实验十：小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察

实 验 原 理

细胞吞噬作用原来是单细胞动物摄取营养物 质的方式，也是原始防御作用。随着动物界 的进化，在高等动物中，则发展生成大小两 类吞噬细胞(即巨噬细胞和嗜中性粒细胞)，
专司吞噬作用，成为非特异免疫功能的重要
组成部分。

巨噬细胞由骨髓干细胞分化生成，然后 进入血液到达各组织内，并进一步分化为各 种巨噬细胞。当病原微生物或其它异物侵入 机体时，能招引巨噬细胞，而巨噬细胞又有 趋化性，能响应招引因子的招引，产生活跃 的变形运动，主动向病原体和异物移行，在 接触到病原体或异物时，即‘伸出伪足，将 之包围并内吞人胞质，形成吞噬体，继而细 胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生融合，形 成吞噬性溶酶体，通过其中水解酶等作用下， 将病原体杀死，消化分解，最后将不能消化 的残渣排出细胞外。
实验八：小鼠腹腔巨噬细胞吞 噬现象的观察
【课前预习】 实验前给小鼠腹腔注射台盼兰淀粉肉汤 的目的是什么？

实 验 目 的
1、通过对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活 动的观察，加深理解细胞吞噬作用的过程及其 意义。
2、掌握小鼠腹腔注射给药和颈椎脱臼处死方法。 观察机体的非特异性免疫现象。 3．熟悉细胞吞噬作用的基本过程
5、吸取的腹腔液与 Hank’s 液1：1混 合，并且滴数滴于载玻片上，37OC 温育30分钟。
6、玻片取出，用生理盐水冲洗，吹干， 甲醇固定5分钟。
7、Gimasa染液染色，干燥后油镜观察。
【实验结果】 在高倍镜下可见有许多较大的圆形和形 状不规则的巨噬细胞，因未染色细胞核 不易见到，其胞质中含有数量不等的兰 色圆形小颗粒（即吞入的含台盼兰的淀 粉肉汤所形成）；还可见少量黄色椭圆 形有明显细胞核的鸡红细胞，慢慢移动 玻片标本，仔细观察视野中的巨噬细胞 表面，有的红细胞已部分被吞入；有的 巨噬细胞内已吞入了一个或多个红细胞 形成吞噬泡。
否则易损害肝及血管等，造成出血致死。腹腔注射
1％鸡红细胞悬液lml，轻按小白鼠腹部，使悬液分 散。
2、约20分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠(右 手抓住鼠尾，用力向后拉，左手拇指与食 指同时向下按住鼠头，使脊髓与脑髓间断 开致鼠死亡)。
3、将小鼠置于解剖盘中，剪开腹部，把内 脏推向一侧，用不装针头的注射器或吸管 吸取腹腔液。 4、每人取一张干净载玻片，滴一滴腹腔液， 盖上盖玻片，置显微镜下观察。
在机体的免疫过程中，巨噬细胞承 担着噬菌、杀菌、清除体内被损伤和衰 老的细胞，以及传递抗原信息，巨噬细 胞将捕获的抗原进行加工处理后，把降 解的抗原信息传递给T、B淋巴细胞。巨 噬细胞又是天然杀伤细胞（NK Cell)的 激活剂，而且对B淋巴细胞的激活、增殖 和分化具有调节作用。
【实验用品】 1．材料：小白鼠、1%鸡红细胞悬液 2．试剂：6%的淀粉肉汤（含台盼蓝）， 0.9%生理盐水 3．仪器设备：显微镜、注射器、注射针 头、吸管、试管架、解剖刀、解剖镊、 载玻片、盖玻片、记号笔

实 验 方 法
1、在实验前一天，给小白鼠腹腔注射5％鸡红细胞
lml/只。注射时，先用右手抓住鼠尾提起，放在实
验台上，用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳和头颈 皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，用左手 的无名指和小指按住尾巴与后肢，前肢可用中指固 定，即可在腹部后 l／2处的一侧注射。进针勿过深，

巨噬细胞
吞噬实验 示教照片
鸡红细胞 巨噬细胞
吞噬鸡红细胞后的巨噬细胞
吞噬鸡红细胞后的巨噬细胞
【实验报告】 1．镜检时，你能在视野中看到几种类型 的细胞？绘图说明巨噬细胞吞噬过程。 2．巨噬细胞将如何进一步处理被吞噬的 红细胞？
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