土壤中氨氮的测定步骤----KCl浸提-靛酚蓝比色法知识讲解
[终稿]铵态氮（靛酚蓝比色法）
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铵态氮（靛酚蓝比色法）方法与原理：土壤浸出液中的NH4+在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝,溶液的蓝色很稳定，在NH4+-N浓度为0.05—0.5mg.L-1范围内，其深浅与NH4+-N含量呈正比.试剂：1.酚溶液：10g苯酚和100mg(0.1g)硝普钠（剧毒）【Na2Fe(CN)5·2H2O】→1L水暗瓶存于4℃冰箱2.次氯酸钠碱性溶液：10gNaOH,7.06gNa2HPO4·7H2O,31.8g Na3PO4·12H2O和10 ml次氯酸钠【w(NaOCl)=5.25%】→1L水中暗瓶存于4℃冰箱3.掩蔽剂:①酒石酸钾钠溶液【ρ（KNaC4H4O6·4H2O）】=400 g.l-1与EDTA二钠盐溶液【C10H14O8N2Na2】100 g.l-1等体积混合.每100 ml混合液加入0.5 mlNaOH溶液（10mol/L）,即得清亮的掩蔽剂②酒石酸钾钠【KNaC4H4O6·4H2O】400g↓EDTA二钠盐【C10H14O8N2Na2·2H2O】110.7 g稀释至2L. 每100 ml混合液加入0.5 mlNaOH溶液（10mol/L）,即得清亮的掩蔽剂4.【ρ（NaOH）】=10 mol.l-1 ：400g NaOH用蒸馏水定容至1L5.NH4+-N标准液：0.4717g烘干的（NH4）2SO4→1L水中(定容) 此为NH4+-N贮备标准液。
测定当天将此液用蒸馏水水准确稀释20倍（如5ml稀释至100ml）即为NH4+-N标准液【ρ（NH4+-N）=5 mg.l-1】操作步骤：1．土壤30g 置于150ml三角瓶中加入100 ml 2M KCl浸提，振荡(140rpm)30min 过滤（约30ml以上滤液）2．10 ml样液于50ml容量瓶+约20 ml水+5 ml酚+5 ml NaOCl摇匀，在20℃左右置1小时↓1ml掩蔽剂以溶解沉淀物定容50 ml λ=625nm 比色3．0/0.5/1/2/3/4/5ml NH4+-N标准液于50ml容量瓶+10 ml KCl+约20 ml水+5 ml 酚+5 ml NaOCl摇匀，在20℃左右置1小时后加入1ml掩蔽剂以溶解沉淀物定容50 ml λ=625nm比色注意事项:掩蔽剂应在显色后加入，加入过早，会使显色很慢。
土壤 氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定
1.适用范围本标准规定了测定土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的氯化钾溶液提取－分光光度法。
本标准适用于土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定。
当样品量为 40.0 g 时，本方法测定土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的检出限分别为0.10 mg/kg、0.15 mg/kg、0.25 mg/kg，测定下限分别 0.40 mg/kg、0.60 mg/kg、1.00 mg/kg。
2.方法原理2.1 氨氮氯化钾溶液提取土壤中的氨氮，在碱性条件下，提取液中的氨离子在有次氯酸根离子存在时与苯酚反应生成蓝色靛酚染料，在 630 nm 波长具有最大吸收。
在一定浓度范围内，氨氮浓度与吸光度值符合朗伯-比尔定律。
2.2 亚硝酸盐氮氯化钾溶液提取土壤中的亚硝酸盐氮，在酸性条件下，提取液中的亚硝酸盐氮与磺胺反应生成重氮盐，再与盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料，在波长 543nm 波长具有最大吸收。
在一定浓度范围内，亚硝酸盐氮浓度与吸光度值符合朗伯-比尔定律。
2.3 硝酸盐氮氯化钾溶液提取土壤中的硝酸盐氮和亚硝酸盐氮，提取液通过还原柱，将硝酸盐氮还原为亚硝酸盐氮，在酸性条件下，亚硝酸盐氮与磺胺反应生成重氮盐，再与盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料，在波长 543 nm 处具有最大吸收，测定硝酸盐氮和亚硝酸盐氮总量。
硝酸盐氮和亚硝酸盐氮总量与亚硝酸盐氮含量之差即为硝酸盐氮含量。
3.试剂和材料除非另有注明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为电导率小于0.2 mS/m（25℃时测定）的去离子水。
3.1 氨氮3.1.1 浓硫酸：ρ（H2SO4）=1.84 g/ml。
3.1.2 二水柠檬酸钠（C6H5Na3O7·2H2O）。
3.1.3 氢氧化钠（NaOH）。
3.1.4 二氯异氰尿酸钠（C3Cl2N3NaO3·H2O）。
3.1.5 氯化钾（KCl）：优级纯。
3.1.6 氯化铵（NH4Cl）：优级纯于105 ℃下烘干 2 h。
土壤铵态氮等测定讲诉
方法原理:用2mol/L KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH+4及水溶性NH+4浸提出来。
