液相色谱系统的精准度和稳定性，获得准确可靠的分析结果。
色谱柱使用维护及解决方案
色谱柱使用维护及解决方案
色谱柱使用维护
1、色谱柱的使用说明：
（1）色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特别说明，均为评价报告所示的流动相。在使用前，确定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很简单析出，堵塞色谱柱。
（2）流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水可以是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。假如将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装
置应当定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0—8.0，BDSC18适合于碱性化合物，PH值适用范围为 2.0—10.0、当必需要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立刻用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。
（3）样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。在用正相色谱法分析样品时，全部的溶剂和样品应严格脱水。
2、色谱柱的保存：
（1）反相色谱柱每天试验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，试验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应当在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
色谱柱使用管理规程
色谱柱使用管理规程
一、目的和适用范围
为了规范色谱柱的使用，确保色谱分析的准确性和可靠性，特制定本
管理规程。本规程适用于实验室中使用的各类色谱柱。
二、工作原则
1.资源共享：实验室内的色谱柱应尽量共享使用，避免重复购买。
2.保养维护：色谱柱在使用过程中应定期进行保养维护，延长其使用
寿命。
3.检查验证：每次使用色谱柱前应进行检查和验证，确保其正常工作。
4.数据记录：使用色谱柱进行分析时应详细记录相关数据，以备后续
分析和验证使用。
三、色谱柱的存储和保养
1.存储条件：色谱柱应存放在干燥、阴凉、避光的地方，远离酸碱等
有害物质。
2.温度控制：色谱柱应避免暴露在高温环境中，存放温度一般不超过30℃。
3.包装保护：未使用的色谱柱应保持原包装完整，避免受潮、损坏等
情况。
4.清洗方法：使用完毕的色谱柱应及时进行清洗，避免残留物对下次
使用的影响。
5.使用周期：色谱柱的使用周期应根据实际情况确定，一般建议每个色谱柱使用不超过100次。
四、色谱柱的检查和验证
1.外观检查：每次使用色谱柱前应检查其外观是否完好，如有破损应立即更换。
2.连接检查：色谱柱的连接部分应检查是否松动，如有松动应重新连接或更换。
3.确认类型：使用色谱柱前应确认其类型和规格是否符合实验需求。
4.验证方法：使用标准样品对色谱柱进行验证，确认其分离效果和分析准确性。
五、色谱柱的使用记录
1.样品信息：每次使用色谱柱时应记录样品的基本信息，包括样品名称、浓度、体积等。
2.柱温记录：记录色谱柱的运行温度，以便后续分析结果的比对和验证。
3.运行参数：记录色谱柱的运行参数，包括流速、时间梯度等。
