实验动物工作者中人兽共患病病原体感染的血清学检测

实验动物工作者中人兽共患病病原体感染的血清学检测
项华1,李晓龙2,沈京达2
作者单位:1 浙江省杭州市疾病预防控制中心,浙江杭州 310006
2 浙江大学实验动物中心
中图分类号:R13614 文献标识码:B 文章编号:1006-9879(2002)02-0159-02
摘要:[目的]探讨实验动物饲养与应用人员人兽共患病病原体感染情况。

[方法]2000年、2001年在杭州市4家科研和教学单位,采集实验动物科学试验、饲养、行政后勤等人员血清157份进行4种人兽共患病病原抗体的检测。

[结果]3份血清检出家鼠型肾综合征出血热病毒抗体,3份检出弓形虫抗体。

[结论]有必要对从事实验动物科研、饲养管理与行政后勤保障工作人员的感染情况作进一步调查。

关键词:实验动物;工作人员;人兽共患病;肾综合征出血热;弓形虫
实验动物体表与体内存在着各种微生物及寄生虫,其中相当一部分为人兽共患病的病原体,既可危害动物本身,还可波及与之密切接触的易感人群,甚至可将病原体扩散至社会上其他人群,危害更大。

因此,有必要对与实验动物直接接触的易感人群进行人兽共患疾病病原体感染情况检测。

为此,从2000年开始,对杭州市4家科研和教学单位从事实验动物饲养管理、科研及相关的行政后勤人员进行血清学检测。

1 材料和方法
111 对象 2000年、2001年,对杭州市4家科研和教学单位从事实验动物科学试验、饲养、行政后勤等人员157人。

其中,从事实验动物饲养管理工作1年以上人员36人,科技人员和实验室其他人员共68人,与实验动物接触很少的行政与后勤保障人员53人。

112 检测项目 根据卫生部颁布的清洁级医学实验动物微生物、寄生虫学标准,检测肾综合征出血热病毒(HFRSV )抗体、鼠肝炎病毒(Mouse Hepatitis Virus,MH V)抗体、泰泽氏菌(Clostridium piliforme)抗体和弓形虫抗体。

113 血清学检测方法 将血清经56e 30min 灭活后置于-20e 冷冻保存。

11311 HFRSV 抗体 用间接免疫荧光试验(IFA)检测HFRSV 特异性抗体。

采用浙江省疾病预防控制中心提供的HFRSV 抗体试剂盒(批号19991228)。

将血清1n 20稀释,当胞浆内出现明显的荧光颗粒时判定为阳性。

用血凝抑制试验(HI)进行H FRSV 感染的血清学分型。

当一份标本用Z 20株血凝素测得HI 抗体滴度\SR 11株血凝素测得的4倍时,则判定为野鼠型;如果用SR 11株血凝素测得的H I 抗体滴度\Z 20
株血凝素测得的H I 抗体滴度的2倍时,则判定为家鼠型。

11312 鼠肝炎病毒抗体 用血清样品总RNA 抽提试剂盒提取总RNA,然后用RT -PCR 方法检测MHV,并对各反应产物进行平均光密度测定。

选用上海科华生物技术有限公司生产的试剂和试剂盒(批号20000131)。

11313 泰泽氏菌抗体 用间接免疫荧光试验(IFA)法检测。

采用泰泽氏菌RJ 株制作的IFA 抗原片。

25%以上细菌有荧光反应者为阳性。

11314 弓形虫抗体 选用兰州畜牧兽医研究所试剂盒(批号940310),操作按说明书进行,诊断标准按全国第2届弓形虫病学术讨论会制定的试行方案[1]。

2 结果
211 感染情况 合计检测各类人群157人,发现6例阳性者。

其中,HFRSV 抗体阳性3例,2例为饲养管理人员,1例为科技人员,抗体阳性率分别为516%(2/36)和115%(1/68)。

弓形虫抗体阳性3例,均为饲养管理人员,阳性率为813%。

鼠肝炎病毒抗体和泰泽氏菌抗体均为阴性。

212 H FRSV 抗体阳性血清的血清学分型 3份HFRSV 抗体阳性血清,用SR11株血凝素测得的H I 抗体滴度均大于用Z20株血凝素测得的H I 抗体滴度2倍以上,说明血清均为家鼠型H FRS 阳性。

见表1。

表1 HFRSV 抗体阳性血清对2种抗原的HI 抗体滴度比较
标本编号
Z20株血凝素
SR11株血凝素滴度比值51n 201n 804倍181n 401n 802倍13
1n 80
1n 160
2倍
213 弓形虫抗体的检测 3例弓形虫阳性者,其初次
血清抗体检测为阳性,3周后再次测定仍为阳性,没有明显的改变,定为隐性感染。

