膜蛋白提取方法
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注:此步如果细胞裂解不充分,下步有大量细胞沉淀,请延长冰浴裂解时间至 30 分钟或更
长,直至细胞充分裂解,中间每隔几分钟充分混匀。
4. 再次高速涡旋振荡 5 秒,然后在 4℃,13000×g 条件下离心 5 分钟。
5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,37℃水浴 5-10 分钟,37℃下② 1000g-2000g 力离心 5 分钟,此时溶液分为两层(对着光线看),下层是膜蛋
产品号 BB-3108 BB-3103 BB-3401 BB-3721 BB-3151 BB-3124 BB-3152 BB-3301 BB-3311 BB-3703
本试剂盒提取的蛋白不可用于 2D 电泳。如下游实验需要用于 2D 电泳,请使用贝博其 它货号的试剂盒。
应用实例:
1
4
4
图片说明:用膜蛋白提取试剂盒提取细胞样本的SDA-PAGE的电泳考染照片和Western照片。图1泳
道中1、4分别为Marker、膜蛋白样本。图2为以上样品的EGFR的WB结果照片。
Proteins by RNAi on Glucose Transport of Intrauterine Growth Retardation Rats
Pediatric Research
2011 Volume 69, Issue 6, pp 497-503
(IF=2.803)
● 李素芬, 杨鹰. 不同浓度瘦素对人胚胎绒毛滋养细胞膜胰岛素受体磷酸化的抑制作用 第三军医大学学报, 2010,32(23): 2530-2532.
B. 组织蛋白提取
1. 取适量组织样本剪碎,加冷 PBS,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体(或
用液氮研磨),冰上静置 5 分钟,小心将匀浆吸入另一预冷的干净离心管。
2. 在 4℃,500g 条件下离心 2-3 分钟,弃上清。
3. 按照细胞蛋白的提取方法的第 3 步骤往下操作即可。
上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。
白约为 20-50μl。 6. 收集上层部分留作备用分析③。 7. 用 150-200μl 冰冷的试剂 B 稀释下层膜蛋白部分,混匀后冰浴 2min,37℃水浴
5-10 分钟,37℃下②1000g-2000g 力离心 5 分钟,此时溶液分为两层(对着
光线看),下层是膜蛋白约为 20-50μl。 8. 按步骤 7 再次抽提膜蛋白(此步骤可以选做)。 9. 用 50-200μl 冷的试剂 C 稀释下层膜蛋白部分,即得膜蛋白。 10. 将上述蛋白提取物定量④后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验⑤。
产品简介: 哺乳动物跨膜蛋白承担各种生物功能,在疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。膜
蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套,因此膜蛋白样本制 备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。 去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构,因而妨碍了膜蛋白的功能研究。
使用方法:
A. 细胞蛋白提取 1. 取 5-10×106 个以上细胞①,在 4℃,500g 条件下离心 2-3 分钟,小心吸取培养 基,尽可能吸干,收集细胞。 2. 用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。 3. 细胞样品中加入 200μl 冷的试剂 A,2ul 蛋白酶抑制剂混合物,高速涡旋振荡 15 秒,置冰上 10-15 分钟,中间每隔几分钟涡旋混匀或用移液器吹打混匀。
膜蛋白提取试剂盒
产品组成:
产品编号 规格 试剂 A 试剂 B 试剂 C
蛋白酶抑制剂混合物
BB-3103-1 50T 10ml 20ml 10ml
250μl
BB-3103-2 100T 20ml 40ml 20ml 500μl
储存条件: 蛋白酶抑制剂-20℃保存; 蛋白提取液 2-8℃保存。
有效期: 一年。
参考文献:
● Ge Zhao, Siyuan Li, Wei Zhao, et al.
