金耳代料栽培技术研究_田果廷

籽 壳 要 提 前 １ｄ进 行 预 湿 ）后 加 水 拌 匀 ；培 养 料 分 别 装 入 １７ｃｍ×３５ｃｍ×０．００５ｃｍ 的 聚 丙 烯 塑 料 袋 （每 袋 含 干 料 约 ５００ ｇ），１２１ ℃ 灭 菌 １２０ ｍｉｎ。
待 栽 培 袋 降 至 室 温 后 每 袋 接 入１．３．１．２中 准 备 好 的 混 合 菌 种 ５０ｇ，于 ２３～２５ ℃ 、黑 暗 环 境 培 养 ，菌 丝 开 始 吃 料 时 培 养 温 度 降 低 到 ２０～ ２３ ℃ ；当 料 面 产 生 黄 白 相 间 的 菌 膜 ，有 黄 色 分 泌 物 出 现 时 ，控 制 温 度 在２０ ℃ 左 右 、湿 度 ６５％ ～７０％ 之 间 ；原 基 形 成 约 需１０ｄ，在 此 期 间 光 强 ５００ｌｘ 以 上 条 件 下 每 天 光 照 不 少 于 ３ｈ，白 天 温 度 控 制 在２２ ℃ 左 右 ，夜 晚 应 稍 低 （２０ ℃ 左 右 ），空 气 湿 度 不 低 于 ８０％ ；幼 耳 期 阶 段 ，控 制 温 度 ２０～２５ ℃ 左 右 ，空 气 湿 度 ９０％ 左 右 ，适 当 增 加 通 风 和 光 照 ；一 般 在 接 种 后 ５０ｄ左 右 耳 瓣 开 始 伸 展 ，在 此 期 间 保 持 温 度 、 加 强 通 风 和 散 射 光 量 ，空 气 湿 度 不 低 于 ９０％ ， 经 过 增 光 、加 氧 、增 湿 管 理 后 ，５ｄ 左 右 子 实 体 即可采收。
子实体性状 Ｆｒｕｉｔ ｂｏｄｙ ｓｉｚｅ
期间菌袋定期划 线，记 录 各 配 方 培 养 基 菌 丝 满袋时间，菌丝长势，发 菌 天 数，耳 基 和 子 实 体 的 形成时间 和 特 点，平 均 产 量，计 算 生 物 学 效 率 和 出耳率。
每 种 培 养 料 配 方 接 种 １００ 袋 。 采用第一 次 采 收 子 实 体 的 重 量 计 算 总 产 量 和生物学效率。
（１）９１．９％ 硬 杂 木 屑 ，５％ 玉 米 粉 ； （２）８６．９％ 中 药 渣 （原 药 配 方 ６０％ 山 海 棠、 ２０％ 岩 白 菜 、２０％ 灯 盏 花 ），１０％ 玉 米 粉 ； （３）８６．９％ 阔 叶 树 锯 末 ，１０％ 玉 米 粉 。 上述配方中都要再添加 ２％蔗糖，１％ 石膏粉 和０．１％的磷酸二氢 钾，调 整 料 水 比 约 １∶１．２～ １．５。 １．２．１．２ 二 步 制 种 培 养 基 （用 于 毛 韧 革 菌 和 酵 母状金耳培养） （Ａ）１０％马铃薯煮 液 加 ０．２％ 酵 母 膏，０．２％ 蛋白 胨，０．２％ 磷 酸 氢 二 钾，０．２％ 硫 酸 镁，２％ 葡
食 用 菌 学 报 ２０１２．１９（１）：４３～４６
文 章 编 号 ：１００５－９８７３（２０１２）０１－００４３－０４
金耳代料栽培技术研究
田 果 廷 ，陈 卫 民 ，苏 开 美 ，柴 红 梅 ，李 树 红 ，赵 永 昌 ＊
（云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所，云南昆明 ６５０２２３）
