waters 消耗品及色谱柱指南
Waters高效液相色谱柱简单介绍与选择
Waters高效液相色谱柱简单介绍与选择2016-04-25 Bruce Lee生产高效液相色谱柱的厂家有很多，如Waters，Agilent，Phenomenex，Shimadzu，Thermo等，每家供应商又生产多个系列，导致市场上的液相色谱柱的可选择性极强。
目前实验室以及公司，企业使用最多的是Waters以及Agilent所生产的RP液相色谱柱。
Waters主要有Symmetry，Sunfire，XTerra，XBridge，XSelect，CORTECS以及Atlantis系列等，其详细分类以及键合相如下。
Figure 1 Waters Symmetry column familyFigure 2 Waters Sunfire column familySymmetry与Sunfire系列色谱柱使用高纯度硅胶（B型）作为固定相基质，摒除金属离子杂质对固定相Si-O键的促进水解作用，此外由于金属离子含量特别低，在对其表面键合选择性烃基或内嵌极性官能团烃基时，可通过配体添加量控制硅胶表面键合相的多少，因此其最大特点在于批次之间的重现性。
两个系列均采用封端技术，Sunfire C8与C18表面载碳量分别为12%和16%；SymmetryC8与C18载碳量均为12%，因此两个系列的C8色谱柱对于分析物的保留能力上没有本质的区别，而Sunfire C18色谱柱则相比Symmetry C18色谱柱，对于非极性比较大的分析物具有更强一些的保留能力，当然对于有机相的最低比例也相对比较高一些。
Symmetry C8 Prep与C18 Prep色谱柱的填料粒径为7 um，其设计用途为制备；Symmetry300 C18（孔径300埃，载碳量8.5%）与Symmetry300 C4（孔径300埃，载碳量2.8%）则是为生物大分子多肽以及蛋白质的分离，分析而设计。
Symmetry Shield RP 18内嵌极性官能团色谱柱，由于在靠近硅胶表面的极性官能团的存在，增加了硅胶表面的水分子浓度，改善了与水之间的浸润状况;因此可以允许使用极高水相作为分离，分析条件，而不会出现孔隙内去湿现象，对于分析碱性等大极性分析物而言，减少其保留能力，改善峰形，具有很高的方法重现性。
waters高效液相色谱系统操作规程(入门)
1. 目的规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
2. 范围本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
3. 职责质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。
4. 系统组成本系统由Waters 600E多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Waters在线脱气机、Rheodyne 7725i手动进样阀、Waters 2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成，另外还包括打印机、断电保护器和通风柜等辅助设备。
5. 程序5.1. 准备5.1.1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用0.45μm滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。
5.1.2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
5.2. 开机和泵操作5.2.1. 开机5.2.1.1. 接通断电保护器的电源，依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。
5.2.1.2. 打开Millennium32软件，按「Login...」，输入用户名和密码，按「OK」注册进入系统主界面。
在Project档内选择所需的项目，右击『Run Samples』图标，选择色谱系统“600_2487”后打开QuickSet窗口。
5.2.2. 更换溶剂5.2.2.1. 打开600E泵后，转动进口集合管阀手柄（以下简称手柄）至RUN位置；5.2.2.2. 将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂，向右打开参照阀（断开柱和进样器）；5.2.2.3. 按［Direct］键使其显示直接控制屏幕，设流速为1ml/min（梯度配比阀在0ml/min时不工作）；5.2.2.4. 选择欲使用的某一溶剂通道，设其比例为100%，其它为0%；5.2.2.5. 将输液管从原有溶剂瓶中取出，放入一干净的空瓶中；5.2.2.6. 逆时钟转动手柄至DRAW位置，用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml 溶剂；5.2.2.7. 再将输液管放入新溶剂瓶内，继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止；5.2.2.8. 转动手柄至RUN位置，将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。
waters xbridge protein beh色谱柱使用说明
waters xbridge protein beh色谱柱使用说明1. 引言1.1 概述在生物医学研究和制药领域中，蛋白质是至关重要的研究对象。
为了更好地理解蛋白质的结构和功能，科学家们需要利用高效的色谱柱来进行分离和纯化。
Waters XBridge Protein BEH色谱柱作为一种先进的工具，能够提供快速、高效、稳定的蛋白质纯化解决方案。
1.2 文章结构本文将对Waters XBridge Protein BEH色谱柱进行详细介绍，并提供使用说明和操作技巧。
首先，我们将概述该色谱柱的基本情况，包括其结构和特点。
接着，我们将讨论该色谱柱的工作原理，并阐述其在不同应用领域中的优势和适用性。
然后，我们将详细介绍如何准备样品并装载到色谱柱中，以及如何设置合适的色谱条件来实现最佳分离效果。
最后，我们将介绍一些注意事项、常见问题解答以及安全须知与储存要求。
通过阅读本文，读者能够全面了解Waters XBridge Protein BEH色谱柱的使用方法，并能够在实验中取得准确可靠的结果。
1.3 目的本文旨在向用户提供关于Waters XBridge Protein BEH色谱柱的详细说明，帮助用户正确并高效地使用该色谱柱进行蛋白质纯化。