Phage Display against Corneal Epithelial Cells
Produced Bioactive Peptides That Inhibit Aspergillus Adhesion to the Corneas
贝博膜蛋白提取试剂盒是一种基于化学而非去污剂方法的高产膜蛋白提取试剂盒。本 试剂盒提供全套试剂,适用于从细胞和动物组织提取膜蛋白。提取过程简单方便,可在 1 小时内完成。提取的膜蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。提取的蛋白可 用于 Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等 蛋白研究。
产品号 BB-3101 BB-3102 BB-3411 BB-3501 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-3105 BB-3702
产品 磷酸化蛋白富集试剂盒 膜蛋白提取试剂盒 BCA 蛋白定量试剂盒 蛋白 Marker 细菌膜蛋白提取试剂盒 植物总蛋白提取试剂盒 植物膜蛋白提取试剂盒 蛋白酶抑制剂混合物 磷酸酶抑制剂混合物 SDS-PAGE 上样 Buffer
PLoS ONE
March 2012 | Volume 7 | Issue 3, (IF=4.411)
● Shunming Zhu, Fei Sun, et al.
Apelin stimulates glucose uptake through the PI3K/Akt
pathway and improves insulin resistance in 3T3-L1 adipocytes
Molecular and Cellular Biochemistry
2011 Volume 353, Numbers 1-2, (IF=2.168)
● LIAO, LIHONG, et al.
The Influence of Down-Regulation of Suppressor of Cellular Signaling
● 何鸿保 孙浩等. 5-Aza-CdR 对肾细胞癌 Caki-1 细胞生长及 E-钙黏蛋白基因表达的影响 江苏大学学报, 2011 年 01 期
● 余冬梅 陈明. 雷米普利通过干预瞬时感受器阳离子通道 C3 的表达对心肌纤维化的影响 重庆医科大学学报, 2011 年 01 期
相关产品:
产品 总蛋白提取试剂盒 核蛋白提取试剂盒 Bradford 蛋白定量试剂盒 ECL 化学发光检测试剂盒 细胞蛋白提取试剂盒 组织蛋白提取试剂盒 细菌蛋白提取试剂盒 酵母蛋白提取试剂盒 磷酸化蛋白提取试剂盒 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒
长,直至细胞充分裂解,中间每隔几分钟充分混匀。
4. 再次高速涡旋振荡 5 秒,然后在 4℃,13000×g 条件下离心 5 分钟。
5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,37℃水浴 5-10 分钟,37℃下② 1000g-2000g 力离心 5 分钟,此时溶液分为两层(对着光线看),下层是膜蛋
产品号 BB-3108 BB-3103 BB-3401 BB-3721 BB-3151 BB-3124 BB-3152 BB-3301 BB-3311 BB-3703
本试剂盒提取的蛋白不可用于 2D 电泳。如下游实验需要用于 2D 电泳,请使用贝博其 它货号的试剂盒。
应用实例:
1
4
4
图片说明:用膜蛋白提取试剂盒提取细胞样本的SDA-PAGE的电泳考染照片和Western照片。图1泳
道中1、4分别为Marker、膜蛋白样本。图2为以上样品的EGFR的WB结果照片。
Proteins by RNAi on Glucose Transport of Intrauterine Growth Retardation Rats
Pediatric Research
2011 Volume 69, Issue 6, pp 497-503
(IF=2.803)
● 李素芬, 杨鹰. 不同浓度瘦素对人胚胎绒毛滋养细胞膜胰岛素受体磷酸化的抑制作用 第三军医大学学报, 2010,32(23): 2530-2532.
