正常人尿中单羟酚类物质含量的测定研究
酚类的测定实验报告
一、实验目的1. 熟悉酚类化合物的性质。
2. 掌握酚类化合物含量的测定方法。
3. 培养实验操作技能,提高实验数据处理和分析能力。
二、实验原理酚类化合物是一类具有羟基(-OH)直接连接在苯环上的有机化合物。
酚类化合物在酸性溶液中能与三氯化铁(FeCl3)发生显色反应,生成具有蓝绿色的络合物。
通过测定该络合物的吸光度,可以计算出酚类化合物的含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器:分光光度计、移液器、容量瓶、试管、烧杯、玻璃棒等。
2. 试剂:酚类化合物标准溶液、三氯化铁溶液、盐酸、无水乙醇、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 配制标准溶液(1)准确移取酚类化合物标准溶液1.0 mL于100 mL容量瓶中,用无水乙醇定容至刻度,配制成浓度为10 mg/L的酚类化合物标准溶液。
(2)分别取酚类化合物标准溶液0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL 于5个试管中,用无水乙醇定容至5 mL。
2. 显色反应(1)向每个试管中加入2 mL三氯化铁溶液。
(2)将混合液在室温下放置5分钟,使其充分反应。
3. 测定吸光度(1)用分光光度计在波长为560 nm处测定各试管中溶液的吸光度。
(2)以无水乙醇为参比,记录吸光度。
4. 绘制标准曲线以酚类化合物标准溶液的浓度为横坐标,对应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
5. 样品测定(1)准确移取待测样品1.0 mL于100 mL容量瓶中,用无水乙醇定容至刻度。
(2)重复上述步骤2、3,测定待测样品的吸光度。
6. 计算酚类化合物含量根据标准曲线,查得待测样品的酚类化合物浓度。
根据下列公式计算酚类化合物含量:酚类化合物含量(mg/L)= 待测样品浓度(mg/L)×样品体积(mL)/ 标准溶液体积(mL)五、实验结果与讨论1. 标准曲线绘制标准曲线如图1所示。
由图1可知,酚类化合物浓度在0~50 mg/L范围内,吸光度与浓度呈线性关系。
2. 样品测定待测样品的吸光度为0.750,根据标准曲线查得待测样品的酚类化合物浓度为30 mg/L。
尿液中苯酚的正常浓度范围
尿液中苯酚的正常浓度范围尿液中苯酚的正常浓度范围1. 介绍苯酚及其在尿液中的存在苯酚,也称为羟苯、碳酸酚,是一种有机化合物,化学式为C6H6O。
它具有无色结晶或黄色结晶的形态,并具有特殊的酚味。
苯酚可以通过各种途径进入人体,其中包括呼吸、皮肤接触以及食物和饮水的摄入。
一旦进入人体,苯酚会被肝脏代谢成苯酚醌,并被排泄到尿液中。
2. 尿液中苯酚的正常浓度范围尿液中苯酚的正常浓度主要取决于个体的代谢状态、环境因素以及苯酚的摄入量等因素。
一般而言,尿液中苯酚的正常浓度应在0.1-1.2μg/mL之间。
若苯酚浓度超过2.5 μg/mL,可能表明存在苯酚中毒的风险,需要进一步的检查和评估。
3. 影响尿液中苯酚浓度的因素尿液中苯酚的浓度可以受到多种因素的影响。
个体的代谢状态是一个重要的因素。
不同个体的苯酚代谢能力存在差异,即使摄入相同剂量的苯酚,尿液中的浓度也可能不同。
环境因素也可能对尿液中苯酚浓度产生影响。
暴露在苯酚含量较高的环境中,尿液中的苯酚浓度可能会增加。
苯酚的摄入量也是一个重要的因素。
若食物、饮品或药物中存在大量的苯酚,尿液中的苯酚浓度也可能增加。
4. 对尿液中苯酚浓度的重要性尿液中苯酚浓度的评估对于判断个体的健康状态和环境暴露状况非常重要。
苯酚是一种有毒物质,长期暴露于高浓度的苯酚可能导致干扰神经系统功能、肝脏损伤、肾脏损害甚至癌症等各种健康问题。
通过检测尿液中的苯酚浓度,可以及早发现苯酚中毒的风险,从而采取相应的预防措施。
5. 小结和个人观点苯酚作为一种有毒物质,其在尿液中的浓度范围是我们评估个体健康状况和环境暴露水平的重要指标之一。
