[诊断学] 临床血液学检测 骨髓检查
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参考值： 成人阳性率：10～40% 积分值40～80分。
AKP积分的计算
积分：-——0分 +——1分
举例：细胞数 积分 5 5*0——0
++——2分
5 5*1——5
+++——3分
10 10*2——20
++++——4分
20 20*3——60
60 60*4——2wenku.baidu.com0
——————————
计算阳性细胞的阳性率和总积分 100个细胞
2、细胞质： ①量：由少逐渐增多，但淋巴细胞变化不大； ②颜色：由深蓝变浅蓝、甚至淡红，红细胞系最终变为橘红色； ③颗粒：从无颗粒（原始细胞）到嗜天青颗粒（早幼粒细胞）
到特异性颗粒（中性、嗜酸性、嗜碱性颗粒），但红细胞胞 质内一般无颗粒。
3、细胞核：
①大小：由大变小，由规则变不规则，有的分叶， 但巨核细胞核由小变大，红细胞系核变小，核形 规则而最终消失。
②染色质：由细致疏松逐渐变为粗糙紧密，着色由 浅变深。
③核仁：由有到无，经清晰到模糊到消失。
④核膜：由不明显到明显。
4、核浆比例：由大变小，即由核大质少到核小质多。 巨核细胞则相反。
三、血细胞化学染色
是以细胞形态学为基础，根据化学反应原理，将 骨髓涂片按一定程序染色，然后在显微镜下观察 细胞化学成分及其变化的一项检查方法。
小细胞低色素性贫血（缺铁性贫血）
进一步检查：
①网积红细胞的计数
②血清铁、血清总铁结合力，转铁蛋白饱和度、血清铁 蛋白
③必要时骨髓穿刺作骨髓涂片检查（骨髓铁染色）进行 确诊
④明确贫血的病因或找到原发病症：粪便潜血实验、尿 常规检查、血液肝肾功能检查、生化或免疫学实验、胃 肠道X线检查、胃镜检查等，以确定造成缺铁性贫血的 病因。
2、诊断其它非造血系统疾病
如疟疾、黑热病、高雪氏病、尼曼－匹克病、 转移性肿瘤等。
3、凡临床上遇到原因不明的发热、恶病质、原因 不明的肝、脾、淋巴结肿大，外周血中出现幼稚 细胞以及血细胞单项或多项原因不明的减少或增 多，均可作骨髓细胞学检查帮助诊断。
4、骨髓穿刺虽然创面不大，但血友病患者 不宜作此项检查。
原理： a—醋酸萘酚酯酶又称非特异性酯酶
（NSE），能将基质液中的a—醋酸萘酚酯水解， 产生a—萘酚，再与重氮染料偶联，形成不溶性的 有色沉淀，定位于胞质内。
结果：胞质中出现有色沉淀者（灰黑色或 棕黑色）为阳性反应。
骨髓检查
Bone –marrow examining
第三节 血细胞形态特征 第五节 常见血液病的血液学特征
概述
骨髓是人体的造血组织，骨髓细胞是主 要发育过程中的血细胞。研究血细胞数量和 形态的变化，有助于了解骨髓造血功能及其 病理变化，因此对血液病的诊断和治疗有十 分重要的意义。但必须与其他临床资料结合 综合分析，才能作出正确的结论。
各种类型血细胞中的化学成分、含量及其分布不 尽相同，在病理情况下也可发生改变。
因此细胞化学染色有助于了解各种血细胞的化学 组成及病理生理改变，可用作血细胞类型的鉴别， 以及对某些血液病的诊断和鉴别诊断、疗效观察、 发病机制探讨等有一定价值。
（一）过氧化酶染色（POX） （二）苏丹黑B染色 （三）中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP） （四）酸性磷酸酶染色（ACP） （五）氯化醋酸AS-D酚酯酶染色 （六）a—醋酸萘酚酯酶染色（NSE） （七）糖原染色（PAS） （八）铁染色
（三）中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）：
阳性程度：
- 胞浆中无紫黑色颗粒 + 胞浆中有一层棕黑色不透明或 局限地方有紫黑色颗粒
++胞浆中颗粒占胞浆1/2或遍布 整个胞浆，但较疏松
+++胞浆中颗粒占3/4，颗粒染 色浓
++++仅见核影，其余均是黑色
成熟阶段中性粒细胞内的 AKP在PH9.4-9.6缓冲液 中能水解基质液中的α-磷 酸萘酚钠，产生α-萘酚， 其与重氮盐偶联，形成不溶 性灰黑色偶氮染料沉淀，定 位于酶活性处。