摘 要：采 用 优 良 的 金 耳（Ｔｒｅｍｅｌｌａ ａｕｒａｎｔｉａｌｂａ）菌 株 ，对 以 稻 草 、棉 籽 壳 、硬 杂 木 屑 、中 药 渣 、阔 叶 树 木 屑 为 主 的 培 养 料 及 配 比 进 行 了 栽 培 实 验 。 实 验 结 果 显 示 ，除 稻 草 栽 培 未 能 出 菇 ，其 它 材 料 均 可 用 于 金 耳 代 料 栽 培 ，其 中 ８９．８％ 中 药 渣 ，８％ 玉 米 粉 ，１％ 蔗 糖 ，１％ 石 膏 粉 ，０．２％ 磷 酸 二 氢 钾 配 方 的 基 质 栽 培 生 物 学 效 率 达 ５５％ 。 关 键 词 ： 金 耳 ；代 替 栽 培 ；中 药 渣
２ 结果与分析
２．１ 一步制种法的培养结果 按 １．３．１．１ 方 法 采 用 原 始 混 合 菌 种 进 行 不 同配方培 养 料 的 一 步 制 种 法 培 养 的 金 耳 菌 丝 和 子 实 体 结 果 如 表 １，其 中 菌 丝 在 配 方 （２）培 养 料 中 生长 最 好，长 速 快 （７．８９ ｍｍ／ｄ）且 菌 丝 洁 白、粗 壮 、较 浓 密 ；配 方 （１）、（３）较 次 。
驯化方面工作。 ＊ 本文通讯作者 Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａａｓｍｕｓｈｒｏｏｍ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
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食 用 菌 学 报
第 １９ 卷
萄糖； （Ｂ）８％ 黄 豆 粉，８％ 玉 米 粉，０．１％ 磷 酸 氢 二
钾 ，０．１％ 硫 酸 镁 ； （Ｃ）在 ８％ 黄 豆 粉 ，８％ 玉 米 粉 ，８％ 栎 木 锯 末 ，
金耳 酵 母 状 孢 子 接 种 在 斜 面 培 养 基 （１．２．１．２中的 Ａ 配 方 加 ２％ 琼 脂 ）上，２５ ℃ 活 化 培养７ｄ，转接 在 含 １５０ ｍＬ Ｂ 培 养 基 的 ２５０ ｍＬ 三角瓶中，２５ ℃、３００ｒ／ｍｉｎ 培 养 ７ｄ，取 １５ ｍＬ 再转入含１５０ｍＬ Ｃ 培养基的２５０ ｍＬ 三角瓶中， ２５ ℃、３００ｒ／ｍｉｎ 摇Байду номын сангаас床 培 养 ７ｄ，制 得 金 耳 菌 种 Ｉ 组分。
第１期
田 果 廷 ，等 ：金 耳 代 料 栽 培 技 术 研 究
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表 １ 一 步 制 种 中 不 同 培 养 料 的 培 养 结 果 Ｔａｂｌｅ １ Ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ｔ．ａｕｒａｎｔｉａｌｂａｏｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ｆｏｒｍｕｌａｅ
现耳基时间
菌丝长速
满瓶时间
出耳率
配方
