92 (22 羟乙基) 2 吖啶酮柱前衍生胆汁酸高效液相色谱分析

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高效液相色谱荧光检测法测定药物中的氯乙酰氯

化学分析计量CHEMICAL ANALYSIS AND METERAGE第30卷，第1期2021年1月V ol. 30，No. 1Jan. 202159doi ：10.3969／j.issn.1008–6145.2021.01.012高效液相色谱荧光检测法测定药物中的氯乙酰氯汤加园，陈向明(滨州医学院药学院，山东烟台　264003)摘要　建立测定药物中氯乙酰氯含量的高效液相色谱–荧光检测方法。

以吖啶酮乙酰肼为荧光标记试剂，对氯乙酰氯进行柱前衍生。

在室温下反应15 min ，衍生产率达到最大。

衍生溶液在XDB–C 18柱上，以水和乙腈为流动相进行分析，激发波长和发射波长分别为255 nm 和429 nm 。

氯乙酰氯浓度在1～1 000 nmol ／L 范围内与色谱峰面积具有良好的线性关系，线性相关系数r =0.999 9。

方法的检出限为0.35 nmol ／L ，仪器精密度和方法精密度分别为0.52%和0.67%(n =6)。

样品加标回收率为92.5%～95.6%。

该方法简单、准确，精密度良好，可用于测定药物中氯乙酰氯的残留量。

关键词　高效液相色谱；荧光检测；氯乙酰氯中图分类号：O657.7 文献标识码：A 文章编号：1008–6145(2021)01–0059–04Determination of chloroacetyl chloride in drug substance by high performanceliquid chromatography with fluorescence detectionTang Jiayuan ， Chen Xiangming(School of Pharmacy ， Binzhou Medical University ， Yantai 264003， China)Abstract A high performance liquid chromatography method coupled with fluorescence detection to determine chloroacetyl chloride in drug substance was developed. Acridone acetyl hydrazine was used as fluorescence labeling reagent and chloroacetyl chloride was derived before column. Optimum derivatization was obtained at room temperature for 15 min. The derivative was separated on a reversed-phase XDB–C 18 column in conjunction with water and acetonitrile as mobile phase. The excitation and emission wavelengths were 255 nm and 429 nm respectively. The concerntration of chloroacetyl chloride had good linear ralationship with the chromatographic peak area in the range of 1–1 000 nmol ／L, the linear correlation coefficient r =0.999 9. The instrument precision and method precision were 0.52%, 0.67%(n =6)，respectively. The detection limit of the method was 0.35 nmol ／L ，and the recoveries were in the range of 92.5%–95.6%. The method is simple ，accurate and showed good repeatability ，which can be used to determine the content of chloroacetyl chloride in drug substance.Keywords high performance liquid chromatography; fluorescence detection; chloroacetyl chloride药物中的遗传毒性杂质是一类能损伤细胞遗传物质并引起基因突变或体内诱变的物质，较少的摄入量就能够对身体健康产生严重的损害［1–2］。

柱前衍生化高效液相色谱法测定乳酸的光学纯度

柱前衍生化高效液相色谱法测定乳酸的光学纯度
1. 前言：柱前衍生化高效液相色谱法是一种用于测定有机化合物光学纯度的分析方法，通常结合手性色谱柱使用，能够对不对称分子进行高效、准确的分离。

