土壤中氨氮的测定步骤----KCl浸提-靛酚蓝比色法知识讲解

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[终稿]铵态氮（靛酚蓝比色法）

铵态氮（靛酚蓝比色法）

方法与原理：

土壤浸出液中的NH4+在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝,溶液的蓝色很稳定，在NH4+-N浓度为0.05—0.5mg.L-1范围内，其深浅与NH4+-N含量呈正比.

试剂：

1.酚溶液：10g苯酚和100mg(0.1g)硝普钠（剧毒）【Na2Fe(CN)5·2H2O】→1L

水暗瓶存于4℃冰箱

2.次氯酸钠碱性溶液：10gNaOH,7.06gNa2HPO4·7H2O,31.8g Na3PO4·12H2O

和10 ml次氯酸钠【w(NaOCl)=5.25%】→1L水中暗瓶存于4℃冰箱

3.掩蔽剂:①酒石酸钾钠溶液【ρ（KNaC4H4O6·4H2O）】=400 g.l-1与EDTA二

钠盐溶液【C10H14O8N2Na2】100 g.l-1等体积混合.每100 ml混合液加入0.5 mlNaOH溶液（10mol/L）,即得清亮的掩蔽剂②酒石酸钾钠

【KNaC4H4O6·4H2O】400g↓EDTA二钠盐【C10H14O8N2Na2·2H2O】110.7 g稀释至2L. 每100 ml混合液加入0.5 mlNaOH溶液（10mol/L）,即得清亮的掩蔽剂

4.【ρ（NaOH）】=10 mol.l-1 ：400g NaOH用蒸馏水定容至1L

5.NH4+-N标准液：0.4717g烘干的（NH4）2SO4→1L水中(定容) 此为NH4+-N

贮备标准液。测定当天将此液用蒸馏水水准确稀释20倍（如5ml稀释至100ml）即为NH4+-N标准液【ρ（NH4+-N）=5 mg.l-1】

土壤无机N---铵态氮硝态氮测量方法

铵态氮和硝态氮测定方法

铵态氮测量方法（2mol ?L -1KCl 浸提—靛酚蓝比色法）

1）方法原理

2mol ?L -1KCl 溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.05～0.5mol ?L -1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。

2）试剂

（1）2mol ?L -1KCl 溶液称取149.1g KCl ，化学纯）溶于水中，稀释至1L 。

（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH ，化学纯）10g 和硝基铁氰化钠

[Na2Fe(CN)5NO 2H 2O]100mg稀释至1L 。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g 、磷酸氢二钠（Na 2HPO 4?7H 2O ，化学纯）7.06g 、磷酸钠（Na 3PO 4?12H 2O ，化学纯）31.8g 和52.5g ?L -1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL 溶于水中，稀释至1L ，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（4）掩蔽剂将400g ?L -1的酒石酸钾钠（KNaC 4H 4O 6?4H 2O ，化学纯）与100g ?L -1的EDTA 二钠盐溶液等体积混合。每100mL 混合液中加入10 mol?L -1氢氧化钠0.5mL 。

（5）2.5μg ?mL –

1铵态氮（NH4+—N; 100ppm）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO 4，分析纯0.4717g 溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L ，制备成含铵态氮（N ）100μg ?mL –

土壤铵态氮测定

土壤铵态氮‎测定

方法原理:

用2mol‎/L KCl溶液‎浸提土壤，把吸附在土‎壤胶体上的‎N H+4及水溶性‎NH+4浸提出来土壤浸出液‎中的铵态氮‎在强碱性介‎质中与次氯‎酸盐和苯酚‎‎。

作用，生成水溶性‎染料靛酚蓝‎，溶液的颜色‎很稳定。在含氮0.05~0.5mg/L的范围内‎，吸光度与铵‎态氮含量成‎正比，可用比色法‎测定。

实验步骤：

（1）称取10.00g新鲜‎土样（精确到0.01g），置于200‎m l三角瓶‎中，加入KCl‎溶液100‎m l，在摇床里振‎荡30mi‎n，取出静置后‎，取上清液过‎滤；

