血浆miR--320、miR--let--7e及miR--21作为视网膜母细胞瘤早期诊断标志物的研究
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材料与方法……………………………………………………．９ 实验结果……………………………………………………．．１６ 讨论…………………………………………………………２３ 小结…．……………………………………………………．．２７ 参考文献……………………………………………………．．２８ 综述：ｍｉＲＮＡ与儿童实体瘤………………………………………３３ 附录…………………………………………………………４３ 攻读学位期间发表文章情况………………………………………．４４ 致谢…………………………………………………………４５ 个人简历……………………………………………………．．４７
新乡医学院硕士学位论文
血浆ｍ ｉ Ｒ－３２０、ｍ ｉ Ｒ－ｌ ｅｔ－７ｅ和ｍ ｉ Ｒ－２１作为视网膜母细胞瘤 早期诊断标志物的研究 摘要
背景：视网膜母细胞瘤（Ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ）是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤，
全球每年新增ＲＢ患儿多达９０００例。目前发达国家ＲＢ的生存率己超过９０％，而我 国仅为５５％。造成这一差异的原因主要是发展中国家对ＲＢ的早期诊断相对滞后，不 少数ＲＢ患儿被确诊时肿瘤多已侵犯眼眶或颅内，而在医疗水平先进的发达国家，当 肿瘤局限在眼球内时疾病便可确诊。因此，寻找一种方便、快捷，灵敏且特异的分子 生物学指标对提高我国ＲＢ患儿的早期诊断率，挽救患儿生命至关重要。
目的：本文通过实时定量ＰＣＲ（ｒｅａｌ．ｔｉｍｅ ＰＣＲ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测候选ｍｉＲＮＡ分子
（ｍｉＲ．３７３、ｍｉＲ．５０３、ｍｉＲ．３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ．７ｅ、ｍｉＲ．４９２、ｍｉＲ－４９８和ｍｉＲ－２１）在视网
膜母细胞瘤（Ｉ也）患者和健康对照者血浆样本中的表达水平，验证并获得在ＲＢ血
浆中表达异常的ｍｉＲＮＡ，探讨其与ＲＢ患者临床特征之间的关系，并分析其作为ＲＢ 早期诊断分子标志物的临床价值。
结论：（１）ｍｉＲ．３２０、ｍｉＲ．１ｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ．２１在ＲＢ患者血浆中的表达均呈降低趋势，
其中以ｍｉＲ．３２０的低表达最为显著，提示ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ．２１可能参与了 ＲＢ的发生发展。（２）ｍｉＲ．３２０、ｍｉＲ．１ｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ－２１在不同年龄、性别、单双眼发 病及肿瘤分期的ＲＢ患者血浆中的表达无统计学差异，提示它们可能在ＲＢ早期形成 过程中起一定作用。（３）血浆ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ．２１中，以ｍｉＲ．３２０的曲线
并比较曲线下面积（ＡＵＣ值），分析血浆ｍｉＲＮＡ及其联合神经元特异性烯醇化酶
（ＮＳＥ）作为ＲＢ诊断指标的有效性。并结合患者的临床资料，揭示血浆ｍｉＲＮＡ与 ＲＢ患者临床特征之间的关系。
结果：（１）７个候选ｍｉＲＮＡ分子中，ｍｉＲ．３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ－２１在１５例ＲＢ患
新乡医学院硕士学位论文
本学位论文属于（请在以下相应方框内打“√”）：
１．保密口，在一年解密后适用本授权书。
２．不保密囱。
wk.baidu.com
作者签名：加ｌ删删
导师签名：
日期：＞口Ｊ牛年亍月７
１３
日期：２口／中年ｆ月、７日
目
录
摘要…………………………………………………………．１
Ａｂｓｔｒａｃｔ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．３
方法：（１）收集１５例初治的ＲＢ患者和１５例健康对照者的血浆样本，通过实时定
量ＰＣＲ技术，检测７个候选的ｍｉＲＮＡ分子（ｍｉＲ．３７３、ｍｉＲ．５０３、ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ－７ｅ、 ｍｉＲ－４９２、ｍｉＲ．４９８和ｍｉＲ－２１）在观察组和对照组中的表达水平，筛选表达异常的 ｍｉＲＮＡ。（２）在新收集的５０例初治ＲＢ患者和５０例健康对照者的血浆样本中，验证 初筛的ｍｉＲＮＡ分子在两组中的表达差异。（３）建立受试者工作特征曲线（ＲＯＣ曲线）
者血浆中的表达水平较１５例健康对照者降低（Ｐ值分别为：Ｐ＜０．００１，Ｐ＝０．０５６４，