我们希望通过本文的阐述，读者能够深入了解该色谱柱的特点和应用领域，并能够根据具体实验需求，熟练掌握样品准备、色谱条件设置以及数据分析与结果解读等技巧，从而为自己的科研工作或制药生产提供有力支持。
2. Waters XBridge Protein BEH色谱柱2.1 色谱柱概述：Waters XBridge Protein BEH色谱柱是一种高性能液相色谱（HPLC）柱，主要用于蛋白质和肽段的分离和纯化。
该色谱柱具有独特的粒径和孔隙结构，能够提供出色的分离效果和样品回收率。
2.2 工作原理：Waters XBridge Protein BEH色谱柱采用亲水性强的氢化硅胶作为填料材料，通过调节流动相中溶剂成分和温度等条件，实现对不同蛋白质和肽段的选择性分离。
watershsst3色谱柱说明书
watershsst3色谱柱说明书Waters HSS T3色谱柱是一种高效液相色谱柱，被广泛应用于生命科学、制药、环境和食品分析等领域。
该柱具有优异的分离性能和稳定性，可用于分离复杂的混合物，提供准确和可靠的分析结果。
以下是关于Waters HSS T3色谱柱的详细说明：1. 柱材料：Waters HSS T3色谱柱采用高质量的硅胶材料制成，具有特殊的表面处理，能够提供优异的色谱性能和稳定性。
2. 柱尺寸：Waters HSS T3色谱柱的常见尺寸为4.6mm乘250mm，具有较大的分离能力和样品容量。
此外，还提供其他规格的色谱柱可供选择。
3. 分离性能：Waters HSS T3色谱柱具有极好的分离性能，可有效分离复杂样品中的成分。
其独特的柱底和柱壁结构可以增强样品和柱相之间的相互作用，提高分离效果。
4. 稳定性：Waters HSS T3色谱柱具有出色的稳定性和重现性，可持续运行大量样品分析而不产生漂移或降解。
柱底和柱壁的特殊表面处理使得该色谱柱不易受到污染和损害，有助于保持柱的使用寿命。
5. 应用范围：Waters HSS T3色谱柱广泛适用于各种样品类型的分析，包括有机化合物、天然产物、药物、代谢产物等。
它可用于定量和定性分析，以及结构鉴定和纯化工作。
6. 色谱条件：Waters HSS T3色谱柱适用于反相液相色谱和离子对色谱法。
在反相液相色谱中，可以使用不同的流动相和梯度条件来优化分离效果。
在离子对色谱中，可以添加离子对试剂来改变运行条件。
7. 包装和存储：Waters HSS T3色谱柱以高压不锈钢柱体包装，旨在保护柱底和柱壁免受损坏和污染。
柱体上标有批号和有效期，以便用户能够正确追踪使用日期和有效期限。
该色谱柱应存放在避光、干燥和温度控制的环境中，以确保其质量和性能。
总之，Waters HSS T3色谱柱是一种优质的色谱柱，具有卓越的分离性能和稳定性，适用于各种复杂样品的分析工作。
色谱柱的使用说明
1、色谱柱的使用说明：（1）色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。
在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。
（2）流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。
另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0，BDS C18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0-10.0。
当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。
（3）样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。
2、色谱柱的保存（1）反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。
注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
（2）长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存的温度最好是室温。
3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。
Waters紫外检测器及色谱柱技术参数
Waters紫外检测器及色谱柱技术参数
1紫外可见检测器（2489型）
1.1*波长、极性和灯源开关均可时间编程控制
1.2内置硝酸铒滤光片用于波长校准及校正，紫外光、可见光都可以校正。
用256.7nm、379.0nm、521.5nm及656.1nm共四个波长校正。
开机时
校准，随时可以进行校正
1.3*可变波长范围：190～700nm
1.4*检测通道：2个
1.5*光源：氘灯
1.6*波长准确度：±1nm
1.7*带宽：5nm
1.8*测量范围：0.0001～4.0000AUFS
1.9耐压：1000psi
1.10*基线噪音：±0.35x10-5AU，254nm在1mL/min（甲醇）
1.11基线噪音：双通道±1.0x10-5AU，230nm，280nm
1.12*漂移：1 x 10-4AU/hour
1.13*梯形狭缝的光路设计，从硬件上消除示差折光效应
1.14*具有操作面板，可以独立设定工作参数、显示运行状态
1.15*分析池：10mm池长
1.16*半制备流通池：3mm池长
2 色谱柱：C18色谱柱，4.6*150mm 1根，。
waters hss t3色谱柱说明书
waters hss t3色谱柱说明书摘要：一、Waters HSS T3 色谱柱简介二、Waters HSS T3 色谱柱的特点三、Waters HSS T3 色谱柱的应用范围四、Waters HSS T3 色谱柱的安装与使用五、Waters HSS T3 色谱柱的维护与保养正文：一、Waters HSS T3 色谱柱简介Waters HSS T3 色谱柱是一种高效、快速的液相色谱柱，由Waters 公司生产。
这款色谱柱采用了独特的HSS（High Speed Silica）技术，具有高柱效、高分辨率和快速分离等特点，广泛应用于药物分析、生物制药、环境监测等领域。
二、Waters HSS T3 色谱柱的特点1.高柱效：Waters HSS T3 色谱柱具有高柱效，可以提高分析速度和分离效果。
2.高分辨率：这款色谱柱的分辨率较高，能够对样品进行精细的分离和检测。
3.快速分离：Waters HSS T3 色谱柱采用了HSS 技术，可以实现快速分离，提高分析效率。
4.广泛的应用范围：这款色谱柱适用于多种样品的分析，包括药物分析、生物制药、环境监测等领域。