金 耳 （Ｔｒｅｍｅｌｌａ ａｕｒａｎｔｉａｌｂａ）隶 属 于 真 菌 界 （Ｋｉｎｇｄｏｍ Ｆｕｎｇｉ），担 子 菌 门 （Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔａ），担 子菌 纲 （Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｅｔｅｓ），银 耳 目 （Ｔｒｅｍｅｌｌａｌｅｓ）， 银耳科 （Ｔｒｅｍｅｌｌａｃｅａｅ），银 耳 属 （Ｔｒｅｍｅｌｌａ）［１］，分 布于我国西南地区。作为一种著名的食药用菌， 它含有丰 富 的 脂 肪、蛋 白 质 和 硫、磷、锰、铁 等 多 种微量元 素。１９８０ 年 以 前，除 云 南、四 川 每 年 有 少量野生金耳出 产 之 外，尚 无 人 工 栽 培。 由 于 野 生金耳的资源量十 分 稀 少，远 远 满 足 不 了 市 场 需 要，引种驯化栽培 野 生 金 耳 十 分 必 要。 金 耳 子 实 体是由外层的金 耳 和 内 层 的 革 菌 （Ｓｔｅｒｅｕｍ）组 成 的异质复合体，给引种驯化带来一 定 的 困 难 。 ［２－４］ 自上世纪 ８０ 年 代 以 来，研 究 者 对 金 耳 的 人 工 栽 培进行了深入研究［５－８］，取得了较大突 破，但 目 前 还存在一些主要 问 题。 金 耳 的 段 木 栽 培，造 成 适 生栎木 大 面 积 砍 伐，使 森 林 资 源 遭 受 到 严 重 破 坏，制约了金耳的规 模 化 生 产 及 可 持 续 发 展 的 产 业化进程。现在，以 棉 籽 壳 和 适 生 阔 叶 树 木 屑 作 为代替料栽培金 耳 的 研 究 已 取 得 明 显 进 展 。 ［９－１２］ 笔者研究 了 不 同 制 种 方 式 的 菌 种 在 代 替 料 栽 培 中的优化组合，希望 为 金 耳 人 工 栽 培 的 产 业 化 提 供参考。
子实体生 长 也 以 配 方 （２）最 好，不 仅 耳 基 出 现 最 快 （１４ｄ）、出 耳 率 高 ，且 子 实 体 长 势 好 、肉 厚 、 色泽好。 ２．２ 二步制种 采用二步制种法进行不同培养料的栽培试 验结果见表２，其中菌丝在配方（ａ）的基质中生 长 最快、长势 最 好 且 出 耳 最 快。 配 方 （ａ）、（ｂ）、（ｄ） 在出耳率、子实体性 状、产 量、生 物 学 效 率 等 方 面 没有明显差别，配 方（ｄ）出 菇 最 迟，但 栽 培 金 耳 的 产量高质量好。
毛韧革菌菌种同 样 活 化 后 转 接 到 含 １００ ｍＬ Ａ 培养基的２５０ｍＬ 三角瓶中，２５ ℃、１２０ｒ／ｍｉｎ 培养５ｄ，取１０ｍＬ 转入装有 Ｄ 配方基质、瓶口直 径２ｃｍ 的无色 ５００ ｍＬ 玻 璃 瓶 （菌 瓶 制 备、灭 菌 方法同１．３．１．１），２５ ℃培养３５ｄ，制得金耳菌种 ＩＩ组 分 。
Ｔｉｍｅ ｆｒｏｍ
Ｍｙｃｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈＴｉｍｅ ｆｏｒ ｃｏｍｐｌｅｔｅ
Ｐｒｉｍｏｒｄｉｕｍ
ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ ｔｏ
Ｆｏｒｍｕｌａ ｒａｔｅ ａｎｄ
ｓｕｂｓｔｒａｔｅ
ｆｏｒｍａｔｉｏｎ
ｖｉｇｏｒ（ｍｍ／ｄ）
ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ
（ｄ）
ｐｒｉｍｏｒｄｉｕｍ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ （ｄ）
ｒａｔｅ （％ ）