如何保护色谱柱柱效 色谱柱维护和修理保养
如何保护色谱柱柱效色谱柱维护和修理保养
1.色谱柱断裂
熔融石英色谱柱的聚酰亚胺涂层如有少许分裂它就会断裂。聚酰亚胺涂层可保护易碎的熔融石英管线。柱温箱持续的加热或冷却、柱温箱风扇的震动以及把色谱柱绕在圆形柱架上均会对管线造成压力。zui后在薄弱处发生断裂。通过轻划或磨损聚酰亚胺涂层会造成显现薄弱处。通常锋利的尖或边划管线时会造成划痕。色谱柱挂钩和标签、GC柱温箱的金属边、色谱柱切割器以及试验室试验台上的各种物品都带有锋利的尖或边。色谱柱自身断裂的情况很少。色谱柱制造业试图找出全部有缺陷的管线并避开在已制好的色谱柱中使用这些管线。
直径较大的色谱柱更简单断裂。也就是说在处理0.45—0.53mm 内径的管线时要比处理0.18—0.32mm内径的管线更加谨慎以防断裂。已断裂的色谱柱并非不能用。假如已断裂的色谱柱保持在高温下连续运行或运行多个温度程序，则将特别简单损坏。已断裂色谱柱的后半段暴露在高温的氧中会快速损坏固定相。而色谱柱的前半段因有载气通过仍会保持完好。假如已断裂的色谱柱未经加热而是仅在高温或含氧的环境下暴露很短时间，则后半段将不会受到任何严重损坏。可以通过安装接头来接上已断裂的色谱柱。任何合适的接头都可重新连接色谱柱。一支色谱柱上不能装入超过2—3个接头。多个接头会造成死体积（拖尾峰）问题。
2.热损坏
超杰出谱柱的温度上限会造成固定相和管表面的加速损坏。这样会造成色谱柱的过分流失，活性组分形成拖尾，以及/或降低柱效（分别度）。幸好热损坏是一个很慢的过程，因此，在色谱柱严重损坏之前还有一段很长的时间可在高于温度极限的条件下使用。当有氧存在时会大大加速热损坏。对有泄漏或载气中氧含量较高的色谱柱进行过度加热可快速并*地损坏该柱。将GC的柱温箱zui高温度设定为色谱柱温度极限或稍高于该温度极限是防止热损坏的zui 佳方法。这样可避开色谱柱意外的过热。即使色谱柱受到热损坏，仍旧可使用。把色谱柱从检测器上卸下来。在色谱柱的恒温温度极限下，将其加热8—16小时。把色谱柱接到检测器的一端截去10—15cm。按正常情况安装色谱柱并进行老化。色谱柱将不能恢复到原来的性能，但仍可使用。在热损坏之后色谱柱的寿命会缩短。
色谱仪的维护与保养
色谱仪的维护与保养
色谱仪是化学分析中常用的一种仪器设备，广泛应用于药品、食品、环境、化
工等行业的质量控制、科研与生产中。但是，由于色谱仪在工作过程中受到各种环境因素的影响，例如高温、高湿、腐蚀等，都会对色谱仪的性能和使用寿命产生影响。因此，科研人员在使用色谱仪时需要注意对其进行维护和保养，以确保其准确性和可靠性。
一、仪器维护
1.养护仪器外表面
色谱仪使用过程中，随着时间的推移，仪器外表会积累灰尘和油污，这些灰尘
和油污会引起仪器散热不畅，从而影响色谱仪的工作效率。因此，在使用后要及时清理仪器外表面，保持其干净整洁，以保持仪器正常工作，延长使用寿命。
2.保持仪器内部清洁
在色谱分析的过程中，色谱柱会被污物和其他杂质所污染，这将降低仪器的工
作效率和精度。为此，在每次使用后需要对色谱柱进行维护，清除污物和杂质，保持仪器内部的清洁，确保其正常工作。
3.维护仪器零部件
仪器的零部件是维护仪器正常运转的关键。因此，在使用过程中需要注意检查
仪器零部件的状况，如果发现损坏或失效的零部件，需要及时更换以保证仪器的正常工作。
二、仪器保养
1.清洗燃气管道
在色谱仪的使用过程中，燃气管道内会有黑色的污垢和油脂产生。这些污垢会
阻塞管道，降低燃气供应速度，从而导致燃气的供应不足，影响仪器的工作效率和精度。因此，在仪器使用一段时间后，需要清洗燃气管道，去除其中的油脂和污垢，以确保色谱仪的正常工作。
2.更换零件