2. 实验原理：该方法采用柱前衍生化反应，将测试物转化为对映异构体的对应衍生体，在手性色谱柱上进行分离，最终通过高效液相色谱分析获得测试物的光学纯度。

3. 实验步骤：
（1）样品制备：将测试物加入反应溶剂中，加入反应试剂进行柱前衍生化反应。

（2）检测系统设置：使用手性色谱柱进行分离，常用的手性色谱柱包括Chiralpak AD、Chiralcel OD等。

检测设备为高效液相色谱仪，通常需要进行优化和校准。

（3）操作流程：样品注入手性色谱柱后，固定相将对映异构体分离，流经检测器进行检测，通过峰面积比值计算样品的光学纯度。

4. 实验注意事项：
（1）反应条件要严格控制，如反应试剂用量、反应时间等均需要优化。

（2）手性色谱柱的选择需根据分析物的分子结构进行选择。

（3）实验过程中应尽量避免杂质的干扰，以保证准确性和可靠性。

5. 结论：柱前衍生化高效液相色谱法是一种有效的测定有机化合物光学纯度的方法，能够实现高效、准确的分离和检测，在化学合成和制药行业等领域得到广泛应用。

柱前衍生高效液相色谱法测定二乙醇胺脱氢产物r亚氨基二乙酸和甘氨酸

柱前衍生高效液相色谱法测定二乙醇胺脱氢产物r亚氨基二乙酸和甘氨酸张蕾;段正康;朱宏文;尹科【摘要】An analytical method was developed for the determination of iminodiacetic acid ( IDA) and glycine ( Gly) , the dehydrogenation products of diethanolamine, by high performance liquid chromatography ( HPLC ) coupled with pre-column derivatization using p-toluenesulfonyl chloride ( PTSC) as the derivatization reagent. IDA and Gly reacted with PTSC in the alkaline environment ( pH 11) under 45℃ for 15 min. Then the derivatization products were analyzed by HPLC-MS. The separation was carried out on a high performance liquid chromatograph equipped with an ultraviolet detector. A VP-ODS column ( 200 mm × 4. 6 mm, 5 μm ) was employed using 0. 03 mol/L ammonium acetate (pH 5. 5)-acetonitrile (87:13, v/v) as mobile phases for isocratic elution at a flow rate of 1mL/min and detection wavelength of 235 nm. The results showed good linearities for iminodiacetic acid of 900-2100 mg/L, and for glycine of 20-100 mg/L, respectively. The linear correlation coefficients ( R2 ) were both greater than 0. 999. The limits of detection ( LODs) of IDA and Gly were 0. 0897 mg/L and 0. 0262 mg/L and the recoveries were in the range of 98. 7%-99. 3% and 98. 0%-99. 5%, respectively. The relative standard deviations ( RSDs) of IDA and Gly were in the range of 0. 89%-1. 23% and 0. 95%-1. 11% ( n=3) . The method has the characteristics of mild reaction conditions and high accuracy,and is well suitable for the determination ofIDA and Gly in industrial production.%以对甲苯磺酰氯(PTSC)为衍生剂,建立了柱前衍生高效液相色谱(HPLC)测定二乙醇胺脱氢产物中亚氨基二乙酸(IDA)和甘氨酸(Gly)含量的分析方法.IDA和Gly与衍生剂在碱性(pH 11)条件下于45℃反应15 min,进行柱前衍生,并利用高效液相色谱-质谱对衍生产物进行定性分析.衍生化产物采用VP-ODS色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,以0.03 mol/L醋酸铵溶液(pH 5.5)为流动相A、乙腈为流动相B(体积比为87:13),进行等度洗脱,流速为1 mL/min,并采用配有紫外检测器的高效液相色谱仪测定,检测波长为235 nm.该法在IDA质量浓度为900~2100 mg/L、Gly质量浓度为20~100 mg/L的范围内线性关系良好,相关系数(R2)均大于0.999.IDA和Gly的检出限(LOD)分别为0.0897 mg/L和0.0262 mg/L,加标回收率分别为98.7%~99.3%和98.0%~99.5%,相对标准偏差(RSD)分别为0.89%~1.23%和0.95%~1.11%(n=3).该法具有反应条件温和、准确性高的特点,可用于工艺生产中IDA和Gly含量的测定.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2017(035)011【总页数】6页(P1165-1170)【关键词】高效液相色谱;柱前衍生;亚氨基二乙酸;甘氨酸;对甲苯磺酰氯【作者】张蕾;段正康;朱宏文;尹科【作者单位】湘潭大学化工学院,湖南湘潭411105;湘潭大学化工学院,湖南湘潭411105;湘潭大学化工学院,湖南湘潭411105;湘潭大学化工学院,湖南湘潭411105【正文语种】中文【中图分类】O658亚氨基二乙酸(IDA)和甘氨酸(Gly)是重要的化工中间体,广泛用于农药、化工、医药等领域。

柱前衍生高效液相色谱法测定氨基葡萄糖盐酸盐的含量_王萍亚

酸钠缓冲溶液；氨基葡萄糖盐酸盐标准品（Sigma）。
1.2 色谱条件
色谱柱：大连依利特 Hypersil BDS C18 柱，粒度 5 μm，4.6 mm（id）×250 mm；检测器：二极管阵列检测
器；检测波长：254 nm；流速：1.0 mL/min；进样量：10 μL；柱温：室温；流动相：乙腈-水(30+70，v/v)。
1.1 仪器与试剂
日本岛津公司 LC 2010 C HT 高效液相色谱仪，包括：真空脱气机，四元梯度泵，柱温箱，自动进样器，
紫外检测器，LC Solution 数据处理系统，二极管阵列检测器（SPD-M20A）。Millipore 超纯水机(法国 Milli－
pore 公司)。漩涡混合器。
乙腈为色谱纯；硼酸钠为分析纯；超纯水；衍生剂：氯甲酸芴甲酯（FMOC-CL）；0.2 mol/L，pH 为 7 的硼
Key words: glucosamine hydrochloride；high performance liquid chromatography wtth precolumn deriva－ tization；quality control
D－氨基葡萄糖盐酸盐又称葡萄糖胺盐酸盐(D-Glucosamine Hydrochloride，GAH)，其结构为 D－葡萄糖分子中 C2-羟基被氨基所取代，因氨基显碱性，与盐酸成盐[1]。GAH 是一种用途广泛的物质，对人体具有重要的生理功能，可参与肝肾解毒，发挥抗炎护肝作用，能促进人体粘多糖的合成，具有明显的消炎镇痛作用，对治疗风湿性关节炎症和胃溃疡有良好的效果。利用它合成的另一种新的水溶性抗癌药物氯脲霉素具有亚硝基脲类化合物的抗癌性，同时又具有抑制骨髓毒性较小的特点，对黑色毒瘤、肺癌、肾癌等显示一

