Survivin与Ki-67在尖锐湿疣中的表达及其相互关系

ＣＡ ｗｅｒｅ ５５．０％（３３／６０）ａｎｄ ９１．７％（５５／６０）ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ａｎｄ Ｋｉ一６７ ｉｎ ＣＡ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ
ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｎｏｒｍａｌ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｅｐｉｔｈｅｌｉａ ｏｆ ｃｅｒｖｉｘ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｗａｓ ｐｏｓｉｔｉｖｄｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｈｉｇｈ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｋｉ一
６７ ｉｎ ＣＡ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ：Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ａｎｄ Ｋｉ一６７ ｍｉｇｈｔ ｐｌａｙ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ＣＡ．ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ＣＡ ａｒｅ
ｓｙｎｅｒｇｅｔｉｃｏ
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｃｏｎｄｙｌｏｍａ ａｃｕｍｉｎａｔｕｍ；Ｓｕｒｖｉｖｉｎ；Ｋｉ一６７
封片，镜下观察。 １．５结果判定标准免疫组化结果阳性表达判定标准：严
格设定阳性标准，形态完整，结构清晰；免疫组化结果 Ｓｕｒｖｉｖｉｎ以胞浆内出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性，Ｋｉ一６７ 以胞核染为棕黄色或棕褐色者即为阳性细胞标志。随机选 取１０个４００倍视野，计数１０个视野中的平均阳性细胞百
分数。计算出每例标本的阳性细胞率，阳性细胞数小于５％ 为阴性（一）；阳性细胞数达５％～２５％为弱阳性（＋），阳 性缨胞数达２６％－－７５％为阳性（＋＋），阳性细胞数多于 ７５％为强阳性（＋＋十）。（＋）～（＋＋）为低表达，（＋ ＋＋）为高表达。 １．６统计学方法在ｓＰｓｓ １１．５软件包上进行数据处理，
细胞的凋亡与增殖同良恶性肿瘤的发生发展密切相关。 Ｓｕｒｖｉｖｉｎ是新近发现的凋亡抑制基因，在多种皮肤肿瘤中有 不同程度表达【ｌ Ｊ。增殖相关核抗原Ｋｉ一６７是一种较可靠的 全面反映细胞增殖活性的指标。Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在尖锐湿疣 （Ｃｏｎｄｙｌｏｍａ Ａｃｕｍｉｎａｔｕｍ，ＣＡ）中的表达情况国内外鲜有报 道。ＣＡ是由人乳头瘤病毒（ＨｕｌｌⅫｌ ｐａｐｉｌｌｏｍａ ｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ） 感染皮肤粘膜所致的良性增生性疾病，是生殖器最常见的 病毒性性传播疾病。临床上ＣＡ发生、发展快，治疗后常 易复发，部分病例有发生癌变的可能，这可能与ＣＡ存在 细胞凋亡和增殖异常有关心Ｊ。为了探讨ＣＡ的发病与细胞 增殖的关系，我们运用ｓＰ免疫组化法检测Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、Ｋｉ一 ６７在ＣＡ中的表达，以探讨Ｓｕｒｖｉｖｉｎ及Ｋｉ一６７表达在ＣＡ 发生发展中的作用及其相互关系。
［作者单位］１．四川省卫生干部管理学院，成都，６１００４１：２．四川 省郫县人民医院 ［作者简介］林友胜（１９７１一），男，讲师，研究方向：生殖系统疾 病病理研究．
万方数据
