MUC_1与_Catenin在贲门癌组织中的表达及意义

262• 临床研究 •血液灌流是将患者动脉血引入储有吸附材料的血液灌流装置，通过接触血液使其中的毒物、代谢产物被吸附而净化，然后再回输体内。

近年来随着血液灌流技术在临床中的开展，对于有机磷农药中毒进行血液灌流的报道逐年增多，具体疗效评价不一。

有研究指出体外试验下血液灌流能促进酶活力的恢复[2]；临床应用也有显著疗效，使体内的有机磷被吸附，胆碱酯酶活性较易恢复[3,4]，阿托品用量明显减少[5]。

也有学者认为当有机磷农药中毒时，无论采用血液灌流，还是血液透析，排毒与解毒作用一般不明显，相反，可清除血中的抗毒药，患者获益不多。

近来有学者认为人类对有机磷杀虫剂和神经性毒物的易感性在很大程度上受到遗传因素和后天环境因素的影响[6]，为我们展现了急性有机磷农药中毒在基因水平预防和治疗的广阔前景。

本次研究显示血液灌流组和单纯药物组治愈率的差异无统计学差异，除农药毒性、遗传因素外还可能是因为已经与胆碱酯酶结合的农药不能被吸附或透析，这也决定了血液灌流越早实施患者获益越大。

值得注意的是血液灌流亦能清除血液中的阿托品和胆碱酯酶复能剂，在灌流实施过程中需加强观察，适当增加用量，这也可能是本次研究中血液灌流组与单纯药物组使用阿托品总用量无显著统计学差异的原因之一。

本次研究观察到血液灌流组较单纯药物组昏迷至清醒时间缩短，提示血液灌流能有效降低有机磷在血液中的峰浓度。

本次研究还观察到血液灌流后胆碱酯酶并没有马上升高，反而先有所下降，可能与有机磷的高脂溶性及大分布容积致血液灌流后体内仍存在大量有机磷与胆碱酯酶结合；与胆碱酯酶结合的农药不能被吸附；以及血液灌流亦有可能吸附胆碱酯酶等有关，尚待进一步研究。

总之，血液灌流不能代替阿托品和胆碱酯酶复能剂，且有可能引起出血、休克、发热、肺水肿、血小板减少等诸多并发征，费用也较昂贵。

但作为辅助治疗，合理安全实施能使昏迷至清醒时间缩短，更好地帮助患者平稳渡过危险期，使患者获益。

参考文献[1] Michael E,Nick AB,Peter E,et al.Medical management of acuteorganophosphorus pesticide self-poisoning[J].Lancet,2008,371 (9612):597-607.[2] 苑鑫,何跃忠,孙成文,等.活性炭血液灌流对有机磷农药敌敌畏和解毒药阿托品的作用[J].中华急诊医学杂志,2005,14(4): 279-281.[3] 夏阳波.血液灌流技术抢救急性有机磷中毒临床探讨[J].中华现代临床医学杂志,2003,1(4):302-303.[4] 张全,宋相明.血液灌流治疗重症有机磷农药中毒31例疗效分析[J].中国医师进修杂志,2006,29(6A):60-61.[5] 何飞,邱俏檬,卢中秋,等.血液灌流对急性重度有机磷中毒的疗效评价[J].中国急救医学,2008,28(11):974-977.[6] 何庆,万智,唐伦先.有机磷中毒救治与预防的重大进步——PON1研究进展[J].中华急诊医学杂志,2003,12(6):425-426.表1 血液灌流组与单纯药物组两组比较组别n 年龄(岁)中毒至就诊时间(h)阿托品化时间(h)首次胆碱酯酶(U/L)阿托品总用量(mg)昏迷至清醒时间(h)血液灌流组940.67±13.572.72±3.413.33±3.39422.22±558.52324.22±286.7812.63±6.32单纯药物组2140.52±18.223.29±4.383.83±4.46526.1±404.75429.43.27±349.4327.80±12.94P值0.9830.7340.7660.5700.4340.004表2 灌流前后胆碱酯酶比较血液灌流组胆碱酯酶（U/L）灌流前422.22±558.52灌流后266.67±239.79P值0.007表3 血液灌流组与单纯药物组两组治愈率比较组别治愈（例）死亡（例）血液灌流组81单纯药物组201累计P值0.517MUC-1与β-Catenin在贲门癌组织中的表达及意义甄 强1高丽娜2刘家宝1（1 石家庄第一人民医院胸外科，河北 石家庄 050000；2 河北省人民医院整形骨二科，河北 石家庄 050000）【摘要】目的 探讨贲门癌组织中黏蛋白-1（MUC-1）又称为多形上皮黏蛋白（PEM）与β-连环蛋白（β-Catenin）异常表达的意义，以及其与贲门癌临床分期、组织学类型、肿瘤发生部位、肿瘤大小等临床病理学关系。

方法 采用HE染色切片进行组织病理学分类，免疫组织化学法（SP）检测70例贲门癌组织、癌旁组织、远癌组织中的多形上皮黏蛋白（PEM）与β-连环蛋白（β-Catenin）的表达。

结果 ①MUC-1、β-Catenin在远癌组织贲门黏膜上皮细胞中的阳性表达率分别为15.71%(11/70)、1.43%(1/70)，在癌旁组织中的表达率为34.29%（24/70）、41.43%(29/70)，而在贲门癌中的阳性表达率是54.29%(38/70)、58.57%(41/70)。