尿液中苯酚的正常浓度范围为0.1-1.2 μg/mL,超过2.5 μg/mL可能存在苯酚中毒的风险。
个体的代谢能力、环境因素以及苯酚的摄入量都会影响尿液中的苯酚浓度。
我们应该注重苯酚的摄入来源以及环境暴露情况,并及时进行检测和评估,以保护我们的健康。
个人观点上,我们应该尽量减少对含有苯酚的食物、饮品或药物的摄入,避免长期暴露在高浓度的苯酚环境中。
酚类测定实验报告
一、实验目的1. 掌握酚类化合物的提取和分离方法。
2. 学习并掌握分光光度法测定酚类化合物含量的原理。
3. 通过实验,了解实验室操作规程,提高实验技能。
二、实验原理酚类化合物是一类含有羟基(-OH)直接连接在芳香环上的有机化合物。
本实验采用分光光度法测定酚类化合物的含量。
该法基于酚类化合物在特定波长下对光的吸收特性,通过比较标准溶液和待测溶液的吸光度,计算待测溶液中酚类化合物的含量。
三、实验材料与仪器材料:1. 标准酚类化合物溶液2. 待测酚类化合物溶液3. 硫酸铜溶液4. 磷酸溶液5. 甲基橙指示液6. 氢氧化钠溶液7. 无酚水8. 乙醇9. 乙醚10. 活性炭仪器:1. 分光光度计2. 紫外可见光分光光度计3. 磁力搅拌器4. 50mL容量瓶5. 10mL移液管6. 25mL比色皿7. 电子天平8. 烧杯9. 滤纸四、实验步骤1. 样品制备:1.1. 取一定量的待测酚类化合物样品,加入适量的无酚水,充分溶解。
1.2. 将溶液过滤,取滤液备用。
2. 标准溶液配制:2.1. 根据实验要求,配制一定浓度的标准酚类化合物溶液。
2.2. 将标准溶液分别置于50mL容量瓶中,用无酚水定容至刻度线。
3. 显色反应:3.1. 取一定量的标准溶液和待测溶液,分别加入适量的硫酸铜溶液和磷酸溶液,搅拌均匀。
3.2. 加入适量的甲基橙指示液,用氢氧化钠溶液滴定至溶液呈紫蓝色。
3.3. 将溶液置于分光光度计中,在特定波长下测定吸光度。
4. 数据分析:4.1. 以标准溶液的吸光度为横坐标,浓度(mg/L)为纵坐标,绘制标准曲线。
4.2. 根据待测溶液的吸光度,从标准曲线上查出对应的浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的线性范围为0.1-1.0 mg/L,相关系数R²为0.999。
2. 待测溶液的吸光度为0.865,从标准曲线上查出其浓度为0.8 mg/L。
3. 待测溶液中酚类化合物的含量为0.8 mg/L。
快速尿液单羟酚代谢物检测在恶性肿瘤中的诊断价值
组别 恶性肿瘤组 非肿瘤疾病组 对照组
n
阳性
879
626 (71 .20)
121
25 (20 .67 )
100
3 (3 .00)
注 :恶性肿瘤组与对照组比较 ,χ2 = 236 .3 ,P < 0 .01 。
2 .2 不同肿瘤组间尿单羟酚阳性结果比较 胃癌 、结肠癌 、直 肠癌 、食 管 癌 、胰 腺 癌 等 消 化 道 肿 瘤 的 尿 单 羟 酚 阳 性 率 达 80 .0% 以上 ,在肺癌 、宫颈癌 、前列腺癌 、乳腺癌 、膀胱癌 、卵巢 癌 、肾癌等的检出 率低 ,平均 为 33 .3% ,差 异 有 统 计 学 意 义 (χ2 = 200 ,P < 0 .001) 。 见表 2 。 2 .3 肿瘤患者尿单羟酚与病理检测结果一致性比较 经影像 诊断和病理诊断确诊 100 例恶性肿瘤患者 ,50 例非恶性肿瘤 患者 ,经 Kappa 检验 ,尿单羟酚与病理检测两法有中等程度的 一致性(Kappa = 0 .476 ,P < 0 .01) 。
检验医学与临床 2016 年 3 月第 13 卷第 6 期 Lab M ed Clin ,M arch 2016 ,V ol .13 ,N o .6
快速尿液单羟酚代谢物检测在恶性肿瘤中的诊断价值
· 755 ·
·论 著·
李兴翠 ,向代军 ,王成彬 ,王 海 △ (解放军总医院临床检验科 ,北京 100853)
【关键词】 肿瘤 ; 单羟酚 ; 尿液 ; 筛查 DOI :10 .3969 /j .issn .1672-9455 .2016 .06 .012 文献标志码 :A 文章编号 :1672-9455(2016)06-0755-02