Ｐ＝０．０４７５）。（２）验证ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ－２１在新收集的５０例ＲＢ患者和５０ 例健康对照者血浆中的表达水平后发现，ｍｉＲ．３２０、ｍｉＲ．１ｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ－２１在ＲＢ血浆 中的表达均呈下降趋势，其中ｍｉＲ．３２０在ＲＢ患几和健康对照者中的差异表达具有统 计学意义（尸＜Ｏ．０１）。（３）血浆ｍｉＲ．３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ．２１在不同年龄、性别、 肿瘤分期、单双眼发病的ＲＢ患者之间的表达无统计学差异。（４）ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ．１ｅｔ．７ｅ 和ｍｉＲ．２１的曲线下面积（ＡＵＣ值）分别为０．６６０（９５％ＣＩ：Ｏ．５５８．０．７５２，Ｐ＝０．００３６）、 ０．５８７（９５％ＣＩ：０．４８４．０．６８４，Ｐ＝０．１２８０）和０．５４８（９５％ＣＩ：０．４４６．０．６４８，Ｐ＝０．４１００）， 敏感性分别为５８％、７６％、４６％，特异性分别为７４％、４２％、７２％；ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ．１ｅｔ．７ｅ 和ｍｉＲ．２１分别联合ＮＳＥ的曲线下面积（ＡＵＣ值）分别为０．９９６（９５％ＣＩ：０．９５７．１．０００， Ｐ＜０．０００１）、０．９９１（９５％ＣＩ：０．９４８．１．０００，Ｐ＜０．０００１）和０．９９３（９５％ＣＩ：０．９５０．１．０００， 尸＜０．０００１），敏感性分别为９８％、９４％、９４％，特异性分别为９８％、１００％、１００％。
作者签名：力１荆泌
日期：）ｏ｜中年ｒ月７曰
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本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并
向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授
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新乡医学院 学位论文原创性声明
本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究
成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经 发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明
确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。
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材料与方法……………………………………………………．９ 实验结果……………………………………………………．．１６ 讨论…………………………………………………………２３ 小结…．……………………………………………………．．２７ 参考文献……………………………………………………．．２８ 综述：ｍｉＲＮＡ与儿童实体瘤………………………………………３３ 附录…………………………………………………………４３ 攻读学位期间发表文章情况………………………………………．４４ 致谢…………………………………………………………４５ 个人简历……………………………………………………．．４７
新乡医学院硕士学位论文
血浆ｍ ｉ Ｒ－３２０、ｍ ｉ Ｒ－ｌ ｅｔ－７ｅ和ｍ ｉ Ｒ－２１作为视网膜母细胞瘤 早期诊断标志物的研究 摘要
背景：视网膜母细胞瘤（Ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ）是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤，
全球每年新增ＲＢ患儿多达９０００例。目前发达国家ＲＢ的生存率己超过９０％，而我 国仅为５５％。造成这一差异的原因主要是发展中国家对ＲＢ的早期诊断相对滞后，不 少数ＲＢ患儿被确诊时肿瘤多已侵犯眼眶或颅内，而在医疗水平先进的发达国家，当 肿瘤局限在眼球内时疾病便可确诊。因此，寻找一种方便、快捷，灵敏且特异的分子 生物学指标对提高我国ＲＢ患儿的早期诊断率，挽救患儿生命至关重要。
目的：本文通过实时定量ＰＣＲ（ｒｅａｌ．ｔｉｍｅ ＰＣＲ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测候选ｍｉＲＮＡ分子
（ｍｉＲ．３７３、ｍｉＲ．５０３、ｍｉＲ．３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ．７ｅ、ｍｉＲ．４９２、ｍｉＲ－４９８和ｍｉＲ－２１）在视网
膜母细胞瘤（Ｉ也）患者和健康对照者血浆样本中的表达水平，验证并获得在ＲＢ血
浆中表达异常的ｍｉＲＮＡ，探讨其与ＲＢ患者临床特征之间的关系，并分析其作为ＲＢ 早期诊断分子标志物的临床价值。