液固定、石蜡包埋、切片。 １．３试剂Ｓｕｒｖｉｖｉｎ为Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ公司产品，为兔抗人多克 隆抗体，Ｋｉ一６７单克隆抗体、即用型ＳＰ免疫组化试剂盒、 ＤＡＢ显色试剂盒均购自迈新生物技术开发公司。 １．４方法
色体１７ｑ２５，编码一个１４２个氨基酸的大分子蛋白质 （１６．５ｋＤ）［４｜。Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在细胞增殖分裂的过程中起关键作 用，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ转录活性Ｇ２／Ｍ期较Ｇ１期、Ｓ期增加约３．５～ ５倍１５Ｊ。Ｓｕｒｖｉｖｉｎ特异性与ｃａ筒ｌｓｅ结合的ＢＩＲ结构域的突变 使ｃａｐｓａｓｅ一３活性增强，推断Ｓｕｒｖｉｖｉｎ有调节凋亡点的作 用【５ Ｊ。近年研究发现，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ虽然是ＩＡＰ家族的成员，分 布却与其他成员不同。其他成员在正常组织有表达，仅表 达水平不同，而Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在多数正常成熟器官中测不到， 主要分布在胚胎及未成熟组织，但在成人正常的子宫内膜、 肾上腺髓质及睾丸、甲状腺、胎盘中有部分表达或低表达； 而在多种恶性肿瘤中高表达，伴随明显的凋亡抑制，并与 细胞增殖和血管生成呈正相关…６。Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在ＣＡ．中的表达 情况国内外鲜有报道。本实验结果显示Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在ＣＡ中的 高表达率为５５．０％，明显高于其在正常宫颈上皮组织中的 表达，提示Ｓｕｒｖｉｖｉｎ与ＣＡ的Ｃ发生发展密切相关，其作用
本研究显示Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和Ｋｉ＿６７在ＣＡ中的阳性表达率， 两者具有一定协同性。有研究指出，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ的上调与ｃ— ｍｙｃ的表达有关，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ促进细胞转化作用可能通过ｃｙ． ｃｌｉｎＤｌ和Ｃ—ｍｙｃ得以实现旧１；Ｋｉ一６７与ｐ５３、Ｃ—ｍｙｃ等基 因的表达有关。以上可以看出，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和Ｋｉ一６７的表达 存在着一定的相互联系，可能与Ｃ—ｍｙｃ的调控有关。而 ＣＡ为来源于角质形成细胞的病变，故推测ＣＡ的发生和发 展与抑制角质形成细胞凋亡（Ｓｕｒｖｉｖｉｎ）和促进角质形成细 胞增殖（Ｋｉ一６７）均密切相关。
表２ Ｋｉ一６７在ＣＡ和正常对照组的表达（×１０—２）
２．３ Ｓｕｒｖｉｖｉｎ与Ｋ卜６７在ＣＡ中表达的关系ＣＡ组中Ｓｕｒ．
ｖｉｖｉｎ与王（ｉ一６７蛋白阳性率之间呈明显正相关（Ｚ２＝６．６７， Ｐ＜Ｏ．０５）。
表３ Ｓｕｒｖｌｖｉｎ与Ｋｉ一６７在ＣＡ中表达的关系（×１０—２）
３讨论 Ｓｕｒｖｉｖｉｎ是凋亡抑制基因（ＩＡＰ）家族新成员，位于染
１．４．１陋染色常规疆染色，光镜下观察，按文献诊
断标准进行病理诊断【３ｊ。
１．４．２免疫组化ＳＰ法按试剂盒说明进行。石蜡切片经 脱蜡和梯度酒精水化，抗原修复后，冲洗，室温下用３％过 氧化物酶孵育切片；ＰＢＳ冲洗，加正常非免疫动物血清
５０止室温下孵育，弃去血清；不冲洗，每张切片滴加一抗 ２０止（Ｓｕｒｖｉｖｉｎ抗体工作浓度Ｉ：８０），４Ｅ冰箱内孵育过夜， ＰＢＳ冲洗，每张切片滴加生物标记的第二抗体５０止，室温 下孵育１０ｍｉｎ，ＰＢＳ冲洗；ＤＡＢ溶液显色，苏木素复染后
ＴｗＥＥＮ ＴＨＥＭ．ＬＩＮ Ｙｏｕ－ｓｈｅｎｇ，碱４『、『Ｇ Ｙｕ－ｍｅｉ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｓｉｃｈｕａｎ Ｃｏｎｔｉｎｕｉｎｇ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＭｅｄｉ—
ｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃ．ｈｅｎｇｄｕ，６１００４１．
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｓｕｒｖｌｖｉｎ ａｎｄ Ｋｉ一６７ Ａｎｔｉｇｅｎ ｉｎ Ｃｏｎｄｙｌｏｍａ Ａｃｍｎｉｎａｔｗｎ（ＣＡ）ａｎｄ ｔｈｅ
通过本研究证实，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和Ｋｉ一６７与ＣＡ的发生发展 密切相关，且两者在ＣＡ中的表达具有一定的协同性。
［参考文献】
［１］Ｔａｎａｋａ Ｋ，Ｉｎｗａｒｎｏｔｏ Ｓ，（３０ｎ Ｇ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｕｒｖｉｖｉｎ
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可能通过抑制角质形成细胞凋亡，促进其增殖来实现。 Ｋｉ＿６７在ＣＡ中的异常表达分析。Ｋ卜６７抗原仅存在
于增殖期细胞中，在Ｇ１中期开始表达并逐渐增加，Ｇ２和 Ｍ期达到高峰，而ＧＯ和Ｇ１早期则无表达，是一种较可靠 的全面反映细胞增殖活性的指标ｌ７｜。本文发现，ＣＡ组Ｋｉ 一６７强阳性表达率显著高于对照组，Ｋｉ一６７在ＣＡ上皮中 的过度表达，可能与ＨＰＶ感染导致细胞周期加速有关。 Ｙｏｕ等㈦８认为高、低危型ＨＰＶ均能诱导已脱离细胞周期 （即已分化）上皮细胞的ＤＮＡ合成。ＨＰＶ依赖宿主细胞提 供ＤＮＡ聚合酶等复制工具来完成病毒ＤＮＡ的合成，上皮 浅层已完成有丝分裂的宿主细胞所能提供的复制元件是有 限的，ＨＰＶ被认为能通过某种机制激活已分化细胞内的 ＤＮＡ合成。我们的研究也证实了这一点。
２０６２
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采用Ｚ２检验。 ２结果 ２．１ Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在ＣＡ及正常宫颈上皮组织中的表达 为胞 浆型，阳性细胞布于表皮各层，在ＣＡ为灶状或弥漫性分 布，在少数正常宫颈上皮组织基底层细胞中呈散在低表达。 阳性率分别为５５．０％（３３／６０）、６．６７％（１／１５），ＣＡ组与 正常皮肤组相比，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ蛋白阳性率的差异有统计学意义 （ｚ２＝１１．３１，Ｐ＜０．０１），见表１。
，Ａｋｉｅｒ ＩＸ；．Ａ ｎｏｖｅｌ ａｎｔｉ—ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｇｅｎｅ， ｓｕｒｖｉｖｉｎｇ，ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｃｉｔｉｉｃｅｒ ａｎｄ ｌｙｍｐｈｏｍａ［Ｊ］．Ｎａｔ Ｍｅｄ， １９９７，３（８）：９１７—９２１．
［５］ＦｅａｌｇＺｈｉ Ｌｉ，ＡｍｂｒⅨｓｉｎｉ Ｇ，Ｃｈｕ ＣＹ，ｅｔ ａ１．Ｒｅ．ｓｅａｒｃｈ ｏｎ ｔｈｅ ｓｔｒｕｔ－
的发生发展密切相关，且两者在ＣＡ中的表达具有一定的协同性。
【关键词】 尖锐湿疣；凋亡抑制基因；Ｋｉ一６７
［中图分类号】Ｒ７５２．５＋３
［文献标识码】Ａ
［文章编号］１００３—８５０７（２００６）１１—２０６１一０２
ＴＨＥ ＥＸＰ］刚￡ＳＳｌ０Ｎ ｓＵＲＶＩⅥＮ ＡＮＤ ＫＩ一６７ ＡＮＴＩＧＥＮ ＩＮ ＣＯＮＤＹｌ ０ＭＡ Ａ（、１ ＴＭＩＮＡＴＵＭ ＡＮＤ ＴＨＥ（：０ＲＲＥＩＡＴＩＯＮ ＢＥ．
ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ａｎｄ Ｋｉ一６７ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｉｎ ６０
ｃ郴ｏｆ ｃａｓｅｓ ｏｆ ＣＡ ａｎｄ １５
ｎｏｒｍａｌ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｅｐｉｔｈｅｌｉａ ｏｆ ｃｅｒｖｉｘ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ａｎｄ Ｋｉ一６７ ｉｎ