羟值测定的详细操作说明(二)
羟值测定的详细操作说明(二)引言概述:本文旨在详细介绍羟值测定的操作步骤,帮助读者全面了解该实验的具体操作要点和注意事项。
羟值测定是一种常用的实验方法,用于测定某种物质中羟基的含量,具有重要的应用价值。
本文将从实验准备、实验步骤、实验数据处理、实验注意事项和实验总结五个大点进行详细阐述。
实验准备:1. 准备所需器材和试剂:酚酞指示剂、稀盐酸、标准氢氧化钠溶液、待测物样品。
2. 检查器材完好性:检查试剂的保存状态、检查仪器和玻璃仪器是否完好。
3. 检查试剂质量:检查试剂是否过期,如过期应重新购买新的试剂。
实验步骤:1. 准备标准曲线:制备一系列含有不同浓度的氢氧化钠溶液,采用酚酞指示剂,用盐酸滴定至颜色突变。
2. 处理待测物样品:将待测物样品溶解并稀释至适当浓度,加入酚酞指示剂。
3. 滴定待测物样品:用标准盐酸溶液滴定待测物样品溶液,记录所需盐酸的用量。
4. 计算羟值:根据滴定所需盐酸的用量计算待测物样品中羟基的含量。
5. 重复实验:重复以上步骤,取平均值作为最后的结果。
实验数据处理:1. 绘制标准曲线:将所测得的氢氧化钠溶液浓度与所需盐酸的用量绘制曲线。
2. 计算待测物样品中羟基的含量:用标准曲线计算待测物样品中羟基的含量。
3. 计算实验误差:计算实验重复性和精密度误差。
实验注意事项:1. 实验室安全:操作时应佩戴防护眼镜和实验服,注意化学品的安全使用。
2. 精确测量:使用准确的量具进行溶液制备和滴定。
3. 混合均匀:在制备待测物样品时,应充分混合以确保样品的均匀性。
4. 试剂保存:将试剂保存在干燥、避光和密封的容器中,避免受到外界环境影响。
5. 数据记录:确保准确记录实验数据,尽量避免数据丢失或错误。
实验总结:羟值测定是一种常用的实验方法,可以准确测定某种物质中羟基的含量。
在实验过程中,正确操作仪器和试剂,严格按照实验步骤进行,注意实验安全并准确记录数据,都是保证实验结果准确可靠的关键。
通过本文所述的详细操作说明,读者能够更好地掌握羟值测定的实验技巧,提高实验效率和结果的准确性。
固相支撑液液萃取-液相色谱-串联质谱法测定尿液中10种单羟基多环芳烃
摇 8摇77
现象、基质效应降低和需要样品量少等优点[19] 。 样品前处理时,使用相应的萃取柱,仅需上样和洗脱两 步,即可从水相中萃取目标化合物。 当加入水性生物样品时,样品在填料的表面扩散并被吸收,从而形成 萃取界面,相当于 LLE 的界面,当与水不相溶的有机溶剂加入后,目标分析物被有机溶剂溶解并收集下来。 相较于 LLE、SPE 等传统尿液前处理方法,SLE 可有效提高样品的提取能力和效率,已广泛应用于人体尿 液和血液样品的前处理[20 ~ 28] ,如 Meunier 等[28] 用甲基叔丁基醚提取血浆样品的醛固酮,方法方便简单。 Liu 等[23] 利用正己烷萃取人体血液和尿液中的多环麝香,无需调节 pH 值和盐度,样品制备时间显著缩 短( ~ 15 min) 。 上述研究结果表明,利用 SLE 方法可以对生物体液中的污染物进行高通量分析。
关键词摇 单羟基多环芳烃; 尿液; 固相支撑液液萃取; 液相色谱鄄串联质谱
1摇 引 言
多环芳烃( Polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs) 是指分子中具有两个或两个以上苯环的一类碳 氢化合物,其主要来源是煤、石油、木材等不完全燃烧或热裂解产物[1] 。 PAHs 可通过呼吸道、皮肤和消 化道等多种暴露途径进入人体,经体内代谢形成羟基多环芳烃( OH鄄PAHs) ,并以葡萄糖醛酸、硫磺酸结 合物的形式主要通过尿液排泄[2] 。 由于它们具有潜在的“ 三致冶 ( 致癌、致畸、致突变) 效应以及在全球 分布的广泛性[3] ,PAH 对人体健康的潜在危害成为世界各国广泛关注的环境污染问题,人体内暴露水 平的评估是开展 PAHs 健康风险评价的重要基础科学数据。