高效液相色谱-荧光衍生法在体内药物分析中的应用

试剂 k荧光胺 l发生衍生化反应 ! 采用反相高效液相色谱法 ! 使用 O7v+5w"?xyzo 柱 ! 流动相为 9:8KK>? { .8|O9s:@ 缓冲液 kvOL‘
十八烷基键合硅胶 # 活性碳及硅藻土等 " 还有将预处理过程与层析过程线上 F>$G ?"$+H进行的 ! 在分析柱前加上较短 F@IJ2KH的预柱 ! 使蛋白质等大分子杂质沉积在预柱上 "
作者单位 %**""""@@@@ 南昌 $% # 江西中医学院 (! # 江西国药有限责任公司
& ¸ &
中 ! 将生物样品中的干扰物或药物保留在担体上而进行分离的方法 ! 也可认为是微型柱色谱法 " 常用担体有聚苯乙烯 #
D9E
!"#$%&"’()’*+,-./09::;<-=>?89@A-B>C
&血浆 # 血清 # 全血 ’# 尿样 # 唾液及组织液 $ 特殊情况下也采用
乳汁 # 泪液 # 胆汁 # 羊水 # 粪便等 " 随着药物的开发研究 $ 药物
(%)
的服用剂量越来越小 $体内药物的浓度越来越低 $这对分析方法灵敏度和选择性等都提出很高的要求 (!)" 高效液相色谱法具有准确 # 灵敏度 # 专一性强等特点 $ 一直是体内药物分析的主要手段 " 而高效液相色谱的荧光检测器比紫外吸收检
(%$)

柱前衍生化高效液相色谱法准确测定2_氯丙酸的光学纯度

柱前衍生化高效液相色谱法准确测定22氯丙酸的光学纯度李俊峰　都婷婷　兰先秋　张义文　宋航3(四川大学制药与生物工程系,成都610065)摘　要　用12萘胺对22氯丙酸进行柱前衍生化,衍生化反应在30℃条件下进行10m in 或更长时间。

选择Chiralcel OD 2H 色谱柱和正己烷2醇类为流动相,考察了流动相组成和柱温的变化对22氯丙酸衍生物对映体拆分效果的影响。

确定流动相为V (正己烷)∶V (甲醇)∶V (乙醇)=50∶45∶5,流速1.0mL /m in,柱温30℃,检测波长224n m 为较优分析条件,分离因子2.5,8m in 内出峰。

现有文献和试剂手册提供的22氯丙酸的比旋光度标准值之间相差很大,在实际测量和计算中无准确标准可依。

柱前衍生化结合手性固定相色谱方法灵敏度高,重现性好,操作较简单,可用于准确测量22氯丙酸的光学纯度,并准确给出一定条件下22氯丙酸的比旋光度和光学纯度的对应关系([α]20D 213.94(neat,d1.2547),e .e .97.9%)。

关键词　22氯丙酸,柱前衍生化,手性固定相,高效液相色谱,光学纯度　2006211216收稿;2007205209接受本文系四川省自然科学基金资助项目(No .04JY029208323)3E 2mail:hangs ong@vi p.sina .com1　引　言芳氧丙酸类除草剂是一类重要的手性农药,其中S 型比R 型的药效低甚至无效[1]。

出于对环境保护的考虑,欧美等发达国家已开始立法限制外消旋农药的使用[2]。

所以开发使用光学纯的手性农药势在必行。

而手性农药的光学纯度高低直接和生产该农药的手性中间体的光学纯度密切相关。

22氯丙酸(22chl or op r op i onic acid )是芳氧丙酸类除草剂、植物生长调节剂以及一些杀菌剂的重要中间体[3]。

因此,检测和控制手性中间体22氯丙酸的光学纯度具有重要的意义。

柱前衍生反相高效液相色谱法测定冻_省略_原制品中盐酸精氨酸和甘氨酸的含量_尉小平

中国图书分类号R392O33文献标识码A文章编号1004-5503(2007)08-609-03【实验技术】柱前衍生反相高效液相色谱法测定冻干人纤维蛋白原制品中盐酸精氨酸和甘氨酸的含量尉小平冉铁成王坚赵家宏【摘要】目的测定冻干人纤维蛋白原制品中盐酸精氨酸和甘氨酸的含量。

方法采用反相高效液相色谱法,以2,4-二硝基氟苯为柱前衍生剂,在色谱柱内层析,以紫外检测器在360n m波长处检测,用外标法计算含量。

结果当盐酸精氨酸和甘氨酸衍生化的取样范围为0125~2100mg/m l时,线性相关系数分别为0199998和0199999。

盐酸精氨酸和甘氨酸的平均加标回收率分别为9616%和9514%。

结论此方法检测结果准确,可用于冻干人纤维蛋白原中盐酸精氨酸和甘氨酸的含量检测。

【关键词】盐酸精氨酸;甘氨酸;冻干人纤维蛋白原;柱前衍生反相高效液相色谱法高效液相色谱法和氨基酸分析仪是目前氨基酸分析方法中最有效的手段,高效液相色谱法分析原理主要是利用氨基酸中的氨基与标识化试剂作柱前或柱后衍生,再进行测定[1,2]。