碱性磷酸酶主要分布在成熟阶段的中性粒细胞（分叶核、杆状 核），其他血细胞均呈阴性反应。阳性反应为胞质中出现灰色 到棕黑色颗粒。血涂片染色后，观察血片100个成熟中性粒细 胞，阳性反应细胞所占百分率即为阳性率；对所有阳性反应细 胞逐个按反应强度分级，将各级所占的百分率乘以级数，然后 相加，即为积分数值。
第三节 血细胞形态特征
一、血细胞发育过程中形态演变的一般规律 （了解）
二、血细胞的正常形态学特征 三、血细胞的细胞化学染色（熟悉） 四、细胞免疫分型 五、细胞遗传学分析
一 血细胞发育规律：
1、细胞体积：由大变小。但巨核系细胞体积通常由小变大， 早幼粒细胞较原粒细胞稍大。形态变化，巨核细胞、单核细 胞、浆细胞由圆形或椭圆形变为不规则形。
（一）过氧化物酶染色（POX）：
粒细胞及分化较好的单核细胞胞浆内的POX能分解 H2O2，产生新生态氧使联苯胺氧化，与亚硝基铁氰化 钠结合成蓝黑色颗粒，定位于酶活性的胞浆内。 结果：粒细胞(+)；
单核细胞(±)； 淋巴细胞(–)
临床意义：主要用于急性白血病类型的鉴别诊断。急 性粒细胞白血病时，白血病细胞多呈强阳性反应；急 性单核细胞白血病时呈弱阳性或阴性反应；急性淋巴 细胞白血病呈阴性反应。 POX染色对急性粒细胞白血病与急性淋巴细胞白血病 的鉴别最有价值。
骨髓细胞形态检查方法
目前研究血细胞形态的方法有多种
• 普通光学显微镜 • 位相显微镜 • 荧光显微镜 • 透射及扫描电子显微镜
今重点介绍在光学显微镜下，通 过瑞氏染色法了解血细胞形态特点及 常见血液病的形态学改变，以及细胞 化学染色的临床应用做简要介绍。
临床应用
1、诊断造血系统疾病
骨髓细胞学检查是目前对造血系统疾病诊断最 有价值的检查方法，如对各型白血病、多发性骨髓 瘤、再障、巨幼贫等均有直接的诊断作用，在疾病 的治疗过程中，动态观察骨髓变化，有利于分析疗 效和估计预后。
AKP积分总分为325
参考范围：40~80分
【临床意义】
病理情况下：
1、急性化脓菌感染时活性增高，病毒感染时活性略 低或正常。
2、慢粒活性明显减低，积分常为0。类白血病时活 性极度增高。
3、急粒时积分值减低，急淋时积分多增高，急单时 正常或减低。
4、再障时活性增高，PNH时活性减低。 5、其他。
（六）a—醋酸萘酚酯酶染色：
AKP积分的计算
积分：-——0分 +——1分
举例：细胞数 积分 5 5*0——0
++——2分
5 5*1——5
+++——3分
10 10*2——20
++++——4分
20 20*3——60
60 60*4——2wenku.baidu.com0
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计算阳性细胞的阳性率和总积分 100个细胞
2、细胞质： ①量：由少逐渐增多，但淋巴细胞变化不大； ②颜色：由深蓝变浅蓝、甚至淡红，红细胞系最终变为橘红色； ③颗粒：从无颗粒（原始细胞）到嗜天青颗粒（早幼粒细胞）
到特异性颗粒（中性、嗜酸性、嗜碱性颗粒），但红细胞胞 质内一般无颗粒。
3、细胞核：
①大小：由大变小，由规则变不规则，有的分叶， 但巨核细胞核由小变大，红细胞系核变小，核形 规则而最终消失。
②染色质：由细致疏松逐渐变为粗糙紧密，着色由 浅变深。
③核仁：由有到无，经清晰到模糊到消失。
④核膜：由不明显到明显。
4、核浆比例：由大变小，即由核大质少到核小质多。 巨核细胞则相反。
三、血细胞化学染色
是以细胞形态学为基础，根据化学反应原理，将 骨髓涂片按一定程序染色，然后在显微镜下观察 细胞化学成分及其变化的一项检查方法。
小细胞低色素性贫血（缺铁性贫血）
进一步检查：
①网积红细胞的计数
②血清铁、血清总铁结合力，转铁蛋白饱和度、血清铁 蛋白
③必要时骨髓穿刺作骨髓涂片检查（骨髓铁染色）进行 确诊
④明确贫血的病因或找到原发病症：粪便潜血实验、尿 常规检查、血液肝肾功能检查、生化或免疫学实验、胃 肠道X线检查、胃镜检查等，以确定造成缺铁性贫血的 病因。
2、诊断其它非造血系统疾病
如疟疾、黑热病、高雪氏病、尼曼－匹克病、 转移性肿瘤等。
3、凡临床上遇到原因不明的发热、恶病质、原因 不明的肝、脾、淋巴结肿大，外周血中出现幼稚 细胞以及血细胞单项或多项原因不明的减少或增 多，均可作骨髓细胞学检查帮助诊断。
4、骨髓穿刺虽然创面不大，但血友病患者 不宜作此项检查。