本研究选 择 人 尿 液 中 的 1鄄羟 基 萘 ( 1鄄OHN) 、2鄄羟 基 萘 ( 2鄄OHN) 、2鄄羟 基 芴 ( 2鄄OHF) 、3鄄羟 基 芴 (3鄄OHF) 、1) 、3鄄羟基菲(3鄄OHPhe) 、4鄄羟基菲(4鄄OHPhe) 、9鄄羟基 菲(9鄄OHPhe) 和 1鄄羟基芘(1鄄OHP) 共 10 种 OH鄄PAHs 为目标物,通过 SLE 洗脱溶剂的筛选和优化,确定 前处理富集净化方法,然后使用 LC鄄MS / MS 技术对其进行定性和定量分析,为尿液中常见的 PAHs 代谢 产物检测提供了科学依据。
用HPLC、LCΠMS方法检测人尿中
2001-08-21收 第一作者简介:刘伟,女,副研,毒物分析专业,电话:021-********用HP LC 、LC ΠMS 方法检测人尿中Viagra及其代谢物刘 伟 沈 敏(司法部司法鉴定科学技术研究所,上海200063)〔摘要〕建立了人体尿液中viagra 及其代谢产物的HP LC 、LC ΠMS 检测方法,确认了志愿受试者服用viagra 的尿液中的代谢产物,并对viagra 原体及其羟基化代谢物在尿液中的消除进行了研究。
结果表明:viagra 服用者尿液中检出三种代谢产物,其中尤以羟基化代谢物量为最大;viagra 原体及羟基化代谢物的检出时限分别为24小时和36小时。
关键词:viagra 代谢物 尿液 HP LC LC ΠMSviagra 药物名称为枸橼酸西地那非(sildenafil citrate ),香港将其命名为“伟哥”,在中国大陆上市时改名为“万艾可”,为98年由美国辉瑞制药有限公司生产的专治阳萎及改善性功能的药物。
它作为一种性药,对治疗男性勃起功能障碍有很好的疗效,因而在世界范围内得到了患者的普遍欢迎。
目前,viagra 已在100多个国家和地区上市,全世界有超过800万名患者接受viagra 的治疗,在我国该药也得以上市。
随着viagra 在我国的获准使用,由此引发的有关司法鉴定问题也有可能出现。
有关体内viagra 的检测国外已有报道〔1,2〕,但国内尚未有体内该药物的检测及代谢物研究报道。
本研究用HP LC 、LC ΠMS ΠMS 方法对受试者服用viagra 的尿液进行了检测研究。
用LC ΠMS ΠMS 方法,确认了viagra 在尿液中的三种代谢产物,并对viagra 原体及其羟基化代谢物在尿液中的消除进行了初步研究。
1 实验材料111主要仪器HP1090ΠDAD 液相色谱仪;Waters 2690ΠMicromass Quattro LC ΠMS 仪1.2 主要试剂标准溶液配制:精密称取viagra 标准品,配制成1mg Πm L 的甲醇溶液作储备液,临用前稀释;0.01m ol ΠL 乙酸铵缓冲溶液:精密称取分析纯乙酸铵(上海化学试剂总厂出品)0.77g 于1000m L 容量瓶中,加水稀释至刻度;乙腈:Fisher Scientific 公司提供,HP LC 级;第22卷第3期质 谱 学 报JOURNA L OF CHI NESE M ASS SPECTROMETRY S OCIETY V ol.22N o.3水:重蒸水;其它试剂均为分析纯。
一种尿液中单羟基多环芳烃的分析检测方法
一种尿液中单羟基多环芳烃的分析检测方法单羟基多环芳烃(OH-PAHs)是一类常见的环境污染物,其具有很强的毒性和致突变性,对人体和生态系统均具有一定的危害。
因此,准确测定尿液中的OH-PAHs含量对于了解人体暴露程度以及环境污染物的迁移和转化具有重要意义。
本文将介绍一种常用的尿液中OH-PAHs分析检测方法。
该方法主要包括以下步骤:1.样品准备:收集尿液样品并将其保存在无色玻璃瓶中。
在样品提取之前,应记录样品收集时间、位置和采集者等信息。
将尿液样品在低温条件下保存,避免OH-PAHs的蒸发和降解。
如果需要进行更长期的保存,请考虑在-20℃或更低的温度下冷冻样品。
2.样品提取:将尿液样品离心以去除悬浮物和固体颗粒,然后用氯仿或正己烷等有机溶剂提取目标物质。
一般情况下,可以使用液-液萃取、固相萃取或固相微萃取等技术对尿液样品进行提取。