三、Waters HSS T3 色谱柱的应用范围Waters HSS T3 色谱柱主要用于药物分析、生物制药、环境监测等领域，可以对各种样品进行高效、快速的分离和检测。
四、Waters HSS T3 色谱柱的安装与使用1.安装：在安装Waters HSS T3 色谱柱时，需要先将色谱柱的两端用封口胶封好，然后将其插入色谱仪的进样口和检测器接口。
2.使用：使用Waters HSS T3 色谱柱进行分析时，需要按照以下步骤操作：（1）样品准备：将待分析的样品进行预处理，使其符合色谱分析的要求。
（2）样品进样：将样品溶液通过进样器注入色谱柱中。
（3）色谱分离：打开色谱仪的泵，使样品在色谱柱中进行分离。
（4）检测：分离后的样品通过检测器进行检测，得到色谱图。
waters CSH18色谱柱说明书
waters CSH18色谱柱说明书使用新鲜洁净的水与乙腈。
冲洗系统，确保系统干净，不含任何缓冲盐和污染物。
取用色谱柱时避免磕碰掉落。
将色谱柱入口端连接到系统上，柱出口端先不要连接，色谱柱身上有箭头标明正确流向。
在0.1ml、min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱，然后在2分钟内将流速升至0.5ml、min。
当溶剂均匀的从柱出口端流出，停流速，将色谱柱出口端接到系统检测器上（这样可以避免气泡进入检测系统，并且可快速达到基线平衡）。
重启流速，按照步骤4的方法逐渐提高流速，至常规分析时所使用的流速。
参考柱效测试报告中的方法，使用该流动相条件平衡色谱柱，通常需要使用5--10倍柱体积的流动相，直至压力与基线稳定。
测试柱效。
如果没有柱效测试报告中的分析物，请联系沃特世化学消耗品部门寻求支持，使用合适的浓度与进样量。
柱效结果略低于柱效测试报告属正常情况。
如结果明显偏低、峰形拖尾，提示色谱柱和、或所使用的液相系统处于非理想状态，需要进行故障排查。
当使用2.1mm内径色谱柱时，建议优化系统以减少谱带展宽，包括：使用检测器微量流通池，减少进样器loop环体积，使用较小内径（如0.005或0.12mm）的系统管路。
并确保管路与色谱柱连接恰当、无死体积。
当使用小颗粒填料（如2.5um）短柱进行高效快速分离时，需要考虑以下因素：1、确保管路与色谱柱连接恰当、无死体积，尽量优化系统减少谱带展宽。
2、提高采样频率至10点、秒以上。
3、较小粒径的色谱柱产生的柱压较高，而较小粒径要达到最优色谱效率所需的线速度较高，请根据所用LC系统的实际情况调节流速。
4、可使用较高的柱温来补偿小颗粒造成的压力升高，例如40°C。
使用杂化颗粒反相色谱柱时，可使用45°C或更高。
Waters HPLC色谱柱介绍
如何选择理想的 HPLC分析柱 HPLC分析柱©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation1如何看待色谱柱？色谱柱是液相色谱工作的最重要又最常使用的工具对工具了解越多，越有可能尽早选对合适的工具，使工作开展的更顺 利工欲善其事，必先利其器！©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation2沃特世价值所在： 技术能力+品质保障+专业服务Better traceability & control of the entire processWaters©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011• Manufactures under cGMP, ISO 9001 and ISO 13485 guidelines • Registered with FDA as a medical device manufacturer©2011 Waters Corporation 3概要如何认识色谱柱？ 如何认识色谱柱？ 沃特世色谱柱： 沃特世色谱柱：为色谱工作者的任务而设计 XBridge Atlantis SunFire XSelect UPLC—HPLC方法转换 HPLC—OBD 制备柱无优放大©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation4沃特世色谱柱： 专为色谱分析工作者所需而设计宽pH范围、耐受性最强、最通用的色谱柱增强极性化合物保留的专用硅胶色谱柱高容量、峰形柱效最优化的通用硅胶色谱柱宽选择性覆盖、LCMS方法开发的首选色谱柱©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation5应对耐受性、通用性的需求色谱工作者的需求： 工作者的需求：方法在高pH条件下！！ 方法在较高温度条件下！！ 耐受性？！ 通用性？！2.5, 3.5, 5, 10 µm柱效？！ 样品复杂难以分离？！ 需要各种键合相？ 需要各种柱规格？©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation6高pH耐受性对碱性化合物的分析特别有利 —分离选择性、方法耐受性与柱使用寿命©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation7XBridge： 基于第二代杂化颗粒技术BEH (Bridged Ethylene Hybrid)硅氧骨架中嵌入亚乙基桥- pH范围耐受更宽 - 机械强度更高 - 柱效佳U.S. Patent No. 6,686,035 B2©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011Anal. Chem. 2003, 75, 6781-6788©2011 Waters Corporation8增加化合物的保留并提高灵敏度： High pH Mobile phase2HIGH pH0.1% NH4OH3 6 1 4Morphine Morphine-3ß–o-glucuronide 10-hydroxymorphine5% 00.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 2.00 2.20 2.40 2.60 2.80 3.00 3.20 3.40 3.60 3.80LOW pH0.1% HCOOHCompounds 1. % 10-hydroxymorphineMorphine-6ß–o-glucuronide6 4,5 2 1 32. 3.Morphine-3β-D-glucuronide Morphine-6β-D-glucuronide4. 5. 