高唐县自然人群乙型肝炎疫苗接种及其预防效果调查
刘志华,刘军华,常婕,吴胜亮,梁伟
作者单位:山东省高唐县卫生防疫站,山东高唐 252800
中图分类号:R512162 文献标识码:B 文章编号:1006-9879(2002)02-0160-02
高唐县从1996年开始应用乙型肝炎(乙肝)疫苗,1990年起逐步向全民推广。

为了解乙肝疫苗在自然人群中的接种情况及其预防效果,2000年4月在城乡进行了一次抽样调查。

1 对象与方法
111 对象 采用整群随机抽样方法,在高唐县全县范围内抽取5个乡,每乡抽取1个村,共5个村,城区抽取4个居委会,调查1~59岁的人群共4344人,其中农村2461人,城区1883人。

112 方法 采用问卷方式,调查一般情况、既往史,乙肝疫苗接种次数、接种时间及接种反应等,由经过培训的专业医师填写调查表。

抽取调查对象静脉血5ml,及时分离血清,放置-20e 保存,采用RIA 法检测乙肝表面抗原(H BsAg )、乙肝表面抗体(抗-HBs)和乙肝核心抗体(抗-HBc)。

检测试剂盒为北京生物制品研究所生产,有效期内使用。

全部样品均在同一实验室由专人检测。

HBsAg 和抗-HBs 以S/N \10为阳性,抗-HBc 以抑制率\75%为阳性。

2 结果
211 乙肝疫苗接种情况 调查4344人,乙肝疫苗接种423人,接种率为9174%。

城区与农村人群接种率分别为15124%(287/1883)和5153%(136/2461)。

接种率最高的是城区5岁以下儿童,为67120%;最低的是农村20岁以上成人,为1192%。

见表1。

表1 高唐县城乡各年龄组自然人群乙肝疫苗接种情况
年龄(岁)城区
调查人数接种人数接种率(%)农村调查人数接种人数接种率(%)1~ 125846712024245181606~ 1055653133200241210010~ 1736235184285331115815~ 18237201331734213120~59
1298
48
3170
1561
30
1192
212 不同人群H BsAg 检测结果 调查人群的HBsAg 阳性率为9178%(425/4344),其中乙肝疫苗接种组为4126%(18/423),未接种组为10138%(407/3921),接种组低于未接种组,差异有统计学意义(V 2=10189,P <0101)。

各年龄组均为接种组低于未接种组,15岁以下3组的差异有统计学意义(P <0101,P <0105),15岁以上2组的差异无统计学意义(P >0105)。

见表2。

表2 高唐县两组自然人群HBsAg 检测情况
年龄(岁)乙肝疫苗接种组调查人数阳性人数阳性率(%)乙肝疫苗未接种组调查人数接种人数接种率(%)V 2值
1~ 1293213223821818281156~ 80221502253013133713710~ 95441213634311185417015~ 41491763144113106013520~59
78
5
6141
2781
272
9178
11043 讨论
即使在普通级动物中仍时常报道有HFRS 等人兽共患病病原体感染发生[2]。

我国5实验动物管理条例6规定,对直接接触实验动物的工作人员,必须定期组织健康体检。

因此,加强对人兽共患疾病的检测是非常必要的。

本次检测涉及4家从事实验动物工作的科研机构的人员。

结果表明,与实验动物密切接触的饲养人员是主要的感染者;科技人员中也有1例感染。

表明人兽共患病能够通过实验动物对人进行感染。

本次发现的3例HFRSV 感染者均为隐性感染,3例弓形
虫抗体阳性者亦为隐性感染,无任何临床表现。

这4个科研机构基本上是2年前开始使用清洁级实验动物的,他们可能是受到过去使用的普通级动物的感染。

提示应淘汰普通级动物,改进实验动物的饲养和管理设施,加强防护措施,定期进行检测,控制病原微生物的感染,有效地保护实验动物工作者的身体健康。

参考文献:
[1]全国第2届弓形虫病学术讨论会11993年弓形虫病诊断标准试行
方案[J]1中国人兽共患病杂志,1994,10(2):1911
[2]魏天文,傅林锋,宁磊,等1开放环境中家兔微生物和寄生虫携带状
况调查[J]1上海实验动物科学,1997,17(3):152-1541
(收稿日期:2001-08-22 本文编辑:薛堂渠)。