B. 组织蛋白提取
1. 取适量组织样本剪碎,加冷 PBS,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体(或
用液氮研磨),冰上静置 5 分钟,小心将匀浆吸入另一预冷的干净离心管。
2. 在 4℃,500g 条件下离心 2-3 分钟,弃上清。
3. 按照细胞蛋白的提取方法的第 3 步骤往下操作即可。
上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。
白约为 20-50μl。 6. 收集上层部分留作备用分析③。 7. 用 150-200μl 冰冷的试剂 B 稀释下层膜蛋白部分,混匀后冰浴 2min,37℃水浴
5-10 分钟,37℃下②1000g-2000g 力离心 5 分钟,此时溶液分为两层(对着
光线看),下层是膜蛋白约为 20-50μl。 8. 按步骤 7 再次抽提膜蛋白(此步骤可以选做)。 9. 用 50-200μl 冷的试剂 C 稀释下层膜蛋白部分,即得膜蛋白。 10. 将上述蛋白提取物定量④后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验⑤。
产品简介: 哺乳动物跨膜蛋白承担各种生物功能,在疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。膜
蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套,因此膜蛋白样本制 备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。 去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构,因而妨碍了膜蛋白的功能研究。
使用方法:
A. 细胞蛋白提取 1. 取 5-10×106 个以上细胞①,在 4℃,500g 条件下离心 2-3 分钟,小心吸取培养 基,尽可能吸干,收集细胞。 2. 用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。 3. 细胞样品中加入 200μl 冷的试剂 A,2ul 蛋白酶抑制剂混合物,高速涡旋振荡 15 秒,置冰上 10-15 分钟,中间每隔几分钟涡旋混匀或用移液器吹打混匀。
膜蛋白提取试剂盒
产品组成:
产品编号 规格 试剂 A 试剂 B 试剂 C
蛋白酶抑制剂混合物
BB-3103-1 50T 10ml 20ml 10ml
250μl
BB-3103-2 100T 20ml 40ml 20ml 500μl
储存条件: 蛋白酶抑制剂-20℃保存; 蛋白提取液 2-8℃保存。
有效期: 一年。
参考文献:
● Ge Zhao, Siyuan Li, Wei Zhao, et al.
Phage Display against Corneal Epithelial Cells
Produced Bioactive Peptides That Inhibit Aspergillus Adhesion to the Corneas
贝博膜蛋白提取试剂盒是一种基于化学而非去污剂方法的高产膜蛋白提取试剂盒。本 试剂盒提供全套试剂,适用于从细胞和动物组织提取膜蛋白。提取过程简单方便,可在 1 小时内完成。提取的膜蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。提取的蛋白可 用于 Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等 蛋白研究。
产品号 BB-3101 BB-3102 BB-3411 BB-3501 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-3105 BB-3702
产品 磷酸化蛋白富集试剂盒 膜蛋白提取试剂盒 BCA 蛋白定量试剂盒 蛋白 Marker 细菌膜蛋白提取试剂盒 植物总蛋白提取试剂盒 植物膜蛋白提取试剂盒 蛋白酶抑制剂混合物 磷酸酶抑制剂混合物 SDS-PAGE 上样 Buffer
PLoS ONE
March 2012 | Volume 7 | Issue 3, (IF=4.411)
● Shunming Zhu, Fei Sun, et al.
Apelin stimulates glucose uptake through the PI3K/Akt
pathway and improves insulin resistance in 3T3-L1 adipocytes
Molecular and Cellular Biochemistry
2011 Volume 353, Numbers 1-2, (IF=2.168)
● LIAO, LIHONG, et al.
The Influence of Down-Regulation of Suppressor of Cellular Signaling
● 何鸿保 孙浩等. 5-Aza-CdR 对肾细胞癌 Caki-1 细胞生长及 E-钙黏蛋白基因表达的影响 江苏大学学报, 2011 年 01 期
● 余冬梅 陈明. 雷米普利通过干预瞬时感受器阳离子通道 C3 的表达对心肌纤维化的影响 重庆医科大学学报, 2011 年 01 期
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产品 总蛋白提取试剂盒 核蛋白提取试剂盒 Bradford 蛋白定量试剂盒 ECL 化学发光检测试剂盒 细胞蛋白提取试剂盒 组织蛋白提取试剂盒 细菌蛋白提取试剂盒 酵母蛋白提取试剂盒 磷酸化蛋白提取试剂盒 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