目前用于反相高效液相色谱检测氨基酸的柱前衍生试剂有近10种,以柱前衍生高效液相色谱法测定纤维蛋白原中的精氨酸也有报道[3],但其衍生化试剂盒费用高,且需配置荧光检测器。

本实验参照《中国药典》二部(2005版)中高效液相色谱法,采用2,4-二硝基氟苯为柱前衍生剂,以紫外吸收检测器在360nm波长处检测,用外标法计算含量,取得了令人满意的效果。

材料与方法11仪器安捷伦1200系列高效液相色谱仪,配置1314B 紫外吸收检测器,为美国Ag ilent公司产品;YMC-Pack ODS-A C18色谱柱(250mm@416mm,5L m)为日本仓光株式会社产品。

21试剂2,4-二硝基氟苯(DNFB)、盐酸精氨酸(A rg# HC l)和甘氨酸(G l y)均为分析纯,S i g m a产品;冻干人纤维蛋白原制品①(含A r g#H C l和G l y),批号: FNG20060721A2和冻干人纤维蛋白原制品②(不含A rg#H C l和G l y),批号:FNG20041024A0,均为本公司产品。

92 (22 羟乙基) 2 吖啶酮柱前衍生胆汁酸高效液相色谱分析

第32卷2004年9月分析化学(FE NXI H UAX UE )　研究报告Chinese Journal of Analytical Chemistry 第9期1131～113492(22羟乙基)2吖啶酮柱前衍生胆汁酸高效液相色谱分析张　琳1　尤进茂2　张　曦1　田　燕1　段继诚1　梁　振1张维冰1　阎　超1　张玉奎311(中国科学院大连化学物理研究所,大连116011) 2(曲阜师范大学化学系,曲阜273165)摘　要　采用一种新型紫外、荧光衍生试剂92(22羟乙基)2吖啶酮(HE A ),在缩合剂12乙基232(32二甲氨丙基)2碳酰二亚胺(E DC ・HCl )及碱性催化剂42二甲氨基吡啶(DM AP )的存在下,对10种胆汁酸进行柱前衍生,并通过荧光检测的方法进行高效液相色谱(HP LC )分析。

在Hypersil BDS C 18柱上,采用梯度洗脱,10种胆汁酸衍生物获得了基线分离,衍生物的激发和发射波长为λex /λem =404/440nm 。

衍生产物稳定性好,检测灵敏度高,按信噪比S/N =3∶1,平均检出限可达8.3fm ol 。

关键词　胆汁酸,衍生,荧光检测,高效液相色谱　2003208212收稿;2004203225接受本文系国家自然科学基金(N o.20375040,N o.20175039,N o.20075016)资助项目1　引言胆汁酸由于其独特的物理化学性质,对胆固醇的平衡、脂肪的消化及胆结石的形成起着关键作用。

血清、胃肠液、肝和胆囊中的胆汁、尿液、粪便中胆汁酸的测定,可为肝胆疾病、胃肠消化功能紊乱及脂肪代谢紊乱的诊断提供可靠依据。

因而胆汁酸的测定,尤其是血清中胆汁酸的测定越来越受到人们的重视[1]。

在临床上对肝胆疾病检查的灵敏度高于96%,特异性大于98%[2]。

血清中胆汁酸含量低,无法直接利用紫外检测。

Zhao [3]等曾利用RP 2HP LC 及柱后酶反应衍生荧光检测方法要求在高效液相色谱柱后增加酶柱,降低了色谱柱的分离效能,同时对分离条件有严格要求。

柱前衍生反相高效液相色谱法测定鸭跖草中1-脱氧野尻霉素含量

ＣｏｍｍｅｌｉｎａｃｏｍｍｕｎｉｓＬｉｎｎ．，ｗｈｉｃｈａｒｅｇｒｏｗｉｎｇｉｎｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｉｖｉｎｇｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｂｙｐｒｅ－ｃｏｌｕｍｎ
摘要：建立了芴甲氧酰氯柱前衍生反相高效液相色谱法测定不同生长环境鸭跖草根、茎、叶中葡萄糖苷酶
抑制剂—— １一脱氧野尻霉素的方法。采用资生堂ＣＡＰＣＥＬＬＰＡＫＣ８色谱柱，３５：６５的乙腈一０．１醋酸体系为
流动相，１一脱氧野尻霉素在０．１～１．５ｔＬｇ／ｍＬ呈良好的线性关系，平均回收率为９９．５。实验方法准确可靠，为
ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｎｔｉ－ｄｉａｂｅｔｅｓａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ：１一ｄｅｏｘｙｎｏｉｉｒｉｍｙｃｉｎｉｓｉｎｔｈｅｒｏｏｔｓ，ｓｔｅｍｓａｎｄ［ｅａ￣ｅｓｏｆ
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ１－ｄｅｏｘｙｎｏｊｉｒｉｍｙｃｉｎｉｎＣｏｍｍｅｌｉｎａｃｏｍｍｕｎｉｓＬｉｎｎ．
ｂｙｒｅｖｅｒｓｅｄ — ｐｈａｓｅｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｉｔｈｐｒｅ — ｃｏｌｕｍｎｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎＬＵＡＮＦａｎｇ，ＺＨＯＵＳｈｕ＿ｊｉｎｇ，ＬＩＪｉｎ－ｌｉａｎ，ＬＶＹｕ－ｇｕａｎｇ１，２，