（2）吸取浸提液‎5m l放入‎50m l容‎量瓶中，后加入KC‎l溶液10‎m l、苯酚溶液5‎m l、次氯酸钠碱‎性溶液5m‎l,摇匀；

（3）在25℃左右室温下‎放置1小时‎后，加入掩蔽剂‎1m l,然后用水定‎容至刻度，在625n‎m波长处进‎行比色。

工作曲线绘‎制：

分别取0.00 ，0.50 ，1.00 ，2.00 ，3.00 ，4.00 ，5.00ml铵‎态氮标准溶‎液于50m‎l容量瓶中‎，各加入10‎m l KCl溶液‎,然后同(2) (3)步骤进行。

试剂配制：

【2mol/L KCl溶液‎】:称取149‎.1g KCl(分析纯)溶入水中，稀释至1L‎。

【苯酚溶液】：称取苯酚（分析纯）10g、NaOH（分析纯）5g和消极‎铁氰化钠(分析纯)0.1g稀释至‎1L。（此试剂不稳‎定，须贮于棕色‎瓶中，在冰箱中4‎℃保存，使用时用酸‎调节PH酸‎性）

【次氯酸钠碱‎性溶液】：称取NaO‎H（分析纯）10g、磷酸氢二钠‎（分析纯）7.06g、磷酸钠（分析纯）31.8g和52‎.5g/L次氯酸钠‎（分析纯，即含5%有效氯的漂‎白粉溶液）10mL溶‎于水中，稀释至1L‎.(贮于棕色瓶‎中，在冰箱中4‎℃保存，使用时放置‎至室温)

实验四：土壤氨态氮的测定

一、实验方法及目的

采用2mol•L-1KCl浸提—纳氏比色法测定土壤氨态氮；掌握土壤氨态氮的测定方法及分光光度法。

二、实验原理

2mol•L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮与碘化汞和碘化钾的碱性溶液反应生成淡红棕色胶态化合物，此溶液在较宽波长内具有强烈吸收，在含氮0.025～2mol•L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定，测量波长为420nm。三、实验仪器与药品

1仪器：多用调速振荡器，分光光度计。

2试剂：

1）2mol•L-1KCl溶液：称取149.12gKCl溶于与1L水中；

2）称取16g氢氧化钠，溶于50ml水中，充分冷却至室温；另称取7g碘化钾和10g碘化汞溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中，用水稀释至100ml，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。

3）酒石酸钾钠溶液:称取50g酒石酸钾钠溶于100ml水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至100ml。

四、实验步骤

1）新鲜土样含水率测定（称取土样10g）

2）浸提：称取5g新鲜土样准确到0.01g，置于50mL离心管中，加入2mo l•L-1KCl溶液25mL，塞紧塞子，在多用调速振荡器上振荡30mim。取出静置，待土壤—氯化钾悬浊液稍微澄清后，用中速滤纸进行过滤。如果不能在24h内进行，用滤纸过滤悬浊液，滤液储存在冰箱中备用。

+-N2µg～25µg)放入25mL比色管中， 3）比色：吸取土壤浸出液1mL-5mL(含NH

铵态氮测量方法 (1)

铵态氮测量方法（2mol•L-1KCl浸提—靛酚蓝比色法）

1）方法原理

2mol•L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.05～0.5mol•L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。

2）试剂

（1）2mol•L-1KCl溶液称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1L。

（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH，化学纯）10g和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀释至1L。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4•7H2O, 化学纯）7.06g、磷酸钠

（Na3PO4•12H2O, 化学纯）31.8g和52.5g•L-1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（4）掩蔽剂将400g•L-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6•4H2O, 化学纯）与100g•L-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。每100mL 混合液中加入10 mol•L-1氢氧化钠0.5mL。

（5）2.5µg•mL –1铵态氮（NH4+—N）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO4，分析纯]0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制备成含铵态氮（N）100µg•mL –1的贮存溶液；使用前将其加水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）2.5µg•mL –1的标准溶液备用。

土壤无机N---铵态氮硝态氮测量方法

铵态氮和硝态氮测定方法

铵态氮测量方法（2mol •L -1KCl 浸提—靛酚蓝比色法）

1）方法原理

2mol •L -1KCl 溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.05～0.5mol •L -1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。