选择合适的提取方法可以提高提取效率和样品纯度。
3.样品净化:提取后的样品需要经过净化处理,以去除有机溶剂、盐类和其他干扰物质。
传统的净化方法包括硅胶柱层析、固相萃取柱层析等。
近年来,固相萃取柱联用高效液相色谱(SPE-LC)和固相微萃取联用气相色谱(SPME-GC)等新技术也逐渐被应用于样品净化过程。
4.样品分析:经过净化处理后的样品可以进行原子荧光光谱法(AFS)、液相色谱联用质谱法(LC-MS/MS)或气相色谱联用质谱法(GC-MS/MS)等分析方法进行检测。
这些分析方法具有较高的测定灵敏度和选择性,可以对复杂矩阵样品中的OH-PAHs进行准确分析。
5.结果分析和评估:根据分析结果,评估尿液中OH-PAHs的暴露水平。
可以与相关标准和限值进行比较,评估其对人体健康的潜在风险。
同时,还可以通过分析结果评估环境中OH-PAHs的污染程度,为相关环境保护政策的制定提供科学依据。
上述方法虽然能够准确测定尿液中OH-PAHs的含量,但仍存在一些问题和挑战。
首先,尿液样品的收集和处理过程可能会导致样品中OH-PAHs的损失或污染。
尿中酚实验报告
实验名称:尿中酚含量测定实验目的:了解尿中酚的检测方法,掌握酚的定量分析方法,为临床诊断提供依据。
实验时间:2021年X月X日实验地点:XX大学医学部实验室实验仪器:紫外分光光度计、电子天平、水浴锅、移液器、试管、容量瓶、pH计等。
实验试剂:酚标准溶液、亚硝酸钠、硝酸、氢氧化钠、盐酸等。
实验原理:尿中酚是一种重要的生物标志物,其含量与多种疾病密切相关。
本实验采用分光光度法测定尿中酚含量。
酚在酸性条件下与亚硝酸钠发生重氮化反应,生成重氮酚,重氮酚与对氨基苯磺酸发生偶联反应,生成红色偶氮染料。
在一定波长下,该偶氮染料的吸光度与酚含量成正比。
实验步骤:1. 标准曲线的绘制:(1)取6只试管,分别加入0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL酚标准溶液,用蒸馏水定容至10.0 mL。
(2)向各试管中加入0.5 mL亚硝酸钠溶液,混匀,室温放置5 min。
(3)向各试管中加入0.5 mL对氨基苯磺酸溶液,混匀,室温放置10 min。
(4)向各试管中加入0.5 mL盐酸溶液,混匀。
(5)在波长510 nm处,用紫外分光光度计测定吸光度。
(6)以酚浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样品测定:(1)取1.0 mL尿样,用蒸馏水定容至10.0 mL。
(2)按照标准曲线的绘制步骤,进行操作。
(3)在波长510 nm处,用紫外分光光度计测定吸光度。
(4)根据标准曲线,计算尿中酚含量。
实验结果:1. 标准曲线:在0.0~2.5 mg/L范围内,吸光度与酚浓度呈线性关系,相关系数R²=0.998。
2. 样品测定:尿中酚含量为X mg/L(X为实际测得值)。
实验讨论:1. 本实验采用分光光度法测定尿中酚含量,具有操作简便、准确度高、灵敏度好等优点。
2. 实验过程中,应注意控制反应条件,如pH值、反应时间等,以保证实验结果的准确性。
3. 本实验测得的尿中酚含量,可为临床诊断提供参考依据。
实验结论:本实验成功建立了尿中酚含量的测定方法,为临床诊断提供了参考依据。
尿液中单羟酚类物质含量的测定方法研究及在肿瘤筛查中的应用
尿液中单羟酚类物质含量的测定方法研究及在肿瘤筛查中的应用宋慧;侯华新;李福森;黄燕军;梁永红;赵农【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2003(013)002【摘要】目的:选择单羟酚类物质酪氨酸为标准物,建立测定尿中单羟酚类物质的实验方法.方法:采用可见分光光度和正交实验,确定测定酪氨酸含量体系的各项最优化条件,并运用于测定各类正常人及肿瘤患者尿液中单羟酚类物质的含量.结果:在一定浓度范围内酪氨酸含量与吸光度呈现良好的线性关系,运用该法测定各类正常人和肿瘤患者尿液单羟酚类物质时,其敏感度为78.1%,特异性为96.0%,阳性预测值为85.4%,阴性预测值为93.4%.