原理： a—醋酸萘酚酯酶又称非特异性酯酶
（NSE），能将基质液中的a—醋酸萘酚酯水解， 产生a—萘酚，再与重氮染料偶联，形成不溶性的 有色沉淀，定位于胞质内。
结果：胞质中出现有色沉淀者（灰黑色或 棕黑色）为阳性反应。
骨髓检查
Bone –marrow examining
第三节 血细胞形态特征 第五节 常见血液病的血液学特征
概述
骨髓是人体的造血组织，骨髓细胞是主 要发育过程中的血细胞。研究血细胞数量和 形态的变化，有助于了解骨髓造血功能及其 病理变化，因此对血液病的诊断和治疗有十 分重要的意义。但必须与其他临床资料结合 综合分析，才能作出正确的结论。
各种类型血细胞中的化学成分、含量及其分布不 尽相同，在病理情况下也可发生改变。
因此细胞化学染色有助于了解各种血细胞的化学 组成及病理生理改变，可用作血细胞类型的鉴别， 以及对某些血液病的诊断和鉴别诊断、疗效观察、 发病机制探讨等有一定价值。
（一）过氧化酶染色（POX） （二）苏丹黑B染色 （三）中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP） （四）酸性磷酸酶染色（ACP） （五）氯化醋酸AS-D酚酯酶染色 （六）a—醋酸萘酚酯酶染色（NSE） （七）糖原染色（PAS） （八）铁染色
（三）中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）：
阳性程度：
- 胞浆中无紫黑色颗粒 + 胞浆中有一层棕黑色不透明或 局限地方有紫黑色颗粒
++胞浆中颗粒占胞浆1/2或遍布 整个胞浆，但较疏松
+++胞浆中颗粒占3/4，颗粒染 色浓
++++仅见核影，其余均是黑色
成熟阶段中性粒细胞内的 AKP在PH9.4-9.6缓冲液 中能水解基质液中的α-磷 酸萘酚钠，产生α-萘酚， 其与重氮盐偶联，形成不溶 性灰黑色偶氮染料沉淀，定 位于酶活性处。
碱性磷酸酶主要分布在成熟阶段的中性粒细胞（分叶核、杆状 核），其他血细胞均呈阴性反应。阳性反应为胞质中出现灰色 到棕黑色颗粒。血涂片染色后，观察血片100个成熟中性粒细 胞，阳性反应细胞所占百分率即为阳性率；对所有阳性反应细 胞逐个按反应强度分级，将各级所占的百分率乘以级数，然后 相加，即为积分数值。
第三节 血细胞形态特征
一、血细胞发育过程中形态演变的一般规律 （了解）
二、血细胞的正常形态学特征 三、血细胞的细胞化学染色（熟悉） 四、细胞免疫分型 五、细胞遗传学分析
一 血细胞发育规律：
1、细胞体积：由大变小。但巨核系细胞体积通常由小变大， 早幼粒细胞较原粒细胞稍大。形态变化，巨核细胞、单核细 胞、浆细胞由圆形或椭圆形变为不规则形。
（一）过氧化物酶染色（POX）：
粒细胞及分化较好的单核细胞胞浆内的POX能分解 H2O2，产生新生态氧使联苯胺氧化，与亚硝基铁氰化 钠结合成蓝黑色颗粒，定位于酶活性的胞浆内。 结果：粒细胞(+)；
单核细胞(±)； 淋巴细胞(–)
临床意义：主要用于急性白血病类型的鉴别诊断。急 性粒细胞白血病时，白血病细胞多呈强阳性反应；急 性单核细胞白血病时呈弱阳性或阴性反应；急性淋巴 细胞白血病呈阴性反应。 POX染色对急性粒细胞白血病与急性淋巴细胞白血病 的鉴别最有价值。
骨髓细胞形态检查方法
目前研究血细胞形态的方法有多种
• 普通光学显微镜 • 位相显微镜 • 荧光显微镜 • 透射及扫描电子显微镜
今重点介绍在光学显微镜下，通 过瑞氏染色法了解血细胞形态特点及 常见血液病的形态学改变，以及细胞 化学染色的临床应用做简要介绍。
临床应用
1、诊断造血系统疾病
骨髓细胞学检查是目前对造血系统疾病诊断最 有价值的检查方法，如对各型白血病、多发性骨髓 瘤、再障、巨幼贫等均有直接的诊断作用，在疾病 的治疗过程中，动态观察骨髓变化，有利于分析疗 效和估计预后。
AKP积分总分为325
参考范围：40~80分
【临床意义】
病理情况下：
1、急性化脓菌感染时活性增高，病毒感染时活性略 低或正常。
2、慢粒活性明显减低，积分常为0。类白血病时活 性极度增高。
3、急粒时积分值减低，急淋时积分多增高，急单时 正常或减低。
4、再障时活性增高，PNH时活性减低。 5、其他。
（六）a—醋酸萘酚酯酶染色：