柱前衍生化高效液相色谱荧光检测法测定桑叶中的12脱氧野尻霉素

同时考察了衍生化试剂fmoc2cl的浓度对衍生化反应的影响在fmoc2cl的浓度为mmoll之间衍生化产物随fmoc2cl的浓度增高而增加在310mmoll之间衍生化产物达到平衡峰面积最大浓度超过10mmoll峰面积又会降低当选择10mmolgly2fmoc的信号有时会超出荧光检出限因此本实验选择2衍生化反应温度反应时间的选择在上述条件下分别在1015202530及35温度下考察了反应1015202530和35min对衍生化反应的影响结果表明
第 6期
欧阳臻等 :柱前衍生化高效液相色谱荧光检测法测定桑叶中的 12脱氧野尻霉素
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3. 3. 2 衍生化反应温度、反应时间的选择在上述条件下 ,分别在 10℃、15℃、20℃、25℃、30℃及 35℃ 温度下 ,考察了反应 10、15、20、25、30和 35 m in对衍生化反应的影响 ,结果表明 :在 15～30℃,随着温度的升高峰面积可达最大 ;超过 30℃以上 ,峰面积反而降低 ;温度低于 15℃反应速度缓慢 ,达到最大峰面积的时间超过 30 m in。在 30℃反应达到最大峰面积的时间是 10 m in, 20℃达到最大峰面积的时间是 20 m in,本实验选择衍生化反应温度为 20℃,衍生化反应时间为 20 m in。 3. 4 高效液相色谱图
乙腈为色谱纯 (德国默克公司 ) ;水为二次蒸馏水 (本实验室自制 ) ; FMOC2Cl ( Sigma公司 ) ;其余试剂均为分析纯。DNJ 标准品由日本北陸大学 ( Hokuriku University) Naoki A sano 教授赠送 ,纯度大于 98% ;桑叶 : 2003年 6月采自江苏大学桑树种植园 ,经镇江市药检所主任药师陈黎鉴定为桑科植物桑 (M orus a lba L. )的叶 ,低温干燥后备用。 2. 2 色谱条件

柱前衍生化一高效液相色谱法分析木糖结晶母液的单糖组成

为６９时间梯度为０ｌ— ２ — ３ｉ相应浓度．，一０００ｍｎ和梯度为０８ — ％一ｌ％一１％时溶剂Ｂ的梯度洗脱５５模式是分离此８种单糖衍生物的较理想色谱分离条件，单糖标准品的色谱分离图和木糖结晶母液的色谱分离图分别如图１所示。
可以看出，８个组分的平均回收率为９．％～８４
５０．ｌ００
．
１．５０
２．００
２５０
１．０１０％
表３８种单糖组分的回收率（５ｎ＝）
ｔａｉ／ｒｎ
孟海波，：等柱前衍生化一高效液相色谱法分析木糖结晶母液的单糖组成
４７
柱前衍生化一高效液相色谱法分析木糖结晶母液的单糖组成
孟海波高绍丰张海燕孟汉卿
（济南圣泉唐和唐生物科技有限公司，济南２００５２４）
摘要
采用１苯基．．一３甲基－一５吡唑啉酮（ＭＰ柱前衍生化一反相高效液相色谱（Ｌ法建立了８种常见单糖Ｐ）ＨＰＣ）
稀释，匀，混然后用０４ｍ水性滤膜过滤，０Ｌ．５１
进样。
１４色谱条件．
色谱柱：ｙｍｅｙＣ８（．ｍ ×１０ｍ５Ｓｍｔ１柱４６ｍｒ５ｍ，
ｍ）美国Ｗａｒ公司；ｉｎｘＵｔＭａ００色谱，ｔｓｅＤｏｅｌｔ３０ｉｅ
量，单糖的浓度与相应的峰高呈良好的线性关系，关系数ｒ在０９９０９９范围内，法检出限为００２ｌ８种相．８７～．９４方．０