结论:此法可作为肿瘤患者辅助诊断的指标,是一种无创、快速、低廉的人群肿瘤筛查方法.【总页数】2页(P71-72)【作者】宋慧;侯华新;李福森;黄燕军;梁永红;赵农【作者单位】广西医科大学,南宁,530021;广西医科大学,南宁,530021;广西医科大学,南宁,530021;广西医科大学,南宁,530021;广西医科大学,南宁,530021;广西医科大学,南宁,530021【正文语种】中文【中图分类】R730.231【相关文献】1.测定尿液萘酚反应物在肿瘤筛查中的应用 [J], 胡望平;胡盈莹;冯福英;黄兢姚;章宏斌;郑钦;王海林2.快速尿液单羟酚代谢物检测在恶性肿瘤中的诊断价值 [J], 李兴翠;向代军;王成彬;王海3.正常人尿中单羟酚类物质含量的测定研究 [J], 侯华新;梁永红;赵农;黄燕军;李福森;宋慧;雷耀兴4.尿液Tenascin-C测定在膀胱肿瘤患者筛查中的应用 [J], 李春梦;张红;贺龙梅;王建利5.尿中单羟酚类物质的测定对妇科肿瘤诊断的临床意义 [J], 侯华新;赵农;梁永红;黄燕军;黎丹戎因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
HPLC法测定人体尿液中的4’-羟基和6-甲氧基黄烷酮
HPLC法测定人体尿液中的4’-羟基和6-甲氧基黄烷酮何小英;李来生;陈会明;金艳红
【期刊名称】《分析化学》
【年(卷),期】2009(37)A02
【摘要】黄烷酮(Flavanone)属于黄酮类化合物(Flavonoids),具有2-苯基色原酮化学结构。
黄烷酮类化合物广泛存在自然界,其衍生物大多从天然植物中提取而得,取代基多为羟基、甲氧基、苄氧基、异戊烯基、香叶基等,是多种药用植物有效成分之一。
据有关文献报道,许多黄烷酮类化合物具有抗菌、
【总页数】1页(P209)
【作者】何小英;李来生;陈会明;金艳红
【作者单位】南昌大学分析测试中心,南昌330047
【正文语种】中文
【中图分类】O625.322
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1.PSE-HPLC法测定食品中叔丁基羟基茴香醚和2,6-二叔丁基羟基甲苯 [J], 林太凤;刘阳;王慧琴;郑大威;罗云敬;张淑芬
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群
5.1-(2-羟基-3-甲氧基苯甲醛缩氨基)-8-羟基-3,6-萘二磺酸的合成及其光度法测定硼的研究 [J], 潘教麦;王芳;徐钟隽
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*广西壮族自治区自然科学基金资助课题(9732032)收稿日期:1999-09-20正常人尿中单羟酚类物质含量的测定研究*侯华新 梁永红 赵 农 黄燕军 李福森 宋 慧 雷耀兴(广西医科大学化学教研室 南宁 530021)摘要 目的:确定正常人尿中单羟酚衍生物(M HP)含量范围。
方法:采用可见分光光度法,定量测定18~60岁各类正常人及HBsAg 阳性携带尿液中单羟酚类物质。
结果:M HP 含量与年龄、性别有一定的关系,194例健康人尿中M HP 含量为正态分布,第95百分位数的O D 值上限为0.3,对应酪氨酸含量是2.46mmo l /L 。
而HBsAg 阳性携带者尿液M HP 与正常人无显著性差异。
结论:此实验结果在运用M HP 进行肿瘤筛查时,可作为正常人参考指标。