2）试剂

（1）2mol •L -1KCl 溶液称取149.1g KCl ，化学纯）溶于水中，稀释至1L 。

（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH ，化学纯）10g 和硝基铁氰化钠

[Na2Fe(CN)5NO 2H 2O]100mg稀释至1L 。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g 、磷酸氢二钠（Na 2HPO 4•7H 2O ，化学纯）7.06g 、磷酸钠（Na 3PO 4•12H 2O ，化学纯）31.8g 和52.5g •L -1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL 溶于水中，稀释至1L ，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（4）掩蔽剂将400g •L -1的酒石酸钾钠（KNaC 4H 4O 6•4H 2O ，化学纯）与100g •L -1的EDTA 二钠盐溶液等体积混合。每100mL 混合液中加入10 mol•L -1氢氧化钠0.5mL 。

（5）2.5µg •mL –

1铵态氮（NH4+—N; 100ppm）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO 4，分析纯0.4717g 溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L ，制备成含铵态氮（N ）100µg •mL –

土壤铵态氮测定方法靛酚蓝比色法

引言：

土壤中的氮素是植物生长和发育的关键因素之一。土壤中的氮素形态有铵态氮和硝态氮两种形式，其中铵态氮对植物的吸收利用更为重要。因此，准确测定土壤中的铵态氮含量对于合理施肥和提高农作物产量具有重要意义。本文将重点介绍一种常用的土壤铵态氮测定方法——靛酚蓝比色法。

一、实验原理：

靛酚蓝比色法是一种常用的测定土壤铵态氮含量的方法。其原理是利用靛酚蓝与铵离子之间的化学反应产生的颜色变化来测定土壤中铵态氮的含量。

二、实验步骤：

1. 取适量土壤样品，将其过筛并去除杂质。

2. 将土壤样品与蒸馏水按一定比例混合，使土壤中的铵态氮溶解于水中。

3. 取一部分土壤溶液，加入靛酚蓝试剂，充分混合。

4. 静置一段时间后，使用分光光度计测定溶液的吸光度。

5. 根据标准曲线，计算出土壤溶液中铵态氮的浓度。

三、实验注意事项：

1. 在实验过程中，应注意避免与空气中的二氧化碳接触，以免造成

铵态氮的损失。

2. 靛酚蓝试剂应储存在避光、干燥的环境中，以保持其稳定性。

3. 实验中的仪器和试剂应严格按照操作要求使用，以确保测定结果的准确性。

四、结果分析：

靛酚蓝比色法是一种简便、快速、准确的测定土壤铵态氮的方法。通过测定土壤样品中溶解的铵态氮的含量，可以评估土壤的肥力和植物的养分供应情况。同时，该方法还可以用于研究不同施肥措施对土壤铵态氮含量的影响，为合理施肥提供科学依据。

结论：

靛酚蓝比色法是一种常用的测定土壤铵态氮含量的方法，具有操作简便、结果准确等优点。通过该方法可以快速测定土壤中的铵态氮含量，为合理施肥和提高农作物产量提供重要依据。在实际应用中，需要严格控制实验操作和仪器试剂的使用，以确保测定结果的准确性。

靛酚蓝比色法测定土壤中铵态氮注意事项

靛酚蓝比色法是一种测定土壤中铵态氮的方法，在土壤肥力评价中应用广泛。但是，在进行测试时需要注意以下几个方面。

首先，样品的选取必须严格按照规定程序进行，以确保测试数据的准确性。在采集土壤样品时，要尽量避免污染和混杂，选择代表性强的样品进行测试。同时，测试样品的数量和质量也应当有所把握。通常情况下，每次测试所用土壤样品的质量应不少于100g，以保证测试数据的可靠性。

其次，实验操作需要准确无误，各种试剂的用量和浓度、反应时间、加热温度等都需要控制好。特别是在制备土壤提取液时，一定要按照比例配好试剂，否则会影响测试数据的准确性。此外，在样品提取和过滤的过程中，也需要注意操作方法和细节，以保证试剂的完全反应和样品提取液的净化。