在使用过程中，一些关键零部件可能会因为磨损或损坏而失效。为了保证色谱
仪的准确性和可靠性，在发现失效的零部件时，应及时更换。
气相色谱仪仪器设备维护保养内容
气相色谱仪仪器设备维护保养内容
气相色谱仪是一种用于化学分析的重要仪器。为了保证气相色谱仪的准确性和可靠性，在实验室中需要进行定期的维护和保养。本文将详细介绍气相色谱仪的各个部件的维护保养内容，并提供一步一步的操作指导。
1.气相色谱柱的维护保养
气相色谱柱是气相色谱仪的核心组成部分，
对仪器的分离效果和分析结果都有很大影响。因此，需要定期进行维护和保养。
-定期更换气相色谱柱：气相色谱柱会随
着使用时间的增长而老化，降低分离效果。一般
建议每3-6个月更换一次气相色谱柱，具体更换
周期应根据实际情况进行调整。
-清洗气相色谱柱：某些样品可能会在气
相色谱柱上留下残留物，影响下一次的分离效果。可以使用特定溶剂进行清洗，或者进行热解吸/
热脱附操作，将残留物清除。
-存储条件：气相色谱柱在存储过程中需
要注意避免高温、潮湿和光照。最好使用柱保真
器或气相色谱柱保护套进行保护，以延长柱的使
用寿命。
2.气源及气源管道的维护保养
气源是气相色谱仪运行的关键，气源管道的
维护保养能够保证气体供应的稳定性和纯度。
-定期更换气源：气源一般为氢气、氮气
和氦气。定期更换气源可以避免气源中杂质的积累，保证气体的纯度。
-定期清洗气源管道：气源管道中可能会
积累杂质和水分，影响气体的纯度和流动性。可
以采用气体反吹、溶解吸附剂或使用吹气软管进
行清洗。
3.检测器的维护保养
气相色谱仪的检测器是分析结果的直接来源，其维护保养至关重要。
-清洗检测器：定期清洗检测器可以去除
附着在检测器表面的污染物，保证分析结果的准
确性。
-校准检测器：定期对检测器进行校准，可以保证仪器的准确性和稳定性。
色谱柱维护保养方法
色谱柱维护保养方法
色谱柱维护保养非常重要，可以延长其使用寿命，并确保分离效果和分析结果的准确性。以下是常见的色谱柱维护保养方法：
1. 色谱柱的储存：如果打算长时间不使用色谱柱，可以将其封装，并储存在干燥、避光和温度适宜的地方，以防止柱内填料受潮、变质或分层。
2. 柱前保护：可以在色谱柱前端安装一个柱前保护器，以延长色谱柱的使用寿命。柱前保护器可以过滤掉样品中的大颗粒物质，防止其对色谱柱造成损害，并保护柱后的检测器。
3. 样品预处理：对样品进行合适的前处理，如过滤、稀释、净化等，可以减少对色谱柱的损害，减轻色谱柱的负担。
4. 样品pH调节：合适的pH值可以增强样品的溶解性，降低
颗粒物质的沉淀和析出，从而延长色谱柱的使用寿命。但要注意不要超出色谱柱的pH范围限制。
5. 洗脱溶剂选择：选择适合的洗脱溶剂可以有效地清洗色谱柱，去除残留物质，恢复柱性能。常用的洗脱溶剂包括纯水、有机溶剂、缓冲液等。选择洗脱溶剂时，要注意其对色谱柱填料的溶解性以及对分离结果的影响。
6. 色谱柱的受控使用：在使用色谱柱进行分析时，要注意避免超过柱压和最大样品容量的限制，避免样品直接接触到填料床层面，避免样品中含有腐蚀性物质等。
7. 定期检查：可以定期检查色谱柱的性能，如检查柱背压、峰形、峰对称性、分辨率等。
8. 色谱柱的再生：当色谱柱分离效果下降时，可以尝试使用一些再生方法，如洗脱溶剂冲洗、温度升高、pH调节等，以恢
复色谱柱的分离能力。
以上是色谱柱维护保养的一些常见方法，实际操作时应根据具体的色谱柱类型和样品特性进行调整。此外，根据色谱柱供应商的建议和操作手册，进行正确的操作和保养也是非常重要的。
如何保护高效液相色谱柱以提高其使用寿命 液相色谱操作规程
如何保护高效液相色谱柱以提高其使用寿命
液相色谱操作规程