结论：（１）ｍｉＲ．３２０、ｍｉＲ．１ｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ．２１在ＲＢ患者血浆中的表达均呈降低趋势，
其中以ｍｉＲ．３２０的低表达最为显著，提示ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ．２１可能参与了 ＲＢ的发生发展。（２）ｍｉＲ．３２０、ｍｉＲ．１ｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ－２１在不同年龄、性别、单双眼发 病及肿瘤分期的ＲＢ患者血浆中的表达无统计学差异，提示它们可能在ＲＢ早期形成 过程中起一定作用。（３）血浆ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ．２１中，以ｍｉＲ．３２０的曲线
并比较曲线下面积（ＡＵＣ值），分析血浆ｍｉＲＮＡ及其联合神经元特异性烯醇化酶
（ＮＳＥ）作为ＲＢ诊断指标的有效性。并结合患者的临床资料，揭示血浆ｍｉＲＮＡ与 ＲＢ患者临床特征之间的关系。
结果：（１）７个候选ｍｉＲＮＡ分子中，ｍｉＲ．３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ－２１在１５例ＲＢ患
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１．保密口，在一年解密后适用本授权书。
２．不保密囱。
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日期：＞口Ｊ牛年亍月７
１３
日期：２口／中年ｆ月、７日
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录
摘要…………………………………………………………．１
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方法：（１）收集１５例初治的ＲＢ患者和１５例健康对照者的血浆样本，通过实时定
量ＰＣＲ技术，检测７个候选的ｍｉＲＮＡ分子（ｍｉＲ．３７３、ｍｉＲ．５０３、ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ－７ｅ、 ｍｉＲ－４９２、ｍｉＲ．４９８和ｍｉＲ－２１）在观察组和对照组中的表达水平，筛选表达异常的 ｍｉＲＮＡ。（２）在新收集的５０例初治ＲＢ患者和５０例健康对照者的血浆样本中，验证 初筛的ｍｉＲＮＡ分子在两组中的表达差异。（３）建立受试者工作特征曲线（ＲＯＣ曲线）
者血浆中的表达水平较１５例健康对照者降低（Ｐ值分别为：Ｐ＜０．００１，Ｐ＝０．０５６４，
Ｐ＝０．０４７５）。（２）验证ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ－２１在新收集的５０例ＲＢ患者和５０ 例健康对照者血浆中的表达水平后发现，ｍｉＲ．３２０、ｍｉＲ．１ｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ－２１在ＲＢ血浆 中的表达均呈下降趋势，其中ｍｉＲ．３２０在ＲＢ患几和健康对照者中的差异表达具有统 计学意义（尸＜Ｏ．０１）。（３）血浆ｍｉＲ．３２０、ｍｉＲ－ｌｅｔ．７ｅ和ｍｉＲ．２１在不同年龄、性别、 肿瘤分期、单双眼发病的ＲＢ患者之间的表达无统计学差异。（４）ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ．１ｅｔ．７ｅ 和ｍｉＲ．２１的曲线下面积（ＡＵＣ值）分别为０．６６０（９５％ＣＩ：Ｏ．５５８．０．７５２，Ｐ＝０．００３６）、 ０．５８７（９５％ＣＩ：０．４８４．０．６８４，Ｐ＝０．１２８０）和０．５４８（９５％ＣＩ：０．４４６．０．６４８，Ｐ＝０．４１００）， 敏感性分别为５８％、７６％、４６％，特异性分别为７４％、４２％、７２％；ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ．１ｅｔ．７ｅ 和ｍｉＲ．２１分别联合ＮＳＥ的曲线下面积（ＡＵＣ值）分别为０．９９６（９５％ＣＩ：０．９５７．１．０００， Ｐ＜０．０００１）、０．９９１（９５％ＣＩ：０．９４８．１．０００，Ｐ＜０．０００１）和０．９９３（９５％ＣＩ：０．９５０．１．０００， 尸＜０．０００１），敏感性分别为９８％、９４％、９４％，特异性分别为９８％、１００％、１００％。
作者签名：力１荆泌
日期：）ｏ｜中年ｒ月７曰
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本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究
成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经 发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明
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