最后，测试结果的分析和解释也要尽可能准确、客观。在使用靛酚蓝比色法测定土壤中铵态氮时，测试结果的解释需要考虑到土壤的环境特征、施肥历史、周围环境的因素等。同时，还需要参考其他相关数据，综合分析，确定土壤铵态氮的含量及其对作物生长的影响。

总之，使用靛酚蓝比色法测定土壤中铵态氮时需要注意实验操作细节和数据解释的准确性，以确保测试结果的科学准确性和可靠性。

铵氮硝氮测定方法-陈伟

铵态氮测定

KCl浸提—靛酚蓝比色法

1）方法原理

2mol•L-1KCl溶液浸提粪样，把粪样中的NH4+浸提出来。粪样浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.05～0.5mol•L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。

2）试剂

（1）2mol•L-1KCl溶液称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1L。

（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH，化学纯）10g和亚硝基铁氰化钠

[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀释至1L。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4•7H2O, 化学纯）7.06g、磷酸钠（Na3PO4•12H2O, 化学纯）31.8g和52.5g•L-1次氯酸钠(NaClO，化学纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液)10mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（4）掩蔽剂将400g•L-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6•4H2O, 化学纯）与100g•L-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。每100mL混合液中加入10 mol•L-1氢氧化钠0.5mL。

（5）20µg•mL –1铵态氮（NH4+—N）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO4，分析纯] 3.7736g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制备成含铵态氮（N）800µg•mL–1的贮存溶液；使用前将其加水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）20µg•mL –1的标准溶液备用。

铵态氮测量方法（1）

铵态氮测量方法（2mol?L-1KCl浸提—靛酚蓝比色法）

1）方法原理

2mol?L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.05～0.5mol?L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。

2）试剂

（1）2mol?L-1KCl溶液称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1L。

（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH，化学纯）10g和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀释至1L。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4?7H2O, 化学纯）7.06g、磷酸钠（Na3PO4?12H2O, 化学纯）31.8g和52.5g?L-1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（4）掩蔽剂将400g?L-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6?4H2O, 化学纯）与100g?L-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。每100mL 混合液中加入10 mol?L-1氢氧化钠0.5mL。

（5）2.5μg?mL –1铵态氮（NH4+—N）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO4，分析纯]0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制备成含铵态氮（N）100μg?mL –1的贮存溶液；使用前将其加水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）2.5μg?mL –1的标准溶液备用。

铵态氮(靛酚蓝比色法)

铵态氮（靛酚蓝比色法）

方法与原理：

试剂：

1.酚溶液：10g苯酚和100mg(0.1g)硝普钠（剧毒）【Na2Fe(CN)5·2H2O】→1L

水暗瓶存于4℃冰箱

2.次氯酸钠碱性溶液：10gNaOH,7.06gNa2HPO4·7H2O,31.8g Na3PO4·12H2O

和10 ml次氯酸钠【w(NaOCl)=5.25%】→1L水中暗瓶存于4℃冰箱

3.掩蔽剂:①酒石酸钾钠溶液【ρ（KNaC4H4O6·4H2O）】=400 g.l-1与EDTA二

钠盐溶液【C10H14O8N2Na2】100 g.l-1等体积混合.每100 ml混合液加入0.5 mlNaOH溶液（10mol/L）,即得清亮的掩蔽剂②酒石酸钾钠

【KNaC4H4O6·4H2O】400g↓EDTA二钠盐【C10H14O8N2Na2·2H2O】110.7 g稀释至2L. 每100 ml混合液加入0.5 mlNaOH溶液（10mol/L）,即得清亮的掩蔽剂

4.【ρ（NaOH）】=10 mol.l-1 ：400g NaOH用蒸馏水定容至1L

5.NH4+-N标准液：0.4717g烘干的（NH4）2SO4→1L水中(定容) 此为NH4+-N

贮备标准液。测定当天将此液用蒸馏水水准确稀释20倍（如5ml稀释至100ml）即为NH4+-N标准液【ρ（NH4+-N）=5 mg.l-1】

铵态氮和硝态氮测定方法!!!---副本

铵态氮和硝态氮测定方法---副本

铵态氮测量方法（2mol•L-1KCl浸提—靛酚蓝比色法）

1）方法原理

2mol•L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+

及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.05～0.5mol•L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。