土壤浸出液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。
在含氮0.05~0.5mg/L的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。
实验步骤：（1）称取10.00g新鲜土样（精确到0.01g），置于200ml三角瓶中，加入KCl 溶液100ml，在摇床里振荡30min，取出静置后，取上清液过滤；（2）吸取浸提液5ml放入50ml容量瓶中，后加入KCl溶液10ml、苯酚溶液5ml、次氯酸钠碱性溶液5ml,摇匀；（3）在25℃左右室温下放置1小时后，加入掩蔽剂1ml,然后用水定容至刻度，在625nm波长处进行比色。
工作曲线绘制：分别取0.00 ，0.50 ，1.00 ，2.00 ，3.00 ，4.00 ，5.00ml铵态氮标准溶液于50ml容量瓶中，各加入10ml KCl溶液,然后同(2) (3)步骤进行。
试剂配制：【2mol/L KCl溶液】: 称取149.1g KCl(分析纯)溶入水中，稀释至1L。
【苯酚溶液】：称取苯酚（分析纯）10g、NaOH（分析纯）5g和消极铁氰化钠(分析纯)0.1g稀释至1L。
（此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时用酸调节PH酸性）【次氯酸钠碱性溶液】：称取NaOH（分析纯）10g、磷酸氢二钠（分析纯）7.06g、磷酸钠（分析纯）31.8g和52.5g/L次氯酸钠（分析纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液）10mL溶于水中，稀释至1L.(贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时放置至室温)【掩蔽剂】: 将400g/L的酒石酸钾钠（分析纯）与100g/L的EDTA二钠盐溶液等体积混合。
每100ml混合液中加入10mol/L NaOH溶液0.5ml。
【铵态氮标准溶液】：称取0.4717g于105℃烘2小时的(NH4)2SO4(分析纯)溶于水，定容至1L。
土壤铵态氮的测定方法
土壤铵态氮的测定方法氨氮（NH3-N）以游离氨（NH3）或铵盐（NH4+）形式存在于土壤中，两者的组成比取决于水的pH值。
当pH值偏高时，游离氨的比例较高。
反之，则铵盐的比例为高。
土壤中氨氮的来源主要为土壤中含氮有机物受微生物作用的分解产物，某此外，在无氧环境中，水中存在的亚硝酸盐亦可受微生物作用，还原为氨。
在有氧环境中，水中氨亦可转变为亚硝酸盐、甚至继续转变为硝酸盐。
1．方法的选择氨氮的测定方法，通常有纳氏比色法、苯酚-次氯酸盐（或水杨酸-次氯酸盐）比色法和电极法等。
纳氏试剂比色法具操作简便、灵敏等特点，水中钙、镁和铁等金属离子、硫化物、醛和酮类、颜色，以及浑浊等干扰测定，需做相应的预处理，苯酚-次氯酸盐比色法具灵敏、稳定等优点，干扰情况和消除方法同纳氏试剂比色法。
电极法通常不需要对水样进行预处理和具测量范围宽等优点。
氨氮含量较高时，尚可采用蒸馏﹣酸滴定法。
2．水样（土壤溶液）的保存水样采集在聚乙烯瓶或玻璃瓶内，并应尽快分析，必要时可加硫酸将水样酸化至pH<2，于2—5℃下存放。
酸化样品应注意防止吸收空气中的氮而遭致污染。
预处理水样带色或浑浊以及含其它一些干扰物质，影响氨氮的测定。
为此，在分析时需做适当的预处理。
对较清洁的水，可采用絮凝沉淀法，对污染严重的水或工业废水，则以蒸馏法使之消除干扰。
（一）絮凝沉淀法概述加适量的硫酸锌于水样中，并加氢氧化钠使呈碱性，生成氢氧化锌沉淀，再经过滤去除颜色和浑浊等。
仪器100ml具塞量筒或比色管。
试剂（1）10%（m/V）硫酸锌溶液：称取10g硫酸锌溶于水，稀释至100ml。
（2）25%氢氧化钠溶液：称取25g氢氧化钠溶于水，稀释至100ml,贮于聚乙烯瓶中。
（3）硫酸ρ=1.84。
步骤取100ml水样于具塞量筒或比色管中，加入1ml 10%硫酸锌溶液和0.1—0.2ml 25%氢氧化钠溶液，调节pH至10.5左右，混匀。
放置使沉淀，用经无氨水充分洗涤过的中速滤纸过滤，弃去初滤液20ml。
土壤铵态氮测定方法靛酚蓝比色法
土壤铵态氮测定方法靛酚蓝比色法引言：土壤中的氮素是植物生长和发育的关键因素之一。
土壤中的氮素形态有铵态氮和硝态氮两种形式，其中铵态氮对植物的吸收利用更为重要。
因此，准确测定土壤中的铵态氮含量对于合理施肥和提高农作物产量具有重要意义。
本文将重点介绍一种常用的土壤铵态氮测定方法——靛酚蓝比色法。
一、实验原理：靛酚蓝比色法是一种常用的测定土壤铵态氮含量的方法。
其原理是利用靛酚蓝与铵离子之间的化学反应产生的颜色变化来测定土壤中铵态氮的含量。
二、实验步骤：1. 取适量土壤样品，将其过筛并去除杂质。
2. 将土壤样品与蒸馏水按一定比例混合，使土壤中的铵态氮溶解于水中。
3. 取一部分土壤溶液，加入靛酚蓝试剂，充分混合。
4. 静置一段时间后，使用分光光度计测定溶液的吸光度。
5. 根据标准曲线，计算出土壤溶液中铵态氮的浓度。
三、实验注意事项：1. 在实验过程中，应注意避免与空气中的二氧化碳接触，以免造成铵态氮的损失。
