菊花的组织培养学案

离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对Байду номын сангаас殊，需要适宜的培 养基。
[ 思考 3] 主要成分是什么？起什么作用？ ①微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的； ②蔗糖提供，同时能够维持细胞的； ③甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到
一定影响后所产生的营养需求。
④植物激素：在培养基中需要添加和等植物激素，其、、等都影响结果。 参考资料：组培中常用的植物生长调节剂的类型及作用。
专题三植物的组织培养技术
课题 1 菊花的组织培养
一、基础知识 （一）植物组织培养的基本过程
1、细胞分化 （ 1）概念：植物个体发育过程中，细胞在上都有出现的差异，形成差异的过程叫
做细胞分化。 （ 2）特点：、、 （ 3）实质：细胞发生分化是因为在个体发育过程中，不同细胞中选择表达执行的
基因不同引起的；即是基因的。 2、植物组织培养技术运用的原理 --- 细胞全能性 （ 1）概念：具有该生物的的任何一个已经的细胞，都具有发育成完整个体的。 （ 2）条件：离体；适宜的环境条件 [ 思考 1] 所有细胞都有全能性吗？ [ 思考 2] 以下举例哪个能体现细胞全能性？ A、玉 M种子长成植株； B、癌细胞体外繁殖数代； C、 DNA扩增 1000 次； D、棉花叶肉细胞培养成抗虫棉植株 3、植物组织培养的基本过程 （ 1 ）愈伤组织：指离体的植物组织或细胞，在培养了一段时间以后，通过形成
的，其细胞排列、高度、呈状态的细胞。 （ 2）脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生的过程，叫做脱分化，或叫做去
分化。 （ 3）再分化：脱分化产生的继续进行培养，又可以重新成根或芽等器官的过程。
（二）影响植物组织培养的因素
1、材料的选择：
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不同植物组织或同一植物的不同部分，培养的难易程度，菊花的组织培养，一 般选择的茎上部新萌生的侧枝。 2、 MS培养基：
促进细胞的横向生长和分裂， 促进芽的分化和形成
使用顺序 先生长素， 后细胞分裂素 先细胞分裂素，
后生长素 同时使用
实验结果 有利于 但不分化
细胞
也分化 提高
生长素／细胞分裂素比值与结果
比值高时
促进 分化， 抑制 形成
比值低时 比值适中
促进 抑制 促进
分化， 形成
生长
3、环境条件：
PH、温度、光等环境条件。菊花组培所需
3、灭菌：采取的灭菌方法是
（二）外植体消毒
灭菌。
嫩枝
()
（） 20 分钟左右
(
)
(
)
( ) 清洗
( ) 溶液
()
( ) 清洗
[ 思考 4] 什么是外植体？ [ 思考 5] 为什么选取生长旺盛嫩枝进行组织培养？ [ 思考 6] 在此消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？
（三）接种
接种前，用将工作台擦拭，然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在旁进行， 并且每次使用器械后，都要用灭菌。
把菊花茎段切成长约的小段；插入时不要倒插，外植体的朝上。 [ 思考 7] 外植体越大越好？还是越小越好？
[ 思考 8] 什么是形态学上端？
（四）培养 3/4
接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。培养期间定期，温度控制在℃，并且 每天用日光灯光照 12h。
（五）移栽
移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生 长几日，然后用清水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等 环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中。
（六）栽培
每天要观察记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花。
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调节剂
名称
浓度范围
作用
生长素类
2， 4－二氯苯氧乙酸（ 2，4－ D）、萘乙酸（ NAA）、吲哚丁酸 （ IBA ）等
0.01 ～5mg/L
促进细胞的伸长和分裂，促进 愈伤组织和根的形成
细胞 分裂素类
激动素（ KT）、 6－苄基腺嘌呤 （ BA 或 6－ BA）、玉 M素（ ZT） 等
0.5 ～ 10mg/L
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PH 为，温度为℃，光照条件为每日
用日光灯照射小时。
二、实验操作过程 （一）制备 MS固体培养基
1、配制各种母液：将各种成分按配方比例配制成的浓缩液。使用时根据母液的倍 数，计算用量，并加稀释。
2、配制培养基：应加入的物质有琼脂、、大量元素、微量元素、有机物和植物激 素的母液，并用定容到 1000 毫升。在菊花组织培养中，可以不添加，原因是菊花 茎段组织培养比较容易。