收 稿 日 期 ：２０１１－０２－１６ 原 稿 ；２０１１－１０－２６ 修 改 稿 基 金 项 目 ：国 家 “十 一 五 ”科 技 支 撑 计 划 项 目 （编 号 ：２００８ＢＡＤＡ１Ｂ０３、２００６ＢＡＤ０６Ｂ０８）的 部 分 研 究 内 容 作者简介：田果廷（１９６６－），男，１９８９年毕业于中国农业 大 学，理 学 士，副 研 究 员，主 要 从 事 野 生 食 用 菌 资 源 调 查 和
１ 材料与方法
１．１ 供试菌株 金耳原始母种（金 耳 菌 丝 和 毛 韧 革 菌 菌 丝 的
混合培养 物 ），为 姚 安 县 左 门 乡 段 木 栽 培 场 废 弃 场采集的子实体组 织 分 离 获 得，方 法 参 照 刘 正 南 和郑 淑 芳 的 方 法 获 得［８］；毛 韧 革 菌 （Ｓｔｅｒｅｕｍ ｈｉｒｓｕｔｕｍ）ｙａａｓｍ－０８是通过 对 金 耳 原 始 母 种 菌 丝 进 行 原 生 质 体 分 离 得 到 的 菌 株；金 耳 （Ｔ． ａｕｒａｎｔｉａｌｂａ）酵母状（ｙｅａｓｔ－ｌｉｋｅ）孢子菌株 ｙａａｓｍ－ １７，由成熟 的 子 实 体 弹 射 收 集 孢 子，将 孢 子 涂 布 在 ＰＤＡ 培养基上纯化，并挑取 １０ 个单孢菌 落 混 合而成。以 上 菌 种 均 保 藏 于 云 南 省 农 业 科 学 院 生物技术 与 种 质 资 源 研 究 所 的 大 型 真 菌 菌 种 资 源库。 １．２ 培养基质 １．２．１ 栽培种培养基配方 １．２．１．１ 一 步 制 种 培 养 基 （用 于 原 始 混 合 种 培 养）
将Ｉ组分与ＩＩ组分按１∶１．５（ｖ／ｖ）的比 例混 合 ，室 温 下 放 置 ５～１０ｄ 即 可 用 于 接 种 栽 培 袋 。 １．３．２ 代料栽培培养料的优化筛选 按 １．２．２ 中 配 方 分 别 称 取 各 种 原 料 ，磷 酸 二 氢 钾 ，蔗 糖 先 溶 于 水 ，其 它 成 分 预 先 混 匀 （棉
按照１．２．１．１ 中 培 养 料 （１）、（２）和 （３）的 配 方，将蔗糖、磷酸二氢 钾 和 石 膏 先 溶 于 水，与 其 它 预混和 的 基 质 混 匀，分 别 装 入 瓶 口 直 径 ４ｃｍ 的 无色７５０ｍＬ 玻璃瓶，１２１ ℃ 灭菌 １２０ ｍｉｎ，冷 却 后接入经过活化的原始混合母种，每瓶约 １ｃｍ× ２ｃｍ 的菌种块１个，２０ ℃ 培 养 箱 内 恒 温 培 养。３ 种配方培养基各 制 种 ５０ 瓶，定 期 划 线，观 测 菌 丝 生长速度、长 势，菌 丝 满 瓶 时 间，耳 基 发 生 特 点、 出耳率等。 １．３．１．２ 二 步 制 种
０．１％ 磷 酸 氢 二 钾 、０．１％ 硫 酸 镁 ； （Ｄ）７０％ 栎 木 木 屑，２０％ 麦 麸，５％ 黄 豆 粉，
５％ 玉 米 粉 。 １．２．２ 代替料栽培培养料配方 各种代 料 中 主 料 分 别 为 （ａ）中 药 渣 （配 方 同 １．２．１．１），（ｂ）阔 叶 树 锯 末，（ｃ）硬 杂 木 屑，（ｄ）棉 籽壳，（ｅ）稻 草，含 量 ８９．８％，其 余 辅 料 为 ８％ 玉 米粉，１％ 蔗 糖，１％ 石 膏 粉 和 ０．２％ 的 磷 酸 二 氢 钾 ，料 水 比 约 １∶１．２～１．５。 １．３ 试验方法 １．３．１ 栽培种制备 １．３．１．１ 一 步 制 种