色谱柱用久后常显现柱压上升，柱效降低，峰形畸变，保留时间更改等变化，如不实行适当措施，色谱柱将无法再使用，缩短色谱柱的使用寿命。在高效液相色谱仪的使用中
色谱柱用久后常显现柱压上升，柱效降低，峰形畸变，保留时间更改等变化，如不实行适当措施，色谱柱将无法再使用，缩短色谱柱的使用寿命。在高效液相色谱仪的使用中，保持高效液相色谱柱的柱效、容量和渗透特性，延长柱子的使用寿命特别紧要。
1、流动相对色谱柱的损害因素
颗粒杂质:目前广泛使用的柱填料直径多在10um以下，微小的颗粒杂质很简单使柱子发生堵塞，因此使用的溶剂应当过滤，柱子上端接头应当装微孔过滤片以阻拦颗粒物进入柱中。
水溶液中的微生物:以水溶液为流动相时，应防止细菌的生长，五氯酚、叠氮化钠、辛酸等能防止细菌生长。当用水溶液或有机酸
缓冲液保护柱子时，一些厌氧霉菌可能在色谱柱中繁殖，堵塞固定相颗粒间的空隙。
pH值:对硅胶基键合相填料，水溶液pH值不可超过2—7.5这一范围，当pH>8时，硅胶会释出
生成絮状物堵塞柱子，且难以复原，柱效很快降低，甚至完全失效。
盐类析出:当在流动相缓冲液中加入和水混溶的有机溶剂时，其中的盐类溶解度下降，可析出盐类沉淀，堵塞柱子；加入粘度不同的样品溶液也可能发生仿佛现象。所以缓冲液中盐的浓度宜低，样品提取液的构成应和流动相匹配。
2、样品对色谱柱的损害因素
杂质堵塞:样品中的微粒同样会使柱子堵塞，样品也应进行过滤处理。
样品组分的不可逆吸附:通常被吸附的组分有蛋白质、醣等，可以实行加装保护柱，或使用适应的溶剂反冲来处理。常用溶剂有四氢呋喃（适用于溶解有机高聚物和工业样品中的焦油）、高浓度的脲或盐酸胍溶液（使蛋白质改性而洗脱）、高离子强度的磷酸盐缓冲液（pH=7，适合反相柱和离子交换柱，可除去蛋白质和醣等）。
液相色谱的维护保养
液相色谱的维护保养
液相色谱是一种常见的分离和分析技术，广泛应用于化学、生物、医药等领域。要保证液相色谱的精度和稳定性，需要进行维护保养。
一、常规维护
1. 每天使用前应检查仪器的电源插头是否牢固，仪器内部是否有异物。
2. 每次开机前应清洗进样器、柱和检测器，避免样品残留和杂质附着。
3. 每天结束工作后应清洗所有部件，包括进样器、柱、检测器和泵，避免化学物质残留引起的腐蚀和堵塞。
二、柱的维护
1. 液相色谱柱在使用过程中会出现色谱效率下降、分离效果变差等情况。此时可以进行反向冲洗或正向冲洗，以清除柱中的杂质和残留物质。
2. 液相色谱柱的使用寿命有限，一般为几个月到一年不等，需要及时更换。同时，存储柱时应避免极端温度和湿度。
三、检测器的维护
1. 液相色谱检测器的光源和检测器需要定期清洗，避免灰尘和污垢影响检测精度。
2. 液相色谱检测器需要进行定期校准和标定，以确保检测结果的准确性和可靠性。
四、泵的维护
1. 液相色谱泵需要定期更换密封圈和活塞，以确保泵的密封性和稳定性。
2. 液相色谱泵需要定期进行排气操作，以排除气泡和空气，避免影响流量稳定。
总之，液相色谱的维护保养是保证仪器正常运行和分析结果准确可靠的重要措施。需要科学合理地制定维护计划和操作规程，定期检查仪器性能和部件状况，及时发现和解决问题。
色谱柱的维护与保养
色谱柱的维护与保养
一、C8及C18反相色谱柱（新的色谱柱）
应该在自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。使用前应该用小流速的和色谱柱内部相同的溶剂冲洗一定的时间。具体步骤如下：
（1）准备新鲜超纯水及色谱级乙腈或甲醇，冲洗色谱仪器系统，保证仪器系统管路干净。（新柱老化前，此步决不可忽略）
（2）将色谱柱反向连接，不接检测器。用水-有机相（90：10～95:5），以0.3～0.6ml/min流速冲洗20～30min。（目的是冲洗出柱入口端无机杂物与筛板孔杂物，使筛板正常）