2. 靛酚蓝试剂应储存在避光、干燥的环境中，以保持其稳定性。
3. 实验中的仪器和试剂应严格按照操作要求使用，以确保测定结果的准确性。
四、结果分析：靛酚蓝比色法是一种简便、快速、准确的测定土壤铵态氮的方法。
通过测定土壤样品中溶解的铵态氮的含量，可以评估土壤的肥力和植物的养分供应情况。
同时，该方法还可以用于研究不同施肥措施对土壤铵态氮含量的影响，为合理施肥提供科学依据。
结论：靛酚蓝比色法是一种常用的测定土壤铵态氮含量的方法，具有操作简便、结果准确等优点。
通过该方法可以快速测定土壤中的铵态氮含量，为合理施肥和提高农作物产量提供重要依据。
在实际应用中，需要严格控制实验操作和仪器试剂的使用，以确保测定结果的准确性。
铵态氮实验步骤
6.1.3土壤中铵态氮的测定6.1.3.1靛酚蓝比色法1.方法选择测定土壤铵态氮，主要有直接蒸馏法、浸提后测定法和扩散吸收法等。
直接蒸馏法是在氧化镁存在下直接蒸馏土壤，但此法在弱碱蒸馏时仍可能使一些简单的有机氮微弱水解成氨气蒸出，易使结果偏高。
浸提后测定法多采用中性盐(硫酸钾、氯化钾、氯化钠等)浸提土壤，土壤溶液中的NH4+，可选用蒸馏、比色、或氨电极法测定。
浸提蒸馏法的操作简便，易于控制条件，适合于NH4+含量较多的土壤。
氨气敏电极法测定土壤中的NH4+，操作简便，快速，灵敏度高，重复性和测定范围后很好，但仪器的质量必须可靠。
在这里我们详细介绍浸提比色法和扩散吸收法。
比色法有多种，这里介绍靛酚蓝比色法。
靛酚蓝比色法的灵敏度和准确度高，适用于大批样品自动化分析（本法测定范围0.05~0.5mg·L-1铵态氮）。
扩散吸收法利用氧化镁水悬液的弱碱性，交换吸附在土壤胶体上的铵态氮，不致破坏土壤矿质部分。
此法适用于各种类型土壤样品的测定，特别是对于还原性强的沼泽土和潜育土，可省去消除还原性物质的手续，同时，由于扩散吸收法不须蒸馏装置，设备简单，适用于大批样品的分析（本法测定范围50~300µg铵态氮）。
2.基本原理土壤浸出液中的NH4+在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的蓝色很稳定，在NH4+浓度为0.05~0.5mg·L-1范围内，其深浅与NH4+含量成正比。
3.主要仪器及试剂主要仪器：振荡机；分光光度计。
主要试剂：（1）2mol·L-1KCl溶液：称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1L。
（2）苯酚溶液：称取10g苯酚（C6H5OH，化学纯）和100mg硝基铁氰化钠（硝普钠）[Na2Fe （CN）5NO·2H2O]稀释至1L【1】。
此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
（3）次氯酸钠碱性溶液：称取10g氢氧化钠（NaOH，化学纯），7.06g磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O，化学纯），31.8g磷酸钠（Na3PO4·12H2O，化学纯）和52.5g·L-1次氯酸钠（NaOCl，化学纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液）10mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
靛酚蓝比色法测定土壤中铵态氮注意事项
靛酚蓝比色法测定土壤中铵态氮注意事项
靛酚蓝比色法是一种测定土壤中铵态氮的方法，在土壤肥力评价中应用广泛。
但是，在进行测试时需要注意以下几个方面。
首先，样品的选取必须严格按照规定程序进行，以确保测试数据的准确性。
在采集土壤样品时，要尽量避免污染和混杂，选择代表性强的样品进行测试。
同时，测试样品的数量和质量也应当有所把握。
通常情况下，每次测试所用土壤样品的质量应不少于100g，以保证测试数据的可靠性。
其次，实验操作需要准确无误，各种试剂的用量和浓度、反应时间、加热温度等都需要控制好。
特别是在制备土壤提取液时，一定要按照比例配好试剂，否则会影响测试数据的准确性。
此外，在样品提取和过滤的过程中，也需要注意操作方法和细节，以保证试剂的完全反应和样品提取液的净化。
最后，测试结果的分析和解释也要尽可能准确、客观。
在使用靛酚蓝比色法测定土壤中铵态氮时，测试结果的解释需要考虑到土壤的环境特征、施肥历史、周围环境的因素等。
同时，还需要参考其他相关数据，综合分析，确定土壤铵态氮的含量及其对作物生长的影响。
总之，使用靛酚蓝比色法测定土壤中铵态氮时需要注意实验操作细节和数据解释的准确性，以确保测试结果的科学准确性和可靠性。
铵态氮(靛酚蓝比色法)