AQC柱前衍生化高效液相色谱法测定宝乐果中的游离氨基酸

氨基酸。结果得：ｌ８种氨基酸在０．０２～０．５ｍｍｏｌ／Ｌ浓度范围内有良好的线性关系，ｒ均在０．９９８３～０．９９９２之
间；宝乐果中测得１４种游离氨基酸，其含０ｍｇ／ｇ，平均加样回收率为９６．９％一１０６．９％，ＲＳＤ为０．６７％～３．０７％。该方法可用于检测宝乐果中游离氨基酸含量，测定的结果为宝乐果质量研究和评价提供了依据。
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）．ＨＰＬＣｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎａＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＣ１８（２５０ｍｍ ×４．６ｍｍ，５Ｉｘｍ）ｃｏｌ —
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅａｎｄａｎａｌｙｚｅｆｒｅｅａｍｉｎｏａｃｉｄｓｉｎＢｏｒｏｊｏ．Ｔｈｅｓａｍｐｌｅｗａｓｄｅｒｉｖａｔｉｚｅｄｗｉｔｈ６一ａｍｉ —
ｕｍｎｗｉｔｈｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎｏｆｄｅｉｏｎｉｚｅｄｗａｔｅｒ（Ａ），ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ（Ｂ）ａｎｄ１０ｍｍｏｌ／Ｌａｍｍｏｎｉｕｍａｃｅｔａｔｅ
关键词：宝乐果；ＡＱＣ；游离氨基酸；柱前衍生法
中图分类号：０６５７．７

血清中胆汁酸的高效液相色谱荧光测定及质谱鉴定结果分析

Analysis of results of high-performance liquid chromatography fluorescence determination and mass spectrometry identification of bile acids in serum
WANG Zhibo Department of General Surgery, the Second Hospital of Zhanjiang Agricultural Reclamation, Guangdong, Leizhou 524272, China [Abstract] Objective To analyze the bile acid composition in patients with gallstone disease by ultra-performance liquid chromatography coupled with mass spectrometry and its significance. Methods A method for determination of bile acids in serum by ultra-performance liquid chromatography coupled with mass spectrometry (HPLC-MS) was established. 80 patients with gallstone disease admitted to Guangdong Affiliated Hospital from October 2018 to April 2019 were selected as the experimental group. The subjects in the control group were healthy people, and the subjects in the experimental group were patients with cholelithiasis which were further divided into gallbladder stones and bile duct stones. The serum samples were collected from subjects to determine lipid metabolism levels (total cholesterol (TC), triglyceride (TG), low density lipoprotein (LDL), high density lipoprotein (H-LDL) levels). HPLC-MS method was used to determine the difference in composition and levels of 6 sub-components (taurocholic acid (TCA), glycine cholic acid (GCA), taurodeoxycholic acid (TDCA), glycine chenodeoxycholic acid (GCDCA), glycine deoxycholic acid (GDCA), taurolithocholic acid (TLCA) in serum bile acids of the two groups. Results 4 sub-components were detected in the control group and 6 sub-components were detected in the experimental group. The levels of TCA and GCA in the experimental group was higher than those in the control group, and the differences were statistically significant (P ＜ 0.05). TCA and GCA components may be the hallmark components for the diagnosis of cholelithiasis. In the experimental group, the level of GDCA components between patients with gallbladder stones and patients with bile duct stones was different, and the difference was statistically significant (P ＜ 0.05). This component may be the diagnostic component of different locations of cholelithiasis. The TC, TG and LDL lipid metabolism indexes of

AQC柱前衍生化高效液相色谱法测定宝乐果中的游离氨基酸

AQC柱前衍生化高效液相色谱法测定宝乐果中的游离氨基酸刘博;韩晓东;张敏婷;徐方方;周文;焦红【摘要】To determine and analyze free amino acids in Borojo.The sample was derivatized with 6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate (AQC) and then was analyzed with high-performance liquid chromatography (HPLC).HPLC was performed on a Phenomenex C18 (250mm × 4.6 mm,5 μm) column with gradient elution of deionized water (A),acetonitrile (B) and 10 mmol/L ammonium acetate buffer solution (adjusted to pH 5.10 with glacial acetic acid) (C) at the flow rate of 0.8 ～1.0 mL/min,detected with Ultra Voilet (UV) at 248 nm.Linear relationship equations were obtained with 18kinds of amino acids in the range of0.02 ～ 0.5 mmoL/L,and their correlation coefficients were in the range of 0.998 3 ～ 0.999 2.Fourteen amino acids were detected and average recoveries of those added were in the range of 96.9 ％～ 106.9 ％ and RSD values were in the range of 0.67 ％～ 3.07 ％.The method could be used for determination of content of free amino acids in Borojo.%为了测定宝乐果中游离氨基酸的种类以及含量.该文的样品用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯(AQC)柱前衍生后进行高效液相色谱(HPLC)分析.采用Phenomenex Luna C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,柱温为35℃；流动相A为去离子水,流动相B为乙腈,流动相C为10 mmol/L醋酸铵缓冲液(以冰醋酸调至pH 5.10),梯度洗脱,流速为0.8～1.0 mL/min;检测波长为248 nm,同时测定宝乐果中的游离氨基酸.结果得:18种氨基酸在0.02～0.5 mmol/L浓度范围内有良好的线性关系,r 均在0.998 3 ～0.999 2之间；宝乐果中测得14种游离氨基酸,其含量范围为0.087 ～2.680 mg/g,平均加样回收率为96.9％～106.9％,RSD为0.67％～3.07％.该方法可用于检测宝乐果中游离氨基酸含量,测定的结果为宝乐果质量研究和评价提供了依据.【期刊名称】《中山大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2013(052)004【总页数】5页(P100-104)【关键词】宝乐果;AQC;游离氨基酸;柱前衍生法【作者】刘博;韩晓东;张敏婷;徐方方;周文;焦红【作者单位】广州中医药大学第二附属医院,广东广州510006;广州中医药大学第二附属医院,广东广州510006;广州中医药大学第二附属医院,广东广州510006;广州中医药大学第二附属医院,广东广州510006;广州中医药大学第二附属医院,广东广州510006;广东出入境检验检疫局,广东广州510623【正文语种】中文【中图分类】O657.7宝乐果 (Borojoa sorbilis Cuter.)是茜草科林果属植物Borojoa patinoi Cuatrec.和Borojoa sorbilis Cuatrec.的成熟果实，产于拉丁美洲厄瓜多尔气候的热带雨林，呈棕褐色，直径达7～12 cm，质量达700～1000 g，88%以上为果浆，黏性很强，味道酸涩［1］，有特殊果香。