（3）再将色谱柱正向连接，不接检测器。用水-有机相（90：10～95:5），以0.3～0.6ml/min流速冲洗20～30min。（目的是冲洗出柱出口端无机杂物与筛板孔杂物，使筛板正常）
（4）连接检测器，开启柱温达30℃～40℃，用水-有机相（90：10～95:5），以0.3～0.6ml/min流速冲洗4h以上。（目的是充饱和色谱柱，去除柱内空气）（5）用水-有机相（10：90～5:95），以0.3～0.6ml/min流速冲洗2h以上[或在120min内以水-有机相（95:5→0:100）梯度变化，以0.3～0.6ml/min流速冲洗]→再用100%有机溶剂，以0.3～0.6ml/min流速冲洗1h以上→最后用100%有机溶剂，以1ml/min流速冲洗1h以上。（目的是老化色谱柱）
（6）在平衡前根据水相-有机相的比例，首先调整水-有机相的比例接近流动相水相-有机相的比例，以1ml/min流速冲洗30左右（目的是相平衡过渡）。如果流动相中含有缓冲盐，决不可在柱老化后立即用流动相平衡，必需先用90%以上水进行预平衡30min以上，否则，会导致缓冲盐在柱内析出结晶，严重时会将新柱永久不可逆地损坏。
液相色谱仪的维护保养
液相色谱仪的维护保养
液相色谱仪是一种高精密仪器，维护保养工作对于保证其正常运行和延长使用寿命具有重要意义。以下是液相色谱仪各部分的维护保养方法：一、流动相溶剂瓶
溶剂瓶是流动相的起点，通常用于盛放水相溶液或有机相溶液。在保养过程中，要注意以下几点：
1、防止污染：对于水相溶液，要勤换流动相，保持溶剂瓶清洁。
2、防止聚合：对于有机相溶液，要注意防止溶剂发生聚合，例如乙腈在适宜的光照条件下容易发生聚合，需定期检查并及时更换。
二、高压泵
高压泵是液相色谱仪的核心部件，用于提供流动相压力。在保养过程中，要注意以下几点：
1、定期检查泵内是否有异物，如有异物需及时清除。
2、检查泵的密封性能，如发现泄漏需及时更换密封件。
3、保持泵的清洁，避免长时间不使用导致沉积物积累。
三、进样器
进样器用于将样品引入色谱柱。在保养过程中，要注意以下几点：
1、定期清洗进样器，防止样品残留导致污染。
2、检查进样器的密封性能，如发现泄漏需及时更换密封件。
四、色谱柱
色谱柱是液相色谱仪进行分离的关键部件。在保养过程中，要注意以下几点：
1、定期清洗色谱柱，防止样品残留和柱效降低。
2、避免色谱柱长时间处于高温和高压状态，以免损坏柱材。
3、定期检查色谱柱的固定相，如发现损坏或流失需及时更换。
五、检测器
检测器用于检测分离后的样品信号。在保养过程中，要注意以下几点：
1、定期清洗检测器，防止污染导致信号不稳定。
2、 检查检测器的灵敏度和响应时间，如发现异常需及时处理。
六、废液
废液是液相色谱仪运行过程中产生的废弃物。在处理废液时，要注意以下几点：
【色谱柱】气相色谱柱维护及保养 色谱柱维护和修理保养
【色谱柱】气相色谱柱维护及保养色谱柱维
护和修理保养
在试验过程中常常碰到的情况：
新的色谱柱，直接上分析条件来分析样品，发觉分别情况不稳定。
新的色谱柱，使用中发觉压力蓦地上升。
新的色谱柱，发觉分别度、保留时间发生了变化。
色谱柱使用不频繁，一开始分析样品效果比较好，但是，在使用过程中发觉柱效下降快、峰形异常的情况。
色谱峰形异常，基线不稳。
当发生以上情况，请认真检查，是否有某个操作疏忽了？
1）测试柱性能
通常情况下，我们建议用户在拿到色谱柱后，第一件事情就是在一台性能完好的仪器系统上，依照厂家说明书对色谱柱进行柱效测试。其实，对于一个合格的色谱分析工来说，拿到一根新色谱柱，要开始一个课题之前，都会这样做，目的有二：一、了解色谱柱之前的情况并判定色谱柱是否正常。二、将检测结果当心保存，当试验过程中发觉异常时，在检测柱效进行对比，来进一步排查原因。