铵态氮（靛酚蓝比色法）方法与原理：土壤浸出液中的NH4+在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝,溶液的蓝色很稳定，在NH4+-N浓度为0.05—0.5mg.L-1范围内，其深浅与NH4+-N含量呈正比.试剂：1.酚溶液：10g苯酚和100mg(0.1g)硝普钠（剧毒）【Na2Fe(CN)5·2H2O】→1L水暗瓶存于4℃冰箱2.次氯酸钠碱性溶液：10gNaOH,7.06gNa2HPO4·7H2O,31.8g Na3PO4·12H2O和10 ml次氯酸钠【w(NaOCl)=5.25%】→1L水中暗瓶存于4℃冰箱3.掩蔽剂:①酒石酸钾钠溶液【ρ（KNaC4H4O6·4H2O）】=400 g.l-1与EDTA二钠盐溶液【C10H14O8N2Na2】100 g.l-1等体积混合.每100 ml混合液加入0.5 mlNaOH溶液（10mol/L）,即得清亮的掩蔽剂②酒石酸钾钠【KNaC4H4O6·4H2O】400g↓EDTA二钠盐【C10H14O8N2Na2·2H2O】110.7 g稀释至2L. 每100 ml混合液加入0.5 mlNaOH溶液（10mol/L）,即得清亮的掩蔽剂4.【ρ（NaOH）】=10 mol.l-1 ：400g NaOH用蒸馏水定容至1L5.NH4+-N标准液：0.4717g烘干的（NH4）2SO4→1L水中(定容) 此为NH4+-N贮备标准液。
测定当天将此液用蒸馏水水准确稀释20倍（如5ml稀释至100ml）即为NH4+-N标准液【ρ（NH4+-N）=5 mg.l-1】操作步骤：1．土壤30g 置于150ml三角瓶中加入100 ml 2M KCl浸提，振荡(140rpm)30min 过滤（约30ml以上滤液）2．10 ml样液于50ml容量瓶+约20 ml水+5 ml酚+5 ml NaOCl摇匀，在20℃左右置1小时↓1ml掩蔽剂以溶解沉淀物定容50 ml λ=625nm 比色3．0/0.5/1/2/3/4/5ml NH4+-N标准液于50ml容量瓶+10 ml KCl+约20 ml水+5 ml 酚+5 ml NaOCl摇匀，在20℃左右置1小时后加入1ml掩蔽剂以溶解沉淀物定容50 ml λ=625nm比色注意事项:掩蔽剂应在显色后加入，加入过早，会使显色很慢。
[笔记]土壤铵态氮测定-靛酚蓝比色法
![[笔记]土壤铵态氮测定-靛酚蓝比色法](https://img.taocdn.com/s3/m/c084a4bdd0f34693daef5ef7ba0d4a7302766cd0.png)
土壤铵态氮测定（2 mol﹒L-1KCl浸提-靛酚蓝比色法）【方法原理】 2 mol﹒L-1 KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。
土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性燃料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。
在含氮0.05~0.5 mol﹒L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。
【试剂】（1）2 mol﹒L-1 KCl溶液：称取149.1 g氯化钾（分析纯）溶于水中，稀释至1L。
（2）苯酚溶液：称取苯酚（分析纯）10g和硝基铁氰化钠（硝普钠，有剧毒）100mg，稀释至1L。
此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
（3）次氯酸钠碱性溶液：称取氢氧化钠（分析纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4﹒7H2O）7.06g、磷酸钠（Na3PO4﹒12H2O）31.8g和52.5 g﹒L-1次氯酸钠（即含5%有效率的漂白粉溶液）10 mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
（4）掩蔽剂：将400g﹒L-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6.4H2O,化学纯）溶液与100 g﹒L-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。
每100mL混合液中加入10 mol﹒L-1氢氧化钠0.5mL。
（5）2.5μg.ml-1铵态氮（NH4+-N）标准溶液：称取干燥的硫酸铵[（NH4）2SO4,分析纯]0.4717g溶于水中，定容至1L。
即配制成含铵态氮（N）100μg.m L-1的贮存溶液；使用前将其加入水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）2.5μg.m L-1的标准溶液备用。
【分析步骤】（1）浸提称取相当于10.00g干土的新鲜土样（若是风干土，过10号筛）准确到0.01g，置于250mL三角瓶中，加入氯化钾溶液50mL，塞紧塞子，在振荡机上振荡1h。
取出静置，放置澄清后，将悬液的上部清液用干滤纸过滤，澄清的滤液收集于干燥洁净的三角瓶中。
土壤铵态氮的测定
土壤铵态氮的测定(靛酚蓝比色法)(一)方法提要土壤浸出液中的NH4+在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的蓝色很稳定，在NH4+-N浓度为0.05~0.5u g·mL-1范围内，其深浅与NH4+含量成正比。
反应体系的pH应为10.5～11.7。
硝普钠[硝基铁氰化钠，或称亚硝酰基五氰基合铁(Ⅲ)酸钠，。
Na2Fe(CN)5N0]是此反应的催化剂，能加速显色，增强蓝色及其稳定性。
在20℃左右室温时一般须放置l h后比色，完全显色约需2~3h。