荧光标记—高效液相色谱法测定栝楼中游离脂肪酸

荧光标记—高效液相色谱法测定栝楼中游离脂肪酸陈文艳;陈志;尤进茂【摘要】合成制备了一种荧光标记试剂(2-(9吖啶酮)-乙酰肼),并成功应用于高压液相色谱法测定脂肪酸.2-(9吖啶酮)-乙酰肼与脂肪酸的衍生反应可在20分钟内完成.衍生物具有良好的荧光性质,激发和发射波长分别为260 nm和430nm.采用梯度洗脱使得20种脂肪酸在BDS!C8反相柱上得到良好分离,20种脂肪酸的线性系数均>0.996.当采用20mg栝楼样品进行分析时,脂肪酸检出限(三倍信噪比)在0.21!1.20μg/g之间.采用这种荧光试剂衍生的方法对栝楼根、茎、叶和果皮中的游离脂肪酸的含量进行定量分析.【期刊名称】《大庆师范学院学报》【年(卷),期】2017(037)003【总页数】5页(P72-76)【关键词】游离脂肪酸;高压液相色谱;荧光标记;栝楼;2-(9吖啶酮)-乙酰肼【作者】陈文艳;陈志;尤进茂【作者单位】青海师范大学生命与地理科学学院,青海西宁810008;青海师范大学生命与地理科学学院,青海西宁810008;青海师范大学生命与地理科学学院,青海西宁810008【正文语种】中文【中图分类】R284.1栝楼是葫芦科属一种多年生宿根攀援草本植物，其根、茎、叶、果皮、种子都可供药用[1]。

栝楼种子中富含脂肪酸，但是其根、茎、叶、果皮的脂肪酸却少有报道。

脂肪酸存在于所有生命体中并且是生物膜的结构性组成成分，其药理作用引起了营养学家和药理学家的广泛关注[2]。

由于栝楼根、茎、叶、果皮、种子都可供药用，因此快速准确测定栝楼中各部分的脂肪酸含量对于药用栝楼的质量分析是非常必要的。

由于脂肪酸本身不具有荧光，且紫外吸收非常弱，脂肪酸自身难于采用液相色谱分析。

脂肪酸的分析多数采用气相色谱[3-4]和气相色谱—质谱方法[5]。

但是气相色谱法在测定脂肪酸含量方面有明显的不足，例如长链不饱和脂肪酸在气相分析过程中不稳定[4]。

另外，气相色谱法常用的衍生试剂如三氟化硼和重氮甲烷，危险性和毒性均非常大。

柱前衍生化高效液相色谱法分析9种多糖中的单糖组成

柱前衍生化高效液相色谱法分析9种多糖中的单糖组成王媛媛;张晖;杨俊松;宗智慧【摘要】Objective To establish a precolumnderivatization procedure with 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone ( PMP )-high performance liquid chromatography ( HPLC ) method for the determination of the monosaccharide composition of nine polysaccharides.Methods The nine polysaccharides were hydrolyzed, derivatized by PMP and analyzed by HPLC with the Inertsil ODS-SP C18 column(260mm ×4.6mm,5μm).The mobile phase was the 20%triethylamine-buffer solution withKH2PO4(pH=6.9),and the flow rate was 1.0 ml/min.The UV absorbance was detected at a wavelength of 254 nm,and the injection volume was 10μl with the column temperature 30℃.Results The method was successful in the separation of the mixture monosac-charide standards.The calibration line of each monosaccharide had a good relationship.And the precision, stability and reproducibility were also good.The nine polysaccharides were composed of different monosac-charide and the contents had some difference.Conclusion The method was accurate and stable for the deter-mination of the monosaccharide composition and content of nine polysaccharides.%目的：建立1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（ PMP）柱前衍生化-高效液相色谱法（ HPLC）对甘草多糖等9种多糖的单糖组成成分进行分析。