6. Morphine Morphine N-oxide 6-acetylmorphineMorphine N-oxide0 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 2.00 2.20 2.40 2.60 2.80 3.00 3.20 3.40 3.60 3.80©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©20116-acetylmorphineMinutes©2011 Waters Corporation9XBridge —耐受性最强、最为广泛适用2.5, 3.5, 5, 10 µm 1.7 µm耐受性最强、最为广泛适 广泛适用的色谱柱第二代杂化颗粒技术 无以伦比的流动相pH、温度和压力的耐受范围 达到前所未有的柱效、峰形和稳定性水平 广泛的键合相选择，配合各种分析物所需 齐全的柱规格供应，满足各种规模需要©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation103NH 3CH +17通过极性嵌入基团保留水 可完全兼容100%水相屏蔽硅醇基，对碱性化合物峰形更佳 提供与C18不同的选择性pH 7.0痢特灵(Furazolidone)原料药的杂质分析实例Ligand type:Trifunctional AmideParticle size:1.7, 3.5 µm Ligand density:7.5 µmol/m 2Carbon load:12% Endcap style:NonepH range:2-11Ligand type:UnbondedParticle size:1.7, 2.5, 3.5, 5 µm Ligand density:— Carbon load:— Endcap style:— pH range:1-9Minutes123321=0.26=0.25Reversed-PhaseXBridge C 18HILICXBridge HILIC1. 6-acetyl morphineHILIC 可以提供和反相不同的分离选择性应用于生物医药行业的：—肽的反相分析与分离纯化—小蛋白药物的反相分析—寡核苷酸的离子对反相分析与分离纯化杂化颗粒，无以伦比的流动相pH与温度的耐受性完整的方法与应用资料，整体方案专用柱，经肽谱、蛋白混标或寡核苷酸阶梯混标质控确保批次重现性工作者的需求：：解决色谱工作者的需求2.5,3.5, 5, 10 µm 适用于高pH方法！！耐受较高温度条件！！耐受性极佳！通用性好！柱效高！多种键合相、多种柱规格适应各种项目需要！色谱工作者的需求和问题：越来越多的极性化合物项目！ 极性化合物的保留难？！离子对试剂应用不便！峰形？！柱耐受性？！1. Thiourea2. 5-Fluorocytosine (B)3. Adenine (B)4. Guanosine-5'-monophosphate5. Thymine注：所示色谱柱性能比较情况，与具体操作条件相关，并不代表所有应用情况（法律申明）增强极性化合物保留的专用色谱柱—首选Atlantis T3反相保留反相保留极性化合物首选：提高保留，避免使用离子对试剂 提供pH 2-8全范围的完美峰形 低pH 条件下的耐受性强，柱寿命好积极应对色谱工作者的问题：增强对极性化合物的保留！ 简便的反相条件！ 峰形佳！ 柱耐受性好！ 广受认可与赞誉！色谱工作者的需求和问题：柱效？！柱容量？！载样量高？！中-低pH条件下碱性化合物拖尾严重？！ 样品杂质或相关物质分析及分离？！51V o 234Symmetry ®C 185 µm USP T f = 1.69N = 696151V o234以Amitriptyline （峰5）计算拖尾因子USP T f pH7条件下SunFire™C 185 µm USP T f = 1.26N = 8203MinutesZorbax®SB C18Luna®C18(2)SunFire™C 18Time (minutes)246810Conditions : 3 µm, 3.0 x 150 mm 28:72 乙腈/ 20 mM 甲酸; 0.7 mL/min; 30 °CSN NNOHCl在方法开发过程中，峰拖尾会对任何特定含量方法影响其分离度与灵敏度。
沃特世液相色谱柱及消耗品简要指南
英文回答：The Waters HPLC column is a sophisticated and advanced liquid chromatography apparatus, specifically engineered to facilitate the separation and analysis of a diverse spectrum ofpounds within various samples. Crafted from top-tier materials, it is adaptable to a wide array of solvents and buffers. This column is available in a variety of dimensions and particle sizes to cater to the specific demands of a plethora of applications. Installation and operation are seamless, with the added benefit of ensuring exceptional resolution and reproducibility, thereby engendering accurate and dependable results. It is the epitome of excellence for employment in pharmaceutical, environmental, food and beverage sectors, as well as various other industries, for both routine analysis and research endeavors.Waters HPLC柱是一个精密和先进的液相色谱仪，专门设计用于促进各种样品中各种磅的分离和分析。
Waters Styragel柱子的维护与使用手册-2
Waters Styragel 柱子的维护与使用手册声明：禁止在未经允许下修改本资料，并且不应理解为是Millipore公司的承诺。
对本资料中出现的错误M公司不承担任何责任。
这本手册在出版期间是完整和准确的。
M公司不负责由于本手册的使用带来的任何损失。