生成的蓝色很稳定，24 h内吸收值无显著变化。
比色时在625nm处测量吸收值。
待测液中如有干扰的金属离子，可用EDTA等螯合剂掩蔽。
（二）适用范围本方法适用于各类土壤铵态氮含量的测定。
（三）主要仪器设备1、分光光度计。
2 、往复式或旋转式振荡机，满足180r·min-1±20r·min-1的振荡频率或达到相同效果。
3、塑料瓶，200mL。
（四）试剂1、酚溶液：10 g苯酚(C6H50H)和100mg硝普钠[Na2Fe(CN)5NO·2H20]溶于1 L水中。
此试剂不稳定，须贮于棕色瓶，存放在4℃冰箱中，用时须温热至室温。
注意硝普钠有剧毒2、次氯酸钠碱性溶液：10g氢氧化钠(NaOH)，7.06g磷酸氢二钠(Na2HP04．7H20)，31.8g 磷酸钠(Na3P04·12H20)和10mL次氯酸钠(w (NaOCl)=5.25％，即含有效氯5%的漂白剂溶液]溶于1L水中。
此试剂应与酚溶液同样保存。
3、掩蔽剂：酒石酸钾钠溶液[p(KNaC4 H406·4H20)=400g·L-1与EDTA二钠溶液[p(C10H1408N2Na2)=100g·L-1]等体积混合，每100mL混合液中加0．5mLNaOH溶液[c(NaOH)=10mol·L-1]，即得清亮的掩蔽剂溶液。
靛酚蓝比色法测定土壤中铵态氮注意事项
靛酚蓝比色法测定土壤中铵态氮注意事项介绍靛酚蓝比色法是一种常用于测定土壤中铵态氮含量的方法。
本文将详细介绍靛酚蓝比色法的原理、操作步骤以及注意事项。
希望通过本文的阐述，读者能够全面理解并正确运用这种方法来测定土壤中铵态氮的含量。
原理靛酚蓝是一种酸性指示剂，能够与铵离子形成稳定的蓝色络合物。
根据络合物的颜色深浅可以判断铵态氮的含量。
操作步骤1.样品处理1.将土壤样品通过筛网筛选，去除大颗粒杂质。
2.将筛选后的土壤样品晾干，并将其研磨成细粉末状。
3.随机选取适量土壤样品，称重定量，记录质量。
2.提取铵态氮1.取一定质量的土壤样品，并加入一定体积的钡钠颗粒。
2.加入蒸馏水，使土壤样品完全浸泡。
3.静置一段时间，使铵离子与水中的氢离子反应生成氨气。
4.过滤提取液，获取含有铵态氮的溶液。
3.靛酚蓝比色1.取一定体积的提取液，并加入适量的刚果红溶液和氢氧化钠溶液。
2.加入适量的靛酚蓝指示剂，溶液呈现蓝紫色。
3.使用标准铵溶液制备一系列已知浓度的标准溶液。
4.将标准溶液与待测溶液一同置于比色皿中，比较它们的颜色深浅。
5.根据比色结果，利用光度计或比色计测定铵态氮的含量。
注意事项在使用靛酚蓝比色法测定土壤中铵态氮的过程中，需要注意以下几点：1.样品处理–筛选过程中要保证筛网干净，防止杂质污染样品。
–研磨后的土壤样品应密封保存，避免水分和氧气的接触，以防样品质量损失。
2.提取铵态氮–加入的钡钠颗粒应足够多，以充分消耗土壤中的氢离子。
–提取液中的铵态氮应在一定浓度范围内，过高或过低都会影响测定结果。
–静置时间要适当，一般为4小时左右，时间过短会导致反应不完全，时间过长则可能发生铵氧化反应。
3.靛酚蓝比色–加入刚果红溶液和氢氧化钠溶液时要注意控制用量，避免溶液变得过聚集。
–比色时需使用已知浓度的标准溶液，确保比较的准确性。
–光度计或比色计的参数设置要正确，以获得准确的测量结果。
4.仪器使用和维护–使用仪器前要进行校准，确保其准确可靠。
土壤铵态氮的测定靛酚蓝比色法
土壤铵态氮的测定靛酚蓝比色法哎呀，这土壤铵态氮的测定靛酚蓝比色法啊，听起来是不是让人头都大了？说实话，我第一次接触这个的时候，也是一头雾水。
不过，咱们得慢慢来，把复杂的科学原理变成通俗易懂的小故事，好不？话说那天，我在实验室里头，正儿八经地研究这土壤铵态氮。
你知道，这土壤里头，氮元素可是植物生长的必需品，少了它，植物就长得跟病秧子似的。
所以，测定土壤里头的氮含量，那可是头等大事。
咱们先来说说这个“靛酚蓝比色法”。
这法儿，顾名思义，就是用一种叫靛酚蓝的试剂，跟土壤中的铵态氮反应，生成一种蓝色的化合物。
然后，我们再通过观察这个蓝色化合物的颜色深浅，就能大致判断出土壤里头的铵态氮含量了。
当时，我手里拿着那一瓶瓶子的靛酚蓝试剂，心里头也是直发怵。
你说这试剂，蓝不蓝的，看着就让人心里头犯嘀咕。
但一想到这关乎着植物的生长，我就又来了精神。
实验开始了，我把采集好的土壤样本放在一个玻璃瓶子里，然后小心翼翼地加入适量的靛酚蓝试剂。
看着那试剂跟土壤搅拌在一起，我紧张地盯着，生怕出现什么差错。
突然，我眼前一亮，那瓶子里头的溶液竟然变得蓝悠悠的。
我赶紧把瓶子拿到离我近的地方，仔细观察。
嘿，还真是有点意思。
你说这颜色，就跟蓝宝石似的，好看是好看，但关键是要准确啊。
接下来，我得把这个蓝色溶液放在分光光度计下测量一下。
这分光光度计，可是一个神奇的玩意儿，它能精确地测量出溶液中各种化合物的含量。
我按下了开关，那机器就开始嗡嗡嗡地响了起来。
我看着那屏幕上的数字，心里头也是七上八下的。
你说这数字，准不准那是一回事，关键是要解读得对。
终于，测量结果出来了。
我瞪大眼睛一看，嘿，还真有点成就感。
虽然这数字看起来有点复杂，但只要用心去解读，其实也没那么难。
就这样，我一步步地完成了这个实验。
虽然过程中有点波折，但总的来说，还是挺顺利的。
看着那一份份准确的实验报告，我心里头别提有多高兴了。
通过这次实验，我明白了，这科学实验，其实就是一个不断摸索、不断总结的过程。