AQC柱前衍生高效液相色谱法测定啤酒中的21种游离氨基酸

+ + 对于氨基酸的检测，考虑到一机多用，啤酒企业
［$ / *］大多采用反相高效液相色谱法（ BC97 ）。其中
" $ $# 试剂配制 " $ $ $ " # 衍生剂配制 + 吸取 $ %9 乙腈至衍生剂瓶中，加盖密封，涡旋振荡 $" 1 ，于 %% Q 加热 $" %/2 ，直至衍生剂粉末全部溶解。 " $ $ $ !# !$ 种氨基酸混合标准溶液的配制 + 分别移取 $# 种氨基酸混合标准溶液（ !. % %%") 8 9 ）、自行配制的浓度均为 !. % %%") 8 9 的 512 、 F)2 、 F.&. 和 ,’; * 种单标各 $"" ! 9 后，加入 %"" ! 9 超纯水，涡旋混匀，得到 !$ 种氨基酸的混合标准溶液，每种氨基酸的终浓度均为 ". !% %%") 8 9 。 " $ %# 色谱条件 + + 色谱柱： 5446* ,.3 氨基酸分析柱 7$, （ * !%， (. ’ %% 0 $%" %% ）；柱温： (’ Q ；进样量： $" ! 9 ；紫外检测波长： !*, 2% ；荧光检测：激发波长 !%" 2% ，发射波长 (’% 2% ；流动相：流动相 5， $"" %%") 8 9 三水乙酸钠 +% * & %%") 8 9 三乙胺混合水溶液，用 %" : 磷酸调节 ;B 至 % * #" ；流动相 A，超纯水；流动相 7，乙腈。流动相经 " * !! ! % 滤膜过滤和超纯氦脱气后使用。洗脱程序见表 $ 。

高效液相色谱法测定二羟甲基丙酸反应液

高效液相色谱法测定二羟甲基丙酸反应液纪晓红;邢伶;常丽霞【摘要】A method for detecting 2,2-dimethylol propionic acid ( DMPA )in reaction liquid by HPLC and using ODS-SP column (250 mm x 4.6 mm, 5 μm) was established. The mobile phase was methanol-phosphate buffered solution ( KH2PO3 30 mmol/L, pH 3.0 ), and the volume ratio was 5 : 95 at a flow rate of 0.8 mL/min, with 210 nm as the detection wavelength. On these conditions, the DMPA and impurities could be separated and the result was well. The method had good linearity at the range of 10-30mg/mL, r2=0.9999. The RSD of determination results was 0.36%, the recovery was 97.59%, and the detection limit was 2.0 mg/L. The method is suitable for qualitative and quantitative analysis 2,2-dimethylol propionic acid.%建立了用高效液相色谱法( HPLC)测定二羟甲基丙酸(DMPA)反应液的方法.采用ODS-SP反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-磷酸盐(磷酸二氢钾30 mmol/L,pH 3.0)(5∶95)缓冲溶液,流速为0.8 mL/min,检测波长为210 nm.在此条件下,二羟甲基丙酸与反应液中其它杂质分离较好.二羟基甲基酸浓度在10～30 mg/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,r2=0.9999.对供试品测定结果的相对标准偏差为0.36％,样品回收率为97.59％,检出限为2.0 mg/L.该方法适用于二羟甲基丙酸的定性定量分析.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2011(020)006【总页数】2页(P60-61)【关键词】高效液相色谱法( HPLC);二羟甲基丙酸;中控分析【作者】纪晓红;邢伶;常丽霞【作者单位】山东省生物化学工程重点实验室,济南250014;山东省生物化学工程重点实验室,济南250014;山东省生物化学工程重点实验室,济南250014【正文语种】中文二羟甲基丙酸因其独特的结构是目前一种比较理想的亲水单体，以它为原料制备的水性聚氨酯比国内用酒石酸法合成的产品在储存稳定性方面有较大提高。

柱前衍生-高效液相色谱法测定婴幼儿食品和乳品中胆碱含量

柱前衍生-高效液相色谱法测定婴幼儿食品和乳品中胆碱含量卢越圻;孙洁;金志浩;薛麟;袁雯菲
【期刊名称】《工业微生物》
【年(卷),期】2022(52)6
【摘要】建立了使用柱前衍生-高效液相色法测定婴幼儿食品和乳品中胆碱含量的方法。

试样经酸水解,将滤液进行衍生,HPLC分离,FLD检测,外标法定量。

衍生物的色谱表现良好,标准曲线线性良好,LOD为0.3 mg/100 g、LOQ为1 mg/100 g。

样品平均加标回收率为85.0%~110.4%,RSD为1.27%~3.78%。

对比GB 5413.20—2022第一法对相同样品测定的数据,结果显示两种方法的数据间差异不显著(p>0.05)。

本法能有效对样品中胆碱进行测定。

【总页数】5页(P27-31)
【作者】卢越圻;孙洁;金志浩;薛麟;袁雯菲
【作者单位】中检科(上海)测试技术有限公司;通标标准技术服务(上海)有限公司【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
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