1993年 Millipore公司 美国出版 版权所有 本手册或其中部分理论在没有经过出版者的允许禁止复制。
M，Styragel，Fluoropore和Millex是M公司的注册商标，Waters是M公司的注册商标。
1、介绍本手册介绍的是Waters Styragel HR、HT和HMW系列凝胶渗透色谱柱的使用和维护。
请仔细阅读本手册，遵循本手册的建议将会延长柱子的寿命并加强色谱图的重现性。
本手册描述了Waters Styragel色谱柱的以下三类：Styragel HR；Styragel HT；Styragel HMW。
Waters Styragel柱子的填料为高性能、多孔、高交联度的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物颗粒。
他们的不同性能使你能够选择最优的柱子来满足实验应用。
Waters Styragel HR：可用于低分子量、低聚物和添加剂的高分辨分析。
该柱装填5µm颗粒，能够提供此种分析类形所需的高塔板数。
Styragel HT：可用于分析中等分子量范围聚合物的分析。
他们是分子量分析中用途最多的。
该柱装填10µm颗粒，在较宽的温度范围和溶剂范围内均有可靠的性能。
Styragel HMW：专门用来分析超高分子量聚合物。
装填有20µm颗粒和10µmHMW玻璃原料的该柱子能够有效防止由于剪切而对超高分子量聚合物造成的破坏，这种剪切往往出现在聚合物与小颗粒之间。
2、安装色谱柱组本章概述：准备GPC/HPLC系统；安装色谱柱；维修破坏的压紧螺丝；平衡色谱柱。
准备GPC/HPLC系统系统2.1 准备2.1在将色谱柱接到GPC/HPLC系统流路前，应该先准备系统：1、用零死体积（我的理解为两通）单元代替以前的色谱柱，将进样器直接与检测器相连。
各种型号Waters色谱柱使用指南
各种型号Waters色谱柱使用指南Waters是一家知名的科学仪器制造公司，其色谱柱广泛应用于化学、生物、环境等领域的分析研究。
Waters色谱柱根据不同的分析需求，有多种型号和规格可供选择。
本文将对各种型号Waters色谱柱的使用进行指南，以帮助用户更好地理解和应用这些色谱柱。
1. XBridge 色谱柱系列XBridge色谱柱系列是Waters公司最受欢迎和广泛使用的色谱柱系列之一、它具有优异的耐久性和高效分离能力，适用于各种样品类型的分离和分析。
根据不同的分离模式和分析目标，可以选择不同孔径（1.7、3.5、5、7、10 um）和不同化学改性（C18、C8、Phenyl）的XBridge色谱柱。
使用XBridge色谱柱时，应注意以下几点：-尽量避免使用过高的流速和压力，以免损坏色谱柱。
-在使用之前，应根据样品类型和分析目标选择最适合的色谱柱类型和规格。
-在样品进样之前，应先进行柱平衡，以确保色谱柱的稳定性和重复性。
-根据需要，可以选择柱温控制器进行加热或冷却，以提高分离效果。
2. Acquity UPLC 色谱柱系列Acquity UPLC（超高效液相色谱）色谱柱系列是一种应用于更高效液相色谱系统的色谱柱。
它具有更小的粒径（1.7、2.5 um）和更大的表面积，可以提供更高的分析速度和分离效果。
Acquity UPLC色谱柱适用于对分离效果要求较高、分析时间较短的应用。
在使用Acquity UPLC色谱柱时，应注意以下几点：-使用之前，应确保所使用的色谱柱与液相色谱系统兼容，并进行适当的柱平衡。
-尽量避免在超高压下使用过高的流速，以免损坏色谱柱。
-在样品进样之前，应先进行柱平衡和条件优化，以提高色谱分离效果。
3. SunFire 色谱柱系列SunFire色谱柱系列是一种高性能液相色谱柱，适用于多种样品类型的分离和分析。
它具有优异的化学稳定性和机械强度，适用于各种环境和温度条件下的分析。
在使用SunFire色谱柱时，应注意以下几点：-使用之前，应根据样品类型和分析目标选择适当的色谱柱类型和规格。
waters hss t3色谱柱说明书
waters hss t3色谱柱说明书全文共四篇示例，供您参考第一篇示例：一、引言色谱柱是液相色谱技术中至关重要的部分，它直接影响到色谱分离的效果与结果。
Waters HSS T3色谱柱作为Waters公司的一款重要产品，具有高效分离、优异耐久性和广泛适用性等特点，受到了广泛的关注和应用。
本文将详细介绍Waters HSS T3色谱柱的特点、使用方法以及注意事项，希望能够帮助用户更好地了解和使用该产品。
二、产品特点1. 高效分离：Waters HSS T3色谱柱采用特殊的填料材料和粒径分布，具有优异的分离能力，能够有效解决样品分析中的复杂性和交叉干扰问题。
2. 广泛适用：该色谱柱适用于多种样品类型的分离，包括有机物、药物、生物样品等，具有很强的通用性。
3. 耐久稳定：Waters HSS T3色谱柱具有良好的耐久性和稳定性，能够承受高压和多次重复使用，保证分析结果的可靠性。
4. 高分辨率：由于HSS T3色谱柱的独特设计和材料特性，使得其在保证分离效果的能够提供高分辨率的分析结果，有利于样品成分的准确检测和定量分析。
5. 良好的再生性：Waters HSS T3色谱柱在适当条件下具有良好的再生性能，可以反复使用，延长色谱柱的使用寿命，降低分析成本。
三、使用方法1. 准备工作：在使用Waters HSS T3色谱柱前，应先进行适当的准备工作，包括浸泡、平衡和洗脱等步骤，以确保色谱柱内部的填料材料和介质处于最佳状态。
2. 样品预处理：对于不同类型的样品，需进行相应的预处理工作，如溶解、过滤、稀释等，以确保样品的纯度和适用性，避免对色谱柱造成不必要的损坏或污染。
3. 流动相选择：根据样品类型及分析要求，选择合适的流动相，并根据需要进行适当的调节和混合，以保证在色谱分离过程中的稳定性和有效性。
4. 良好的保养：在使用完成后，应及时对色谱柱进行适当的保养和再生，包括冲洗、干燥、存放等步骤，以保证色谱柱的长期稳定性和再生性能。
waters色谱柱相关知识
Waters特殊应用的色谱柱(4)
Waters生命科学专用柱(2)
糖蛋白的寡聚糖分析及纯化
离子交换柱(酸性)，Glyco-Pak DEAE 分配柱(中性)，Glyco-Pak N (7.8×300mm) Carbohydrate Analysis
儿茶酚胺分析柱
Resolve C18 (传统方法)、Symmetry C8
C1 C4 C6 C8 C18 Phenyl CN NH2
mBandaPak
Resolve
Nova-Pak
Delta-Pak
Symmetry
Spherisorb
Waters不同品牌的色谱柱
m-BondaPak
文献背景强, 是工业标准 平均孔径125Å，10mm高活性、无定形硅胶 中等疏水性表面，端基封口。有独特选择性