【最新精选】土壤铵态氮的测定
土壤铵态氮的测定一、方法原理土壤铵态氮是土壤速效氮的重要组成部分，测定土壤NH4+-N 的方法主要有直接蒸馏法和浸提法两类，直接蒸馏法是在氧化镁的存在下直接蒸馏土壤，但此法在弱碱性蒸馏时仍可能使一些简单的有机氮微弱水解有NH3蒸出，易使结果偏高，同时该法操作复杂，不适合大批量分析。
故在ASI法中采用氯化钾溶液提取土壤中的NH4+，提取液中的NH4+用靛酚蓝比色法，靛酚蓝比色法的灵敏度高，准确度也较高，适合于大批量样品的自动化分析。
靛酚蓝比色法的基本原理是：土壤胶体上的NH4+被K+交换下来后，在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚反应，生成水溶性染料靛酚蓝，其深浅与溶液中的NH4+-N含量呈正比，线性范围为0.05～0.5mg/L之间。
二、试剂配制1. NaOH溶液将6.75g NaOH、0.75g EDTA二钠、1.25g 醋酸钠溶解于250ml水中，储存于250ml 的容量瓶中。
其中EDTA二钠作为金属离子的掩蔽剂，防止干扰。
醋酸钠可增强颜色的稳定性。
2. 90%苯酚溶液将45g 苯酚溶解于50ml水中，注意苯酚易结块，可加热到60-70℃。
3. 碱性苯酚溶液测定当天，将36ml 90%苯酚溶液加到250ml 溶液中，摇匀。
4. 次氯酸钠溶液在400ml 的水中加入100ml 的NaClO溶液即可。
5. NH4+-N 标准溶液的配制(改进的地方)称取1.9105g NH4Cl（65℃烘4h），于500ml的容量瓶中，加水定容至刻度。
该溶液的浓度为1000mg/L.用移液管吸取1ml于100ml的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，此时容量瓶中溶液浓度为10mg/ml。
再对该溶液分别取0，0.5，1，2，4，8ml于25ml 的比色皿中，，对应的浓度为0.0，0.2，0.4, 0.8, 1.6，3.2 ppm(mg/L).6. 浸提剂KCl溶液的配制称取74.5g KCl 溶解于500ml 水中，并加0.25g 聚丙烯酰胺至1000ml 容量瓶中。
[原创]实验四：土壤氨态氮的测定
![[原创]实验四：土壤氨态氮的测定](https://img.taocdn.com/s3/m/adfee84dbf23482fb4daa58da0116c175f0e1e6c.png)
实验四：土壤氨态氮的测定一、实验方法及目的采用2mol•L-1KCl浸提—纳氏比色法测定土壤氨态氮；掌握土壤氨态氮的测定方法及分光光度法。
二、实验原理2mol•L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。
土壤浸提液中的铵态氮与碘化汞和碘化钾的碱性溶液反应生成淡红棕色胶态化合物，此溶液在较宽波长内具有强烈吸收，在含氮0.025～2mol•L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定，测量波长为420nm。
三、实验仪器与药品1仪器：多用调速振荡器，分光光度计。
2试剂：1）2mol•L-1KCl溶液：称取149.12gKCl溶于与1L水中；2）称取16g氢氧化钠，溶于50ml水中，充分冷却至室温；另称取7g碘化钾和10g碘化汞溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中，用水稀释至100ml，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。
3）酒石酸钾钠溶液:称取50g酒石酸钾钠溶于100ml水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至100ml。
四、实验步骤1）新鲜土样含水率测定（称取土样10g）2）浸提：称取5g新鲜土样准确到0.01g，置于50mL离心管中，加入2m ol•L-1KCl溶液25mL，塞紧塞子，在多用调速振荡器上振荡30mim。
取出静置，待土壤—氯化钾悬浊液稍微澄清后，用中速滤纸进行过滤。
如果不能在24h内进行，用滤纸过滤悬浊液，滤液储存在冰箱中备用。
3）比色：吸取土壤浸出液1mL-5mL(含NH4+-N2µg～25µg)放入25mL比色管中，用去离子水定容至25ml标线处，然后先加入酒石酸钾钠溶液0.5mL、再加入纳氏试剂0.75mL，摇匀。
用1cm比色槽在420nm波长处（或红色滤光片）进行比色，读取吸光度。
4）工作曲线分别吸取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、6.00、8.00、12.00、16.00、20.00mL NH4+-N标准液于50mL比色管中，同3）步骤进行比色测定。
铵态氮和硝态氮实验操作方法
铵态氮---靛酚蓝比色法一、方法原理土壤浸出液中的NH4+在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定，在NH4+-N浓度为0.05mg/L-0.5 mg/L范围内，其深浅与NH4+-N含量成正比。
反应体系PH应为10.5-11.7之间。