②二者在有淋巴结组与无淋巴结转移组的表达不具有显著性差异（P＞0.05）。

③二者在不同临床分期、不同分化程度的蛋白表达不具有显著性差异（P＞0.05）。

④二者在肿瘤大小、不同年龄段、不同性别中蛋白表达均不具有显著性差异（P＞0.05）。

⑤MUC-1与β-Catenin在贲门癌表达中具有协同作用（相关系数为0.9072，P=0.0001＜0.05)。

【关键词】贲门癌；MUC1；β-Catenin；阳性表达一致率；增殖调控中图分类号：R735.2 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2011）17-0262-03世界范围内，肿瘤尤其是恶性肿瘤的发生和死亡仍呈上升趋势。

食管癌贲门癌是世界常见的六大肿瘤恶性肿瘤之一，从19世纪起，许多专家对食管癌做了深入研究，人们逐渐认识到肿瘤细胞的转化、演进以及侵袭、转移等涉及到多种原癌基因的激活和抑癌基因的缺失，以及许多肿瘤相关因子的异常表达。

MUC-1作为一种大分子跨膜黏蛋白在人体内多种脏器的腺细胞内均有表达，而其在于贲门癌组织中表达的相关文献报道甚少。

Wen等对体外胰腺癌细胞研究发现，癌细胞中MUC-1过度表达可使核内β-Catenin的稳定性增加[1]。

而MUC-1和• 临床研究 •263β-Catenin协同表达在贲门癌组织中发生、发展的研究未见报道。

因此研究二者在贲门癌组织中的表达既有理论意义又具有现实意义。

1 材料与方法1.1 研究对象本实验采用河北医科大学附属第一人民医院胸外科2000至2005年70例贲门癌的手术切除标本。

所有标本均为福尔马林固定，常规石蜡包埋。

患者均有完整的病理资料可供查询。

年龄39~75岁，其中男27 例，女43 例。

每例均分别取材癌组织、癌旁组织、远癌组织。

按肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结阳性结果等进行分组。

1.2 方法采用链霉菌抗生物素过氧化酶（SP）免疫组织化学法。

所有样本经体积分数为10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，制成厚 4 μm的切片，60 ℃烘烤，脱蜡，体积分数为 3%过氧化氢灭活内源性过氧化物酶，微波修复抗原，体积分数为10%非免疫血清封闭，加入1∶50的鼠抗人黏蛋白1（MUC-1）单克隆抗体（ZM-0391，克隆系：Ma695为北京中杉金桥生物技术有限公司产品）和鼠抗人β-连接素（β-Catenin）单克隆抗体（ZM-0442，克隆系：CAT-5H10为北京中杉金桥生物技术有限公司产品），4 ℃过夜孵育，PBS液冲洗，滴加1∶300生物素标记二抗，室温下30min，冲洗，滴加1∶40的SP液，室温下30min，冲洗后DAB（北京中杉金桥生物技术有限公司）显色，苏木素-伊红（HE）染色，封片。

PBS液代替一抗作为阴性对照。

1.3 结果判定首先通过HE染色在显微镜下观察，确定组织标本的病理分型。

免疫组织化学染色在光镜下阅片，随意选取5个高倍视野，每视野计数100个，以其平均数作为最后评定。

分别由2位病理专业医师独立阅片，对有分歧者请第三位专业医师一同阅片，最后取意见一致者作为判定标准。

MUC-1染色阳性判定标准：采用双盲法以胞质染出黄色或黄棕色为阳性。

每例切片随机记数5个高倍视野（×400倍），每视野计数阳性细胞100个，按阳性细胞所占的百分比，将MUC-1阳性病例分为4级：“－”表示无阳性细胞，“+”表示阳性细胞≤25%，“++”表示阳性细胞数在26%~50%之间，“+++”表示阳性细胞数≥50%，其中“－”和“+”作为MUC-1阴性表达，“++”为低表达，“+++”为高表达。

后二者作为阳性表达。

其中“－”记1分，“+” 记2分，“++” 记3分，“+++” 记4分。

然后进行相关统计学分析。

β-Catenin染色阳性判定结果：同MUC-1染色阳性判定标准。

1.4 统计学分析方法基本资料在计算机上经统计软件SPSS13.0处理，不同率的比较采用行×列表的χ2检验，MUC-1与β-Catenin表达之间的关系行相关分析。

P ＜0.05视为有显著差异。

2 结 果2.1 MUC-1的表达MUC-1多表达于癌细胞的胞质中，为粗细不等的黄色颗粒，或为弥散性胞质染色，MUC-1在远癌组织贲门黏膜上皮细胞中的阳性表达率为15.71%（11/70），在癌旁组织中的表达率为34.29% （24/70），而在贲门癌中的阳性表达率是54.29%（38/70）。

经统计学分析显示:MUC-1在贲门远癌组织和癌旁组织中的表达具有显著性差异（P ＜0.05），在癌旁组织与癌组织中的表达有统计学意义（P ＜0.05），远癌组织与癌组织中的表达也同样具有显著性差异（P ＜0.05） （表1）。

在肿瘤大小、分化程度、TMN分期、淋巴结转移、性别、年龄方面MUC-1的表达则无明显的差异。

2.2 β-Catenin的表达β-Catenin同样多表达于癌细胞的胞质中，为粗细不等的黄色颗粒，或为弥散性胞质染色，β-Catenin在远癌组织贲门黏膜上皮细胞中的阳性表达率为1.43%（1/70），在癌旁组织中的表达率为41.43% （29/70），而在贲门癌中的阳性表达率是58.57%（41/70）。

经统计学分析显示：三者比较具有显著性差异（P ＜0.05）。

β-Catenin在贲门远癌组织和癌旁组织中的表达具有显著性差异（P ＜0.05），在癌旁组织与癌组织中的表达无统计学意义（P ＞0.05），远癌组织与癌组织中的表达也同样具有显著性差异（P ＜0.05）（表2）。