NovaPak C18
胆甾醇及未皂化的油中的抗氧剂的分析
Styragel HR 100A及500A柱有效地分离。
离子排斥类型色谱柱，用于有机酸，醇和碳水化合 物类的分析，适合于分析单糖类、有机酸或糖酸
离子排斥及反相混合类型的色谱柱，可测定葡萄酒 、啤酒或其他饮料中的乙醇及有机酸的种类及含量， 以确定其香型
对称峰形，好重现性，不同的选择性，使用寿命长
waters xbridge protein beh色谱柱使用说明
waters xbridge protein beh色谱柱使用说明一、引言Waters XBridge Protein BEH色谱柱是一种用于分离和纯化蛋白质的高效液相色谱柱。
本文将详细介绍该色谱柱的使用方法，并说明如何充填和平衡柱子，以及优化分离条件和储存建议。
二、色谱柱的充填与平衡1. 初始准备在充填色谱柱之前，需确认柱子和其他设备已进行有效的清洗和消毒。
请确保所有操作都在洁净和无尘的实验环境中进行。
2. 色谱柱的底部连接将色谱柱的底部与液相色谱系统连接，确保连接紧密无漏。
确认柱子与系统的兼容性以及接口的完整性。
3. 柱子的充填使用适当的方法将柱子充填物均匀地充入色谱柱中。
充填时要小心谨慎，以避免产生气泡或不均匀的充填物分布。
4. 床高检查充填完成后，使用适当的工具测量柱子的床高。
确保床高符合规定，并进行必要的校正。
5. 柱子的平衡连接柱子至液相色谱系统，使用流动相进行柱子的平衡。
按照柱子说明书中的建议流速和平衡时间进行操作。
确保柱子完全平衡以获得稳定和可重复的色谱分离结果。
三、优化分离条件1. 流动相配制根据待分离蛋白质的性质和需求，选择合适的流动相。
通常包括溶剂体系、添加剂和缓冲剂的选择。
确保流动相的配制和pH值调整符合实验要求。
2. 流速优化通过改变流速来优化对待分离蛋白质的分离度和分离时间。
一般来说，较高的流速可提高分离速度，但可能会牺牲分离的分辨率。
根据实际需要进行适当的调整。
3. 温度控制对于某些蛋白质的分离，温度的调控也是必要的。
根据实验要求，选择适当的工作温度和温度控制方法。
4. 采集条件根据分析和应用的不同，选择适当的采集条件来获取所需的色谱峰。
根据具体实验目的，灵活选择分析和监测方法。
四、储存建议1. 柱子的保养每次使用后，根据色谱柱说明书中的建议进行柱子的保养和清洁。
遵循正确的操作规程，确保柱子处于最佳状态。
2. 储存条件当柱子不使用时，将其储存在干燥、阴凉和无尘的环境中。
Waters_液相色谱化学品
Oasis MCX 填料
碱性药物的独特选择性
尿样、血样中提取碱性药物及代谢产物的最佳选择 成功实例：
组织、饲料中的盐酸克伦特罗 果汁中的防霉剂，多菌灵、涕必灵
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适合于酸性药物提取的Oasis® MAX
反相
C18/tC18/C8/tC2/Porapak/RDX/NH2/CN/Diol
离子交换
Accell Plus QMA/ Accel Plus CM
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Sep-Pak 小柱的外观
Plus
Classic
Light
Vac
Vac RC
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20孔提取装置的配件
WAT200685：针阀（Needle valve），每包20个，可以重
复使用 – 若用户仅使用Oasis 小柱，可不配置此项
WAT054260： Adapter (to attach reservoir to 1,3 & 6cc
特征二：通用型吸附剂 优势
在很宽的范围内保留酸性、碱性及中性化合物
益处
– 对极性化合物可获得较高回收率 – 一种吸附剂适用于大多数SPE提取 – 一个方法可同时提取药物及其代谢产物
且获得重现性好的高回收率
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Vac cartridge), 每包12个，可以重复使用
WAT048160：Adapter (to attach reservoir to 12, 20 &
waters H-class-Emp简易操作手册
Waters 常规反相UPLC-H Class简易操作步骤一.准备1.流动相准备:有机试剂（HPLC级），水（新鲜超纯水，18.2mΩ），盐流动相（需过滤）Seal wash：10% 甲醇(或异丙醇等有机相)Needle wash：50%甲醇Purge: 10%甲醇2.样品准备: 0.5-1.5mL，过滤后放入样品室3.色谱柱准备: 按流速方向安装，接头注意防止死体积，连接所需使用的检测器二.仪器开机:1.开机:电脑主机（待本地连接完成）—仪器主机（FTN-QSM-PDA）—Empower软件2.启动系统: 开机/更换溶剂时执行，溶剂置换，气泡排除ACQUITY控制台中,左边树状栏选中“系统”——控制——“启动系统”——检查如下设置——启动，等待仪器自动完成系统启动工作QSM：选中需要使用到的ABCD/密封清洗溶剂，灌注3minFTN：清洗溶剂15秒，清除溶剂5个循环平衡到方法：流速0ml/mim3.平衡: 控制台中QSM中设置流速缓冲盐体系：设置水90%：有机相10%，0.2mL/min运行3～5min后，才能运行缓冲盐非缓冲体系：根据实验条件设置流动相比例与流速，柱温三.Empower登录初始用户名：system 密码：manager四.配置系统1.选择系统:根据需要选择所需使用的检测器Empower主页面—配置系统—左边树状目录选择“系统”—右边选中不需使用的系统，右键—离线—选择需用的系统，右键—在线2.新建项目: 建立数据/方法等存放目录Empower主页面—配置系统—左边树状目录选择“项目”—右键—新建项目—选择父项目，下一步——表空间（建议200-500M）——选择源项目，要复制的参数（建议Default）——命名并确定3.备份项目: 定期备份，防止系统，软件故障Empower主页面—配置系统—左边树状目录选择“项目”—选中需备份的项目—右键备份项目——浏览选择存放路径——下一步——完成备份出来的文件夹可另用硬盘存放，以保证数据安全。
WATERS液相色谱教程三四七(最全)
色谱泵的维护保养
流动相要过滤
常用缓冲液时，停泵前要用水清洗泵头，并用水 冲洗柱塞杆清洗孔 关闭排液阀时，不要太用力拧紧，以不渗液为准 更换流动相时，要保证两种溶剂的互溶性 , 如不 互溶，要用一种中间溶剂过渡 色谱泵在停用时 ,应先用水洗去缓冲盐 ,然后用纯 甲醇充满泵头及管路,并保存在纯甲醇中