硝普钠{硝基铁氰化钠，或称亚硝酰基五氰合铁（ⅲ）酸钠，Na2Fe(CN)5NO.2H2O}是反应的催化剂，能加速显色，增强蓝色及其稳定性。
在20℃左右室温时一般须放置1h后比色，完全显色约需2h-3h。
生成的蓝色很稳定，24h内吸收值无显著变化。
比色时在625nm处测量吸收值。
待测液中如有干扰的金属离子，可用EDTA等螯合剂掩蔽。
二、主要仪器分光光度计三、试剂（1）酚溶液：10g苯酚和100mg硝普钠（Na2Fe(CN)5NO.2H2O）溶于1L蒸馏水中。
此溶剂不稳定，须贮存于暗色瓶中，存放于4℃冰箱中，同时需温热至室温。
注意硝普钠有剧毒！（2）次氯酸钠碱性溶液：10gNaOH，7.06gNa2HPO4.7H2O，31.8gNa3PO4.12H2O和10ml 次氯酸钠{w(NaClO)=5.25%（即有效氯5%的漂白剂溶液）溶于1L水中。
此试剂应与酚溶液同样保存}。
（3）掩蔽剂：酒石酸钾钠{p(KNaC4H4O6.4H2O)=400g/L}与EDTA二钠盐溶液N2Na{p(C10H14O8)=100g/L}等体积混合。
每100ml混合液加入0.5mlNaOH（C（NaOH）=10mol/L）溶液，即得清亮的掩蔽剂溶液。
（4）NH4+-N标准溶液：0.4717g烘干的(NH4)2SO4（二级）溶于蒸馏水中，定容至1L。
此p （NH4+-N）=100mg/L贮存液。
测定当天将此溶液用蒸馏水准确稀释20倍（取5ml稀释至100ml），即为5mg/L NH4+-N标准溶液（p(N)= 5mg/L）。
（5）KCl溶液（2mol/L）：称取149.1g分析纯KCl，加水定容至1L的容量瓶中。
土壤铵态氮测定
土壤铵态氮测定方法原理:用2mol/L KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的N H+4及水溶性NH+4浸提出来土壤浸出液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚。
作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。
在含氮0.05~0.5mg/L的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。
实验步骤：（1）称取10.00g新鲜土样（精确到0.01g），置于200m l三角瓶中，加入KCl溶液100m l，在摇床里振荡30min，取出静置后，取上清液过滤；（2）吸取浸提液5m l放入50m l容量瓶中，后加入KCl溶液10m l、苯酚溶液5m l、次氯酸钠碱性溶液5ml,摇匀；（3）在25℃左右室温下放置1小时后，加入掩蔽剂1m l,然后用水定容至刻度，在625nm波长处进行比色。
工作曲线绘制：分别取0.00 ，0.50 ，1.00 ，2.00 ，3.00 ，4.00 ，5.00ml铵态氮标准溶液于50ml容量瓶中，各加入10m l KCl溶液,然后同(2) (3)步骤进行。
试剂配制：【2mol/L KCl溶液】:称取149.1g KCl(分析纯)溶入水中，稀释至1L。
【苯酚溶液】：称取苯酚（分析纯）10g、NaOH（分析纯）5g和消极铁氰化钠(分析纯)0.1g稀释至1L。
（此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时用酸调节PH酸性）【次氯酸钠碱性溶液】：称取NaOH（分析纯）10g、磷酸氢二钠（分析纯）7.06g、磷酸钠（分析纯）31.8g和52.5g/L次氯酸钠（分析纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液）10mL溶于水中，稀释至1L.(贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时放置至室温)【掩蔽剂】: 将400g/L的酒石酸钾钠（分析纯）与100g/L的EDTA二钠盐溶液等体积混合。
土壤铵态氮测定
土壤铵态氮测定方法原理:用2mol/L KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH+4及水溶性NH+4浸提出来。
土壤浸出液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。
在含氮0.05~0.5mg/L的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。
实验步骤：（1）称取10.00g新鲜土样（精确到0.01g），置于200ml三角瓶中，加入KCl 溶液100ml，在摇床里振荡30min，取出静置后，取上清液过滤；（2）吸取浸提液5ml放入50ml容量瓶中，后加入KCl溶液10ml、苯酚溶液5ml、次氯酸钠碱性溶液5ml,摇匀；（3）在25℃左右室温下放置1小时后，加入掩蔽剂1ml,然后用水定容至刻度，在625nm波长处进行比色。
工作曲线绘制：分别取0.00 ，0.50 ，1.00 ，2.00 ，3.00 ，4.00 ，5.00ml铵态氮标准溶液于50ml容量瓶中，各加入10ml KCl溶液,然后同(2) (3)步骤进行。