关键词 单羟酚类物质;尿液;正常人中国图书资料分类法分类号 R446.12DETERMINATION THE LEVEL OF MO NOHYDROXYPHENYL S UBSTANCES I N NORMAL HUMAN URI NEHou Huaxin,Liang Yonghong ,Zhao Nong,et al (Depa rtment of Chemistry,Guang xi Medical Univ ersity,Nanning 530021China)Abstract Objective :To determine the normal rang e of M onohydrox yphenyl substances (M HP)level in humanurine .Method:M onohydrox yphenyl substances level in hum an urine which collected from normal persons and HBsAg carrying persons were detected quanititativ ely by v isable spectophotometer method.Results :The results indicated that there was a little different between the differential sex group and the ag e g roup.The urinesamples from 194healthy subjects (the age from 18~60y ears )were determined to establish a reference rang e of urinary M HP (confidence interval 95%),and its upper limit w as 2.46mmol /L,when Tyr w as selected as the standard.There w as not remarkable different betw een the norm al persons and the HBsAg carrying persons.C onclusion :The assay results can be considered as a no rmal range of urinary M HP when this m ethod is used a cancer screening system .Key words mo nohydroxy pheny l substance;urine;normal human 恶性肿瘤的治愈率很大程度依赖于早期发现与诊断。
所以寻找出一种快速、简便的测定方法已成为当今的热门课题。
目前使用较多的肿瘤标志物是糖蛋白、酶类、多胺类、激素等物质[1]。
Kim [2]通过对肿瘤病人尿液进行核磁共振检测,发现有一特征峰,后查明这是一类含有单羟酚结构的物质及其衍生物。
我们经过大量实验发现正常人的尿液中也有这类物质,只是含量较低。
但是其含量是否随着机体内外环境改变而改变?有必要确定一个正常的波动范围,以利于今后诊断上划分正常与异常的界限。
我们通过对近200例正常人和43例HBsAg 阳性携带者尿液进行单羟酚类物质(M HP )分析,以确定正常值的范围。
并找出正常人M HP 含量与年龄、性别的关系。
1 材料与方法1.1 仪器:752型分光光度计,恒温水浴箱,离心机。
1.2 试剂:酪氨酸,硫酸汞,硝酸汞,硝酸镍,亚硝酸钠。
上述试剂均为国产分析纯试剂。
1.3 尿液收集:收集近期经体检各重要器官未发现实质性占位的健康人晨尿194例,其中青年组18~30岁136例(男76例、女60例),中老年组31~60岁58例(男21例、女37例)。
另收集30~50岁经体检发现为HBsAg 阳性携带者尿样43份。
所有供尿者3d 前均停止服用各种药物和浓茶。
1.4 实验方法:①标准曲线:参照文献[2],对Millon 试剂进行改进(改进后方法的精密度、灵敏度实验;重复性实验;回收率实验等另文报道),以酪·754·广西医科大学学报J OURN AL OF GUAN GXI M EDIC AL UNIV ERSITY 2000Oct ;17(5)氨酸作为单羟酚类物质的标准物,在500nm下测定其与改进的Millon试剂产生的有色物质的OD 值;②尿液中M HP测定,M HP与改进的Millon试剂反应产生的有色物质于500nm下测定其OD值。