2）当反相使用高浓度缓冲盐时，注意过渡
在使用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂时，确定要注意应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很简单析出，造成系统堵塞。另外，在发觉系统压力
上升异常时，要认真检查，段段排出包括保护柱、混合器、管路或者流通池等。色谱柱的维护和保养
3）当更换色谱柱时，原来的试验情况发生变化
首先，假如之前开发方法时色谱柱已经做过别的样品，那么之前的样品或使用的流动相对这个样品分析可能有干扰，只能重新找条件。建议：开发方法时使用新的色谱柱。（其次，假如是更换了品牌发生这样的情况，可能是由于不同品牌的键合技术不同，造成了选择性的细小差异，需要调整条件，并再次确定出峰次序（有些样品的洗脱次序会更改）。
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HPLC色谱柱的维护保养
HPLC色谱柱维护保养概要:
• 收到新的色谱柱 • 管路和接头 • 流动相注意事项 • 色谱柱的保护 • 保护柱 • 色谱柱的清洗 • 色谱柱的保存
收ຫໍສະໝຸດ Baidu新的色谱柱
• 核实色谱柱的信息 – 是你订购的色谱柱吗? – 规格是否正确? – 固定相是否正确?
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0.280 0.467
0.697 0.972 1.275
0.204 0.399
0.650 0.958 1.308
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• 检查物理性损坏 • 用标准测试样品在标准条件下测试柱子，以验证柱效 • 每支菲罗门色谱柱都经过单独检测
管路和接头
• 色谱性能取决于整个系统，而不仅仅是色谱柱 • 管路和接头会造成系统的死体积 • 系统死体积会导致:
– 峰展宽 – 峰形差 – 柱效降低 – 灵敏度降低
管路和接头
优化HPLC系统以获得最大性能 • 改变连接管路的内径（id）
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连接管路
1. 泵到进样器 • 可以使用大一点的内径(0.010” = 0.254 mm)
2. 进样器到色谱柱 • 管路内径最小化 • 通常使用0.007” (0.178 mm)或0.005” (0.127 mm) ID
3. 色谱柱到检测器 • 管路内径最小化 • 大一些的内径会影响分离效果 • 通常使用0.007”或0.005” ID
优化前
DAD1 B, Sig=254,8 Ref=off (F:\PROJECTS\0217_M~1\IN-PRO~1\INSTRU~1\CONFIG07.D) mAU
350
优化后
DAD1 B, Sig=254,4 Ref=off (F:\PROJECTS\0217_M~1\INSTRU~1\CHROMA~1\HPLCSY~1\TESTIN62.D) mAU
4. 检测器到废液瓶 • 可以使用更大的内径(0.010”)
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接头
• 并非所有的色谱柱和接头都一样 • 使用锥箍的种类/形状也各有不同 • 固定长度不同 (0.080”到0.130”) • 固定长度很关键