50% MeOH 50 % ACN 100% H2O 100% MeOH 100% ACN
psi
2500 2000 1500 1000 500 0 0.0 0.2 0.4 0.6 mL/min 0.8 1.0 1.2
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反压与温度的关系
温度对反压的影响是反比关系 温度升高,反压降低,对某些流动相的影响更大一些
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实验样品的制备
标样和样品
– 标样:又称对照品,它作为液相色谱定性和定量分析的参 考标准物,一般是纯度较高的纯物质 – 样品:待测物,一般是成分复杂的混合物
液相色谱对样品(包括标样)制备的要求:
– 必须能溶于流动相
如样品的溶剂不是流动相,一定要用流动相试溶解度,以免在进样 时样品在流动相中析出,堵塞管路和色谱柱
注:泵排气后,应输液稳定(系统压力脉动小,一般在几十
Psi以内),否则,需重做排气操作
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Waters 515 泵的前面板
电源开关 柱塞杆清洗孔
排液阀
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Waters 600泵的前面板
泵控制器 电源开关
2 星期 1 星期 1天
Waters1525-2489高效液相色谱仪操作规程
编写：审核：批准：日期：日期：日期：生效日期：1.目的：规范Waters1525型高效液相色谱仪的操作，确保检测设备安全稳定的运行。
2.范围：适用于Waters1525型高效液相色谱仪的操作使用。
3.职责：检验员负责本规程的执行。
4.操作步骤4.1开机前检查流动相对应泵单元放置，检查电源线接口连接完好4.2色谱柱的安装安装待测样品所需的色谱柱，注意色谱柱方向。
打开柱温箱电源开关，设置柱温箱温度。
4.3开机4.3.1泵单元打开泵电源，待自检通过后排气泡。
（注：上泵是B泵，一般放置水系流动相；下泵是A泵，一般放置有机系流动相。
）拧开上泵排液（空）阀螺旋，用注射器抽去管道及泵头内气泡，然后立即拧紧排液（空）阀螺旋。
下泵排气泡操作与上泵相同。
4.3.2打开检测器电源等待自检通过，大约5min。
4.3.3打开色谱工作站打开计算机电源，点击桌面图标，进入Breeze2 色谱工作站，用户名输入breeze，点击确定按钮，操作的项目选择“hd”，色谱系统选择“1525/2489”，点击确定。
4.4建立分析方法点击（调用方法组编辑器向导）图标，点击对话框中的“新建”，在电脑下方任务栏中出现（仪器方法编辑器），点开，设置波长等条件，再点击，设置A、B两泵的流速，然后点击保存图标，在对话框中输入此方法的名称，比如“亚麻酸方法”，再点击保存。
在“新方法组”的对话框中点击图标，选择“亚麻酸方法”，点击两次下一步，再点击完成。
4.5平衡仪器点击(平衡系统/监视基线图标)，在对话框中，选择方法如“亚麻酸方法”，点击设置。
等待仪器设置反应，再次点击（平衡系统/监视基线）。
等待基线平衡（一般约30-40min）。
4.6进样与数据采集：基线平衡后（30-40min），点击（中断正在运行的样品组或单进样）图标，结束平衡。
点击（单进样）图标，编辑样品名称、进样体积和运行时间，选择方法组，点击进样即可开始进样。
4.7谱图处理：点击图标，点，再点，双击所要查看的谱图。
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最佳柱床密度（OBD）制备柱------------------------------------------------------------------------------- 41 径向加压柱 --------------------------------------------------------------------------------------------------------- 48
氨基酸分析 --------------------------------------------------------------------------------------------------------- 57 多肽分析和纯化 -------------------------------------------------------------------------------------------------- 58 蛋白质分离和纯化----------------------------------------------------------------------------------------------- 59 DNA/寡核苷酸分析和纯化------------------------------------------------------------------------------------- 62 MS及LC/MS消耗品-------------------------------------------------------------------------------------------------- 63
Oasis® HLB：用于酸性、碱性与中性化合物的亲水亲脂平衡 反相吸附剂
Oasis® MCX：用于碱性化合物的混合型强阳离子交换反相吸 附剂
Oasis® MAX：用于酸性化合物的混合型强阴离子交换反相吸 附剂 Qasis® MCX
Oasis® WCX：用于强碱性化合物（如季胺）的混合型弱阳离 子交换反相吸附剂
GPC色谱柱 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 51 生命科学 --------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 55
色谱柱硬件 ---------------------------------------------------------------------------------------------------------- 66 样品瓶及附件 ------------------------------------------------------------------------------------------------------ 68
无硅醇基作用
3
高效液相色谱柱及消耗品简要指南2008-2009