试剂配制：【2mol/L KCl溶液】: 称取149.1g KCl(分析纯)溶入水中，稀释至1L。
【苯酚溶液】：称取苯酚（分析纯）10g、NaOH（分析纯）5g和消极铁氰化钠(分析纯)0.1g稀释至1L。
（此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时用酸调节PH酸性）【次氯酸钠碱性溶液】：称取NaOH（分析纯）10g、磷酸氢二钠（分析纯）7.06g、磷酸钠（分析纯）31.8g和52.5g/L次氯酸钠（分析纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液）10mL溶于水中，稀释至1L.(贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时放置至室温)【掩蔽剂】: 将400g/L的酒石酸钾钠（分析纯）与100g/L的EDTA二钠盐溶液等体积混合。
每100ml混合液中加入10mol/L NaOH溶液0.5ml。
【铵态氮标准溶液】：称取0.4717g于105℃烘2小时的(NH4)2SO4(分析纯)溶于水，定容至1L。
土壤—铵态氮的测定—光度法
铵态氮的测定—光度法1 范围本方法适用于土壤低含量铵态氮的测定。
2 原理土壤用氯化钾溶液浸提，浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，借以光度法测定。
含氮量在0.05mg/L～0.5mg/L范围内，吸光度与铵态氮含量成正比。
3 试剂3.1 氯化钾溶液：2mol/L，称取149.1g氯化钾，溶于水中，再稀释至1000mL。
3.2 苯酚溶液：称取10g苯酚（C6H5OH）和100mg硝基铁氰化钠（Na2Fe(CN)5NO·2H2O），溶于水中，再加水稀释至1000mL。
此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
硝基铁氰化钠有剧毒，使用时应注意。
3.3 次氯酸钠碱性溶液：称取10g氢氧化钠、7.06g磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）、31.8g磷酸钠（Na3PO4·12H2O）和10mL次氯酸钠溶液（NaOCl，称取5.25g次氯酸钠溶于100mL水中，即含5%有效氯的漂白粉溶液），溶于水中，再加水稀释至1000mL。
贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
3.4 掩蔽剂：称取40g酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·4H2O）溶于100mL水中。
再称取10g EDTA二钠盐溶于100mL水中。
然后将两种溶液按等体积混合，每100mL混合溶液中加0.5mL 10mol/L氢氧化钠溶液。
3.5 铵态氮标准溶液：称取0.4717g(精确至0.0001g)干燥的硫酸铵[(NH4)2SO4]溶于水中，再加水稀释至1000mL，此溶液1mL含100µg N。
使用前再稀释成1mL含2.5µg N 的工作标准溶液。
4 仪器4.1 振荡机。
4.2 分光光度计。
4.3 锥形瓶，200mL。
4.4 容量瓶，50mL，100mL。
5 操作步骤5.1 待测液的制备：称取20.00g新鲜土样（精确至0.01g）置于200mL锥形瓶中，加入100.00mL氯化钾溶液，加塞，放在振荡机上振荡1h。
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土壤中氨氮的测定步骤----K C l浸提-靛酚蓝比色法
精品文档 土壤中氨氮的测定-KCl 浸提-靛酚蓝比色法
-《土壤农化分析》鲍士旦
主要仪器：
1. 震荡机；
2. 分光光度计
试剂和药品及其配制
1. 2mol/L KCl 溶液。
149.1gKCl （化学纯）溶于1L 水中
2. 苯酚溶液。
苯酚（化学纯）10g 和 硝基铁氰化钠 100mg 稀释至1L 。
不稳定，须贮于棕色瓶中，4℃保存
3. 次氯酸钠碱性溶液。
4. 掩蔽剂。
400g/L 的酒石酸钾那（化学纯）与100g/L 的EDTA 二钠盐等体积混合。
每100ml 混合液中加入10mol/L 的氢氧化钠溶液0.5ml
5. 2.50μg ∙mL −1铵态氮（NH 4+−N ）标准溶液。
干燥的硫酸铵（分析纯）0.4717g 溶于水中，后定容至1L ，得铵态氮100μg ∙mL −1的贮存溶液；使用前将其加水稀释至40倍，即得标准溶液
分析操作步骤
NaOH （化学纯）10g 七水磷酸氢二钠（化学纯）7.06g 十二水磷酸钠（化学纯）31.8g 52.5g/L 次氯酸钠 10ml 溶于水，稀释至1L ，贮于棕色瓶中，4℃保存
称取相当于20.00g 的干土，准确至
0.01g
置于200mL 具塞三角
加入KCl 溶液
振荡1h ，取出静置
澄清后，取上清液
吸取土壤浸出液2mL~10mL 置于50mL 容量瓶用KCl 溶液补充至
加入苯酚溶液5mL 和次氯酸钠碱性溶液
20℃左右室温放置加掩蔽剂1mL ，用水1cm ，波长625nm ，比
吸收0.00、2.00、4.00、
6.00、
置于50mL 容量
各加入10mLKCl。