– 管路一定要与色谱柱相匹配 – 不匹配的接头会导致死体积的增大或漏液 • 手紧接头 (聚合物的) – 容易使用 – 一体的 – 符合柱头的形状
• 怎样去做? – 流动相入口过滤头 – 在线过滤器 – 保护柱 – 流动相脱气 – 过滤所有流动相组分 – 过滤所有样品
样品作为污染物的来源
• 样品基质是HPLC/UHPLC柱主要的污染物来源，常 会导致:
• 背压升高 • 色谱性能降低
– 峰形问题（分叉，拖尾） – 柱效降低 – 分辨率降低
样品的制备
– 0.17 mm id到0.12 mm id • 减小流通池的体积
– 标准流通池 – 13 µL, 10 mm 路径 – 半微量流通池 – 5 µL, 6 mm 路径
条件 • Luna® 3µm C18(2), 10 x 2.0 mm
– (MercuryMS™柱芯) • 50:50 乙腈/水 ，0.2 mL/min • HP1100 w/二元泵
• 如果超出锥箍的管路长度 过短，就会造成死体积， 导致峰展宽和拖尾
流动相
• 彻底冲洗HPLC泵和管路以去除气泡（打开冲洗阀来 加速过程）
• 连接色谱柱和进样器 – 检查流向是否与色谱柱标签指示方向一致
• 流动相起始流速为0.1 mL/min，随后逐渐增大到正常 流速
• 停止流速并将色谱柱与检测器入口连接 • 重启流速，用10-30个柱体积的流动相平衡色谱柱
管路和接头
优化前
• 峰宽 – 峰3: 0.072 min – 峰4: 0.085 min – 峰5: 0.103 min
• 分辨率 3/4 = 2.06 • 分辨率 4/5 = 1.89
优化后
• 峰宽 – 峰3: 0.057 min – 峰4: 0.076 min – 峰5: 0.099 min
• 分辨率 3/4 = 2.73 • 分辨率 4/5 = 2.35
– 含有离子对的流动相平衡所需时间更长
流动相
• 使用HPLC级溶剂 • 使用最高纯度的化学药品和试剂 • 使用前脱气和过滤所有流动相 • 保证溶剂是互溶的 • 验证缓冲盐在混合水/有机流动相中的溶解度
（尤其采用从高水相到高有机相的梯度洗脱时） • 检查样品在流动相中的溶解度
流动相
• 强烈建议每天更换水相缓冲溶液，以最大程度的减少 微生物的生长，避免这些微生物堵塞在线过滤器和色 谱柱。
接头
聚合物 手紧螺母
32圈螺纹/英寸 10号或0.190’’
锥箍
1/16’’OD管路 （0.010’’ID）
螺母
尖端固定长度 为关键尺寸
10-32 螺母和锥箍
1/4’’OD标准分析柱 （250 x 4.6mm ID）
色谱柱柱头
不同厂商的接头
连接接头
• 如果超出锥箍的管路长 度过长，锥箍将固定不 当，导致漏液
微生物在柱头填料 上的生长
其它注意事项
• 保持pH在2.0到8.0之间（旧型硅胶和极性封尾相）或 在1.5到10.0之间（新型硅胶）
• 低pH会使键合相从硅胶上断裂下来（水解） • 高pH会使硅胶溶解 • 如在接近pH极限下运行时，使用预饱和柱将使这些影
响降到最低
• 更新型的介质可以提供更宽的pH稳定性(1 – 12)
• 在向HPLC/UHPLC柱进样前，去除潜在的污染物 • 过滤样品(0.45或0.2 µm针式滤头) • 样品净化 – 例如SPE, 蛋白沉淀等
柱头处 – 新柱
柱头处 – 样品前处理不当
其它注意事项
• 背压通常保持在3500 psi以下（常规的HPLC柱和系统） • UHPLC柱具有更高的压力限（≥9000 psi） • 流速必须符合色谱柱的背压限 • 避免突然的压力变化 • 万一背压升高，可以反冲色谱柱（向色谱柱制造商核实
一下）
色谱柱的保护
• 为什么要这么做呢? – 最大限度地延长色谱柱的寿命 – 减少系统损耗 – 从长远来看，可以节约时间和成本 – 获得最佳的结果