pka<～0 0.6meq/g
［ 样品前处理产品 ］
Oasis® HLB 化学技术
用于酸性、中性和碱性化合物的通用型吸附剂 独特的水可浸润性Oasis® HLB共聚物
Oasis® HLB是一种可满足所有SPE需要的亲水亲脂平衡的 水可浸润性反相吸附剂，它是由两种基本单体：亲水性的N －乙烯吡咯烷酮和亲脂性的二乙烯基苯按特定比例聚合构 成的。它以特别的“极性钩”为增强极性物的保留提供了 优异的反相保留容量。
降低离子抑制
Oasis® SPE产品可成功地除去在LC/MS/MS联用分析中导致 离子抑制的主要物质：磷脂和溶血磷脂。去除这些干扰物可 提高质谱的响应，从而降低最低定量限（LOQ）。
改善分析系统的性能
S P E技术的发展及自动化控制技术的采用，使S P E成为更 经济、更省时的样品前处理技术。它通过以下几个方面改 善了分析系统的性能：
Oasis®家族成员
● 1～35cc各种规格的Oasis® HLB，MCX，MAX，WCX，WAX， 固相提取小柱
● Oasis® HLB玻璃小柱 ● 96孔Oasis® HLB，MCX，MAX，WCX，WAX，提取板 ● 96孔Oasis® µElution HLB MAX，MCX WCX，WAX，提取板 ● Oasis®在线色谱柱 ● Oasis® µElution提取板
高效液相色谱柱及消耗品 简要指南
2008-2009
目录
样品前处理产品 ---------------------------------------------------------------------------------------------------1
Oasis® 固相提取产品 -----------------------------------------------------------------------------------------------2 Oasis® 2×4方法 ------------------------------------------------------------------------------------------------------6 Oasis® 96 孔提取板和Oasis µElution提取板 ------------------------------------------------------------------7 Oasis® 在线样品前处理柱 ---------------------------------------------------------------------------------------9 SiroccoTM蛋白沉淀板----------------------------------------------------------------------------------------------- 10 Sep-Pak®固相提取产品------------------------------------------------------------------------------------------- 11
ACQUITY UPLC®色谱柱及配套消耗品 ---------------------------------------------------------------- 13 高效液相色谱分析柱
XBridgeTM色谱柱----------------------------------------------------------------------------------------------------- 18 SunFireTM色谱柱 ----------------------------------------------------------------------------------------------------- 23 Atlantis®色谱柱 ----------------------------------------------------------------------------------------------------- 26 Symmetry®色谱柱 -------------------------------------------------------------------------------------------------- 28 XTerra®色谱柱 ------------------------------------------------------------------------------------------------------- 31 Spherisorb®色谱柱 -------------------------------------------------------------------------------------------------- 34 Nova-Pak®色谱柱---------------------------------------------------------------------------------------------------- 35 µBondapak®色谱柱-------------------------------------------------------------------------------------------------- 35 专用色谱柱及应用----------------------------------------------------------------------------------------------- 36
● 采用质谱兼容溶剂将分析物引入系统 ● 延长分析色谱柱寿命，降低系统的停机和维护时间 ● 将离子抑制降低到最小程度，改善信号响应
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高效液相色谱柱பைடு நூலகம்消耗品简要指南2008-2009
［ 样品前处理产品 ］
高效液相色谱柱及消耗品简要指南2008-2009
［ 样品前处理产品 ］
为什么使用固相提取？
样品前处理是每种分析方法（如LC/MS/MS）都不可缺少 的关键步骤。据估计，分析实验室的大约60-80% 工作量和 运行成本都花费在进行仪器分析前的样品处理上。进行样
品前处理（尤其是进行固相提取）的重要意义，主要是源于 以下四方面考虑：去除基质干扰物、降低离子抑制、富集 目标分析物及改善分析系统的性能。