2）试剂

（1）2mol•L-1KCl溶液称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1L。

（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH，化学纯）10g和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀释至1L。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4•7H2O，化学纯）7.06g、磷酸钠

（Na3PO4•12H2O，化学纯）31.8g和52.5g•L-1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（4）掩蔽剂将400g•L-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6•4H2O，化学纯）与100g•L-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。每100mL 混合液中加入10 mol•L-1氢氧化钠0.5mL。

（5）2.5µg•mL –1铵态氮（NH4+—N）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO4，分析纯0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制备成含铵态氮（N）100µg•mL –1的贮存溶液；使用前将其加水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）2.5µg•mL –1的标准溶液备用。

土壤铵态氮等测定讲诉

方法原理:

用2mol/L KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH+4及水溶性NH+4浸提出来。土壤浸出液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.05~0.5mg/L的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。

实验步骤：

（1）称取10.00g新鲜土样（精确到0.01g），置于200ml三角瓶中，加入KCl 溶液100ml，在摇床里振荡30min，取出静置后，取上清液过滤；

（2）吸取浸提液5ml放入50ml容量瓶中，后加入KCl溶液10ml、苯酚溶液5ml、次氯酸钠碱性溶液5ml,摇匀；

（3）在25℃左右室温下放置1小时后，加入掩蔽剂1ml,然后用水定容至刻度，在625nm波长处进行比色。

工作曲线绘制：

分别取0.00 ，0.50 ，1.00 ，2.00 ，3.00 ，4.00 ，5.00ml铵态氮标准溶液于50ml容量瓶中，各加入10ml KCl溶液,然后同(2) (3)步骤进行。

试剂配制：

【2mol/L KCl溶液】: 称取149.1g KCl(分析纯)溶入水中，稀释至1L。

【苯酚溶液】：称取苯酚（分析纯）10g、NaOH（分析纯）5g和消极铁氰化钠(分析纯)0.1g稀释至1L。（此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时用酸调节PH酸性）

【次氯酸钠碱性溶液】：称取NaOH（分析纯）10g、磷酸氢二钠（分析纯）7.06g、磷酸钠（分析纯）31.8g和52.5g/L次氯酸钠（分析纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液）10mL溶于水中，稀释至1L.(贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时放置至室温)

[笔记]土壤铵态氮测定-靛酚蓝比色法

土壤铵态氮测定（2 mol﹒L-1KCl浸提-靛酚蓝比色法）

【方法原理】 2 mol﹒L-1 KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性燃料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.05~0.5 mol﹒L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。

【试剂】

（1）2 mol﹒L-1 KCl溶液：称取149.1 g氯化钾（分析纯）溶于水中，稀释至1L。

（2）苯酚溶液：称取苯酚（分析纯）10g和硝基铁氰化钠（硝普钠，有剧毒）100mg，稀释至1L。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（3）次氯酸钠碱性溶液：称取氢氧化钠（分析纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4﹒7H2O）7.06g、磷酸钠（Na3PO4﹒12H2O）31.8g和52.5 g﹒L-1次氯酸钠（即含5%有效率的漂白粉溶液）10 mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（4）掩蔽剂：将400g﹒L-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6.4H2O,化学纯）溶液与100 g﹒L-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。每100mL混合液中加入10 mol﹒L-1氢氧化钠0.5mL。

（5）2.5μg.ml-1铵态氮（NH4+-N）标准溶液：称取干燥的硫酸铵[（NH4）2SO4,分析纯]0.4717g溶于水中，定容至1L。即配制成含铵态氮（N）100μg.m L-1的贮存溶液；使用前将其加入水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）2.5μg.m L-1的标准溶液备用。