2 结 果2.1 青年组的M HP含量低于中老年组,具有显著性差异(P<0.05)。
而HBsAg阳性患者尿中M HP 含量略高于正常人组,但无显著性差异(P> 0.05)。
见表1。
表1 青年组、中老年组正常人及HBsAg阳性患者尿液M HP含量对比(t检验)组 别n x-(OD)s(OD)P青年组(18~30岁)1360.1160.093中老年组(31~60岁)580.1490.089<0.05 HBsAg阳性(30~60岁)430.1550.108>0.05 2.2 将男女尿样M HP进行比较,不管是否考虑年龄差异,都是女性高于男性,除中老年组内差异不明显外,其余均差异显著(P<0.05),见表2。
表2 各组正常人男女尿液M HP含量对比年龄组性别n x-(OD)s(OD)t检验18~30岁男760.0690.091t1= 2.661(P<0.05)女600.1210.136t2= 1.148(P>0.05)31~60岁男210.1310.078t3= 3.508(P<0.001)女370.1590.089t4= 1.489(P>0.05)18~60岁男970.0820.088t5= 2.840(P<0.01)女970.1350.120 t1为青年组男女比较,t2为中老年组男女比较,t3为男女性别比较,t4为青年组与中老年组女性比较,t5为青年组与中老年组男性比较2.3 青年组与中老年组男性间、女性间的M HP含量也有差别,且都是中老年组较高,其中男性间差别大(P<0.05),见表2。
2.4 在波长500nm下测定酪氨酸标准溶液OD值时,在0.4~3.2m mol/L浓度范围内,呈现良好的线性关系,结果见表3。
表3 酪氨酸(T Y R)溶液标准曲线T yr浓度(c B/mmo l·L-1)0.40.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2OD值0.0450.0920.1480.1920.2300.2930.3300.3813 讨 论3.1 从实验结果可知,青年组与中老年组M HP含量有明显差异,这可能是由于中老年机体抗氧化能力下降,引起体内自由基含量增加,从而对蛋白质中Ty r等不饱和物质进行攻击,使其氧化速度加快,导致双酪氨酸含量增加,从尿液中排泄出来。
3.2 各年龄组内,女性M HP含量均高于男性,且在青年组有显著差异。
这可能是女性体内雌激素与孕激素所致。
建议在收集女性尿液时,应在月经后13~18d内为宜。
3.3 相当一部分肝癌病人早期都曾长期处于HBsAg阳性,但是HBsAg阳性患者尿中M HP含量与正常人无显著性差异,说明该类病人尿中M HP 代谢仍未达到异常,用此指标无法区分正常人与HBsAg阳性患者。
3.4 根据估计正常值范围的正态分布法[4],可按公式x-±uS确定正常值范围,故M HP正常值95% OD值上限为0.30。
而实验结果表明,绝大多数恶性肿瘤患者尿中M HP含量均大于0.35(结果另文发表)。
所以本文数值可作为在M HP角度上判断正常人与肿瘤患者间参考指标。
3.5 据文献报道,尿液中的M HP为含单羟酚结构的一类物质,包括酪氨酸、苦味酸、对羟苯丙酮酸等及其衍生物,若以酪氨酸的含量反映尿中M HP 的含量,则正常值95%酪氨酸含量上限为 2.46 mmol/L。
参 考 文 献1 李宣海,巫向前,倪语星.肿瘤标志物的检测与临床.北京:人民卫生出版社,1997.69.2 Kim Y J.Sensitivity and Specificity of the Reag ent fo r Cancer Diag nosis Obtained by U rine N M R M easurement.The N ew M edica l Journal,1985,28(2):51.3 四川医学院主编.卫生统计学.北京:人民卫生出版社, 1978.94-97.·755·侯华新,等.正常人尿中单羟酚类物质含量的测定研究。