靛酚蓝比色法测定土壤中铵态氮注意事项

介绍

靛酚蓝比色法是一种常用于测定土壤中铵态氮含量的方法。本文将详细介绍靛酚蓝比色法的原理、操作步骤以及注意事项。希望通过本文的阐述，读者能够全面理解并正确运用这种方法来测定土壤中铵态氮的含量。

原理

靛酚蓝是一种酸性指示剂，能够与铵离子形成稳定的蓝色络合物。根据络合物的颜色深浅可以判断铵态氮的含量。

操作步骤

1.样品处理

1.将土壤样品通过筛网筛选，去除大颗粒杂质。

2.将筛选后的土壤样品晾干，并将其研磨成细粉末状。

3.随机选取适量土壤样品，称重定量，记录质量。

2.提取铵态氮

1.取一定质量的土壤样品，并加入一定体积的钡钠颗粒。

2.加入蒸馏水，使土壤样品完全浸泡。

3.静置一段时间，使铵离子与水中的氢离子反应生成氨气。

4.过滤提取液，获取含有铵态氮的溶液。

3.靛酚蓝比色

1.取一定体积的提取液，并加入适量的刚果红溶液和氢氧化钠溶液。

2.加入适量的靛酚蓝指示剂，溶液呈现蓝紫色。

3.使用标准铵溶液制备一系列已知浓度的标准溶液。

4.将标准溶液与待测溶液一同置于比色皿中，比较它们的颜色深浅。

5.根据比色结果，利用光度计或比色计测定铵态氮的含量。

注意事项

在使用靛酚蓝比色法测定土壤中铵态氮的过程中，需要注意以下几点：

1.样品处理

–筛选过程中要保证筛网干净，防止杂质污染样品。

–研磨后的土壤样品应密封保存，避免水分和氧气的接触，以防样品质量损失。

2.提取铵态氮

–加入的钡钠颗粒应足够多，以充分消耗土壤中的氢离子。

–提取液中的铵态氮应在一定浓度范围内，过高或过低都会影响测定结果。

–静置时间要适当，一般为4小时左右，时间过短会导致反应不完全，时间过长则可能发生铵氧化反应。

土壤铵态氮的测定

土壤铵态氮的测定(靛酚蓝比色法)

(一)方法提要

土壤浸出液中的NH4+在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的蓝色很稳定，在NH4+-N浓度为0.05~0.5u g·mL-1范围内，其深浅与NH4+含量成正比。

反应体系的pH应为10.5～11.7。硝普钠[硝基铁氰化钠，或称亚硝酰基五氰基合铁(Ⅲ)酸钠，。Na2Fe(CN)5N0]是此反应的催化剂，能加速显色，增强蓝色及其稳定性。在20℃左右室温时一般须放置l h后比色，完全显色约需2~3h。生成的蓝色很稳定，24 h内吸收值无显著变化。比色时在625nm处测量吸收值。待测液中如有干扰的金属离子，可用EDTA等螯合剂掩蔽。

（二）适用范围本方法适用于各类土壤铵态氮含量的测定。

（三）主要仪器设备

1、分光光度计。

2 、往复式或旋转式振荡机，满足180r·min-1±20r·min-1的振荡频率或达

到相同效果。

3、塑料瓶，200mL。

（四）试剂

1、酚溶液：10 g苯酚(C6H50H)和100mg硝普钠[Na2Fe(CN)5NO·2H20]溶于1 L水中。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶，存放在4℃冰箱中，用时须温热至室温。注意硝普钠有剧毒

2、次氯酸钠碱性溶液：10g氢氧化钠(NaOH)，7.06g磷酸氢二钠(Na2HP04．7H20)，31.8g 磷酸钠(Na3P04·12H20)和10mL次氯酸钠(w (NaOCl)=5.25％，即含有效氯5%的漂白剂溶液]溶于1L水中。此试剂应与酚溶液同样保存。

3、掩蔽剂：酒石酸钾钠溶液[p(KNaC4 H406·4H20)=400g·L-1与EDTA二钠溶液[p(C10H1408N2Na2)=100g·L-1]等体积混合，每100mL混合液中加0．5mLNaOH溶液[c(NaOH)=10mol·L-1]，即得清亮的掩蔽剂溶液。